全 文 :第 31卷第 3期
2008年 6月
云南中医学院学报
JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine
Vol. 31No. 3
6.2008
蜘蛛香镇痛 、 镇静作用及对胃肠运动的影响 *
毛晓健 , 李静平 , 王 军
(云南中医学院中药学院 , 云南昆明 650200)
摘 要:将蜘蛛香不同极性段的提取物做镇痛 、 镇静及对胃肠运动影响的实验研究 , 并与水煎液作比较 ,
观察各极性段的作用并作比较。方法:采用小鼠热板法 、 辐射热刺激法 、 活动及举双前肢法 、 炭末推进法以及
家兔离体肠肌法等经典的实验方法进行实验。结果:蜘蛛香水提液组具有非常显著的镇痛 、 镇静 、 增加小肠炭
末推进率作用 , 对家兔离体肠肌亦有非常显著的兴奋作用。蜘蛛香萃取液母液对上述指标也有显著的作用 , 而
正丁醇组作用较弱 , 乙酸乙酯组和石油醚组的作用不明显 , 或基本无作用。结论:蜘蛛香具有镇痛 、 镇静作用
及对胃肠运动影响的成分主要在大极性段 , 尤其是水煎液和水层的效果最好。
关键词:蜘蛛香;镇痛;镇静;胃肠运动;有效部位
中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1000— 2723(2008)02— 0034— 04
蜘蛛香为败酱科缬草属植物蜘蛛香 Valeriana
jatamansiJones的干燥根茎。首载于 《本草纲目》 ,
《滇南本草》 中亦有记载 , 是云南地区常用的药物
之一。性味辛 、 苦 , 温。具有消食散结 , 行气止
痛 , 镇静安神 , 消炎止泻等功效。用于治疗胃肠道
疾病有较好的疗效 , 如消化不良 , 呕吐腹泻 , 小儿
疳积 , 腹胀 , 食少 , 胃气痛等 [ 1] 。蜘蛛香的主要
成分为挥发油 , 环烯醚萜类 , 黄酮类等[ 2] 。但是 ,
现代对其药效学的研究主要在镇静方面 , 而其他作
用罕见报道 。故将蜘蛛香不同极性段的提取物做镇
痛 、镇静及对胃肠运动影响的实验研究 , 并与水煎
液做比较 , 从而得知其活性部位在哪个极性段 , 为
以后更好的开发 、利用蜘蛛香提供实验依据。
1 实验材料
1.1 动物
ICR小鼠 , 体重 18 ~ 22g, 雌雄兼用 , 由昆明
医学院实验动物中心提供 , 实验动物生产许可证 。
SCXX(滇 20060008)。
1.2 药物
蜘蛛香为败酱科缬草属植物蜘蛛香 Valeriana
jatamansiJones的干燥根茎 , 购自省药材公司;元
胡止痛 胶囊 (惠 州九惠 制药厂 , 产 品批号
20050602);香砂平胃颗粒 (云南省腾冲制药厂 ,
产品批号:060143)。
1.3 仪器及试剂
RB— 200智能热板仪;SW-200光热尾痛测
试仪;ZZ-6小鼠自主活动仪;HW-2000微循环
数字恒温仪;HW400-S恒温平滑肌槽;JH-2型
肌张力传感器;电子天平。所用试剂氯化钙 、氯化
钾 、 氯化钠 、 磷酸二氢钠 、 葡萄糖 、碳酸氢钠 、 硫
酸镁均为市售分析纯试剂。
1.4 药液的配制 、 分组给药剂量
药液的配制:蜘蛛香药材先浸泡 30min, 再煎
煮 3次 , 每次 30min, 过滤合并 3次药液 , 浓缩至
2g/mL浓度 。将此水煎浓缩液分别用石油醚 、乙酸
乙酯 、正丁醇按极性递增法萃取 , 分别得到石油醚
层 、 乙酸乙酯层 、 正丁醇层和水层 4个极性部分。
回收溶剂 , 并挥尽溶剂后调正体积 , 灌封并冰箱保
存供药理筛选用[ 3] 。临用时用 37℃水浴加热摇匀。
分组给药剂量:蜘蛛香水煎液组 、 水层组 、 正
丁醇组 、 乙酸乙酯组均分为高 、 低剂量组。高剂量
组均给予折合原生药 25g/kg的剂量 , 低剂量组均
给予折合原生药 12.5g/kg的剂量 。阳性药对照组 ,
根据不同的实验指标分别为元胡止痛胶囊组
(0.39g/kg)、 香砂平胃颗粒组 (14.29g/kg), 空
白对照组给等体积生理盐水 。以上均灌胃给药 , 每
