全 文 ：食品与药品 Food and Drug 2013年第 15卷第5期 329
正交设计优选婆婆针中聚炔苷的提取工艺研究
张清华1，刘玉红2，蒋海强2*
（1. 山东明仁福瑞达制药股份有限公司，山东 济南 250104；2. 山东中医药大学，山东 济南 250355）
摘 要：目的 探讨提取婆婆针中聚炔苷的工艺。方法 以聚炔苷含量为指标，采用正交设计优选最佳提取工艺。结果 最佳
提取工艺为70 %乙醇，10倍量，回流提取1 h，提取3次。结论 乙醇提取法优于水提取法。乙醇浓度对婆婆针中聚炔苷溶
出量影响显著。
关键词：婆婆针；聚炔苷；正交设计；提取工艺
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2013）05-0329-02
Optimization of Extracting Technology for Polyacetylenic Glycoside in Bidens bipinnata with
Orthogonal Design
ZHANG Qing-hua1, LIU Yu-hong2, JIANG Hai-qiang2
(1. Shandong C. P. Freda Pharm Co., Ltd., Jinan 250104, China; 2. Shandong University of Traditional Chinese
Medicine, Jinan 250355, China)
Abstract: Objective To explore the extracting technology for polyacetylenic glycoside in Bidens bipinnata. Methods
The optimum extraction condition was investigated by orthogonal design, using the content of polyacetylenic glycoside
as index. Results The optimum extracting condition was as follows: refl uxing and extracting for 3 times with 10 times
of 70 % alcohol, 1 h each time. Conclusion Ethanol extraction method is superior to water extraction, and ethanol
concentration affects greatly on the dissolution of polyacetylenic glycoside.
Key Words: Bidens bipinnata; polyacetylenic glycoside; orthogonal design; extracting technology
收稿日期：2012-11-20
作者简介：张清华（1980-），女，山东临朐人，主管药师，从事中药新药研究
*通讯作者：蒋海强（1982-），男，山东青州人，讲师，从事天然药物化学分离分析研究 E-mail：jhq12723@163.com
婆婆针（Bidens bipinnata）是菊科（Compositae）管
状花亚科鬼针草属植物，民间药用历史悠久，具有清热
解毒、散瘀消肿之功效，用于治疗疟疾、腹泻、肝炎、
胃痛、蛇虫咬伤等[1]。药理研究表明，婆婆针具有抗炎作
用，对心血管系统的作用及体外抑制白血病细胞作用[2-3]。
聚炔类成分是其主要的有效成分之一，为探讨婆婆针中聚
炔类成分的最佳提取条件，我们采用高效液相色谱法，以
聚炔苷含量为指标研究提取工艺。
1 仪器与材料
婆婆针采自济南近郊，经山东中医药大学生药学教
研室徐凌川鉴定。聚炔苷对照品（自制），工业乙醇（国
药集团试剂公司），甲醇（天津四友，色谱纯），纯净水
（娃哈哈）。高效液相色谱仪（日本岛津LC-10A型）。
2 方法与结果
经预实验选择提取溶剂，采用L9（34）正交设计试
验，以醇浓度、加醇溶剂量、提取时间、提取次数为因
素，优选最佳提取工艺。
2.1 鬼针草提取工艺预实验
2.1.1 水提法 精密称取婆婆针药材2 g，用水50 mL浸泡12
h，回流提取1 h，滤过，滤液定容至100 mL量瓶，摇匀，
作为供试品溶液，备用。
2.1.2 醇提 精密称取婆婆针药材2 g，用70 %乙醇浸泡12
h，回流提取1 h，滤过，滤液定容至100 mL量瓶，摇匀，
作为供试品溶液，备用。
2.2 聚炔苷含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱Phenomenex（150 mm×4.60 mm，5
μm），流动相：甲醇－水（55:45），检测波长：254 nm，
流速：1 mL/min。
2.2.2 标准曲线绘制 精密称取聚炔苷对照品适量，加甲醇
溶解为60 μg/mL溶液，作为对照品溶液。精密量取0.1，
0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，置入1 mL量瓶，加甲醇定
容至刻度，摇匀。各吸取20 μL注入高效液相色谱仪，测
定峰面积，以聚炔苷含量为横坐标，峰面积积分值为纵
坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=4×10-6X+326 836，
r=0.9997，结果表明，聚炔苷在0.12～1.2 μg范围内线性关
系良好。
2.2.3 聚炔苷含量测定 上述两种供试品溶液分别用0.45 μm
微孔滤膜滤过，取续滤液5 mL置入量瓶，精密吸取对照品
溶液与供试品溶液各20 μL，注入高效液相色谱仪，测定峰
