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一年蓬花挥发油的体外抗氧化活性研究
张璐璐，文飞龙，井清泉，马雪梅，徐漫，毕淑峰*
(黄山学院生命与环境科学学院，黄山 245041)
摘 要:采用水蒸气蒸馏法提取一年蓬花的挥发油，以 DPPH自由基、ABTS自由基和亚硝酸钠的清除作
用为指标评价一年蓬花挥发油的体外抗氧化活性，并与维生素 C (VC)和 2，6 －二叔丁基 － 4 －甲基苯酚
(BHT)。研究结果表明:20%挥发油对 DPPH自由基、ABTS自由基和亚硝酸钠有明显的清除作用，其 IC50值
分别为 99. 33、22. 68、85. 79μL。20% 一年蓬花挥发油对 DPPH 自由基和亚硝酸钠的清除能力分别优于
0. 1mg /mL的维生素 C和 1mg /mL BHT;对 ABTS自由基的清除能力略低于 1mg /mL 的维生素 C。一年蓬花挥
发油具有良好的体外抗氧化活性，样品量与清除率存在量效关系。
关键词:一年蓬花;挥发油;抗氧化活性
中图分类号:Ｒ962 文献标识码:A 文章编号:1006 － 2513(2013)06 － 0110 － 03
Study on antioxidant activity of flower volatile oil of
Erigeron annus in vitro
ZHANG Lu-lu，WEN Fei-long，JING Qing-quan，MA Xue-mei，
XU Man，BI Shu-feng
(College of Life and Environment Science，Huangshan University，Huangshan 245041)
Abstract:The volatileoilfrom flowers of Eigeron annuswas extracted by steam distillation． Its antioxidant activity was e-
valuated by scavenging capacity against DPPH·，ABTS·，and sodium nitrite． The results were compared with those
of VC and BHT． The results showed that 20% volatile oil exhibitedsignificant scavenging capacity against DPPH·，
ABTS·，and sodium nitrite with IC50 values of 99. 33、22. 68、85. 79μL，respectively． The scavenging capacity a-
gainst DPPH free radical and sodium nitriteof volatile oil were higher than that of 0. 1mg /mL VC and 1mg /mL BHT and
the scavenging capacity against ABTS· free radical was lowerthan that of 1mg /mL VC． The volatile oil from flowers of
E． annus exhibitedsignificant antioxidant activity in vitro and isconcentration dependent．
Key words:flowers of Eigeron annus;volatile oil;antioxidant activity
一年蓬为菊科飞蓬属植物，又名女菀、野
蒿、牙肿消、地白菜、油麻草、千层塔、治疟草
等［1］。一年蓬原产北美洲，19 世纪末传入我国，
其繁殖力强，现已成为我国分布范围最广的入侵
物种之一［2］。一年蓬具有药用价值，全草可入
药，有清热解毒、助消化的作用，临床用于治疗
消化不良、肠炎腹泻、传染性肝炎、血尿、疟疾
等［3，4］。一年蓬挥发油的化学成分及抗菌活性已
有报道［5 － 7］，但一年蓬花挥发油的抗氧化活性研
究未见报道。本文对一年蓬花挥发油抗氧化活性
收稿日期:2013 － 07 － 05 * 通讯作者
基金项目:中国博士后科学基金面上项目 (2011M500898) ;黄山学院自然科学基金项目 (2012xkjq002) ;
