免费文献传递   相关文献

药用植物大籽雪胆繁育技术研究



全 文 :— 6 — 现代中药研究与实践2016年第30卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2016 Vol. 30 No. 4
基金项目:云南省科技计划项目(2011CG024)
作者简介:郭乔仪(1974― ), 男 , 本科 , 讲师 , 研究方向:中药材栽培工作。E-mail: gqy111@yeah.net
通讯作者:张金渝(1975― ), 男 , 博士 , 研究员 , 研究方向:中药资源及中药材栽培研究工作。E-mail: yaasyzs_zjy@126.com
药用植物大籽雪胆繁育技术研究
郭乔仪 1,王洪丽 1,张凤梅 1,鲁菊芬 1,杨美权 2,王家金 2,
武云华 1,张金渝 2*
(1.楚雄技师学院,云南 楚雄 675000 ;2.云南省农业科学院药用植物研究所,
云南 昆明 650205)
摘 要:目的 为促进药用植物大籽雪胆野生驯化,实现野生变家种进程,探索其有效繁育方法。方
法 以楚雄紫溪山所产大籽雪胆种子和植株为材料,采用不处理种子、45 ℃温烫浸种 60 min、98% 浓硫酸
处理 10 min、剥去种皮四种方法研究种皮对种子萌发的影响;采用分期播种法确定种子寿命;将块根纵切
成大小约2 cm×2 cm×2 cm,倒苗后挖掘块根观察其生长情况;将生长的茎第四节或第五节压入土中深2~3
cm,连续三年观察块根生长情况。结果 大籽雪胆种子萌发存在种皮障碍,种子寿命为 1年,块根繁殖率低,
茎节压蔓繁殖所需时间长。结论 大籽雪胆最有效繁殖方法是种子繁殖,采用新种和 98% 浓硫酸处理是提
高种子发芽率的有效途径。
关键词:大籽雪胆;种子;无性繁殖
中图分类号:S567 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2016)04-06-03
doi: 10.13728/j.1673-6427. 2016. 04. 002
Study on Reproducition Research of Hemsleya macrosperma
GUO Qiao-yi1 , WANG Hong-li1, ZHANG Feng-mei1, LU Ju-feng1, YANG Mei-quan2, WANG Jia-jin2,
WU Yun-hua1, ZHANG Jin-yu2*
( 1. Chuxiong Technician Colleges, Chuxiong 675000, China; 2. Institute of Medicinal Plant, Yunnan Academy of
Agricultural Sciences, Kunming 650205, China )
Abstract: Objective To facilitate large seeds of medicinal plants Hemsleya domesticated wild, wild
achieve home-grown process variable, exploring its effective breeding. Methods Exploring seeds of Hemsleya
macrosperma in Chuxiong and its plants for the material, using to non-treatment of seeds, 45 ℃ temperature hot
soaking 60 min, 98% H2SO4 acid treated for 10 min, stripped testa four methods to study on seed germination;
determining seed longevity seeding by stages; vertical cut into the root size of about 2 cm × 2 cm × 2 cm, observe
the growth after digging roots back postemergence ; the growth stems IV or V pressed buried deep 2 ~ 3 cm,
observe root growth for three consecutive years. Results The result that seed germination was restrained by seed
coat, seed longevity was one year; reproduction rate was low with root, layering with internodes needed long time.
Conclusion Seed reproduction was more effective than asexual reproduction, adopting fresh seed and treating
seed with 98% H2SO4 was effective to improve seed germination rate.
