全 文 ：北方园艺 2009(11):219 ～ 221 ·中 草药 ·
第一作者简介:王艳梅(1967-),女 ,博士, 研究方向为野生动植物
保护与利用。 E-mail:yanmeimeiw@163.com。
基金项目:科技部攻关资助项目(2005BA741C)。
收稿日期:2009-06-10
长白山区野生泥胡菜中总黄酮及微量元素的分析研究
王艳 梅1 , 王 继龙2 , 张 　秋3 , 贺凤 成2
(1.农业部参茸产品质量监督检验测试中心 ,吉林长春 130118;2.吉林农业大学中药材学院,
吉林长春 130118;3.鲅鱼圈出入境检验检疫局,辽宁营口 115007)
　　摘　要:采用加速溶剂萃取法提取 、紫外分光光度法测定长白山野生泥胡菜中的总黄酮含
量 ,用原子吸收分光光度法对泥胡菜中的 K 、Ca、Na、Mg 、Cu 、Zn 、Fe、Mn 8种元素含量进行分析测
定。结果表明:长白山泥胡菜中含有较高的总黄酮和丰富的微量元素。试验结果为野生泥胡菜
资源的开发利用奠定了科学的理论依据。
关键词:长白山;泥胡菜;总黄酮;微量元素
中图分类号:S 567.23+9　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2009)11-0219-03
　　微量元素是构成人体组织的重要成分 ,可维持神经
和肌肉的兴奋性 、细胞膜的通透性以及细胞正常的功
能 ,同时也是酶的辅基 、激素 、维生素 、蛋白质和核酸的
构成成分和激活剂 ,是参与体内多种物质代谢和生理生
化的重要物质基础[ 1] 。天然植物生长不仅需要必须的
营养元素 ,而且还有选择地吸收和富集某些人体所必需
的且有益的微量元素 ,这些元素是临床中起防病治病的
物质基础之一[ 2] 。黄酮类化合物是植物中非常重要的
一类天然化合物 ,具有降血脂 、抗血栓 、抗氧化等多种生
理活性。
泥胡菜(Hemisteptia lyrata Bunge)为菊科泥胡菜属
植物 ,广泛分布于我国各地 ,为 2 a生草本植物 ,具有清
热解毒 、消肿祛瘀 、去腐生肌等功效 ,临床上用其口服或
外用治疗痔漏 、痈肿 、疔疮 、外伤出血和骨折等[ 3] 。四川
民间把泥胡菜用来治疗白内障 ,疗效较好[ 4] 。为了深入
开发长白山野生泥胡菜资源 ,该试验应用加速溶剂萃取
提取并采用紫外分光光度法对泥胡菜总黄酮进行测定 ,
用原子分光光度法测定 K 、Na 、Ca 、Mg 、Cu 、Zn、Fe、Mn
8种元素。
1　材料与方法
1.1　样品与试剂
样品采自长白山临江地区 ,由吉林农业大学胡全德
教授鉴定为菊科植物泥胡菜(Hemisteptia lyrata
Bunge)。样品用纯净水充分洗净 ,阴干后粉碎过 0.28
mm筛置于干燥器中备用。
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所),无水乙
醇 、NaNO3 、AlON3(分析纯),HNO3 、HClO4(优级纯 ,北
京化工厂),杭州产娃哈哈纯净水 ,K 、Na、Ca、Mg 、Cu等
元素标准储备液(国家标准物质中心)。
1.2　仪器
岛津 AA-6300型原子吸收分光光度计 ,Cu 、Zn、Fe、
Mn等空心阴极灯(岛津);戴安 ASE-300型加速溶剂萃
取仪 ,经单因素试验及正交试验确定其提取参数条件
为:乙醇浓度80%,提取温度120℃,提取时间 10 min ,冲
洗溶剂量为 50%,循环次数为 2次;DU7500分光光度
计 ,样品检测波长 510 nm;1712MP8电子天平。
1.3　样品处理
微量元素:将样品粉碎后准确称取0.5000 g于消化
瓶中 ,加入20 mL的 HNO3 ∶HClO4 =4∶1 ,上端放一曲
径漏斗 ,静止 10 h 后进行消化。消化器逐渐升温至
205℃,消化管内红棕色气体冒完后加热至白烟散尽 ,溶
液接近无色 ,将消化管取下冷却 ,加入2 ～ 3 mL 纯净水 ,
继续加热 ,除去余酸 ,冷却后用纯净水定容到 50 mL容
量瓶中 ,混匀 ,待测。
总黄酮:称取 2.000 g 样品 ,置于 ASE-300萃取池
中 ,萃取池底部加入过滤膜后关闭萃取池门 ,按1.2设置