国家级大学生创新计划项目 (201210375041)。
作者简介:张璐璐 (1990 －) ，男 (汉族) ，学士，研究方向:天然产物化学。
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进行研究，为一年蓬的开发利用及药理研究提供
科学依据。
1 材料与方法
1. 1 材料、仪器与试剂
一年蓬花采自安徽省黄山市，由黄山学院生
命与环境科学学院张慧冲副教授鉴定为一年蓬 E-
rigeron annus的花。UV754N紫外可见分光光度计
(上海精密科学仪器有限公司) ;挥发油提取器;
1，1 －二苯基苦基苯肼 ［DPPH，梯希爱 (上海)
化成工业发展有限公司］;2，2 －联氮基 －双 －
(3 － 乙基苯并噻唑啉 － 6 － 磺酸)二氨盐
(ABTS， Ｒegal Biotechnology Company， 批 号
AD0002) ;无水乙醚、2，6 －二叔丁基 － 4 －甲基
苯酚 (BHT)、过硫酸钾等均为国产分析纯。
1. 2 一年蓬挥发油挥发油的提取
一年蓬花真空干燥后粉碎、过筛、装瓶。称
取 30. 0g 样品置于挥发油提取器烧瓶中，加水
300mL，用挥发油提取器按水蒸气蒸馏法提取 6h，
收集无水乙醚层，室温挥发无水乙醚，无水硫酸
钠干燥，得到具有浓郁香味的淡黄色透明油状
物，共提取 8 次，挥发油的得率为 0. 26%。用丙
酮将挥发油稀释成体积分数 20%，备用。
1. 3 一年蓬挥发油抗氧化活性的测定
1. 3. 1 挥发油对 DPPH 自由基清除作用的
测定［8，9］
取 20μL 100μL20%挥发油置于 5 只试管，
样品体积少于 100μL 的试管，以丙酮补至
100μL。分别加 4 mL24mg /L的 DPPH乙醇溶液混
合，避光 2h，在波长 517nm 处测吸光度 (Ai) ，
以不加样品的 DPPH 乙醇液为对照，测定对照组
吸光度 (A0)。
清除率(%)=(1 － Ai /A0)× 100%。
1. 3. 2 挥发油对 ABTS 自由基清除作用的
测定［10］
将等量的 7mmol /L ABTS 溶液与 2. 45mmol /L
过硫酸钾混合使之反应并置于暗处 12h 16h。
用甲醇将 ABTS 自由基溶液稀释至其在 734nm 处
吸光度 0. 70 ± 0. 02。将不同体积样品液加入 2mL
ABTS自由基溶液中以稀释，6min 后测量其在波
长 734nm处的吸光度 (Ai)。测定 2mLABTS 自由
基溶液与样品体积相同甲醇混合后的吸光度
(A0) ;测定 2mL甲醇溶液与不同体积样品液的吸
光度 (Aj)。
清除率(%)=［(A0 － Ai + Aj)/ A0］× 100%。
1. 3. 3 挥发油对亚硝酸钠清除作用的测定［11］
将 0. 5mol /L 的柠檬酸钠 － 盐酸缓冲液
(pH3. 0) 5. 0mL 置于 10 mL 容量瓶中，加入
1mL0. 1g /L的 NaNO2溶液和 20μL 100μL 挥发
油，用蒸馏水定容至刻度，37℃下反应 1h。取
1mL反应液，加入 4g /L 对氨基苯磺酸溶液 2mL
和2g /L N － 1 －萘乙二胺盐酸盐 1mL，摇匀放置
15min，在 540nm处测吸光度值 AX;同时做对照
实验测其吸光度 A0。
清除率(%)=［(A0 － Ax)/A0］× 100%。
2 结果与分析
2. 1 挥发油对 DPPH自由基的清除作用
由图 1 可知，20%一年蓬挥发油对 DPPH 自
由基具有一定的清除作用，其清除效果优于
0. 1mg /mL 维生素 C，样品体积为 100μL 时，清
除率为 48. 83%。随着挥发油体积的增加，对 DP-
PH自由基清除能力逐步增强，样品体积与清除
率呈正相关，挥发油体积 (X)与清除率 (Y)
的回归方程为 Y = 0. 2891X + 21. 2830 (Ｒ2 =
0. 9599)。20%挥发油和 0. 1mg /mL 维生素 C 的
IC50 (清除率为 50% 时样品的体积)分别为
99. 33μL、166. 32μL。
图 1 挥发油对 DPPH自由基的清除作用
Fig． 1 Scavenging capacity against DPPH
free radical of volatile oil
2. 2 挥发油对 ABTS自由基的清除作用