Key words: Hemsleya macrosperma C. Y. Wu; seed; asexual reproduction
大籽雪胆 Hemsleya macrosperma C. Y. Wu 为葫芦
科雪胆属多年生藤本植物,属雌雄异株。大籽雪胆以
块根入药,其块根扁圆形近似锣锅形状,药名“锣锅
底”,别名金盆、金龟莲、土马兜铃、曲莲、苦金盆,
具清热解毒,利湿消肿,止痛止血的功效。主治咽喉
肿痛,牙痛,目赤肿痛,胃痛,菌痢,肠炎,肝炎,
尿路感染,前列腺炎,痔疮,宫颈炎,痈肿疔疮,外
伤出血 [1]。其疗效显著,为重要彝族药,在民间也被
白族、苗族广泛使用。大籽雪胆主要分布于云南、贵
州、四川等地,生于阴湿山坡的灌木丛中。
1 材料与方法
1.1 材料
— 7 —现代中药研究与实践2016年第30卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2016 Vol. 30 No. 4
大籽雪胆母株采自楚雄市紫溪山,经云南省农业
科学院药用植物研究所张金渝研究员鉴定为大籽雪胆
Hemsleya macrosperma C. Y. Wu。
1.2 方法
1.2.1 种皮对种子萌发的影响 采用不处理种
子、45 ℃温烫浸种 60 min、98% 浓硫酸处理 10
min、剥去种皮四种方法处理种子后于 2012 年 2 月 8
日播种,定期观察出苗情况。
1.2.2 种子寿命测定 采用分期播种法确定种子
寿命,2011 年 10 月 6 日采收种子,于 2011 年 10 月
8 日播新鲜种子 50 粒,其余种子阴干待播。2012 年
2 月、6 月、10 月和 2013 年 2 月再次播种,每次播
种 50 粒,计算发芽率。
1.2.3 块根繁殖试验 将块根纵切成 4块(大小
约 2 cm×2 cm×2 cm), 倒苗后挖掘块根观察其生长
情况。
1.2.4 压蔓繁殖试验 2012 年 4 月,将生长的茎
第四节或第五节压入土中深 2~ 3 cm,连续三年观
察块根生长情况。
2 结果与分析
2.1 大籽雪胆种子种皮对种子萌发的影响
三种处理中,剥去种皮的发芽率最高,出苗时间
最早;其次是 98%浓硫酸处理和温烫浸种处理的种
子,不处理的种子发芽率最低,出苗时间最长(见表
1)。
表 1 不同处理对种子萌发的影响
Tab. 1 The effect of seed germination by different treatment
处理方法 播种时间 出苗始期 出苗末期 平均出苗时间(天 ) 出苗率 (%)
剥去种皮
2012.2.8
2.20 2.24 15.5 96
98% 浓硫酸处理 2.23 2.29 19.5 90
45 ℃温烫浸种 3.15 3.25 42 84
不处理 3.16 4.02 46.5 82
结果表明:大籽雪胆种子的种皮对种子萌发有明
显的抑制作用,采用剥去种皮的方法虽然有效,但处
理方法复杂不宜采用,而98%浓硫酸处理是有效方法。
2.2 大籽雪胆种子寿命
大籽雪胆种子采收后立即播种出苗时间最短、出
苗率最高,平均出苗天数 21 d,出苗率达到 94%。贮
藏 8个月发芽率在 86%以上,贮藏 12 个月发芽率明
显下降,但仍在 50%以上。贮藏 16 个月发芽率只有
32%,已降到 50%以下(见表 2)。
结果表明:种子采收后立即播种发芽率最高,随
着贮藏时间延长,出苗率逐渐降低。解剖种子后观察
到大籽雪胆种子含油率较高,属典型的油性种子。
随着贮藏时间增加含油量呈减少趋势,种子含油量可
能是影响种子寿命的主要因素。当种子中的含油量分
解到一定程度后供种子萌发的物质不足导致种子出
苗率降低 , 这与张丽萍 [2] 等人观点相同。贮藏一年后
种子发芽率降低到 50%以下,根据种子寿命标准 [3]
大籽雪胆种子寿命为 1年。出苗天数以新采收种子的
最短,可能是随着种子贮藏时间延长,种子皮干缩而
致密所致。
表 2 种子不同储藏时间出苗情况
Tab. 2 Germination rate of different seed storage time
种子贮藏时间(月 ) 播种期 平均出苗时间(天 ) 出苗数 (株 ) 出苗率 (%)
- 2011.10.10 21 47 94
4 2012.02.08 46.5 41 82
