全 文 ：图 2 大鼠各组织(μg·g － 1)和血浆(μg·mL －1)中的 TJ0711 盐酸盐
浓度(珋x ± s，n = 6，生殖器官 n = 3)
－ □ － 10min;－ － 25 min;－ － 60 min;－■ － 180 min
Fig 2 Concentrations of TJ0711 in tissues (μg·g － 1)and plasma (μg·
mL －1) (珋x ± s，n = 6，gonad n = 3)
－ □ － 10min;－ － 25 min;－ － 60 min;－■ － 180 min
采用 C18柱分离药物，HPLC-荧光检测各种生物样品
中的 TJ0711 盐酸盐质量浓度，方法准确、灵敏、特异
性强，能够满足生物样品测定要求。
药物与血浆蛋白结合的程度会影响药物在体内
的分布、代谢和消除，从而影响其作用强度和时间，
并往往与药物的相互作用及作用机制等密切相关，
因此对新药进行蛋白结合率的研究具有重要意义。
蛋白结合率实验结果表明，TJ0711 盐酸盐与大鼠和
人血浆蛋白的结合率均较高(85． 83% ～ 92． 08%) ，
且不同种属的蛋白结合率之间有显著性差异。
TJ0711 盐酸盐与大鼠和人血浆蛋白属于高度结合
(＞ 80%) ，提示在临床应用时可能容易受到其他高
蛋白结合率药物的影响。
组织分布实验要求大鼠给药后，在吸收相、分布
相和消除相上选一个时间点测定组织中的药物浓
度。在前期实验中，大鼠灌胃给予 TJ0711 盐酸盐
30 mg·kg －1后，对大鼠血药浓度-时间数据采用 DAS
2． 0软件进行统计矩分析，计算得 tmax为(19． 2 ±
4． 9)min，t1 /2z为(37． 9 ± 9． 1)min。因此选取的时
间点分别为 10，25，60，180 min。组织分布实验结果
表明，药物在大鼠体内迅速向肺、肝、胃、十二指肠、
肾、脾等血流量比较丰富的组织或器官分布，绝大多
数组织在给药后 10 min或 25 min药物浓度达峰值，
其后随时间延长，药物浓度迅速下降，药物在脑和脂
肪组织中也有一定分布，说明 TJ0711 盐酸盐具有一
定的脂溶性，且能透过血脑屏障，在体内分布较广
泛。给药 180 min 后多数组织中药物浓度已经很
低，表明该药物在体内没有明显的蓄积现象。但值
得注意的是，药物在大鼠肺组织分布相对较多，在安
全性评价时须特别注意考察 TJ0711 盐酸盐对呼吸
系统的影响。
参考文献:
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［收稿日期］2010-07-06
［基金项目］国家科技重大专项课题新药创制(编号:2009ZX09103-448) ［作者简介］杨秀，女，硕士生，电话:13565965736 ［通讯作者］王
新春，女，主任药师，博士，硕士生导师，电话:15199586171，E-mail:cwjwxc@ 163． com
星点设计-效应面法优化香青兰黄酮缓释片处方
杨秀1，邢建国2，王新春1，3，李悦1，薛桂蓬2，马祖文1，任文东1 (1．石河子大学药学院，新疆 石河子 832000;2．新疆
维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004;3．石河子大学医学院一附院，新疆 石河子 832000)
［摘要］ 目的:通过星点设计-效应面法优化香青兰黄酮缓释片处方并探讨释药机制。方法:以 HPMC的用量和乳糖 /淀粉(1
∶ 1)的用量为考察因素，以 2，6，12 h的累积释放度为考察指标，分别用线性和二项式模型描述因素与考察指标之间的数学关
系，根据模型绘制等高线图，通过重叠等高线图确定优化处方并进行验证实验，探讨药物释放机制。结果:优化后的处方为
HPMC 50 mg，乳糖 68 mg，淀粉 68 mg，主药 150 mg，释放模型符合 Higuchi方程。结论:星点设计-效应面法优化香青兰黄酮缓
释片的处方具有良好的预测性。
［关键词］ 香青兰黄酮;星点设计-效应面法;HPMC缓释片;释药机制
［中图分类号］R943 ［文献标识码］A ［文章编号］1001-5213(2011)15-1238-04
Optimization of Dracocephalum moldevica flavones sustained-release tablets formulation by
central composite design-response surface methodology
·8321· 中国医院药学杂志 2011 年第 31 卷第 15 期 Chin Hosp Pharm J，2011 Aug，Vol 31，No． 15
YANG Xiu1，XING Jian-guo2，WANG Xin-chun1，3，LI Yue1，XUE Gui-peng2，MA Zu-wen1，REN Wen-dong1(1．