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*收稿日期:2008— 01— 08 修回日期:2008— 03— 10
作者简介:毛晓健 (1967 ~ ), 女 , 云南人 , 副教授 , 硕导 , 主要研究方向:临床中药学及新药研发。
第 3期 毛晓健 , 等:蜘蛛香镇痛 、 镇静作用及对胃肠运动的影响
日一次 , 每次 0.02mL/g。
2 实验方法和结果
实验结果的统计学处理:实验数据符合正态分
布 , 方差齐者:用 t检验;方差不齐者:用 t′检
验 。实验数据如有偏态 , 则用参比差值法 。
2.1 对小鼠痛阈的影响
2.1.1 热板法
按文献方法 [ 3] , 取雌性小鼠 , 测定小鼠的痛
阈 (即痛反应潜伏期 , 指小鼠接触热板至舔后足
的时间)。痛反应潜伏期在 5 ~ 30sec内为合格鼠 ,
取两次正常痛阈平均值 , 作为该鼠给药前痛阈值。
将合格小鼠随机分为 10组 , 每组 10只 。实验时以
60sec为限 , 以免烫伤小鼠。连续灌胃 6d, 于末次
给药后 30min, 60min, 90min, 120min, 180min分
别测量小鼠痛阈 , 结果见表 1。
表 1 对小鼠热刺激致痛的影响 (x±S)
组别 舔足时间 (s)药前 药后 30min 60min 90min 120min 180min
水煎液组 (高) 12.74±2.27 17.70±7.83 18.59±5.15 26.74±15.83* 30.27±15.01* 23.83±13.02
水煎液组 (低) 15.29±2.67 20.37±7.42 21.38±14.13 26.30±7.25* 26.62±11.93 19.89±8.68
水层组 (高) 21.87±5.86 20.66±4.65 22.25±7.33 25.05±9.56 22.78±7.58 20.79±8.06
水层组 (低) 16.7±93.23 19.31±10.33 20.96±8.80 22.09±6.19 22.73±11.01 19.79±7.89
正丁醇组 (高) 18.77±2.95 20.62±8.39 18.41±7.09 21.38±8.56 19.50±6.25 20.56±3.78
正丁醇组 (低) 17.21±4.26 17.01±4.21 18.34±6.95 20.19±8.21 19.84±4.78 20.27±4.48
乙酸乙酯组 (高) 5.14±2.78 16.27±6.13 19.29±6.34 19.74±8.44 21.03±4.64 15.14±7.10
乙酸乙酯组 (低) 17.23±2.78 21.92±13.12 16.89±6.13 20.59±5.64 21.91±7.77 18.14±6.39
元胡止痛胶囊组 21.08±6.19 24.44±17.55 37.82±12.21* 34.45±12.99 31.49±8.76 31.54±13.48
生理盐水组 19.32±3.98 18.45±7.90 17.85±8.49 20.14±9.11 20.52±5.49 21.23±5.33
与对照组比:**P< 0.01;*P<0.05 (以下均同)
结果表明:水煎液高剂量组对小鼠热刺激致痛
有显著抑制作用 , 低剂量亦有显著抑制作用 , 但两
组起效均比阳性对照组慢 , 其余几组作用均不显著。
2.1.2 辐射热刺激甩尾法 [ 3]
选用 18 ~ 22g小鼠 , 雌雄各半 , 每组 12只 ,
共 10组 , 将动物置鼠筒中 , 尾自然下垂于筒外 ,
以启动光热至鼠尾急速摆动的时间为甩尾潜伏期测
痛阈 , 调整刺激强度使基础痛阈 (给药前痛阈值)
为 3sec左右 , 给药后若药物使痛阈提高 , 则照射
时间以 6sec为限 。小鼠连续灌胃 7d, 于末次给药
后 30min测其痛阈 , 用配对 t值法检查差异显著
性。结果见表 2。
表 2 对小鼠辐射热刺激致痛的影响 (x±S)
