全 文 ：2014 年 6 月 第 16 卷 第 6 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jun. 2014 Vol. 16 No. 6
*［通信作者］ 张辉，教授，研究方向:中药与天然药物有效成分;E-mail:zhanghui_8080@ 163. com;
孙佳明，副研究员，研究方向:中药与天然药物有效成分;E-mail:sun_jiaming2000@ 163. com
一年蓬不同部位中焦袂康酸的含量测定
宋利，赵好冬，杜延佳，曲朋，张辉* ，孙佳明*
(长春中医药大学，吉林 长春 130117)
［摘要］ 目的:建立一年蓬中焦袂康酸的 HPLC含量测定方法，并对一年蓬药材不同部位中焦袂康酸含量进
行测定。方法:采用 Unitary C18(250 mm × 4. 6 mm，5 μm)色谱柱，以甲醇 － 1‰三氟乙酸水溶液(5∶95)为流动相，
检测波长为 270 nm，柱温为 30 ℃，流速为 1. 0 mL·min －1。结果:焦袂康酸的线性范围为 0. 25 ～ 62. 0 μg·mL －1(r =
0. 999 3)，平均加样回收率为 98. 4%，ＲSD = 1. 2%(n = 6)。一年蓬花、叶、茎中焦袂康酸含量分别为 2. 56，0. 40，
0. 08 mg·g －1，根中含量低于 0. 012 mg·g －1。结论:该方法简便、准确、重复性好，可以作为一年蓬中焦袂康酸的含
量测定方法，为合理利用一年蓬药材提供参考依据。
［关键词］ 一年蓬;焦袂康酸;高效液相色谱法
Determination of Pyromeconic acid in Different Parts of Erigeron annus
SONG Li，ZHAO Haodong，DU Yanjia，QU Peng，ZHANG Hui* ，SUN Jiaming*
(Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China)
［Abstract］ Objective:To establish a method for the determination of pyromeconic acid in Erigeron
annus by HPLC，and determine the contents of pyromeconic acid in different parts of E. annus. Methods:
Unitary C18 column(4. 6 mm ×250 mm，5 μm)was used with a mobile phase consisting of methanol － 1‰
trifluoroacetic acid aqueous(5∶95). The detection wavelength was 270 nm. Column temperature was 30 ℃
. The flow rate was 1. 0 mL·min －1 . Ｒesults:The linear range of pyromeconic acid was 0. 25 ～ 62. 0 μg·
mL －1(r = 0. 999 3)and The mean recoveries rate was 98. 4 %，ＲSD 1. 2% (n = 6). The contents of
Pyromeconic acid in flower，leaf，stem were 2. 56，0. 40，0. 08 mg·g －1，while root was lower than 0. 012
mg· g －1 . Conclusion: The method is simple， accurate， reproducible， and can be used as the
determination method of pyromeconic acid in E. annus，and meanwhile，can provide reference basis for the
rational use of E. annus.
