全 文 ：云 南 中 医 中 药 杂 志
* 基金项目:农业科技成果转化资金项目———濒危贵重中药材珠子参新品种良种繁育及种植示范(NO:2012GB2F300415)
作者简介:曹红云(1983 －)，女，硕士，工程师，主要从事中药分析。E － mail:caohy612@ 163． com。
△通信作者:游燕，E － mail:youwanyan@ sohu． com
不同炮制方法对珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量的影响*
曹红云，牛延菲，罗宗斌，游 燕△
(云南省药物研究所，云南 昆明 650111)
摘要:目的 探究干热烘制和湿热蒸煮制对珠子参中竹节参皂苷Ⅳa 含量的影响。方法 采用直接烘干、蒸制和煮制后烘
干对珠子参进行炮制加工，以 HPLC测定不同炮制品中竹节参皂苷Ⅳa的含量。结果 相比直接烘干，蒸制和煮制烘干的珠子参
中竹节参皂苷Ⅳa含量有降低。结论 直接干燥对珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量影响不大，该方法适合珠子参药材的加工炮制。
关键词:珠子参;炮制方法;竹节参皂苷Ⅳa
中图分类号:Ｒ283. 1 文献标志码:A 文章编号:1007 － 2349(2015)04 － 0066 － 03
Influence of Different Processing Methods on Chikusetsu Saponin Ⅳa
Content in Ｒhizoma Panacis Majoris
CAO Hong － yun，NIU Yan － fei，LUO Zong － bin，YOU Yan
(Yunnan Provincial Institute of Materia Medica，Kunming 650111，Yunnan)
【Abstract】Objective:To explore the influence of dry heat baking and damp heat cooking on the content of chikusetsu saponin Ⅳa in
Ｒhizoma panacis majoris(ＲPM). Methods:ＲPM was processed by direct drying and drying after steaming and cooking to determine the
content of chikusetsu saponin Ⅳa by HPLC. Ｒesults:The content of chikusetsu saponin Ⅳa processed by direct drying was lower than the
content processed by steaming and cooking drying. Conclusion:The direct drying had little influence on the content of chikusetsu saponin
Ⅳa in ＲPM and is suitable for processing herbs.
【Key words】Ｒhizoma panacis majoris，processing method，chikusetsu saponin Ⅳa
珠子参又名珠儿参，扣子七，钮子七。为五加科植物珠子
参［Panax japonicus C. A. Mey. var. major(Burk. )C. Y. Wu et
K. M. Feng］或羽叶三七［Panax japonicus C. A. Mey. var. bipin-
natifidus(Seem.)C. Y. Wu et K. M. Feng］的干燥根茎。主产于
云南、四川、贵州、陕西、西藏等西部山区。具有补肺、养阴、活
络、止血等功效。用于阴气两虚、烦热口渴、虚劳咳嗽、跌扑损
伤、关节痹痛、咳血、吐血、崩漏、外伤出血等症状［1 － 2］。现代
研究表明，珠子参主要化学成分为皂苷、多糖、氨基酸和多种
微量元素［3 － 5］，其主要成分皂苷以齐墩果烷型三萜皂苷为主，
具有镇痛、镇静［6］、抗炎［7］、提高机体细胞免疫功能［8］抗肿
瘤［9］等活性。
2010 年版中国药典中记载珠子参秋季采挖，直接干燥或
蒸(煮)透后干燥可用，但民间药农多采用直接晒干后销售使
用。为了客观的评价珠子参药材的质量，本实验采用低温烘
干和煮制、蒸制后烘干等加工方法炮制珠子参，研究不同加工
炮制对珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量的影响，为珠子参质量控
制提供依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器及试液 Agilent 1100 高效液相色谱仪;SK －
3200LH型超声清洗仪(180W，59kHz);AG285 分析天平(梅特
勒，瑞士);乙腈(色谱纯，默克公司);其余为分析纯;水为云
南省药物研究所自制超纯水。
1. 2 试药 竹节参皂苷Ⅳ a 对照品(购于中检所，批号:
111861 － 201001)。药材来自丽江珠子参基地。经云南省药
物所究所天然药物资源研究中心高丽正高级工程师鉴定为五
加科植物人参属珠子参 Panax japonicus C. A. Mey. var. major
(Burk)C. Y. Wu et K. M. Feng。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱 Waters XTerral C18，0. 46 × 250 mm，
5 μm;流动相 乙腈 － 0. 2%磷酸(37:63);检测波长 203 nm;流