组别 剂量(折合生药量)
动物数
(n)
甩尾时间 (s)
给药前 给药后
水煎液组 (高) 25g/kg 12 2.29±0.66 4.99±0.99**
水煎液组 (低) 12.5g/kg 12 2.52±0.72 4.77±1.31**
水层组 (高) 25g/kg 12 2.69±0.44 4.99±0.99**
水层组 (低) 12.5g/kg 12 2.16±0.44 3.38±1.25**
正丁醇组 (高) 25g/kg 12 2.34±0.43 2.93±0.75**
正丁醇组 (低) 12.5g/kg 12 2.26±0.55 2.69±1.17**
乙酸乙酯组 (高) 25g/kg 12 2.54±0.68 2.28±0.91*
乙酸乙酯组 (低) 12.5g/kg 12 3.01±0.50 3.22±0.60
元胡止痛胶囊组 0.39g/kg 12 2.51±0.71 4.93±1.06**
生理盐水组 0.02mL/g 12 3.02±0.97 3.02±0.94
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2008年 云南中医学院学报 第 31卷
结果表明:蜘蛛香水煎液高 、 低剂量组 , 水层
高 、低剂量组及正丁醇高剂量组对小鼠疼痛均有非常
显著的抑制作用 , 正丁醇低剂量组及乙酸乙酯组高剂
量组亦有显著的抑制作用 , 其余组作用不显著。
2.2 对小鼠自主活动的影响 (走动时间和举双前
肢法)[ 3]
选用 18 ~ 22g小鼠 , 雌雄不拘 , 随机分组 , 每
组 12只。给药前把小鼠放进活动箱中记录 10min
内的活动次数 , 灌胃给药 8d后于末次给药 30min
后按同法测定小鼠活动次数 [ 4] , 结果见表 3。
表 3 对小鼠自主活动的影响 (x±S)
组别 动物数(n)
给药前 给药后
活动 (次) 站立 (次) 活动 (次) 站立 (次)
水煎液组 (高) 12 30.25±6.18 109.83±26.35 17.42±4.89** 52.75±38.41**
水煎液组 (低) 12 40.17±16.91 110.25±25.66 26.17±19.88** 75.58±22.09**
水层组 (高) 12 44.17±18.22 123.25±30.88 31.51±14.06** 83.33±16.13**
水层组 (低) 12 35.75±16.05 116.25±18.01 32.67±12.89** 109.53±32.94**
正丁醇组 (高) 12 32.08±10.32 123.33±30.28 29.67±8.71** 110.58±41.76**
正丁醇组 (低) 12 39.42±13.60 130.67±39.90 32.17±9.52* 113.58±41.76*
乙酸乙酯组 (高) 12 43.75±11.74 147.42±34.83 36.67±12.43* 135.42±37.38*
乙酸乙酯组 (低) 12 35.58±14.82 149.58±36.45 34.75±12.69 148.33±22.19
生理盐水组 12 30.50±9.48 121.58±32.96 32.58±15.28 122.25±22.62
结果表明:水煎液高 、低剂量组及水层高剂量
组对小鼠自主活动均有非常显著的抑制作用 , 水层
低剂量组 、 正丁醇高 、低剂量组及乙酸乙酯高剂量
组对小鼠站立活动有显著抑制作用 , 其余几组作用
不显著 。
2.3 对小鼠肠蠕动的影响 (炭末法)[ 3]
取小鼠 120只 , 分成 10组 , 连续灌胃 9d, 每
天 1次 , 每次 0.02mL/g。末次给药加 5%的炭末 ,
于给药后 10min把小鼠脱颈椎处死 , 打开腹腔分离
肠系膜 , 剪取上端至幽门 、下端至回盲部的肠管 ,
轻轻将小肠摆成直线 , 测量其全长及炭末推进的长
度 , 用公式计算炭末推进百分率:炭末推进率
(%)=炭末在肠内推进距离 (cm)/小肠全长