［Key words］ Erigeron annus;Pyromeconic acid;HPLC
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2014． 06． 006
一年蓬 Erigeron annuus(L. )Pers. ［Aster annuus
L.］是菊科飞蓬属植物，以全草入药，又名女菀、
野蒿、牙肿消、牙根消等。其味甘、苦，性凉，具
有解毒，止血，消食，截疟的功能，主治淋巴结
炎，齿龈炎，疟疾，消化不良，胃肠炎，血尿，毒
蛇咬伤［1］。一年蓬化学成分包括黄酮类［2-3］、萜类
和甾醇类［4-6］、有机酸类［7-9］等。其中，一年蓬全草
含焦袂康酸［2］。张人伟等［10］研究表明焦袂康酸有
升压作用，其葡萄糖苷有降压和镇静催眠作用。李
铁军等［11］研究证明灯盏花中焦袂康酸苷(ES)对大
鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用，其抗氧化和抗活
性氧作用可能是其保护作用机制之一。孙汉董
等［12］研究证明焦袂康酸及其葡萄糖苷具有显著增
加脑血管流量，改善脑血循环，降低脑血管阻力，
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提高血脑屏障的通透性，增加心肌营养回流的作
用，同时具备提高机体巨噬细胞免疫功能和较强的
抑制内凝血等作用。此外，焦袂康酸也是制备香味
增效剂麦芽酚、乙基麦芽酚的重要中间体［13］。目
前尚未见有文献报道测定一年蓬不同部位焦袂康酸
含量的方法。本研究建立了一年蓬中焦袂康酸的
HPLC 测定方法，并对一年蓬药材不同部位中焦袂
康酸含量进行测定。
1 仪器与材料
1. 1 仪器
AgiLent 1260 系列高效液相色谱仪，Sartorius
BSA124S-CW 型电子天平，KQ-3200B 型超声波清
洗器。
1. 2 材料
一年蓬药材采于吉林省蛟河市，经长春中医药
大学张辉教授鉴定为菊科飞蓬属一年蓬 Erigeron
annuus(L. )Pers. ［Aster annuus L.］ 的全草。将该
药材分拣为花、叶、茎、根，晾干，粉碎，过三号
筛，备用。
焦袂康酸对照品为本实验室从一年蓬中分离得
到，经波谱分析鉴定结构，HPLC面积归一化法检测
纯度 ＞ 98. 0%。甲醇、三氟乙酸为色谱纯，水为娃
哈哈纯净水，其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件
Unitary C18色谱柱(250 mm × 4. 6 mm，5 μm)，
流动相:甲醇 － 1‰三氟乙酸水溶液(5∶95)，检测波
长:270 nm，柱温:30 ℃，流速:1. 0 mL·min －1，
进样量:10 μL。在上述色谱条件下对照品和样品的
色谱图见图 1。
2. 2 对照品溶液的制备
精密称定焦袂康酸对照品 0. 006 2 g，置 100 mL
量瓶中，甲醇溶解，定容，摇匀，配制成浓度为
0. 062 mg·mL －1的焦袂康酸对照品溶液，备用。
2. 3 供试品溶液的制备
取一年蓬花、叶、茎、根粉末各约 0. 5 g，精密
称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 mL，密
塞，称定重量，超声处理(功率 250 W，频率 50
kHz)1 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失质
量，摇匀，静置，取上清液，0. 45 μm 滤膜滤过，
即得供试品溶液。
1. 焦袂康酸
A. 对照品 B. 茎 C. 花 D. 根 E. 叶
图 1 焦袂康酸对照品及一年蓬不同部位 HPLC图
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2. 4 线性关系考察
精密吸取 2. 2 项下对照品溶液 0. 04，1，4，8，
10 mL，甲醇定溶于 10 mL量瓶中，摇匀。分别吸取
10 μL 注入色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。
以浓度为横坐标(Χ)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性
回归，所得焦袂康酸的回归方程为 Y = 60. 099Χ －
14. 549(r = 0. 999 3)。结果表明，焦袂康酸在0. 25 ～
62. 0 μg·mL －1与峰面积呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验
