全 文 ：收稿日期: 2000- 12- 27
田基黄对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影响
周小玲　柯美珍　宋志军
(广西医科大学病理生理学教研室　南宁　 530021)
摘要　目的: 研究田基黄对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影响。方法: 将雄性重 200～ 250g Wistar大鼠随机分成对照组与实
验组 (每组 n = 10) , 应用免疫学细胞技术 , 对大鼠呼吸道及全身免疫功能各项指标进行检测。结果: 田基黄能明显提高外周
血中性粒细胞 ( PMN ) 吞噬率 ( 75. 2± 3. 9, 83. 5± 5. 1, P < 0. 001) 及 T淋巴细胞百分率 ( 64. 8± 5. 4, 72. 2± 3. 1, P <
0. 001) ; 提高支气管肺泡灌洗液 ( BALF) 中 T淋巴细胞百分率 ( 60. 4± 6. 3, 68. 8± 6. 5, P < 0. 01) ; 对外周血白细胞移行
抑制指数 ( M I) ( 0. 455± 0. 156, 0. 439± 0. 148, P > 0. 05) 及肺泡巨噬细胞 ( AM ) 吞噬率 ( 41. 8± 5. 8, 48. 2± 9. 5, P >
0. 05)无明显影响。结论 : 田基黄能提高大鼠全身的特异性和非特异性细胞免疫功能 ; 对呼吸道局部免疫功能也有一定影响。
关键词　田基黄 ; 免疫 ; 吞噬
中国图书资料分类法分类号　 R965. 1
EFFECTS OF HYPERICUM JAPONICUM THUNB ON THE RESPIRATORY
TRACT AND SYSTEMIC IMMUNE FUNCTIONS OF RATS
Zhou Xiaoling , Ke M eizhen, Song Zhi juan ( Department of Pathophysiolog y, Guangxi Medical Univ ersi ty,
Nanning 530021 China)
Abstract　 Objective: To study the effects of Hypericum Japonicum Thunb on the respiratory t ract and sy stemic
immune functions of rats.Methods: Male Wistar rats w ith body w eight of 200～ 250 g were divided into tw o
g roup ( n = 10) , Immune cellular techniques w ere adopted and some targ ets were detected on the respi rato ry
tract and systemic immune functions of rats. Resluts: Hypericum Japonicum thunb can obviously increase the
phagocy tic rate of PMN ( 75. 2± 3. 9, 83. 5± 5. 1, P < 0. 001) , enhance the BALF ( 60. 4± 6. 3, 68. 8± 6. 5,
P < 0. 01) and the peripheral blood( 64. 8± 5. 4, 72. 2± 3. 1, P < 0. 001) T lymphocyte ratio. It had not obvious
effects on the leucocy tic mig ra tiny inhibition index and the phagocy tic rate of the alv eolar
macrophages. Conclusion: Hypericum Japonicum Thunb can increase the cellular immunity functions of specific
and nonspecific rats and had some ef fects on the respiratory t ract immune functions.