(cm) ×100%
结果见表 4。
结果表明:水煎液高剂量组有非常显著的增加
炭末推进率的作用 , 水层高剂量组亦能显著增加炭
末推进率 , 水煎液低剂量组仅有轻微作用 , 无统计
意义 , 其余几组作用皆不显著 。
2.4 对家兔离体肠肌的影响
家兔处死后立即解剖 , 将肠管放入常温的台氏
液 [ 5]中清洗 , 排尽肠内容物。每次取长约 1.5 ~
2cm的肠管 , 一端固定在麦氏浴管上 , 恒温 37℃,
表 4 对小鼠肠蠕动的影响 (x±S)
组别 剂量(g/kg)
动物数
(n)
炭末推进率
(%)
水煎液组(高) 25g/kg 12 74.26±12.91**
水煎液组(低) 12.5g/kg 12 59.87±19.95
水层组(高) 25g/kg 12 63.03±13.79*
水层组(低) 12.5g/kg 12 52.76±7.23
正丁醇组(高) 25g/kg 12 48.68±8.29
正丁醇组(低) 12.5g/kg 12 42.74±9.11
乙酸乙酯组(高) 25g/kg 12 54.94±15.89
乙酸乙酯组(低) 12.5g/kg 12 42.73±11.51
香砂平胃颗粒组 14.29g/kg 12 77.60±7.90**
生理盐水组 0.02ml/g 12 51.48±7.88
通空气 , 每 min40 ~ 60个气泡 , 另一端连接在张力
换能器上 , 负荷张力约 1 ~ 2g。通过电生理数据采
集处理系统记录肠管的收缩活动 。待肠管收缩活动
稳定后 , 描记一段正常收缩曲线 。然后向浴槽内加
入受试药液 , 观察药物的作用 , 描记曲线 , 测记曲
线高度。各药物剂量均按前述高剂量加药。给药顺
序为:给药—冲洗恢复 —乙酰胆碱 (1μmol/L)—
给药 。阿托品以同样方法给药[ 3] 。每组药用 5只兔
子共 10个肠肌标本进行实验 , 结果见表 5。
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第 3期 毛晓健 , 等:蜘蛛香镇痛 、 镇静作用及对胃肠运动的影响
表 5 对家兔离体肠肌的影响 (x±S, 单位:mm)
组别 标本数 (n) 给药前 给药后 乙酰胆碱 给药 阿托品 给药
水煎液组 10 2.13±0.83 6.07±1.46** 1.98±0.41 5.14±0.92** 6.25±1.96 3.38±1.11**
水层组 10 4.12±0.77 5.65±1.68** 2.48±0.65 4.79±0.81** 5.38±2.09 3.93±2.29*
正丁醇组 10 6.47±2.38 8.26±1.99 2.39±0.63 4.14±1.76* 7.58±1.26 5.91±1.76*
乙酸乙酯组 10 4.35±1.38 5.11±2.09 2.52±0.73 4.09±1.71* 7.23±1.73 7.28±2.77
石油醚组 10 4.87±1.36 6.73±4.63 2.45±0.89 3.34±1.49 5.90±2.26 5.64±1.87
香砂平胃颗粒组 10 4.79±0.77 6.68±2.01** 2.73±1.09 4.69±1.73** 8.27±2.81 4.98±1.59**
生理盐水组 10 4.96±1.00 4.92±0.71 2.66±1.17 2.83±1.15 6.59±1.71 5.98±1.39
结果表明:与空白组比较 , 蜘蛛香水煎液组及
水层组对离体肠肌运动均有非常显著的增强作用 。
水煎液组 、 水层组 、 正丁醇组 、乙酸乙酯组均有显
著的对抗乙酰胆碱的作用;水煎液组 、水层组 、正
丁醇组均能使阿托品引起的肠肌松弛有所缓解 , 提
示蜘蛛香对肠肌运动可能有双向调节作用 。其是兴
奋或是抑制起决于肠肌的状态 。
3 小结与讨论
从以上实验结果表明:蜘蛛香水提液组具有非
常显著的镇痛 、镇静 、增加小肠炭末推进率作用 ,
对家免离体肠肌亦有非常显著的兴奋作用 。蜘蛛香