取 2. 2 项下对照品溶液 1 mL，甲醇定溶于
10 mL量瓶中，摇匀，按 2. 1 项下色谱条件连续进样
5 次，测得焦袂康酸峰面积的 ＲSD = 0. 16%，试验
表明仪器精密度良好。
2. 6 重复性试验
按 2. 3 项下的供试品溶液的制备方法平行制备
一年蓬花的供试品溶液 5 份，按 2. 1 项下色谱条件
进样，测定焦袂康酸平均质量分数为 2. 56 mg·g －1，
ＲSD =1. 70%，表明此法重复性良好。
2. 7 稳定性试验
精密称取 2. 3 项下制备的一年蓬花供试品溶液，
按 2. 1 项下色谱条件每 2 h进样 1 次，进样 6 次，计
算得焦袂康酸峰面积的 ＲSD = 0. 97%，结果表明供
试品溶液在 10 h内稳定。
2. 8 加样回收率试验
精密称取已知含量的一年蓬花细粉 6 份，分别
精密加入 2. 2 项下焦袂康酸对照品溶液 10 mL，照
2. 3 项下方法制成加样回收供试液，按上述色谱条
件依法进行测定，结果见表 1。
表 1 一年蓬花中焦袂康酸加样回收率试验
称样量 / g样品中含
量 /mg
对照品加
入量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
ＲSD
/%
0. 252 0 0. 645 0. 620 1. 218 96. 3 98. 4 1. 2
0. 255 4 0. 654 0. 620 1. 264 99. 2
0. 245 2 0. 628 0. 620 1. 243 99. 6
0. 253 1 0. 648 0. 620 1. 251 98. 6
0. 249 8 0. 639 0. 620 1. 240 98. 5
0. 259 0 0. 663 0. 620 1. 257 98. 0
2. 9 样品含量测定
按 2. 3项下方法分别制备一年蓬花、叶、茎、根
样品溶液各 3份，按 2. 1 项下色谱条件进样，测得峰
面积，计算焦袂康酸的含量。测得一年蓬花、叶、茎
中焦袂康酸的平均质量分数分别为 2. 56，0. 40，0. 08
mg·g －1，根中焦袂康酸质量分数低于 0. 012 mg·g －1。
3 讨论
取甲醇溶解的焦袂康酸对照品溶液，以甲醇为
空白，在 200 ～ 400 nm 进行光谱扫描，可见焦袂康
酸在 270 nm 波长处有最大吸收，因此选择 270 nm
作为检测波长。焦袂康酸为 3-羟基-4-吡喃酮，具有
弱酸性，经尝试最终选用使峰形较好的甲醇 － 1‰三
氟乙酸水溶液(5∶95)作为流动相。
应用本法测定了一年蓬药材不同部位中焦袂康
酸的含量，结果显示各部位焦袂康酸含量为花 ＞
叶 ＞茎 ＞根，且各部位含量差异较为明显，其中根
中几乎不含焦袂康酸，而花中的焦袂康酸含量是叶
的 6 倍左右、茎的 30 余倍，因此判定花为一年蓬中
富含焦袂康酸的主要药用部位。这提示我们在资源
可持续利用的原则下，只采收一年蓬的地上部分就
可获得该植物中绝大多数的焦袂康酸。本研究建立
的方法不仅能够快速准确地测定一年蓬中焦袂康酸
的含量，也为一年蓬药材的合理采收和开发利用提
供参考依据。
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(下转第 465 页)
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近年来，随着人们对多糖类物质化学结构及生
物功能认识的加深，证实了这类植物细胞壁骨架成
分具有多种生理活性，如:抗氧化、抗病毒、免疫
调节、抗肿瘤、降血糖等。感冒灵颗粒中药水提取
物醇沉淀丢弃物中所包含的多糖类物质可能具有提
高感冒患者免疫力的作用，能够辅助制剂中的小分
子化学成分发挥最佳疗效。因此，我们对感冒灵原
工艺、新工艺(取消醇沉)及醇沉沉淀的体内抗流
感病毒作用进行了研究，结果表明原工艺与新工艺
流膏对 FM1 和 PＲ8 株感染小鼠肺炎均有明显治疗
作用，二者作用强度相当;用醇沉部分治疗也可一
定程度上降低模型动物的死亡数及延长动物的存活
天数。机理研究中，给予感冒灵各工艺浸膏治疗 4
d，新工艺及原工艺可降低 FM1 株流感病毒感染
正常小鼠肺组织中病毒载量;新工艺、原工艺及
醇沉部分均可提高 PＲ8 株流感病毒感染正常小鼠
肺组织 IFN-γ 含量;对 FM1 株流感病毒感染正常
小鼠肺组织 IFN-γ 和血清 IgM 无明显影响。该试
验为感冒灵工艺改进及增加抗流感病毒适应症提
供了依据。
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