面积，计算，结果见表1。
由表1可见，水提取总黄酮含量明显低于醇提取，仅为
醇提取的76.3 %，故提取方法确定为70 %乙醇回流提取，
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表1 不同溶剂提取的测定结果
提取方法 溶剂 提取时间/h 加液量/倍 聚炔苷含量/mg·g-1
水提法 水 1 25 1.64
醇提法 70 %乙醇 1 25 2.15
表2 提取工艺因素水平表
水平/因素 醇浓度/％A
醇溶剂量/倍
B
提取时间/h
C
提取次数/次
D
1 60 6 0.5 1
2 70 8 1 2
3 80 10 1.5 3
进而以正交设计对鬼针草中聚炔苷的醇提工艺条件进行优
选。
表3 L9(34)正交试验及结果
试验号
1 2 3 4
聚炔苷的含量/ mg·g-1因素
A B C D
1 1 1 1 1 1.555
2 1 2 2 2 1.759
3 1 3 3 3 2.036
4 2 1 3 2 2.225
5 2 2 1 3 2.130
6 2 3 2 1 2.304
7 3 1 2 3 2.418
8 3 2 3 1 2.024
9 3 3 1 2 2.098
I j 5.350 6.198 5.783 5.883
Ⅱj 6.659 5.913 6.481 6.082
Ⅲj 6.540 6.438 6.303 6.584
R 1.309 0.525 0.698 0.701 CT＝ 38.229
∑
9
i=1
yi = 18.549
3 讨论
3.1 本实验所用对照品为两种聚炔苷的混晶，所以选择保
留时间为3 min左右的两个峰，其峰面积之和为总的聚炔苷
含量指标。
3.2 本实验采用正交设计法探讨婆婆针中的有效成分聚炔
苷的最佳提取工艺，实验方法合理，结果准确可靠，为婆
婆针中聚炔苷的提取分离优化提供了依据。
参考文献
[1] 江苏新医学院. 中药大词典[M]. 上海：上海科技出版社，
1986：1694.
[2] 王建平，张惠云，秦红岩，等. 鬼针草抗炎新成分的药理作用
[J]. 中草药，1997，28（11）：665-667.
[3] 王建平，高玉敏，秦红岩，等.鬼针草抗炎有效成分及抗氧化
作用研究[J]. 实用中医药杂志，1996，12(5)：57.
收稿日期：2012-10-18
作者简介：胡志朝（1977-），男，河北冀县人，硕士研究生，主治医师，从事外科医学研究 E-mail：693543205@qq.com
泽漆提取液抗肿瘤作用的研究
胡志朝1，牛明娟2，惠秋沙2
（1. 北京怀柔区第一医院，北京 101400；2. 山东中医药大学，山东 济南 250355）
摘 要：目的 探讨泽漆水提液对小鼠S180肉瘤的抑制作用。方法 采用环磷酰胺作阳性对照，通过计算抑瘤率、胸腺指数及
脾指数观察泽漆对小鼠肉瘤的抑制作用，用丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）联合测定法初步分析泽漆抗肿瘤
的的机制。结果 泽漆提取液能抑制小鼠S180肉瘤的生长、升高小鼠脾指数及胸腺指数，能增加SOD的活性，高剂量组作用
最明显，给药后小鼠血浆中MDA的含量有所降低。结论 泽漆提取液抗肿瘤作用与降低体内脂质过氧化反应、清除体内过
多自由基，以及增强机体免疫力有关。
关键词：泽漆；免疫功能；抗肿瘤
中图分类号：R965 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2013）05-0330-03
Anti-tumor Effect of Euphorbia helioscopia Extraction
HU Zhi-zhao1, NIU Ming-juan2, HUI Qiu-sha2
（1. The First Hospital of Beijing Huairou District, Beijing 101400, China；2. Shandong University of Chinese
Traditional Medicine, Jinan 250355, China）
Abstract: Objective To study the inhibition effect of Euphorbia helioscopia water extraction on S180 tumor in mice.
Methods Using cyclophosphamide as the positive control, the calculations of inhibitory rate, thymus index and
spleen index were determined by weight to observe the inhibition effect on S180. The malondialdehyde（MDA）and
精密称取药材2 g，分别按照L9（34）试验列号各条件
进行提取，滤过，滤液定容至100 mL量瓶，摇匀，作为供
试品溶液。分别用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液5 mL置
入量瓶，即得。各吸取20 μL注入高效液相色谱仪，测定峰
面积，计算。 结果见表3。　　　
由极差分析可见，对聚炔苷含量影响因素排列由大到
小为A> D > C >B，优化条件为最佳提取工艺是A2B3C2D3，
即醇浓度70 %，溶剂用量10倍量，提取时间1 h，提取次数
3次。按优选工艺方案进行验证试验，测得聚炔苷含量为
2.56 mg/g，说明所选方法合理。
2.2 醇提取工艺条件的选择
采用L9(34)正交试验设计，以醇浓度、加醇溶剂量、提
取时间、提取次数为因素，优选最佳提取工艺。因素水平
设计见表2。