Key words　 hypericum japonicum thunb; immunity; phagocytin;
　　田基黄 ( Hypericum japonicum thunb) 为藤黄科植物的
干燥全草 , 又名地耳草。具有清热解毒、 散瘀消肿的功效 [1] ,
近年发现具有抗菌、 抗病毒及抗癌 [2]的作用 , 是治疗病毒性
肝炎的常用药物。但是 , 有关这种药物的免疫药理研究报道
甚少。本文研究了该药物对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影
响 , 现报道如下。
1　材料与方法
1. 1　动物: Wistar雄性大鼠 ,体重 200～ 250 g, 由广西医科
大学实验动物中心提供。
1. 2　主要药品和试剂: 田基黄注射液由江苏常州武进制药
厂生产 , 每 ml含生药 1 g; 植物血凝素 ( PHA ) , 广州医药
工业研究所生产 ; RPMI1640粉剂 , 日本日水制药株式会社
生产 ; 灭活金黄色葡萄球菌 ( 25亿 /ml) , 本校微生物教研室
提供。
1. 3　给药方法: 将大鼠随机分为实验组与对照组 ,实验组皮
下注射田基黄注射液 2 ml /kg体重 ,对照组皮下注射生理盐
水 2 ml /kg体重 ; 隔天 1次 , 共 7次 , 于第 14天进行各项指
标的检测。
1. 4　免疫检测指标与方法:
1. 4. 1　全身性免疫功能测定指标: ①外周血中性粒细胞
( PMN ) 吞噬功能测定 [3]: 取肝素抗凝血 2 ml加 3%等量明
胶生理盐水分离 ,取上清液 ,用冷 Hank s液冲洗 ,离心 2500
r /min, 5 min, 重复 3次 , 最后一次弃上清液 , 加入自身血
浆 150μl, 再加入 20μl 25亿 /ml金黄色葡萄球菌 , 混匀后
37℃水浴 20 min。取出离心 1000 r /min, 1 min, 去 2 /3上清
液后混匀涂片 ,凉干后 Wright s染色 ,油镜下计算 100个中
·211·广 西 医 科 大 学 学 报JOURN AL OF GUAN GXI MEDICAL UNIV ERSITY　 2001 Apr; 18( 2)DOI : 10. 16190 /j . cnki . 45 -1211 /r . 2001. 02. 026
性粒细胞中吞噬细菌的细胞数 , 即为 PMN的吞噬率 ; ②外
周血 T淋巴细胞酸性 a-醋酸萘酯酶 ( ANAE) 检测 [3]: 剪
鼠尾 ,取血一滴 ,涂片 ,固定。置孵育液中 37℃水浴 60 min,
取出用自来水冲净 , 1%甲基绿复染。此为酸性 a- 醋酸萘酯
酶染色法 ( AN AE法 ) , 油镜下计数 100个淋巴细胞中呈
ANAE阳性的细胞数 ,计算其百分率 ; ③外周血白细胞移行
抑制试验 ( M IT ) [4]: 取抗凝血 4ml加等量明胶生理盐水沉
淀 ,取上清液 ,用冷 Hank s液冲洗 3次 ,离心留取沉淀细胞 ,
平均分为 2管 , 一管放入无 PHA的 RPM I 1640培养液中 ,
另一管放入有 PHA的 RPM I 1640培养液中 , 装入毛细玻
管 , 置细胞培养小池内 , 37℃培养 4 h , 计算移行抑制指数。
1. 4. 2　呼吸道免疫功能测定指标: ①肺泡巨噬细胞 ( AM )
吞噬功能测定 [3 ]: 切开气管 , 插入玻璃套管 , 用冷生理盐水
30 ml反复冲洗肺。收集支气管肺泡灌洗液 ( BALF)于离心
管中 , 离心 , 留取沉淀细胞 , 最后将 BALF细胞浓度调至 1
× 107 /ml, 即为 BALF细胞悬液 , 以下同 PMN吞噬功能检
测 ; ②肺 T淋巴细胞酸性 a-醋酸萘酯酶 ( LAN AE)检测 [3]:
取支气管肺泡灌洗液 ( BALF) 细胞悬液 , 离心 , 留取沉淀
细胞 , 以下方法同外周血 T淋巴细胞 AN AE检测。
1. 5　统计学方法: 各组数据处理采用两样本均数比较的 t