速 1. 0 mL·min －1;进样量 20μL;理论塔板数以竹节参皂苷Ⅳa
峰计算不低于 3000。竹节参皂苷Ⅳa对照品 HPLC图见图 1。
66 2015 年第 36 卷第 4 期
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2015.04.035
云 南 中 医 中 药 杂 志
A—空白对照 B—竹节参皂苷Ⅳa对照 C—珠子参药材
图 1 竹节参皂苷Ⅳa对照品 HPLC图
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取竹节参皂苷Ⅳa对照品适
量，加 60%乙醇溶液配制成 1. 198 mg·mL －1的贮备液，待用。
精密吸取 2 mL于 10 mL量瓶中，加 60%乙醇至刻度，摇匀，作
为对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取药材粉末(过 2 号筛)约 0. 1 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 60%乙醇 25 mL，称定
重量。超声处理 40 min，取出放冷，再称定重量，加 60%乙醇
补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。
2. 4 线性关系的考察 分别精密吸取上述贮备液 0. 5，1，2，
3，4，5 mL，于 10 mL量瓶中，加 60%乙醇至刻度，摇匀，配制成
0. 0599，0. 1198，0. 2396，0. 3594，0. 4792，0. 5990 mg·mL －1的
系列溶液，分别进样 20 μL，测定峰面积，以竹节参皂苷Ⅳa 对
照品的进样量(μg)为横坐标，计算的回归方程:Y =
362. 28385X + 9. 03649(Ｒ = 0. 99998)，线性范围:1. 198 ～
11. 980 μg，见图 2。
图 2 竹节参皂苷Ⅳa线性关系图
2. 5 精密度试验 取同一供试品溶液，照 2. 1 项下色谱条
件，连续进样 6 次测定竹节参皂苷Ⅳa 峰面积。计算得 ＲSD
0. 71%，结果表明本法精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液分别于 0、2、4、8、18、
24 h内进样，照 2. 1 项下色谱条件测定竹节参皂苷Ⅳa 峰面
积。计算得 ＲSD 1. 43%，结果表明样品在 24 h 内峰面积
稳定。
2. 7 重复性试验 精密称取同一批号的样品 6 份，按 2. 3 项
下方法制备供试品溶液，照 2. 1 项下色谱条件测定竹节参皂
苷Ⅳa峰面积。计算得 ＲSD 1. 47%，结果表明本法具有良好
的重复性。
2. 8 加样回收率 分别精密称取已测定含量的样品 6 份(每
份约 0. 5 g)，精密加入竹节参皂苷Ⅳa 对照品适量，按 2. 3 项
下方法制备供试品溶液，照 2. 1 项下色谱条件测定竹节参皂
苷Ⅳa含量，测得平均加样回收率为 102. 50%，ＲSD 1. 17%。
3 炮制品的制备
直接烘干 珠子参三个不同地下部位，分别为大珠(直径
约为 5 ～ 6 cm)、中珠(直径约为 2. 5 ～ 3. 5 cm)、小珠(直径约
1. 5 cm)，各自取新鲜药材 300 g 置于 40℃的烘箱中烘干，
即得。
煮制烘干 珠子参三个不同地下部位，分别为大珠、中珠
和小珠，各自取新鲜药材 300 g 三份，分别在沸水中煮沸
5 min、10 min和 15 min，滤去水分，置于 40℃的烘箱中烘干，
即得。
蒸制烘干 珠子参三个不同地下部位，分别为大珠、中珠
和小珠，各自取新鲜药材 300 g 三份，分别在蒸笼中蒸制
5 min、10 min和 15 min，滤去水分，置于 40℃的烘箱中烘干，
即得。
4 样品含量测定
分别称取不同加工炮制的珠子参药材粉末 0. 1 g，按 2. 3
项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液和供试
品溶液各 20 μL，按 2. 1 项下色谱条件进行测定，结果见表 1。
表 1 不同炮制方法的珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量
品种 直接烘干
煮制烘干 蒸制烘干
5min 10min 15min 5min 10min 15min
大珠 3. 16 2. 86 2. 21 2. 15 2. 74 1. 74 1. 62
中珠 2. 70 2. 57 2. 56 2. 28 2. 26 2. 44 1. 98
小珠 2. 32 2. 23 2. 26 2. 12 2. 12 2. 06 2. 00
注:珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量以干燥品计。
5 讨论
不同加工炮制方法对珠子参药材中竹节参皂苷Ⅳa 的含
量有较明显影响，从表 1 中结果可见，珠子参珠子越大，竹节
参皂苷Ⅳa的含量越高;相比较直接烘干，煮制和蒸制后药材
中竹节参皂苷Ⅳa的含量都有不同程度下降，而且随着煮制和
蒸制时间的延长，珠子参药材中竹节参皂苷Ⅳa的含量也有逐
渐下降的趋势。分析其主要原因可能是由于竹节参皂苷Ⅳa
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为热敏感性成分，不耐高温，在高温下其成分结构有一定的破
坏，因而含量降低。总之，不同炮制方法对珠子参化学成份的
影响很大，为了提高有效药物含量，选择正确的炮制方法，研
究其炮制前后化学成份变化、作用机制和原理是十分必要的。
参考文献:
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药科技出版社，2010:254.