由图 2 可知，20%一年蓬花挥发油对 ABTS
自由基有较好的清除作用，体积为 100μL 时，清
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除率为 90. 14%。体积为 20μL 时，挥发油对
ABTS自由基清除能力优于 1mg /mL 维生素 C，体
积为 40 100μL时，挥发油对 ABTS 自由基清除
能力低于 1mg /mL 维生素 C。在实验体积范围内，
挥发油体积与清除率几乎呈直线相关，挥发油体
积 (X)与清除率 (Y)的回归方程为 Y =
0. 5207X + 38. 1882 (Ｒ2 = 0. 9964)。清除率为
50% 时， 挥 发 油 和 VC 体 积 分 别 为
22. 68μL、21. 46μL。
图 2 挥发油对 ABTS·的清除作用
Fig． 2 Scavenging capacity against ABTS
free radical of volatile oil
2. 3 挥发油对亚硝酸钠的清除作用
由图 3 可知，20%一年蓬花挥发油对亚硝酸
钠的清除能力明显强于阳性对照 1mg /mL BHT;
随着样品体积的增加，挥发油对亚硝酸钠的清除
能力逐步增加，但增幅较少，挥发油体积 (X)
与清除率 (Y)间存在良好的量效关系，两者的
回归方程为 Y = 0. 1773X + 34. 7889 (Ｒ2 =
0. 9966)。20%挥发油、1mg /mL BHT 的 IC50分别
为 85. 79μL、195. 61μL，BHT的体积是挥发油体
积的 2. 28 倍。
图 3 挥发油对亚硝酸钠的清除作用
Fig． 3 Scavenging capacity againstsodium
nitrite of volatile oil
3 结论与讨论
人体炎症、癌症及衰老等均与体内自由基过
量和失衡有关，从药用植物中寻找和发现天然抗
氧化剂对增进人类健康有重要意义。亚硝酸钠是
一种防腐剂和腌制剂，广泛存在于多种食品中。
在胃部酸性条件下，亚硝酸盐与胺类同时存在
时，会形成化学致癌物亚硝胺，清除亚硝酸钠具
有预防癌症作用。DPPH自由基、ABTS 自由基和
亚硝酸钠清除法是评价抗氧化活性的常用方法。
以 DPPH自由基、ABTS自由基和亚硝酸钠的清除
作用评价一年蓬花挥发油的体外抗氧化活性，其
IC50值分别为 99. 33L、22. 68L、85. 79L，一年蓬
花挥发油具有良好的体外抗氧化活性，在天然抗
氧化剂的研发中具有应用前景。一年蓬作为外来
入侵种，适应能力强、繁殖快，资源丰富，将其
开发利用是最佳的防治方法。
参考文献:
［1］ 国家中医药管理局． 中华本草 (第 21 卷) ［M］． 上海:上
海科学技术出版社，1999:826 － 827.
［2］ 李振宇，解焱． 中国外来入侵种 ［M］． 北京:林业出版社，
2002:195.
［3］ 中国科学院中国植物志编辑委员会． 中国植物志 (第 74
卷) ［M］． 北京:科学出版社，1985:326.
［4］ 江苏新医学院． 中药大词典:上册 ［M］． 上海:上海科学
技术出版社，1986:103.
［5］ 杨再波，龙成梅，郭治友，等． 微波辅助顶空固相微萃取法
快速分析黔产一年蓬不同部位挥发油化学成分 ［J］． 精细化
工，2011，28 (3) :242 － 246.
［6］ 徐琅，贾元超，龚祝南． 一年蓬挥发油的气相色谱 －质谱分
析及体外抑菌活性研究 ［J］． 时珍国医国药，2009，20
(5) :1171 － 1172.
［7］ 赵昱玮，南敏伦，吕雪峰，等． 一年蓬超临界提取物的 GC
－ MS测定 ［J］． 中国医药指南，2010，8 (34) :221 － 223.
［8］ 贾红丽，张丕鸿，计巧灵，等． 新疆阿勒泰百里香挥发油化
学成分 GC － MS分析及抗氧化活性测定 ［J］．
食品科学，2009，30 (4) :224 － 229.
［9］ 赵金伟，李范洙，张先． 苹果梨酚类物质抗氧化活性研究
［J］． 食品科学，2010，31 (17) :170 － 172.
［10］ 杨少辉，宋英今，王洁华，等． 雪莲果体外抗氧化和自由
基清除能力 ［J］． 食品科学，2010，31 (17) :166 － 169.
［11］ 陆占国，李伟，封丹． 莳萝籽精油成分及清除亚硝酸钠研
究 ［J］． 天然产物研究与开发，2010，(22) :479 － 482.