School of Pharmacy，Shihezi University，Xinjiang Shihezi 832000，China;2． Xinjiang Institute of Meteria，Xinjiang Urumqi 830004，
China;3． The first Affiliated Hospital of Medical College，Shihezi University，Xinjiang Shihezi 832000，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To optimize the formulation of sustained-release preparation by the central composite design-response
surface methodology．METHODS The amounts of HPMC and lactose:strarch (1∶ 1)as independent variables were optimized with
RSM plus CCD by selecting percentages of in vitro cumulative releases at 2，6 and 12 h as dependent variables． Multi-linear and quad-
ratic models were used to estimate the relationship between the dependent and the independent variables，and to delineate RSM and o-
verlay contour plots in order to select the optimal formulations with the application of hypothesized in vitro cumulative release(%)at 2，
6 and 12 h． RESULTS Regression coefficients of second-order models were higher than first-order model． Optimized formulation was
proposed to consist of HPMC 50 mg，lactose 68 mg，starch 68 mg，remedium cardinale 150 mg． In vitro release indicated that there exis-
ted high approximation between the observed and estimated values． The release was conformed to Higuchi equation． CONCLUSION
Central composite design-response surface methodology can be applied to optimize the coating formulation for Dracocephalum moldevica
flavones sustained release tablets and the models are proved to be predictable．
KEY WORDS:Dracocephalum moldevica flavones;central composite design-response surface;HPMC sustained-release tablets;re-
lease mechanism．
香青兰(Dracocephalum moldevica L．)是维吾尔
民族药之一，具有重要的药用价值。它在维吾尔医
和民间用于治疗冠心病，血液质旺盛(高血压)［1］。
香青兰中黄酮类化合物种类繁多，含量较高，是香青
兰中主要的活性物质，具有明显的心肌保护作
用［2］。国内已有香青兰滴丸、香青兰颗粒及香青兰
冲剂的研究，但未见口服缓释制剂的报道。因此，课
题组在前期香青兰总黄酮缓释片单因素研究［3］基
础上，以 HPMC为骨架材料，采用星点设计-效应面
法［4-7］，优化香青兰总黄酮缓释片处方并对其释药
机制进行初步探讨。
1 材料
SPD-10AVP型高效液相色谱仪(日本岛津制造
所) ;VFP-7 旋转式变速压片机(常州市龙城晨光药
化机械有限公司) ;ZRS-8G 型智能溶出仪(天津大
学无线电厂) ;YD-20KZ型智能片剂硬度仪(天津市
天大天发科技有限公司) ;DHG-9023A 电热恒温鼓
风干燥箱(上海申贤恒温设备厂) ;香青兰黄酮(总
黄酮含量为 57%，新疆西部加斯特药业提供，批号
20100708) ;羟丙基甲基纤维素(HPMC-K15M，上海
