全 文 ：中闰药师 年第 卷第 期
西医结合研究 , 侧刃 ,
吕亚青 丹参的化学成分及临床应用进展 〕 中国药房 , 入
曹荣 ,胡旭东 ,程海林 ,等 苦黄联合丹参注射液治疗病毒性肝炎
高黄疽疗效观察 〕 药物流行病学杂志 , , 石
赵延斌 复方丹参注射液不良反应 例文献分析 〔 〕 中国药
师 , 加 , 一
杨垒 ,李天云 复方丹参注射液致严重不良反应 例仁 药物
流行病学杂志 , ,
胡昌勤 ,徐明哲 ,马越 等 含丹参的中药注射液中过敏性杂质的
检测 药学学报 , , 一
朱立平 ,陈学清 免疚学常用实验方法【 」北京 人民军医出版
社 , 《 一 , 一 , 一
曹亚 实用分子生物学操作指南【 〕北京 人民卫生出版社 ,
, 一
徐永春 病毒 重组蛋白多克隆杭体的制备与初步应用研
究【 成都 四川大学硕士学位论文 ,
几 记 即
叫 硫 一」 , , 一
仪 汪家政 ,范明 蛋白质技术手册【 〕 北京 科学出版社 ,
一
刀一 收稿 习拱 修回
法测定多花篙药材中阿格拉宾含量
白晓雪 郭文敏 王莉芳 刘翠艳 石药集团中奇制药技术 石家庄 有限公司 石家庄
摘 要 目的 建立用高效液相色谱法测定多花篙药材中阿格拉宾含量。方法 采用回流提取法 ,以甲醉为提取溶剂。 色谱
柱为 , 叩 ,以乙睛一水 为流动相 ,流速为 耐 · 一 ,检汉波长为 ,柱温
℃ 结果 阿格拉宾与其它杂质能够达到有效分离 ,在 一 畔 ·耐一浓度范围内线性关系良好 平均
加样回收率为 沂 刀为 。结论 该检测方法准确可靠 ,重复性好 ,可用于批量多花篙药材中阿格拉宾含量
的测定 。
关键词 阿格拉宾 多花高 含量测定 高效液相色谱法 甲醇回流提取
中图分类号 文献标识码 文章编号 很 刁 刁
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耐 · 一 仆 。 ℃ 仆。 仆
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材 少乙
多花篙 砌 乙 为菊科篙属的植
物 ,分布于泰国 、不丹 、缅甸 、印度 、尼泊尔 、克什米尔
以及中国大陆的云南 、青海 、甘肃 、贵州 、山西 、广西 、
四川等地 ,生长于海拔 一 的地区 ,多生
在山坡以及路旁与灌丛中 ,目前尚未由人工引种栽
培 ,研究发现其含有的倍半菇内醋类化合物阿格拉
宾 具有抗肿瘤活性 ,可用于肝癌 、乳腺癌
等多种癌症的治疗 【, 。目前国内对此研究较少 ,
没有准确的含量测定方法 〔〕。本文建立了多花篙
药材中有效成分阿格拉宾的提取方法 ,同时采用高
效液相色谱法进行了多花篙药材中阿格拉宾的测
定 ,现报道如下 。
仪器与材料
高效液相色谱仪 包括 四
元梯度泵 ,在线脱气机 ,自动进样器 ,柱温箱 ,
光电二极管阵列检测器 , 色谱工作站 梅
特勒一托利多 电子分析天平 超声波发生器
美国科尔帕默公司 , 一 纯水
仪 美国 公司 。阿格拉宾对照品 批号
,自制 ,含量为 ,供含量测定 多花
篙药材 批号 、 、 ,购于
云南省昆明市郊区 ,经华南植物园刘焕芳博上鉴定
为菊科篙属植物多花篙 记 少艺 ·
。乙睛 、甲醇均为色谱纯 详
, ,水为去离子水 ,其余试剂均为分析纯 。
基金项目科技部 “十一五 ”重大新药创制 编号 一
通讯作者 白晓雪 一
〔份梦
认叫曰 研究报告
