全 文 ：收稿日期:2010-05-12;　修订日期:2010-11-28
基金项目:《中国药典 》2010版Ⅰ部标准研究课题(N0.YZ-123)
作者简介:邓　翀(1978-), 男(汉族),陕西咸阳人 ,现任陕西中医学院
讲师 ,博士学位 ,主要从事中药质量标准及中药体内分析研究工作.
＊通讯作者简介:宋小妹(1964-),女(汉族),陕西渭南人 ,现任陕西中医
学院教授 ,博士学位 ,主要从事中药药效物质基础及中药炮制研究工作.
珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定
邓　翀 1 ,宋小妹1, 2＊ ,蔡宝昌 2
(1.陕西中医学院 ,陕西 咸阳　712046;　2.南京中医药大学 ,江苏 南京　210046)
摘要:目的 建立高效液相色谱法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法 供试品用 60%乙醇超声提取 40min, 滤
过 , 取续滤液作为供试品溶液;高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱:InertsilODS-sp(5μm, 4.6mm×150 mm);流动相:
乙腈 -0.2%磷酸溶液(35∶65);柱温:30℃;流速:1.0ml/min;检测波长:203 nm。结果 珠子参中竹节参皂苷Ⅳa与其他
组分分离良好 , 保留时间 12.5 min。 竹节参皂苷Ⅳa对照品线性范围 1.007 6 ～ 10.076μg, r=0.999 9, 平均回收率为
103.46%, RSD为 0.81%。结论 该法操作简便 , 方法稳定性 ,分离度好 ,灵敏度高 , 可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含
量测定。
关键词:珠子参;　竹节参皂苷Ⅳa;　高效液相色谱
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.04.035
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2011)04-0863-01
　　珠子参又名珠儿参 ,为五加科植物珠子参 PanaxjaponicusC.
A.Mey.var.major(Burk.)C.Y.WuetK.M.Feng或羽叶三七 Pa-
naxjaponicusC.A.Mey.var.bipinnatifidus(Seem)C.Y.WuetK.
M.Feng的干燥根茎 , 主产于陕西 、四川 、云南 、甘肃 、贵州 、西藏等
西部山区 , 具有补肺 、养阴 、活络 、止血功效 ,用于气阴两虚 、烦热
口渴 、虚劳咳嗽 、跌扑损伤 、关节疼痛 、咳血 、外伤出血等症 [ 1] 。
化学研究表明 , 珠子参主要含有多种皂苷 、多糖 、氨基酸和多种微
量元素等 [ 2] , 其主要化学成分为皂苷类成分 , 具有镇痛 、镇静 [ 2] 、
抗炎 [ 2] 、增强免疫力 [ 3] 、抗肿瘤 [ 4～ 5]等活性。本文采用高效液相
色谱法对珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量进行测定 ,为珠子参的
质量控制提供科学依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器 岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪;ShimadzuLCso-
lution工作站;SB-3200D型超声清洗机(宁波新芝生物科技股份
有限公司 , 180 W, 40kHz);BP-121S电子天平(北京赛多利斯仪
器系统有限公司)。
1.2 　试药 3批珠子参药材均购自陕西 ,经陕西中医学院药学院
王继涛高级实验师鉴定 , 来源为珠子参 PanaxjaponicusC.A.