卡乐康公司提供) ;其他辅料均由北京凤礼精求商
贸有限责任公司提供，均为药用规格。田薊苷对照
品(新疆维吾尔自治区药物研究所) ;色谱乙腈、甲
醇(美国 Fisher) ;其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 缓释骨架片的制备 将香青兰黄酮，HPMC、
乳糖、淀粉等辅料按处方量称取，过 100 目筛，混匀
后加入润湿剂适量，制软材，20 目筛网制粒，50 ℃干
燥0． 5 h，过 20 目筛网整粒，加入润滑剂硬脂酸镁，
混匀，用旋转式变速压片机压片，每片含主药 150
mg。
2． 2 含量测定方法
2． 2． 1 色谱条件 色谱柱:Shim-pack vp-ODS(250
mm × 4． 6 mm，5 μm) ;流动相:乙腈-0． 5%甲酸;检
测波长:324 nm;流速:1． 0 mL·min －1;柱温:35 ℃ ;
进样量:10 μL;上述色谱条件测定。
2． 2． 2 标准曲线的制备 精密吸取200． 4 μg·
mL －1田薊苷对照品储备液0． 25，0． 5，1． 0，2． 0，3． 0
mL，分别置 5 mL 量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇
匀，即得田薊苷系列对照品溶液。分别精密吸取上
述溶液 10 μL，注入高效液相色谱仪，以对照品质量
浓度 (X，μg·mL －1)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐
标，分别得到田薊苷的回归方程:Y = 27 772 X +
43 263，r = 0． 999 7。结果表明，田薊苷在10． 02 ～
120． 24 μg·mL －1范围内，呈良好线性关系。
2． 3 体外释放度测定 采用溶出度测定法，即中国
药典 2010年版二部附录第三法的装置(搅拌桨法即
小杯法) ，释放介质为0． 8%十二烷基硫酸钠水溶液
250 mL，温度为(37 ±1)℃，转速为 100 r·min －1，分别
于 2，6，12 h取样 3 mL(同时补充同温同体积的溶出
介质) ，用0． 45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液进入液相
色谱仪，以外标法计算田蓟苷累积释放度(Q)。
2． 4 处方优化
2． 4． 1 实验设计 依据单因素实验结果，确定影
响药物释放的主要因素 HPMC 用量(X1)和乳糖 /淀
粉(1∶ 1)用量(X2)极值范围为:X1(35 ～ 70 mg) ，X2
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(126． 5 ～ 161． 5 mg)。以缓释片在 2，6，12 h 的累积
释放度(分别用 Q2h，Q6h，Q12h表示)为考察指标，根
据星点设计-效应面法安排因素水平表及实验表。
结果详见表 1，表 2。
表 1 因素水平表
Tab 1 Levels of independent variables in the coded and physi-
cal forms
因素
水平
－ 1． 414 － 1 0 1 1． 414
X1 35． 0 40． 1 52． 5 64． 9 70． 0
X2 126． 5 131． 6 144． 0 156． 4 161． 5
表 2 星点设计表及结果
Tab 2 Central composite design and results
试验号
代码 操作值 累积释放度 /%
X1 X2 X1 X2 2 h 6 h 12 h
1 － 1 － 1 40． 1 131． 6 24． 63 54． 27 86． 40
2 + 1 － 1 64． 9 131． 6 21． 33 53． 48 89． 50
3 － 1 + 1 40． 1 156． 4 26． 52 61． 15 86． 88
4 + 1 + 1 64． 9 156． 4 22． 33 50． 02 83． 76
5 － 1． 414 0 35 144 28． 54 61． 89 89． 41
6 1． 414 0 70 144 23． 55 52． 08 81． 56
7 0 － 1． 414 52． 5 126． 5 22． 84 51． 63 82． 87
8 0 1． 414 52． 5 161． 5 22． 45 55． 45 87． 22
9 0 0 52． 5 144 24． 70 57． 20 90． 43
10 0 0 52． 5 144 24． 50 61． 17 93． 32
11 0 0 52． 5 144 25． 33 59． 77 92． 78
12 0 0 52． 5 144 24． 72 59． 57 92． 15
13 0 0 52． 5 144 24． 60 58． 10 91． 81
2． 4． 2 模型拟合 根据拟合优度(r)和置信度(P)
