全 文 ：· 论 著 ·
东风菜染色体的核型分析
王冰 , 李楠 ,顾晓洁 ,许亮 ,尹海波 (辽宁中医学院 , 沈阳 110 3 2)
摘要 : 目的 对药用植物 东风菜 ( z人双于况inge i(lr s ca 6亡r Ne s s . )染色体数 目 、核型 、体积等进行了研究
.
) 方法 采 用常规制片方法 , 结
合显微摄影对染色体进行分析 。 结果 东风菜染色体数 目 2n = 18 ; 相对长度组成为 2n = 18 二 8呱 + 10M : 。 核 型公式是 K
(2
。
)
= ZX 二 18 二 16m + sZ m
, 染色体总长为 47 . 62 卿 , 长臂总长为 25 . 86 脚 , 核 型不对称 系数 ( A s . K% )为 54 . 30 % , 属 于 “ ZA ”
型 , 全组染色体总体积为 1 18 . 48 拼砰 。 结论 东风莱体细胞染色体的数 目 、 核型 、 体积等清晰准确
关键词 : 东风菜 ; 染色体数 目 ; 染色体核 型 ; 染色体体积
中图分类号 : 2R 81 . 4 文献标识码 : A 文章编号 : 10 卜 24 94 ( 2以巧 ) 10 一 07 犯 一 03
K a r yP t y pe nA
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研几气NG Bi嗯 , 1 N a n , GU X iao 一ji e , XU U an g , Y IN H a i一ho (八d 。成咭 olC leg of rT 口d il如耐 服esn e 皿` d id en , 涨姗遥腿了若 1 10 32
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川昭 T RA C f : ( )B J E C f IVE oT s ut 街 s y Sl e l l l t ie al ly th e e v o ln t io n an d if n d s e e d s a de e t io n t肠 u gh l人〕e lli刀ge 门 。 sc ab e r N e s s . e腼nor so m e n um -
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n = 18 = SM : + 10M I ; k娜 `” , 1“ , fo mr lu a w as K ( Z n ) = ZX = 16 m + Z s m ; w h ie h l , -
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东风菜 ( DOe l l i哪九a 、 ca be: N e s S . )为菊科 ( c o m -
oP ist at e )植物 。 分布于东北 、 华北 、 华中等地 ,生于山
坡 、草地 、 林间或路边等 。 全草具有治疗跌打损伤 ,
蛇伤等功效 t ’ 〕 ,关于东风菜的细胞学研究笔者在文
献中尚未见到报道 。 本实验对东风菜的染色体数
目 、 核型 、 体积等进行了实验研究 , 为该种药用植物
的起源演化 、 鉴定 、 良种培育及分子生物学等的深人
研究提供必要的细胞学资料 。
1 材料与方法
1
.
1 材料
东风菜的果实于 20 2 年 9 月采于辽宁千山 , 由
辽宁中医学院郑太坤教授鉴定为东风菜 ( 刀。 e il gne -
iar cs
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:
Ne s
.
)果实 。 凭证标本存于辽宁中医学院
药用植物教研室 。
1
.
2 方法
实验按常规方法〔“ 一 5习进行 。 将种子放在 24 一 28
℃的恒温培养箱中培养 。 当胚根长至 1 . 0 一 1 . 5 Cm
时 ,在室温下用 0 . 巧 % 和 0 . 20 % 秋水仙碱液分别暗
处理 3 , 3 . 5 , 4 h 。 用卡诺固定液 固定 2 一 巧 h ,再转
人体积分数为 70 % 乙醇中( 4 ℃左右 )保存 。
将清洗的材料转人预热恒温 印 ℃的 1 mo l · L 一 ’
盐酸解离液中分别解离 ,用混合酶液 ( 1 . 5%纤维素酶 -
1
.