Mey.var.major(Burk.)C.Y.WuetK.M.Feng的干燥根茎。
乙腈为色谱纯(SKChemicals公司);其余均为分析纯;水为
纯净水;竹节参皂苷Ⅳa对照品(自制 ,纯度 98.4%)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 色谱柱:InertsilODS-sp(5 μm, 4.6 mm×150
mm);流动相:乙腈 -0.2%磷酸溶液(35∶ 65);检测波长:203
nm;流速:1.0ml/min;进样量:20 μl;柱温:30 ℃;理论板数按竹
节参皂苷Ⅳa峰计算应不低于 3 000。
竹节参皂苷Ⅳa对照品和供试品 HPLC图谱见图 1 ～ 2。
2.2　对照品溶液的配制 取竹节参皂苷Ⅳa对照品适量 ,精密称
定 , 加 60 %乙醇配制成 1.007 6 mg/ml的储备液 ,待用。精密吸
取 2 ml于 10 ml量瓶中 , 加 60 %乙醇至刻度 , 摇匀 , 作为对照品
溶液。
2.3　供试品溶液的制备 取珠子参药材粉末(过 2号筛)约 0.1
g, 精密称定 ,加 60%乙醇溶液 25 ml, 超声处理 40 min, 取出 ,加
60 %乙醇补足重量 , 滤过。取续滤液即得。
图 1　竹节参皂苷Ⅳa对照品HPLC图谱
图 2　供试品 HPLC图谱
2.4　线性关系的考察 分别精密吸取上述对照品贮备液 0.5 , 1,
2 , 3 , 4 , 5ml, 于 10 ml量瓶中 ,加 60 %乙醇至刻度 , 摇匀 ,配制
成 0.050 4, 0.100 8, 0.201 5, 0.302 3, 0.403 0, 0.503 8mg/ml的
系列溶液 ,分别进样 20 μl, 测定峰面积 , 以竹节参皂苷Ⅳa对照
品进样量(μg)为横坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 并计
算回归方程得:Y=391102X-16725(r=0.999 9),结果表明 , 竹
节参皂苷Ⅳa在 1.007 6 ～ 10.076 μg范围内 , 峰面积 Y与进样量
(μg)X线性关系良好。
2.5　精密度实验 取同一供试品溶液 , 照 “ 2.1”项下色谱条件 ,
重复进样 6次 , 测定竹节参皂苷Ⅳa峰面积。结果表明本法精密
度良好 , RSD为 0.02 %。
2.6　稳定性实验 取同一供试品溶液分别于 0, 2, 4, 8, 12, 18, 24
h内进样 , 按 “ 2.1”项下色谱条件测定竹节参皂苷Ⅳa峰面积。
结果表明 ,样品在 24 h内峰面积稳定 , RSD为 0.02%。
2.7 　重复性实验 取同一批号样品 , 平行称取 6份 , 按 “ 2.3”项
下方法制备供试品溶液 ,按 “ 2.1”项下色谱条件测定竹节参皂苷
Ⅳa含量。结果表明 ,本法具有较好的重复性 , RSD为 1.10 %。
2.8 　回收率实验 取已知含量的样品 6份 , 各 0.05 g, 精密称
定 , 精密加入竹节参皂苷Ⅳa对照品适量 ,按 “ 2.3”项下方法制备
供试品溶液 ,按 “ 2.1”项下色谱条件测定竹节参皂苷Ⅳa含量。
计算回收率 ,平均回收率为 103.46%, RSD为 0.81 %。 结果表
明 , 本法回收率良好。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.4 时珍国医国药 2011年第 22卷第 4期
2.9 　样品含量测定 取不同批次样品粉末约 0.1 g, 精密称定 ,
按 “ 2.3”项下方法制备样品溶液 ,进样 20 μl, 按 “ 2.1”项下色谱
条件进行测定 , 记录色谱峰面积 , 外标法计算竹节参皂苷Ⅳa含
量。结果见表 1。
表 1　珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量 %
批号 竹节参皂苷Ⅳa含量 RSD
070919 5.45 1.30
061015 4.63 1.43
061018 6.81 0.14
　　n=3
3 　讨论
在供试品溶液制备方法考察的过程中 , 笔者分别对提取溶
媒 、提取方法和提取时间进行了筛选 ,发现 60%乙醇超声提取 40
min提取率达 98%,其中回流提取和超声提取的效果相当。由于
超声提取法的操作简便易行 ,故选择超声提取为宜。
对流动相的选择 ,分别考察了甲醇 -水 、甲醇 -0.6 %磷酸
水溶液 、乙腈 -水等的不同配比 ,发现采用乙腈 -0.2 %磷酸溶
液(35∶65)竹节参皂苷Ⅳa峰与相邻峰能达到基线分离 , 且峰
形较好 ,保留时间为 12.5 min, 空白溶剂无干扰。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:192.
[ 2 ] 　赵　仁 ,赵　毅 ,李东明 ,等.珠子参研究进展 [ J] .中国现代中药 ,
2008, 10(7):3.