分别对线性、交互相和二项式拟合方程进行判定，得
到如下拟合方程，其结果详见表 3、图 1。
表 3 统计结果
Tab 3 The statistics results
模型 响应面
自变量 交互项 二次项
X1 X2 X1X2 X21 X22
Q2h 55． 61 1． 01 － 7． 44 18． 63
Q6h F值 52． 54 6． 15 16． 89 6． 56 38． 09
Q12h 2． 48 0． 016 － 9． 80 11． 31
图 1 HPMC 用量及乳糖与淀粉(1 ∶ 1)用量对 Q2h(A)、Q6h(B)及
Q12h(C)的等高线图
Fig 1 Contour map of the amounts of HPMC and lactose:starch(1∶ 1)vs
Q2h(A)、Q6h(B)and Q12h(C)
Q2h = 136． 644 58 － 0． 759 66X1 + 2． 559 20X2 +
0． 005 563 3X21 － 0． 008 8041 X
2
2 (r = 0． 956 6，P ＜
0． 01)
Q6h = 488． 296 25 + 3． 008 09X1 + 6． 512 76X2 －
0． 001 688 2X1X2 － 0． 007 978 0X
2
1 － 0． 019 227X
2
2(r
= 0． 971 3，P ＜ 0． 01)
Q12h = 387． 826 55 + 1． 920 11X1 + 5． 997 53X2 －
0． 019 357X21 － 0． 020 793X
2
2(r = 0． 851 9，P ＜ 0． 01)
2． 4． 3 缓释片处方优化 依据所绘制的两因素重
叠等高线图(见图 2) ，得到同时满足上述条件的区
域 HPMC 用量50． 0 ～ 57． 5 mg，乳糖 /淀粉(1 ∶ 1)的
用量135． 0 ～ 144． 0 mg。
图 2 HPMC用量及乳糖与淀粉(1∶ 1)用量重叠等高线
Fig 2 Contour ovarlap of the amounts of HPMC and lactose:starch(1 ∶
1)
2． 5 处方验证及释放曲线拟合 结合各主要因素
的用量范围与 Design-Expert 8． 0 软件给出的 Solu-
tions优选最佳处方为:HPMC-K15M 50 mg，乳糖 68
mg，淀粉 68 mg，主药 150 mg，硬脂酸镁 4 mg。按照
优化的处方，进行 3 批样品放大实验，分别测定香青
兰黄酮缓释片中田蓟苷在 2，6，12 h 的释放度，计算
累积释放百分率，并进行释放曲线拟合，结果分别见
表 4、表 5。
表 4 实测值与预测值比较
Tab 4 Comparison of test and predictive values
响应面 预测值 实测值 误差 /%
Q2h 25． 41 24． 39 4． 02
Q6h 59． 98 57． 32 4． 43
Q12h 95． 13 90． 73 4． 63
表 5 香青兰黄酮缓释片田蓟苷体外释药拟合方程
Tab 5 In vitro release model of sustained release tablets of til-
ianin
模型 方程 r值
Zero-order Mt /M∞ = 6． 937 3t + 11． 828 0． 994 2
One-order ln(1-Mt /M∞)= － 0． 230 2t + 0． 215 1 0． 974 8
Higuchi Mt /M∞ = 30． 945t
1 /2 － 16． 06 0． 994 4
验证实验结果表明，优化处方制备 3 批样品的
指标实测值与预测值之间的偏差绝对值均小于
5%，说明该数学模型具有良好的预测效果，所选条
件重复性好。释放曲线拟合结果显示，香青兰黄酮
缓释片中绿原酸及芦丁的释药行为较好地符合
Higuchi方程，提示田蓟苷的释放机制主要以扩散机
·0421· 中国医院药学杂志 2011 年第 31 卷第 15 期 Chin Hosp Pharm J，2011 Aug，Vol 31，No． 15
制为主。
3 讨论
由表 3 方差分析结果中 2 h 累积释放度释药前
期的 X1，X2的系数可知，HPMC、乳糖和淀粉对释放
度的影响是反向的，即 HPMC 对药物释放起促进作
用，而乳糖和淀粉起阻碍作用。可能因为乳糖是一
种亲水性稀释剂，具有较强的亲水性，可与 HPMC
竞争片面上的水分，使凝胶骨架片水化程度下降，且
乳糖本身为非膨胀性的水溶性辅料，可降低 HPMC
骨架片的膨胀能力。由 6 h累积释放度的二次模型
拟合方程中的 X1，X2系数可知 HPMC，乳糖和淀粉
对释放度的影响是同向的，共同起到阻滞药物释放
的作用。可能因为 HPMC 形成的凝胶层逐渐增厚，
凝胶强度增大，药物释放速度趋于缓慢，乳糖基本水
化完全，淀粉为水不溶性但遇水微弱膨胀的填充剂，