提取条件 ,进行提取。提取结束后将提取液定容至
100 mL ,待测。
1.4　标准曲线的绘制
各元素标准曲线:取元素标准液进行标准曲线绘制
(如表2)。芦丁标准曲线:称取芦丁标准品 5.000 mg ,定
容于 25 mL容量瓶中 ,其浓度为0.2 mg/mL。分别精密
吸取芦丁标准溶液1.00 、2.00、4.00 、6.00 、8.00 mL置于
25 mL容量瓶中 ,用 30%乙醇溶液补充至12.5 mL ,加入
5%亚硝酸钠溶液 0.75 mL ,摇匀 ,放置 5 min后 ,加入
10%硝酸铝溶液 0.75 mL ,摇匀 ,放置 5 min后 ,再加入
1 mol/L 氢氧化钠溶液10 mL ,摇匀 ,用30%乙醇溶液稀
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·中 草药· 北方园艺 2009(11):219～ 221
释至刻度 ,10 min后用 DU7500型分光光度计在 510 nm
下进行测定 ,以试剂为空白。
　　表 1 各元素及芦丁标准曲线相关系数
元素 标准溶液浓度 线性回归方程 相关系数
K 0、0.4 、0.6、0.8、1.0、1.2 y=0.532x+0.067 0.998
Ca 0、4、8、16、20 y=0.0295x+0.0237 0.9999
Na 0 、0.5、1、2、3 、4 y=0.35778x+0.022 0.9991
Mg 0、0.1、0.3、0.5 、0.7 y=0.99887x+0.0311 0.9998
Zn 0、0.2、0.4、0.6、0.8 、1.2、1.6 y=0.44751x+0.0103 0.9997
Mn 0、2、4 、6、8、10 y=0.15386x+0.0203 0.9989
Cu 0、0.5、1.0、1.5、2、2.5 y=0.13994x+0.0007 1.0000
Fe 0、2、4 、6、8、10 y=0.05069x+0.0008 0.9998
总黄酮 0、8、16、32、48 、64 y=12.721x 1.0000
2　结果与分析
用火焰原子分光光度法测定样品中各元素含量(见
表2)。按 1.4中方法对样品中总黄酮进行分析测定:长
白山野生泥胡菜总黄酮含量为 5.84 mg/g(C%:
0.584%)。
　　表 2　　长白山野生泥胡菜各元素含量
各元素 含量/μg·g-1
K 21 613.88±77.003
Ca 8 194.239±23.5217
Na 1 560.463±15.2258
Mg 6 814.042±24.0014
Cu 10.67405±0.4001
Mn 106.8304±0.8526
Fe 1 326.035±56.2389
Zn 76.8313±1.1123
　　试验结果显示 ,长白山野生泥胡菜总黄酮含量为
0.584%,微量元素含量较为丰富 ,各元素含量大小依次
为:K>Ca>Mg>Na>Fe>Mn>Zn>Cu。
加速溶剂萃取技术是近年来发展起来的一种全新
的萃取方法 ,已被美国国家环保局批准为EPA3545号标
准方法[ 5] 。加速溶剂提取技术(Accelerated solvent ex-
t raction , ASE)是一种在较高的温度和较大的压力下用
溶剂萃取固体或半固体的新颖的样品前处理方法 ,具有
有机溶剂用量少 、萃取速度快 、样品回收率高等突出优
点 ,已在环境 、食品的农残检测及天然产物有效成分提
取等领域得到广泛的应用[ 6-10] 。该试验通过对乙醇浓
度、提取温度 、静态萃取时间 、冲洗溶剂用量 、循环次数
等5个单因素试验及正交试验确定了泥胡菜中总黄酮
乙醇提取的最佳条件为:乙醇浓度 80%,提取温度
120℃,提取时间 10 min ,冲洗溶剂量为 50%,循环次数
为2次 ,并通过试验数据验证了该工艺的准确性。
泥胡菜中含有大量的K ,属于典型的高 K低 Na的
野生植物 ,在药用上有利于降低血压 ,减少心血管疾病 ,
促进糖类代谢的作用[ 11] 。丰富的Ca元素 ,可以加强大
脑皮层的抑制过程 ,调节兴奋和抑制过程的平衡 ,还有
消炎 、消肿 、抗过敏及解毒作用 ,并与高血压成负相
关[ 12] 。Mn是能量 、蛋白质和核酸代谢中某些重要酶的