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(7):3 － 6.
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学分类意义［J］. 云南植物研究，1988，10(1):101.
［4］池群，郭建文 . 珠子参的微量元素分析比较［J］. 西北药学杂志，
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究［J］. 第三军医大学报，2010，32(20):2224 － 2227.
［8］陈涛，陈茂华，胡月琴，等 . 珠子参多糖抗肝癌作用的实验
研究［J］. 时珍国医国药，2010，21(6):1329 － 1331.
［9］陈涛，陈茂华，胡月琴，珠子参多糖提取及抗癌活性研究［J］. 中国
中药杂志，2010，35(7):912 － 914.
(收稿日期:2014 － 10 － 10)
* 基金项目:云南省教育厅科研项目(NO:2012Z126C)。
三步止泻手法对兔脾虚证动物模型的血清免疫的实验研究*
杨丽秋
(云南省中医医院，云南 昆明 650011)
摘要:目的 观察脾虚证小兔模型的症状、血清免疫功能治疗前后变化情况，探求三步止泻治疗小儿腹泻的客观依据，为临床
应用推广该疗法提供科学依据。方法 采用喂服生大黄粉的造模方法制作脾虚证小兔动物模型 30只，随机分为 3组(即实验组 10、
对照组 10、模型组 10只)实验小兔。实验组采用三步止泻手法治疗，对照组给予思密达药物灌服治疗，模型组给饲料喂养，治疗组予
推拿治疗。通过对症状改变，血清免疫功能方面比较，进一步探索三步止泻手法治疗脾虚证动物模型的作用机理。结果 实验兔腹
泻后推拿治疗对血液中 CPＲ、IgA、IgM浓度影响较思密达组更为明显，对 IgG影响无明显不同。结论 推拿手法比思密达治疗对实
验兔血清免疫功能影响更明显。
关键词:动物模型;血清 C反应蛋白;三步止泻法
中图分类号:Ｒ244. 1 文献标志码:A 文章编号:1007 － 2349(2015)04 － 0068 － 02
小儿腹泻亦称小儿泄泻，属于小儿消化不良，是小儿常见
的消化系统疾病，脾虚证以腹泻为主要症状，发病年龄 3 岁以
下多见，发病时间一年四季均可发病，尤以季节更替时明显 .
它是由于小儿脾常不足，脾胃功能容易因外邪或内因导致失
调，故出现以大便次数增多并且粪质改变为主要临床表现 .
病情较重者可出现脱水及电解质紊乱或危及生命，临床中非
常重视。小儿推拿疗法是以中医理论为指导，根据小儿的生
理病理特点，在其体表特定的穴位或部位以推拿手法为主治
疗疾病，强身健体或助长益智的一种外治疗法。该课题组三
步止泻法相对简单易掌握，临床观察疗效显著。国内外目前
关于手法研究在于使用单一手法治疗脾虚证动物模型对免疫
方面的研究，李铁浪［1］研究捏脊疗法可通过降低血清 MOT的
含量，改善脾虚证家兔的胃肠运动，达到治疗作用;郭争鸣［2］
指出推拿明显影响机体的免疫功能。关于脾虚证动物模型制
作方面，李志强［3］采用大黄复制脾虚大鼠作研究;薛丽莉［4］采
用大黄复制脾虚泄泻大鼠;有关动物穴位定位方面研究，多为
成人十二经络穴位，尚无小儿推拿特定穴位方面的研究，我课
题组定穴方法参考郑利岩等［5］《实验家兔常用经穴的客观检
测与标定》。故本课题脾的取穴定位于小兔拇指掌面，腹取穴
定位即为小兔腹部，上七节骨为小兔骶尾骨正中线。本课题
组开展动物实验研究，先完成脾虚证动物模型的造模，后设立
实验组和对照组，观察三步止泻治疗、西药思密达治疗前后脾
虚证动物模型症状的改善、血清中免疫功能的改变。
1 研究内容与方法
1. 1 研究方案 采用喂服生大黄粉的造模方法(参考李志
强［3］采用大黄复制脾虚大鼠作研究的方法，方法有改动)制作
86 2015 年第 36 卷第 4 期
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2015.04.036