检验 , 并在 Pems统计学软件包下进行计算。
2　结　果
　　田基黄对全身免疫功能及呼吸道免疫功能的影响见表
1, 2。
表 1　田基黄对全身免疫功能的影响 ( x-± s )
组　别 n PMN
(% )
M IT
(移行抑制指数 ) AN AE(+ )(% )
对照组 10 75. 2± 3. 9 0. 455± 0. 156 64. 8± 5. 4
实验组 10 83. 5± 5. 1 0. 439± 0. 148 72. 2± 3. 1
P < 0. 001 > 0. 05 < 0. 001
表 2　田基黄对呼吸道免疫功能的影响 ( x-± s )
组　别 n 肺 ANAE(+ )
(% )
肺 AM
(% )
对照组 10 60. 4± 6. 3 41. 8± 5. 8
实验组 10 68. 8± 6. 5 48. 2± 9. 5
P < 0. 01 > 0. 05
3　讨　论
　　酸性 a-醋酸萘酯酶 ( AN AE) 是成熟 T淋巴细胞的一
种标志酶。经 AN AE法染色 ,在细胞质边缘或细胞质内有一
个至数个棕红色颗粒或斑块的淋巴细胞即为 ANAE阳性细
胞 ( T淋巴细胞 )。 本指标可反映机体的特异性细胞免疫。
　　白细胞移行抑制试验 ( M IT )能反映机体 T淋巴细胞的
功能状态 , T淋巴细胞在体外被植物血凝素 ( PHA)刺激后
释放移行抑制因子 ( M IF ) ,抑制白细胞移动。移行抑制指数
( M I) 增大说明移行抑制因子减少 , T淋巴细胞分泌功能下
降 , 移行抑制指数减少说明移行抑制因子增多 , T淋巴细胞
分泌功能增强。本指标可反映机体的特异性细胞免疫功能状
态。
　　外周血中性粒细胞 ( PMN ) 和肺泡巨噬细胞 ( AM ) 吞
噬功能测定是反映机体非特异性免疫功能状态的指标。
　　从上述实验结果可以看出 ,田基黄能明显提高外周血和
肺部支气管肺泡灌洗液中 AN AE阳性的淋巴细胞百分率
( P < 0. 01) , 说明田基黄能作用于机体的免疫器官和免疫
细胞 ,促进 T淋巴细胞的分化与成熟 ,从而增强机体的特异
性细胞免疫和免疫调节作用 ;田基黄还能提高外周血中性粒
细胞吞噬率 ( P < 0. 001) , 说明田基黄能增强中性粒细胞的
吞噬杀菌功能 , 从而提高机体抗细菌感染能力 ; 外周血白细
胞移行抑制指数虽比对照组低 , 但统计学上无显著意义 ( P
> 0. 05) , 说明田基黄对 T淋巴细胞分泌白细胞移行抑制因
子的作用不明显 ; 肺泡巨噬细胞吞噬率无显著提高 ( P >
0. 05)。
　　田基黄是我国民间常用的消肿解毒药。药理研究发现其
有抗菌、 抗病毒 [5]及抗癌的作用 , 田基黄的部分免疫促进作
用可能是其消肿解毒、 抗菌、 抗病毒及抗癌的免疫药理学基
础。田基黄的免疫效应机制目前尚不很清楚 , 是否与其具有
抗氧化作用和参与机体的免疫相关细胞因子的调节 [6, 7] , 从
而增强机体的免疫功能 ,有待我们更进一步的从分子水平去
研究。
参　考　文　献
1　冉先德主编 . 中华药海 (上卷 ) . 黑龙江: 哈尔滨出版社 ,
1993. 269-271.
2　金辉喜 ,李金荣 .田基黄对人舌癌细胞株 TSCCa细胞毒
作用的研究 .临床口腔医学杂志 , 1997, 13( 1): 19-20.
3　陶义训 ,章谷生 ,孙　荫 ,等 .临床免疫学检验 .上海: 上海
科技出版社 , 1983. 44-47.
4　余　氵贺 ,谢少文 ,杨贵贞 ,等 .临床免疫学技术 .上海: 上海
科技出版社 , 1982. 319-323.
5　陈宏略 ,邱冰峰 ,丁明罡 .自拟抗乙肝方治疗慢性活动性
乙型肝炎 100例 .福建中医药 , 2000, 31( 3): 12-13.
6　龙振洲主编 .医学免疫学 .第 2版 .北京: 人民卫生出版
社 , 1995. 43-52.
7　杨　光 . NO与炎症及免疫调节 .国外医学免疫学分册 ,
1995, 6( 3): 303-306.
·212· 广西医科大学学报　 2001 Apr; 18( 2)