组成成分和激活剂 ,在厌氧情况下能够充当最终的受氧
体 ,促进氧化过程 ,增加脂肪的利用 ,并有延缓衰老的作
用 ,有助于癌症 、精神分裂症和糖尿病的防治[ 1] 。Cu能
够维持正常的造血机能 ,促进骨骼 、血管和皮肤的正常
结构 ,维护中枢神经系统等作用。Zn参与人体内300余
种酶和功能蛋白的组成 ,对代谢活动起重要的调节作
用。Fe可以提高机体的免疫力 ,增加中性粒细胞和大吞
噬细胞的吞噬能力 ,同时也可使机体的抗感染能力增
强[ 13-15] 。该试验对长白山野生泥胡菜的总黄酮和微量
元素进行了准确科学的分析测定 ,为泥胡菜资源的进一
步价值开发奠定了理论依据 ,并为长白山野生植物资源
的现代化发展提供了新的思路和方法。
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Analysis and Study of Total Flavone and Trace Element in Hemisteptia lyrata Bunge of Changbai Mountain
WANG Yan-mei1 ,WANG Ji-long2 , ZHANG Qiu3 ,HE Feng-cheng2
(1.Ginseng and Antler Products Testing Center of M inistry of Ag riculture, Peoples Republic of China , Changchun , Jilin 130118 , China;
2.College of Chinese Traditional Medicine, Jilin Agricultural University , Changchun , Jilin 130118 , China;3.Entry-Exit Inspection and Quar-
antine Bureau of Bayuquan , Yingkou , Liaoning 115007 , China)
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北方园艺 2009(11):221 ～ 223 ·中 草药 ·
半夏愈伤组织的诱导及植株的再生研究
潘 卫仓1 , 刘菊英2
(1.天水师范学院生命科学与化学学院 ,甘肃天水 741001;2.永登县第二中学,甘肃 永登 730302)
　　摘　要:以半夏 Pinellia ternate(Thunb.)Breit的块茎为外植体 ,接种于附加了 6-BA ,NAA ,
2 ,4-D及其组合的MS培养基上 ,都能诱导出愈伤组织。结果表明:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5
mg/ L NAA对半夏愈伤组织的诱导率最高 ,植株在 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA中较
MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA中更容易再生。
关键词:半夏;组织培养;愈伤组织;生长调节剂
中图分类号:S 567.23+9　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2009)11-0221-03
　　半夏 Pinellia ternate(Thunb.)Breit又名半子 、三步
跳、麻芋头 、三兴草等 ,为天南星科多年生宿根草本植
物 ,株高一般为15 ～ 40 cm ,1 a生或较小株芽为单叶 ,2 a
生以上为 3片小复叶[ 1, 2] 。雌花常生于花序基部 ,而雄
花则生于上端。花期6 ～ 8月 ,果期8 ～ 9月[ 3] ,生育期为
180 ～ 210 d[ 4] 。天水野生半夏多生于山坡 ,阴湿的草丛 ,
林下及田间 ,夏季易在半阴半阳的环境中生长 ,一般土
壤含水量在 20%～ 40%时生长最为适宜 ,家种半夏以甘
肃陇南 、平凉 ,山东荷泽等地为主。
半夏以块茎入药 ,具有燥湿化痰 ,降逆止呕 ,消痞散
