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收稿日期: 2009 - 09 - 07
基金项目: / 十一五 0国家支撑计划课题资助项目 ( 2006BA I09B 006 -
05)
作者简介:孙付军 ( 1977 - ) ,男,山东苍山人,助理研究员,学士,从事中
药炮制毒效关系研究。
通讯作者:林慧彬 ( 1962 - ), 女,山东济南人,研究员,博士,研究方向:
中药资源鉴定。
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不同含油量木鳖子霜毒效关系研究
孙付军 1,路俊仙 1,崔 璐 2,陈慧慧 2,王春芳 2,林慧彬 1
( 11山东省中医药研究院,山东 济南 250014; 21山东中医药大学, 山东 济南 250014)
摘 要: 目的:分别观察不同含油量木鳖子霜急性毒性与药效学作用,探讨毒性与药效学的关系,为制霜工艺提供毒
理和药效学依据。方法: 按照急性毒性试验 LD50测定方法, 灌胃给予 10%、20%、30%含油量木鳖子霜和木鳖子原药材
的水混悬液, 观察其急性毒性, B liss法计算各自的 LD50和 95%可信度区间。采用小鼠耳肿胀法和小鼠热板法观察不同
含油量木鳖子霜的抗炎、镇痛作用,观察小鼠体重、脏器指数、耳肿胀率、痛阈值等指标。结果: 10%、20%、30% 含油量木
鳖子霜和原药材的 LD50分别为 31923、51 6393、519594、61 1610g /kg。不同含油量木鳖子霜对小鼠体重、脏器指数、耳肿胀
率、痛阈值等指标有不同程度影响,小鼠一般状况较空白对照组差,体重普遍低于空白对照组; 对小鼠主要免疫器官具有
不同程度的抑制作用; 具有明确的抗炎和镇痛作用, 但对镇痛试验的舔足次数无显著性影响。上述所有指标均未呈现明
显的线性量效关系, 随含油量的增加, 均呈现出先增强后减弱的变化趋势, 其中 10% ~ 20% 含油量时其抗炎、镇痛作用
最好, 且对体重和免疫器官的影响最小。结论: 木鳖子毒性随着含油量的增大呈现降低趋势,木鳖子在 20%含油量时抗
炎、镇痛等药效学作用最为明显, 对免疫器官的抑制作用最小,对小鼠一般状况和体重影响最小。
关键词: 木鳖子;急性毒性; 药效学;小鼠
中图分类号: R28515 文献标识码: A 文章编号: 1000 -1719( 2010) 05 - 0946 - 03
The Study ofRelation of Tox icity and Pharmacodynam ic ActionW ith
CochinchinaM om ordica Seed CremW ith E ifferentO ilContent
SUN Fu-jun1, LU Jun-x ian1, CU I Lu2, CHEN Hui-hui2, WANG Chun-fang2, L IN Hui-b in1
( 11Shandong academy o f ch inese m edicine, J inan 250014, Shandong Ch ina;
21Shandong un iver sity o f traditional Ch inese m edicine, J inan 250014, Shandong Ch ina )
Abstrac t: Ob jective: Observing acute tox icity and pharm acodynam ic action o f cochinchina momo rdica seed c rem w ith differen t
o il content respective ly, and discussing their rela tion prived basis fo r frost - like powderm ak ing artwo rk in tox ico logy and pha rm a-
codynam ic s.M ethods: A ccord ing to LD50 assay m e thod in the acute tox icity te s,t lavaged aqueous suspension w ith 10% , 20% ,
30% index o f o ilm omo rdica cochinchinensis sub-fro st and them om o rdica cochinchinensis o riginal raw m ate ria l obse rved its acu te
toxic ity, and ca lcula ted respec tive LD
50
and 95% confidence leve l sec to r in the B liss law. Adopt ear edem a and ho t plate me thod