8 2012.06.03 23 43 86
12 2012.10.08 34 27 54
16 2013.02.06 52 16 32
2.3 大籽雪胆块根分离繁殖
2.3.1 不定芽萌发特点 2011 年 4 月 10 日分离繁
殖块根,5月 3 日开始出苗 , 挖掘块根观察 , 每个块
根能产生 2~ 5个不定芽 , 芽发生量从顶端向底部呈
逐渐减少趋势 , 随着顶端最强的芽萌发出土 , 其他芽
逐渐萎缩死亡 , 表明大籽雪胆块根具有明显的顶端优
势。
2.3.2 须根萌发特点 须根在分离繁殖体种植后 1
个月产生,须根以伤口愈伤组织面上产生的较多,原
块根表面上相对较少。
2.3.3 块根生长特点 用块根分离繁殖,块根数
量不会增加。作为繁殖材料的母块根进一步膨大,切
口面只能产生愈伤组织,此方向无明显的增长量,块
根的进一步增长主要沿着母根上具有根皮的方向呈横
向快速生长,其纵向生长不明显,整体生长量是母根
的 2~ 4倍。
2.4 大籽雪胆压蔓繁殖
2.4.1 压蔓繁殖块根产生特点 压蔓后,根块从
茎节侧端产生,初为白色小瘤状体,解剖其结构,块
根是由原茎节处的皮层细胞向外凸起伴随细胞增生逐
渐形成。一个茎节只能产生一个新块根。
2.4.2 压蔓繁殖块根生长特点 压蔓当年是块根
产生阶段,新块根表面无须根形成,养分主要由母体
供给,生长量极小,母株倒苗后随着茎蔓枯死新块根
逐渐脱离母体独立存在,直径 2~ 3 mm, 第二年须根
从块根上有少量形成,并从块根顶端萌发出 1株极弱
的茎蔓,株高 5~ 15 cm,第二年倒苗后,块根直径
达 8~ 10 mm,第三年块根上能产生较多段根,块根
只能萌发一个主茎,株高 35 ~ 42 cm,进入块速生
(下转第11页)
— 11 —现代中药研究与实践2016年第30卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2016 Vol. 30 No. 4
究表明,蒸制处理提高了肉苁蓉的苯乙醇苷、多糖、
可溶性糖和醇溶性浸出物含量,其中苯乙醇苷和醇溶
性浸出物含量受蒸制处理的影响程度大于切片处理,
且蒸制处理对松果菊苷和异毛蕊花糖苷含量有显著性
影响(P < 0.05)。就外观而言,肉苁蓉鲜药材的蒸晒
品与其干药材经传统酒蒸炮制的样品相似,即质地柔
软,颜色黑亮。因此笔者认为蒸制处理能有效保证肉
苁蓉药材品质,方便后期储藏和运输,适宜于大规模
采收后新鲜肉苁蓉的产地加工。
趁鲜切片是近年来中药材产地加工的常用方法,
旨在节省加工工序,减少传统二次切片加工导致的有
效成分损失,但其适用性与具体药材品种和指标成分
密切相关 [10-11]。本研究发现肉苁蓉的多糖和可溶性糖
含量受切片处理的影响程度大于蒸制处理。因此,趁
鲜切片直接晒干对糖类含量有较好保留,而趁鲜切片
蒸制后晒干对苯乙醇苷类成分有较好保留,这对肉苁
蓉产地加工与饮片炮制一体化有重要的参考意义。
现代药理研究表明,苯乙醇苷、半乳糖醇和寡糖
类成分是肉苁蓉传统功效补肾壮阳、润肠通便的物质
基础 [12-14]。苯乙醇苷类属于酚酸类物质,分子中含有
多个酚羟基 , 呈弱酸性,易被氧化,易分解。Tamura
Y 等 [15] 指出植物体中苯乙醇苷类成分降解是过氧化
物酶和β-葡萄糖苷酶作用的结果。笔者在后续试验
中发现,蒸制样品的过氧化物酶活性显著性低于不蒸
样品,而β-葡萄糖苷酶在两者之间没有显著性差异
(另文发表),提示肉苁蓉蒸制处理后苯乙醇苷类成
分含量升高与过氧化物酶活性降低密切相关。同为补
肾壮阳中药的巴戟天蒸制前后糖类HPLC指纹图谱变
化是蒸制导致某些糖类水解形成果糖所致 [16]。本研究
仅对多糖和可溶性糖总量进行了测定。蒸制或切片处
理是否导致半乳糖醇与其它各单糖、寡糖之间相互转
化,以及糖类与苯乙醇苷类成分含量之间存在何种消
长关系都有待进一步研究。
参考文献
[1] 戈建新 . 肉苁蓉的人工种植方法 [P]. 中国 01132486. 4, 2002-05-01.
[2] 姜 勇 , 屠鹏飞 , 邹萍萍 , 等 . 一种肉苁蓉药材的加工方法 [P]. 中国
201310167453. 9, 2014-11-12.
[3] 雷 丽 , 王新意 . 一种提高新鲜中药肉苁蓉中苯乙醇苷类成分含量的加
工方法 [P]. 中国 200810059282. 7, 2009-07-22.