结等多种功效[ 5-7] ,近年来 ,又发现半夏蛋白有抗早孕 ,抗
肿瘤[ 1.8-12] ,抗心律失常 ,抗衰老[ 13-16] ,去皱养颜和提高记
忆力的特殊作用[ 16-19] 。另外 ,半夏有一定的毒性 ,还可
对有毒成分进一步研究 ,根据“以毒攻毒”的思路 ,开发
研制一些植物杀虫剂[ 9] 。
　　随着半夏用途的日益扩大 ,近年来全国各大药市半
夏商品货源偏少 ,价格坚挺 ,市场呈现购销两旺的局面 ,
价格从 20世纪90年代的10元/kg到目前的30元/kg ,
一直在攀升[ 9, 11 ,20] 。近期 ,半夏商品价格又升高了 ,统货
第一作者简介:潘卫仓(1979-), 男, 甘肃天水人 ,在读硕士 ,讲师。
E-mail:pwei1999@163.com。
收稿日期:2009-06-20
收购价为 32 ～ 34元/kg ,优质品达 38 ～ 40元/kg[ 21] 。有
关药市行家预测 ,半夏后市将继续走畅价升 ,野生资源
形式严峻 ,由于生态环境遭到破坏 ,造成半夏大面积灭
绝。肆意采伐树木和开山挖田 ,大量使用除草剂掠夺式
采挖 ,致使半夏雪上加霜。半夏家种繁殖缓慢 ,667 m2地
用 10～ 13 mm 的种茎达 100 kg ,而仅产种茎1 000 kg左
右 ,其中3/4做商品 ,仅有 1/4做种用 ,第 2年只能用于
扩种 333 m2 ,如此缓慢的发展 ,再加产区又不多 ,因此商
品严重不足。我国对半夏的年需求量达 350万 kg 以
上 ,每年出口日本的半夏达 400 t[ 20] 。田间半夏多采用
块茎 、株芽等来繁殖 ,所以需要大量的种茎 ,而目前市场
上半夏种茎达 50元/kg ,这给药农带来严重的经济负
担 ,再加上产量又低 ,田间繁殖致使半夏感染病毒严重 ,
品质下降 ,因此人们的种植积极性不高 ,因而半夏的供
应越来越少 ,但随着全球温度的升高 ,肺疾的增多 ,国内
外对半夏的需求量却越来越大[ 9] 。
为此 ,选用中药半夏正品为材料 ,进行组织培养 ,以
获得优质种苗 ,使半夏得以快速繁殖 ,为实现半夏的工
厂化生产或为大田生产提供支持 ,并为开展人工种子的
研究作一些铺垫性的工作[ 22] 。
1　试验材料
半夏块茎采自甘肃省天水。试剂和药品:2 ,4-D:北
京化工厂;NAA:曹扬第二试剂厂;6-BA:新华活性材料
研究所。
Abstract:The power of Hemisteptia lyrata Bunge in Changbai Mountain was extracted by ASE , and the content of total
flavone was determined by ultrviolet spect rophotometry.The contents of eight trace elements in cluding potassium , na-
t rium , calcium ,magnesium , copper , zinc , iron , manganese were determined by f lame atomic absorption spectrophotome-
t ry.The results showed that there were high total flavone and rich trace elements.Among which w ere comparatively
high potassium , calcium ,magnesium , natrium , iron in Hemisteptia lyrata Bunge.It provided theoretical basis for the
further research on wild Hemisteptia lyrata Bunge in Changbai Mountain.
Keywords:Changbai mountain;Hemisteptia lyrata Bunge;Total f lavone;Trace elements
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