[ 3 ] 　考玉萍 , 姜　炜 ,宋小妹.珠子参叶总皂苷抗疲劳抗应激作用的实
验研究 [ J] .陕西中医 , 2008, 29(8):1092.
[ 4 ] 　陈　涛 ,陈龙飞 ,金国琴 ,等.珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应
及机制研究 [ J] .肿瘤 , 2006, 26(2):144.
[ 5 ] 　陈　涛 ,龚张斌.珠子参对人早幼粒白血病 HL-60细胞增殖的抑
制和诱导分化作用的研究 [ J].中国中医药科技 , 2009, 16(4):278.
收稿日期:2010-06-11;　修订日期:2010-11-10
基金项目:四十二批中国博士后科学基金二等资助金;国家杰出青年科学基金项目(No.30625008)
作者简介:孙雅煊(1970-),女(满族),甘肃兰州人 ,现任北京联合大学应用文理学院副教授 ,博士学位 ,主要从事天然产物的药理药效学研究工作.
＊通讯作者简介:安黎哲(1963-),男(汉族),甘肃天水人 ,现任兰州大学生命科学学院教授 ,博士学位 ,主要从事植物生理生态研究工作.
高山离子芥水提物对四氯化碳诱导
的急性肝损伤的影响
孙雅煊 1, 2 ,刘　婷 4 ,戴雪伶 1 ,高兆兰1 ,郑秋生 4 ,安黎哲2, 3＊
(1.北京联合大学应用文理学院 ,北京　100191;
2.中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 ,甘肃 兰州　730000;
3.兰州大学生命科学院 ,甘肃 兰州　730000;　4.石河子大学药学院 ,新疆 石河子　832003)
摘要:目的 评价高山离子芥水提物在四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤中的作用 , 并阐明其可能机制。方法 高
山离子芥水提物预处理 7 d后 ,小鼠腹腔注射 CCl4石蜡油溶液。测定肝脏指数 , 血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸
转氨酶(ALT)水平 ,肝组织中丙二醛(MDA)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结
果 高山离子芥水提物呈剂量依赖性地降低肝脏指数 , AST、ALT、MDA水平 ,提高 SOD和 GSH-Px活性。结论 高山离子
芥水提物是有效的抗化学性肝损伤的护肝剂 ,可能与其抗氧化活性有关。
关键词:高山离子芥;　水提物;　四氯化碳;　肝损伤;　抗氧化
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805, 2011.04.036
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2011)04-0864-03
EffectsofChorisporabungeanaWaterExtractonAcuteLiverInjuryInducedbyCarbon
Tetrachloride
SUNYa-xuan1, 2 , LIUTing4 ,DAIXue-ling1 ,GAOZhao-lan1 , ZHENGQiu-sheng4 , ANLi-zhe2, 3＊
(1.ColgegofAppliedSciencesandHumanities, BeijingUnionUniversity, Beijing100191;2.ColdandAridRe-
gionsEnviromnentalandEngineeringResearchInstitute, ChineseAcademyofSciences, Gansu, Lanzhou730000,
China;3.SchoolofLifeSciences, LanzhouUniversity, Gansu, Lanzhou730000, China;4.SchoolofPharmacolo-
gy, ShiheziUniversity, ShiheziXinjiang, 832003, China)
Abstract:ObjectiveToevaluatetheroleofChorisporabungeanawaterextractincarbontetrachloride(CCl4)-inducedacute
liverinjuryinmiceanditspossiblemechanisms.MethodsMicewerepretreatedwithChorisporabungeanawaterextractfor7days
andthenwereintraperitoneallyinjectedwithCCl
4
inliquidparafin.Liverindexwasassayed, andspartateaminotransferase(AST)
andalanineaminotransferase(ALT)levelswereestimated, andMDAlevelandsuperoxidedismutase(SOD), glutathioneperoxi-
dase(GSH-Px)activitiesinlivertissueweredetermined.ResultsThewaterextractofChorisporabungeancoulddecreaseliver
index, alanineaminotransferse(ALT), aspartateaminotransferase(AST), andlivermalondialdehyde(MDA)levels, increasethe
liverSODandGSH-Pxactivitiesinadose-dependentmanner.ConclusionChorisporabungeanawaterextracthashepatopro-
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