in m ice to obse rve anti-in flamma tory and analgesic effec t of differen t index of o il momo rdica coch inchinensis. R esults: the LD50 of
10% , 20% , 30% index o f o il mom ordica cochinchinensis sub-fro st and the m omo rdica cochinchinensis o riginal raw m ate ria l is
31 923g /kg, 516393g /kg, 51 9594g /kg, 61161g /kg. C ochinch inam om o rdica seed crem w ith diffe rent o il content p lay a pa rt o f dif-
feren t deg ree in mouse we igh t、org an index、ea r sw e lling ra te、pa in thresho ld and so on. Them ouse general condition is wo rse than
the mouse in blank and the body w eigh t is lowe r, too; H aving the va ry ing deg ree inh ib itory action to the m ousem a in immune o r-
gan; Hav ing an expect anti - inflamm atory and analgesic effec ,t bu t it has no sign ificant im pac t for L icking test o f ana lge sia suffi-
#946# 辽宁中医杂志 2010年第 37卷第 5期
DOI：10.13192/j.ljtcm.2010.05.183.sunfj.075
c ien t number. A ll o f these ind ica trix have not shown clear signs o f a linear dose - e ffect re la tionsh ip, w ith the increa se in o il con-
ten,t we re later show n to enhance the trend o fw eaken ing, of wh ich 10% ~ 20% oil content in its anti-inflamm a to ry and analgesic
e ffec t of the bes,t and of body w e ight and m inim ize the impact o f immune o rgans. Conclusion: sion: acute tox icity of co chinchina
m om ord ica seed c rem Dec reased trend w ith im proved o f o il conten,t cochinchina m om o rdica seed c rem o il con tent o f 20% when
the anti-inflamm a to ry, ana lgesic pharm acodynam ics, such as the ro le o f the most obv ious inhibito ry effec t on the imm une org ans of
the sm a lles,t in m ice the general situation and the impact o f the m inimum we igh .t
K ey words: cochinchina mom ord ica seed crem; acute tox icity; pharm acodynam icology; m ouse
木鳖子为葫 芦科植 物木鳖 Momordica co-
chinchinensis( Lour) Spreng. 的干燥成熟种子 [1 ]。木鳖
子味苦、微干, 温。有毒。具有散结消肿, 解毒生肌之
功效 [ 2]。5开宝本草6谓: /主折伤, 消结肿恶疮, 生肌,
止腰痛,妇女乳痈,, 0。历代本草对木鳖子均有记
载。为常用中药之一, 以外用较多。本文就不同含油
量木鳖子霜进行了急性毒性实验和药效学观察, 为其
制霜工艺提供依据。
1 材 料
11 1 受试品
0%、10%、20%、30%含油量的木鳖子霜和木鳖子
原药材。由本院中药鉴定研究室制备并提供。密封, 4
~ 8e 保存。不同含油量的木鳖子霜采用制霜机压榨
去油法制备,木鳖子原药材含油量为 42% , 0%含油量