方法与结果
色谱条件
色谱柱 柱 ,
林 流动相 乙睛一水 检测波长
流速 · 一 柱温 ℃ 进样量 林 。
溶液制备
供试品溶液 取本品 ,粉碎 ,研细 ,取约
,精密称定 ,置回流装置中 ,加甲醇 ,加热
至微沸开始计时 ,提取 ,放冷至室温 ,取上清
液 ,转移至 耐量瓶中 取回流瓶中剩余样品 ,同
法操作 ,重复 次 ,分别将上清液转移至 量
瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,即得 。
对照品溶液 精密称取阿格拉宾对照品适
量 ,加甲醇溶解制成含阿格拉宾 林 · 一的
对照品溶液 ,即得 。
提取条件的考察
提取溶剂 取本品适量 ,粉碎 ,研细 ,取约
, ,精密称定 ,置回流装置中 ,同时称定 份 ,分
别标记 一 。 , 分别加人 甲醇溶剂 , , 分
别加入 时 乙睛溶剂 , , 分别加人 衬 乙醇溶
剂 , , 分别加人 耐 乙酸乙醋溶剂 。提取及转移
稀释方法同 “ ”项下方法 。分别精密吸取
闪 ,注人液相色谱仪 ,记录峰面积 ,外标法计算 ,结果
表明 ,以甲醇为提取溶剂提取效果最好 。
提取方式 取本品适量 ,粉碎 ,研细 ,取约
,精密称定 ,称取 份 ,标记为 至 , , 放入
回流装置中 , , 放人具塞三角瓶中 ,加人甲醇
,同时回流和超声 ,重复 次 。转移稀释及
测定方法同 “ ”项下方法 。结果表明采用回流
提取方式提取效果最好 。
提取溶剂量 取本品适量 ,粉碎 ,研细 ,取约
,精密称定 ,置回流装置中 ,同时称定 份 ,分
别标记 至 。 , 分别加人 甲醇溶剂 , ,
分别加人 甲醇溶剂 , , 分别加人 甲醇
溶剂 , , 分别加人 甲醇溶剂 。提取方法 ,转
移稀释及测定方法同 “ ”项下方法 。结果表
明 , 甲醇与 甲醇的提取效率几乎相同 ,
故提取溶剂用量定为 。
提取次数 取本品适量 ,粉碎 ,研细 ,取约
,精密称定 ,置回流装置中 ,同时称定 份 ,分
别加入 耐 甲醇溶剂 ,加热至微沸开始计 时 ,
停止加热 ,放冷过滤至 耐 量瓶中 ,标为
, 一 。取回流瓶中剩余样品 ,同法操作 ,重复
次 ,分别至 量瓶 , 分别定容至刻度 ,摇匀 ,滤
过 。测定方法同 “ ”项下方法 。结果表明 ,第
四次提取效率为 犯 ,小于 ,不再提取 。故
提取次数定为 次 。
专属性考察
分别取供试品溶液 、对照品溶液和提取溶剂
甲醇 空白溶液 ,按 “ ”色谱条件下进样 ,记录色
谱峰面积 ,结果表明 ,优化确定的多花篙提取方法所
提取阿格拉宾无其它杂质干扰 ,采用此方法测定 ,空
白溶剂无影响 ,见图 。
】
一
空自溶剂 对照品溶液 供试品溶液 阿格拉宾
图 色谱图
线性关系考察
精密称取阿格拉宾对照品适量 ,加甲醇溶解并
稀释制成阿格拉宾浓度分别为 , , ,
, 林 · 一对照品溶液 。按 “ ”色谱
条件下进样 ,记录色谱峰面积 ,以浓度 为横坐
标 ,峰面积 为纵坐标 ,进行线性回归 ,得阿格拉
宾的回归方程为 ,
二 。结果表明 ,阿格拉宾在 一 林 · 一
浓度范围内与峰面积呈良好线性关系 。
精密度试验
精密吸取阿格拉宾对照品溶液 闪 ,按 “ ”
色谱条件下进样 ,重复进样 次 ,测得阿格拉宾峰面
积的 为 , 。
重复性试验
取多花篙药材 批号 ,共 份 ,分别
按 “ ”项下方法 ,制备供试品溶液 ,按 “ ”色