5%果胶酶 = l : l) 在室温下解离 20 一 30 而n 后 ,用
改良的石碳酸品红染色液染色 , 45 % 的冰醋酸分色 ,
用压片方法将细胞分散 。 采用 冰冻制片法制片 。 选
择有代表性的染色体组进行显微摄影 ,并做进一步的
分析。 根据染色体数量统计要求 ,对 30 个染色体分
散良好 、 数目清晰的细胞进行染色体数量统计 。 取 2
个细胞的染色体 ,每条染色体测量 5 次后的平均值制
成染色体参数表格和核型模式 图 。 选择一个具有代
表性的分裂相排成核型模式图 ,各组染色体排列顺序
以染色体总长为准 ,从长到短依次排列 。
细胞核型分析采用 玫 v an 等困 以染色体臂比来
确定着丝点位置和 Kuo 7[] 以染色体相对长度系数将
作者简介 : 王冰 , 男 , 教授 eT l : ( 02 4 ) 3 12 07 1 17 E 一 n l ia l : 川 ,wan g@ l r lu t e rn
. 司 , l
7 3 2
·
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石 1 2刀 ; J , 2伙巧 月护“ 、 一 , V(, l
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4 l 的 . j o 中国药学杂志 2以巧年 5月第 41 卷第 0] 期
染色体分成 4组的染色体分类标准 。 采用 了 S bet -
hi ns 【“ 〕的按核型中最长染色体与最短染色体之比及
臂比大于 2的染色体所占的 比例和 A nar o[ 9〕提出的
长臂总长与全组染色体总长之比的核型不对称系数
(A S
.
K% )来确定染色体核型不对称程度 。 染色体
体积采用 D E一 v es c ovi 等〔’侧的计算方法 。
2 结果与讨论
2
.
1 染色体数 目
在 30 个染色体分散良好的细胞中 , 有 29 个细
胞染色体数目为 18 条 , 因此确定东风菜体细胞染
色体数目为 Z n = 18 ,观察中未发现有 B染色体及随
体 。 经分析得出东风菜该个体体细胞染色体数目为
Z n = ZX = 18
,见图 l 。
表 2 东风菜的染色体参数
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注 : 东风菜的染色组总长度是 47 . 62 ,。
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图 2
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东风菜染色体核型
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图 1 东风菜根尖体细胞中期 , 示染色体 Z n 二 18
Fi g I C俪om os m e Z n = 18 m e at p hase of D `祀ll in ge 几 a s o zb e r os -
m at le e e l
2
.
2 染色体相对长度组成及核型分析
东风菜的染色体平均长度为 2 . 64 脚 ,按 uK J 7」
等的分类标准 ,可将东风菜的 9 对染色体分成 2 组 ,
见表 1 。 1 一 4 对为 呱 组 , 5 一 9 对为 M , 组 ,染色体
相对长度组成为 Z n = 18 = SM : 十 l o M I ,根据玩 v an 等
的染色体分类标准 , 东风菜的 9 对染色体具中部着
丝点的为第 l , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 9 对 ,具亚中部着丝点
的为第 8 对 , 其核型公式是 K ( Z n) 二 ZX = 18 二
16 m + sZ m
。 东风菜的染色体参数 、 核型及核型模式
图分别见表 2 和图 2 , 3 。
表 1 东风菜的染色体体积
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注 : 东风菜的染色体总体积是 1 18 . 46 脚
N以 e : 及记召动群瓜 2 3。巍 , 。阮旧 1烈班1犯 ot 已 v o l nL l祀 ~ 118
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中国药学杂志 2X( 为 年 5 月第 41 卷第 10 期
图 3 东风菜核型模式图
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s a功e r c h r O I n o so me
东风菜染色体组染色体总长为 47 . 62 脚 , 长臂
总长为 25 . 86 脚 ,根据 A门 1 0 的计算方法 ,核型不对
称系数 ( A S . K% )为 54 . 30 ,对称程度较高 。 9 对染色
体长度变化范围在 2 . 08 一 3 . 17 脚 间 , 最长染色体
与最短染色体之比是 1 . 52 : 1 , 臂比值变化范围是
1
.
08 一 2
.
90
,其中 1对染色体臂比大于 2 , 为全组染
色体的 n . n % , 根据 tS eb ib n s 的核型分类标准 , 属
于 “ 2A’ ,型 。
.2 3 染色体体积
根据 D E一 V es co vi 等的染色体体积计算公式得 出
各对染色体体积 , 见表 l 。 体积变化范围在 4 . 1 1 -
8
.