萃取液母液对上述指标也有显著的作用 , 而正丁醇
组作用较弱 , 乙酸乙酯组和石油醚组的作用不明
显 , 或基本无作用。
蜘蛛香是一味经中医临床长期应用证实疗效较
好的中药之一 , 但长期以来对其具体作用部位的研
究却甚少 , 因此 , 本次实验是对蜘蛛香中有效部位
研究的一个初步探索。通过以上实验 , 可以证明蜘
蛛香具有镇痛 、镇静作用及对胃肠运动影响的成分
主要在大极性段部分 , 并且全药均比单个极性段的
药理作用显著 , 但具体作用部位及成分还有待于进
一步的研究。该实验的结论为以后对中药蜘蛛香的
进一步研究 、 开发和更好的利用提供了参考 。
[参考文献 ]
[ 1] 兰茂.滇南本草 (第二卷)[ M] .昆明:云南人民出
版社 , 1977.273.
[ 2] 陈磊 , 郑清明.蜘蛛香的研究进展 [ J] .中国野生植
物资源 , 2002, (21):1.
[ 3] 陈奇.中药药理学实验方法学 [ M] .北京:人民卫
生出版社 , 1993.367, 369, 326, 433, 667.
[ 4] 曹斌 , 洪庚辛.蜘蛛香的中枢抑制作用 [ J] .中国中
药杂志 , 1994, (19):1.
[ 5] 徐叔云 , 卞如濂 , 陈修.药理实验方法学 [ M] .北
京:人民卫生出版社 , 2005.1311, 1834.
(编辑:岳胜难)
MainPharmacodynamicStudyonValerianawalichiDC
MAOXiao-jian, LIJing-ping, WANGJun
(YunnanUniversityofTCM, KunmingYunnan650200, China)
ABSTRACT:Objective:TheextractionofdiferentpolarityfromValerianawalichiDCwasstudiedonmain
Pharmadynamics, andcomparedwithitswaterdecoctiontoobservepharmacologicalactivityonpolaritysection.
Methods:Thepharmacologicalexperimentswerecarriedoutbysomeclassicalmethods, suchasmousemodelsof
hot-plate, radiationheatsitmulation, movingandliftingdualanteriorlimbs, charcoalpowderpropulsionand
rabbitsinvitrointestinalmusclemethods.Results:ThewaterdecoctionofValerianawalichiDChadobvious
efectsofanalgesia, sedationandincreasingthecharcoalpowderpropulsionrateandexcitingrabbitsinvitrointes-
tinalmuscle.Itsextractmotherliquorhadsimilarefects.1-butanolsectionhadweakones, aceticetherandpe-
troleumethersectionhadindistinctionobviousones.Conclusions:ThepharmacologicalactivityofValerianawali-
chiDCwasmainlyonbigpolaritysection, itswaterdecoctionandwaterlayerhadstrongactivity.
KEYWORDS:ValerianaWalichiDC;PharmadynamicStudy;DiferentPolaritySection;Gastrointestinal
Function.
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