谱条件下进样 ,记录色谱峰面积 ,样品中阿格拉宾含
量为 · 一 , 为 。
加样回收率试验
精密称取已知含量的药材 批号 ,阿
格拉宾含量为 · 一` ,粉碎后称约 ,共
份 ,分别精密加入阿格拉宾浓度为 ·
一的对照品溶液 , , ,按 “ ”项下
方法 ,制备供试品溶液 ,按 “ ”色谱条件下进样 ,
记录色谱峰面积 ,计算回收率 。结果平均回收率为
, 为 。
稳定性考察
取同一份供试品溶液 ,分别在 , , , , ,
按 “ ”色谱条件下进样 ,记录色谱峰面积 ,阿格拉
诊尹
中闯药师 年第 卷第 期
宾峰面积的 为 。试验结果表明 ,
供试品溶液在 内稳定 。
含量测定
取 批多花篙药材 ,按 “ ”项下方法 ,制备
供试品溶液 ,按 “ ”色谱条件下进样 ,记录色谱峰
面积 ,计算阿格拉宾含量 ,测定结果见表 。
表 样品测定结果
批号 阿格拉宾含量 ·
讨论
本研究筛选了较适宜的色谱柱 , 色
谱柱分离效果较好 ,乙睛一水 等度洗脱较好 ,
经二极管阵列检测器扫描 ,样品紫外吸收特征峰在
,此分析条件可专属性地检测出阿格拉宾特
征峰 ,准确的进行含量测定 。
供试品溶液的制备方法及生药质量浓度是影响
含量测定准确度的主要因素之一 ,对不同的提取溶
剂 、提取溶剂用量 、提取方式等因素进行考察 ,结果
表明 ,采用甲醇为提取溶剂 、提取溶剂体积比为
,回流提取次数为 次时 ,既提高了药材中阿格拉
宾的提取率 ,又减少了毒性溶剂的使用量 。由于本
研究中样品溶液经药材提取制成 ,药材中所含成分
较为复杂 ,因此样品提取溶液必须经滤膜滤过 ,色谱
柱前要连接保护柱 ,以延长色谱柱使用寿命 。
本研究建立了多花篙药材中有效成分阿格拉宾
的提取和含量测定方法 ,为多花篙药材的质量控制
提供依据 。
参 考 文 献
中国科学院 “中国植物志 ”编委会 中国植物志「 〕 北京 科学
出版社 ,
, 硕 , 卜一 叮
, 〔 即 而 “ 〔 〕
口尸 , , 之
中国药典 〔 年版一 部
一 一 收稿 刀 一 修回
法测定天麻素缓释片中天麻素的含量
刘辉 , 张精 , ,
武汉
级研究生
樊光辉 ` 卢立 · 张芸 , , “ 邹萍 , , 陈利锋 , 匡长春 , 广州军区武汉总医院药剂科
湖北中医药大学药学院 级研究生 南方医科大学 ,药学院 级研究生 湖北中医药大学药学院
摘 要 目的 建立天麻素缓释片中天麻素的高效液相色谱含量测定方法。方法 以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂 ,采用
色谱柱 , 卜 ,以乙睛毛 磷酸溶液 为流动相 ,检汉波长为 】
】】
流速为 司 ·
,平均回收率为一 ,测定天麻素的含量。结果 天麻素在浓度 一 哪 · 一范围内与峰面积线性关系良好, 为 二 。结论 本方法灵敏度高 ,快速准确 ,可用于天麻素缓释片中天麻素的含量测定
关键词 天麻素 缓释片 含量刚定 高效液相色谱
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
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天麻 为兰科多年寄生草本 植物天麻 的干燥块茎 ,味甘
基金项目 年军队中医药科研专项课题重点项目 编 号 】
通讯作者 樊光辉 一 。
飞只夕