45 子皿 3 间 ,全组染色体总体积为 1 18 . 48 拌m3 。
植物遗传 、育种 、 演化 、 地理分布 、分类等 , 所有
这些工作都是和染色体的数目 、形态研究分不开的 ,
因此植物染色体技术在这些研究工作中具有特别重
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n }P 如。 J , 2丈欠巧腕少, VOI . 4 ] NO . ] 0 · 7 3 3 ·
了心7一找O
不同化学型苍术根茎及根际土提取物生物活性及化感物质的比较
郭兰萍 ’ , 黄璐琦 ’ ` , 蒋有绪 2 , 吴志刚 ’ ,林淑芳 ’ , 詹亚华 3 l( 中国中医科学院中药研究所 , 北京 l即o ; 2 . 中国林业科学研究
院 ,北京 1(D阳 1 ; 3 . 湖北中医学院 .武汉 43 以巧 l )
摘要 : 目的 比较不 同化学型苍术根茎及其根际土提取物对茅山苍术种子发芽及幼苗生长的 自毒作用 , 以及二者所含化感物
质的差异 。 方法 设水 (CK ) 、 茅山苍术根际土提取液 (MA S )5 0 g’ L 一 ’ 、 英山苍术根际土提取液 ( YAS )5 0 g’ L 一 ` 、 茅山苍术根茎
提取液 (MA )20 g’ L一 ’及英 山苍术根茎提取液 ( Y )A oZ g’ L 一 ’共 5 个处理组 , 每个处理组 3 次重复进行生物学实验 , 分别在第
5
,
7 和 14 天测量苍术种子发芽率 、胚根长及胚芽长后 ,使用 SR弧 10 . 0 软件 , 利用单因子方 法分析比较各处理组生物活性的差
异 ;采用 G G M S 分 离鉴别苍术根 茎及根际土所含的化合物 。 结果 ① M气S 和 Y AS 所含归一化百分含量 > 5% 的组分大体相
同 , 其对茅山苍术种子发芽率 、胚根长及胚芽长均 无显著影响 (尸 > 0 . 05 ) ;②茅山苍术和英 山苍术属于两种不 同的化学型 。 其
对茅山苍术种子发芽率 、 胚根长及胚芽长均有显著抑制作用 ( P < 0 . 05 ) , MA 对茅山 苍术种子发芽率的抑制作用显著强于 YA
( 尸 < 0 . 05 ) , 但二者对茅山苍术胚根长及胚芽长的抑制作用的 差异不显著 。 结论 M A和 Y A 对茅山苍术种子均有化感作用 ;
苍术的 自毒现象在种内不 同品种间存在差异 。
关键词 :苍术 ;化学型 ;化感作用 ; 自毒 ;连作
中图分类号泪2 84 . 1 文献标识码 : A 文章编号 : 10 1一 2494 ( 2《X巧 ) 10 一 07 34 一 以
C o m脚的吧 of BOI ac it 村yt a n d A u ot t:o 对e s u加加口 e es h℃m E xt ar e st of R恤OZ m a a n d 助吻韶 P h e代 so n of A勿叱妙.
及那份` 白砚即 1兀 ) . 诫ht 珑月陇戊n t hC 以in 如 pe
Gu o 骊一 p i嗯 , , 刚胡 G 玩一 q i` 关 , J IANG Y o u 一 x u Z , 则 z h i一脚 g , , H N s h u 一afn g , , z HA人 Y a 一 h u a3 ( 加 ,、* of 俄~
衬 i* r id 泪钱统 a , Ac 口凌 n l少 of 乃栩勿勿耐 以泛~ 泪妞众坛ne , 倪协ng l X( )7《X) , hC ina ; 2 . esR 倒动 力“ 忿众以。 of oF esr 娜 , 凸艺刀份e 」e初毓 l少 of声b esr l。 口 , 及乒刀召 1《X 刃1 , hC i na ; 3 . 角或 i 之IJ泛2℃ sr勿 of (rT 卫垃如刀以 以葱刀韶e 乃介 d ic i配 , 叭硫朋 43 (叉巧 l , 汰 an )
川略T RA C 】’: O田 E〔 1 1V E oT c o ll l详以 , th e a u ot oxt ie o s i s an d au ot ot x ie s u l粥ant e e s of d ife er n t e henu t》样 } of A之or e t价心公 之朋沮王
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二 M田 T HOI 哈 iF v e h℃ a hn e snt we o u se d , inc lu d i n g 姚 0 , ex 咖st of hR iosz 油 e er 50 1 of A . 如汉℃。 in M ao shan (毗5) 50 g’ L 一 ’ , ex -
actr
t s of R h i即 s p h e er 501 1 of A . 2口月走沦“ in Y i呼 han ( YAS ) 50 9 · L 一 ’ , e x瞅 ts of Rh iz o m a of 通 . 人刀 l倪。 讯 M即 shan (MA )20 9 · L 一 ’ adn e x -
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. 勿爪加 in iY n罗han ( Y )A oZ g’ L 一 ’ e ac h 比 a t l l l e in w as id osp dse iw ht 3 re pe a ts