[4] 屠鹏飞 , 齐学兵 , 姜 勇 , 等 . 提高松果菊苷含量的肉苁蓉药材的加工方
法 [P]. 中国 200410048303. 7, 2005-12-21.
[5] Ma Z G, Yang Z L, Li P, et al. Simultaneous determination of eight
phenylethanoid glycosides in different species of the genus Cistanche by high
performance liquid chromatography[J]. J Liq Chromatogr R T, 2008, 31(18):
2838-2850.
[6] 王丽楠 , 陈 君 , 杨美华 , 等 . 不同初加工温度对肉苁蓉有效成分含量
的影响 [J]. 中国药房 , 2007, 18(21): 1620-1623.
[7] 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典 (一部)[S]. 北京 : 中国医药科技
出版社 , 2010: 52-53,62.
[8] 清 ·张 叡 , 撰 , 张志国 , 曹 臣 , 主编 . 《修事指南》释义 [M]. 山西 : 山
西科学技术出版社 , 2014:14.
[9] 张守平 , 辛 宁 , 周改莲 . HPLC 检测蒸法对中药各成分的影响 [J]. 中药
材 , 2007, 30(7): 775-778.
[10] 李 芸 , 苗小楼 , 吴平安 , 等 . 不同产地加工方法对掌叶大黄药材质量
的影响 [J]. 中药材 , 2011, 34(8): 1196-1199.
[11] 李越峰 , 吴平安 , 刘峰林 , 等 . 当归趁鲜切片对当归中阿魏酸含量的影
响 [J]. 中国中医药信息杂志 , 2014, 21(9): 90-93.
[12] 高云佳 , 姜 勇 , 戴 昉 , 等 . 肉苁蓉润肠通便的药效物质研究 [J]. 中国
现代中药 , 2015, 17(4): 307-310.
[13] 何 伟 , 宗桂珍 , 武桂兰 , 等 . 肉苁蓉中雄性激素样作用活性成分的初
探 [J]. 中国中药杂志 , 1996, 21(9): 52-53.
[14] Wang L L, Ding H, Yu H S, et al. Cistanches Herba:chemical constituents and
pharmacological effects[J]. Chinese Herbal Medicines, 2015, 7(2): 135-142.
[15] Tamura Y, Nishibe S. Changes in the concentrations of bioactive compounds in
plantain leaves[J]. J Agric Food Chem, 2002, 50(9): 2514-2518.
[16] 刘晓涵 , 陈永刚 , 林 励 , 等 . 巴戟天蒸制前后糖类成分HPLC指纹图
谱的比较研究 [J]. 中成药 , 2009, 31(9): 1313-1315.
收稿日期:2015-11-10
长期,至倒苗块根直径达 20 ~ 25 mm(见表 3)。
表 3 压蔓繁殖幼苗生长情况
Tab. 3 Seedling growth situation by layering
幼苗性状 第一年 第二年 第三年
块根直径 (mm) 2 ~ 3 8 ~ 10 20 ~ 25
段数数量 ( 条 ) - 2 ~ 4 7 ~ 12
株高 (cm) - 5 ~ 15 35 ~ 42
3 结论与讨论
3.1 大籽雪胆繁殖以种子繁殖为主,块根分离繁殖、
压蔓繁殖的繁殖率低,压蔓繁殖还存在着生长缓慢的
特点,在实际生产中无实用价值。大籽雪胆属雌雄异
株植物,在育种工作中可采用块根分离繁殖的方式分
别培育雌雄株,为生产提供种子。
3.2 大籽雪胆种子寿命为一年,为保证出苗率,生
产中不能使用隔年种子。种子萌发时存在种皮障碍,
剥去种皮和用 98%浓硫酸处理 10 min 均能显著提高
种子发芽率 , 但剥去种皮较为困难,费工费时,生产
中不易使用,从经济价值和实用价值综合考虑,以
98%浓硫酸处理 10 min 为有效方法。
参考文献
[1] 魏均娴 , 梁巨忠 , 阳 滋 . 雪胆素含量测定研究 [J]. 中国中药杂志 ,
1982(2): 28-29.
[2] 张丽萍 , 杨春清 , 王瑞芳 , 等 . 181 种药用植物繁殖技术 [M]. 北京 : 中国
农业出版社 , 2004: 55.
[3] 郭巧生 . 药用植物栽培学 [M]. 北京 : 高等教育出版社 , 2004: 79.
收稿日期:2015-11-07
(上接第 7 页)
(编辑:张宝成)