保留在凝胶结构内，表现为阻塞水通道的阻滞释放
的作用。在释药后期，骨架溶蚀或溶解，因此表现为
药物受 HPMC、乳糖和淀粉的影响减弱，释药速度加
快。
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［收稿日期］2010-11-15
［基金项目］国家一类新药—双苯氟嗪的开发;国家高科技研究发展计划(863 计划)资助项目(编号:2002AA2Z3132) ［作者简介］陈汝红，
女，硕士，副主任药师，电话:0311-85212007-8029，E-mail:crh030227@ sohu． com ［通讯作者］王永利，男，博士，教授，电话:0311-86266432，E-
mail:wangyl52@ heinfo． net
双苯氟嗪中杂质的结构分析
陈汝红1，王熳1，刘松雁2，边铭2，赵曦3，王永利4 (1．河北省药品检验所，河北 石家庄 050011;2．石家庄市兽产品质
量监测中心，河北 石家庄 050041;3．石药集团中奇制药技术有限公司，河北 石家庄 050051;4． 河北医科大学药学院，河北 石
家庄 050017)
［摘要］ 目的:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS /MS)和高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-PDA)法对双苯氟嗪中
的杂质进行结构分析。方法:采用 C18柱，甲酸铵溶液(用甲酸调节 pH 至3． 2)-甲醇为流动相，线性梯度洗脱，流速 0． 5 mL·
min －1，柱温 45 ℃，MS /MS和 PDA分别检测。结果:双苯氟嗪中的主要杂质有效分离，通过解析获取的质谱和紫外信息，结合
原料合成工艺，对其中 3 个未知杂质的结构进行了推断。结论:本实验分离鉴别了双苯氟嗪中的主要杂质，为双苯氟嗪的质量
控制和工艺优化提供了参考。
［关键词］ 双苯氟嗪;杂质;结构分析;高效液相色谱-串联质谱;高效液相色谱-二极管阵列检测
［中图分类号］R917 ［文献标识码］A ［文章编号］1001-5213(2011)15-1241-04
Structure analysis on impurities in dipfluzine
CHEN Ru-hong 1，WANG Man1，LIU Song-yan2，BIAN Ming2，ZHAO Xi3，WANG Yong-li4(1． Hebei Provincial In-
stitute for Drug Control，Heibei Shijiazhuang 050011，China;2． Shijiazhuang Animal Products Quality Monitoring Center，Heibei Shiji-
azhuang 050041，China;3． Pharmaceutical Research Institute of Shijiazhuang Pharmaceutical Group Co． Ltd． ，Heibei Shijiazhuang
050051，China;4． School of Pharmacy，Hebei Medical College，Heibei Shijiazhuang 050017，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To analyze structures of impurities in dipfluzine by means of HPLC-MS /MS and HPLC-PDA． METH-
ODS The HPLC separation was carried on an ODS column by linear gradient elution with a mixture solution of ammonium formate so-
lution (adjust pH to 3． 2 with formic acid)and methanol． The flow rate was 0． 5 mL·min －1 and the column temperature was 45℃ ．
Sample was detected by MS /MS and PDA respectively． RESULTS Major impurities in dipfluzine could be effectively separated．
Through analysing informations of MS and UV acquired and combining synthetic process of raw material，deduced structures of three un-
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