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1l l e ge 耐iant o n ar tes , le l lght s of o ts
出心 hs o ts we 此 溉词de res cpe it ve ly in s , 7 an d 14 day . o ne ~ 、怕 y NA OV A ~ do ne ot ifn d ht e d ife r e cn es ~ g het 能
a tm enst 了】卜e c om -
更1 〕山洲卜 in al al 洲” 11 Ier a切祀心 , xce etP 姚O , ~ se 邵几t司 an d ide int if司 场 GC
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. 人训加 罗mu ant ions adn hte g D协 t ll of 呱 s adn s ll o t s (尸 > 0 . 05 ) ;②MA an d YA
要的意义 。 随着基因工程技术和分子生物学飞速发
展 ,作为细胞生物学的主要研究内容 ,染色体技术也
将逐渐渗透到生药学的研究领域 ,每种药用植物染
色体进行系统的研究愈加显示出其重要性 , 特别是
对植物药材的鉴定 、 亲缘关系的确定 、 良种培育及驯
化 、新药源的寻找和开发等方面将有特殊的意义 。
RE全乞 R E N C E S
【1] l l AN G SU Ne w M EO IC月 J CO IL 五G E 注沁绝“ 〕瓜刃 户 of (T泌 (中药大辞
典 )【M 〕. 51皿唱枷 J 、 钊e R山li sh i ll g H仅 IeS , 1叨 : . 1 .〔2 1 ZHU W . 产、 切二 。 刀万溯~ 耐 了阮灿以卿廿 (植物染色体及染色体技术 )仁M」. iBej ign :阮 i~ R山1 5卜i n g l l以 IeS , 1叨 : 42 一92
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〔3] , 件N G B, xU z H, 刀狂洲 G T K O袱人 adn 邵` 151 ` 乱山” iobp一
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l叮 1川 1祀仁J〕. 凸公刁月钻叨飞 (J 中国药学杂志 ) , 1期 , 32 ( 7) :舅冬《 )1 .
〔4〕 从战N ( ; B, xu Y, 刀 正 N G T K . 长好详 , 山司卿: J 肠 理饭夕汉放万于舰 己娜 -
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仁J〕 .日山之尸阮价刀 J (中国药学杂志 ), l粥 , 3 ( 12 ) : 7 1吞7 19 .
[引 认人刊C B, 刀 u召 C w w , S AN M I 凡叮 p t y l祀 肛曰 , s i s of B叱绝刀 3拜训确期
C玩众 1~
l祀 〔J〕. 口如 月刁朋” (J 中国药学杂志 ) J I” , 38 ( 2) :外盯 .
仁6 ] LE VNA A , F RE DC A K , SNA D BERG A A . No n祀 nc lac 恤 for 。en -
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ir c p 芜 I t ion on c ll ro l邢阳me 「J] . 扶 )庄 d讯“ , l知 , 5 2 : 20 1一20 .【7 ] Ku o s R , w洲G T T , H UNA G T C . K脚 。 t ” 祀 是川创师 s of ~
lb n l l吧川 g ” 刊IOS pe n 】巧仁J〕J b 。砚权刀艺口 . 197 2 , 17 :肠一80 .
【别 , 匹: B BI Ns G L . 口浏〕艘” ~ 及龙,翻￡` 认 肠岁刁厅 到面。 【M 〕」众记on :
别 w 出d Aor IUd , 197 :1 8 .
〔9」 A RA No H . Cytol 哈cal st u d i e s i n s t山faJ I ` Iy c an 」u io d , ( c o n甲 08 1-
姗 ) of 」a l知 l仁J1.撇 肠嗯 (T 。卜y o ), 1963 , 76 : 32 一39 .〔10 ] D E~ v l互吠l v) 1 M A , S乙幻 习、 0 . 伪坷川 ive k明 ot ” 祀 印例师 5 J I、 x l -
妙-as ifr 「J」. 5砚从 l e G肠及d , 197 5 ,拼 忆3) : 48 . (收稿日期二2X() 5一阵07 )
基金项 目 :科技基础性工作和社会公益研究专项资助 ( Zo 3DI 3B川0)
作者简介 : 郭兰萍 ,女 ,博士 , 副研究员 ’ 通讯作者 : 黄璐琦 ,男 ,博士 ,博士生导师 ,研究员
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· 以正n 丹柳 i J , 2庆万碗 , · , 侃 . 41 No . 10
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中国药学杂志 2 X( 拓 年 5 月第 41 卷第 10 期