木鳖子霜 (纯霜 )采用石油醚 ( 30~ 60e )索氏提取法
制备。
11 2 动物环境及饲料
动物: KM小鼠, 18~ 22g, 雌雄各半, 山东大学实
验动物中心提供,合格证号: SCXK (鲁 ) 20030004。环
境:山东省中医药研究院动物实验中心, 许可证号:
SYXK (鲁 ) 20050052。饲料: 山东省实验动物管理中
心提供,合格证号: SCXK (鲁 ) 20040014。
11 3 仪器
GB303型电子天平、PL303型电子天平, 均为 m et-
tle r to lido产品。YP型电子天平,上海上天精密仪器有
限公司产品。XZC - 2B型自控温度热板仪, 山东省医
学科学院设备供应站提供。
2 方法与结果
21 1 急性毒性试验
21 11 1 预实验观察 取 18~ 22g (组内体重差异小于
4g)小鼠, 雌雄各半,禁食不禁水 12h, 每组 6只, 分别
进行 10%、20%、30%、42%含油量木鳖子霜的 0%、
100%致死剂量 ( Dm in、Dm ax ) , 结果如表 1所示。 10%、
20%、30%、42%含油量木鳖子霜均测定出近似 0%、
100%致死剂量。
表 1 木鳖子不同含油量霜的 0% 100%致死量 (n= 6)
组别 Dm in ( g /kg) Dmax ( g /kg)
10%含油量霜 310 912
20%含油量霜 410 1116
30%含油量霜 410 1116
原药材 410 1116
21 11 2 10% 20% 30% 42%含油量木鳖子霜的 LD50
测定 根据预实验结果, 分别进行 10%、20%、30%、
42%含油量木鳖子霜的 LD50测定。 18~ 22g KM小鼠,
雌雄各半,每组 10只, 每个受试品以 Dm ax为最大给
药量, 以 01 8为系数确定不同给药剂量。给药前禁食
不禁水 12h, 01 4mL /10g灌胃, 灌胃后连续观察 14天,
正常饮食, 记录 14天小鼠死亡率, 根据死亡率按照
B liss法计算不同受试品的 LD50和 95%可信度区间, 结
果如表 2所示, 10%含油量木鳖子霜 LD50为 31 923g /
kg, 其毒性最大, 在 20%后随含油量增加毒性逐渐降
低。随着含油量的增大,其毒性呈现降低趋势, 如图 1
所示。
表 2 10% 20% 30% 42%含油量木鳖子霜的 LD 50和 95%的可信区间
组别 LD50 ( g /kg) 95%可信区间 ( g /kg)
10%含油量霜 319230 310294~ 510802
20%含油量霜 516393 415604~ 619733
30%含油量霜 519594 511154~ 619425
原药材 611610 419574~ 716568
图 1 不同含油量木鳖子霜急性毒性 LD 50和 95%可信区间变化趋势
21 2 主要药效学试验
受试药剂量设计及理由: 小鼠临床等效量 (按照
成人每日用量 10g计算 )为: 10g /d @ 01 0026 @ 50 /kg=
11 3g /kg。药效学给药量按照小鼠临床等效量 113g /kg
给予。临用前配制成 01 065g /mL, 以 20mL /kg灌胃,
连续给药 1周。
21 21 1 小鼠耳肿胀法 [3 ]观察不同含油量木鳖子霜的
抗炎作用 按体重、性别均衡随机分为空白对照组,
0%、10%、20%、30%含油量的木鳖子霜和木鳖子原药
材组,每组 10只。给药组按照 20mL /kg分别给予同
体积受试药, 空白对照组给予生理盐水 20mL /kg灌
胃,连续给药一周。
给药最后 1天 20B00时禁食, 第 8天给药 1h后将
混合致炎液涂在小鼠左侧耳前后两面,约涂 01 1mL, 右
耳作对照。致炎 4h后将小鼠脱颈处死, 称重后
81 5mm打孔器分别在两耳同一部位打下一圆形耳片,
电子天平称重,每鼠左侧耳片重量减去右侧耳片重量
即为肿胀度。按照公式 ( 1)、( 2)分别计算肿胀率和肿
胀抑制率。打完耳片后各组小鼠剥离胸腺、脾脏等主
要免疫器官,称重,按照公式 ( 3)计算脏器指数。
肿胀率 =致炎耳重 -未致炎耳重未致炎耳重 ( 1)
肿胀抑制率 =对照组平均肿胀率 -给药组平均肿胀率给药组平均肿胀率
#947# 辽宁中医杂志 2010年第 37卷第 5期
@ 100% ( 2)
脏器指数 =脏器重 (mg)体重 ( g) ( 3)
结果如表 3所示:给药 1周后,各给药组小鼠体重
普遍低于空白对照组体重, 其中纯木鳖子霜体重减轻
最为明显, 20%木鳖子霜体重变化较小。
表 3 不同含油量木鳖子霜对小鼠体重的影响
(抗炎试验体重 ) (n= 10, €x ? s)
组 别 剂量 ( g /kg) 分组体重 ( g) 给药 1周体重 ( g)
空白组 - 21176 ? 1119 24158 ? 1159
0%含油量 113 21131 ? 1111 20154 ? 3108* *
10%含油量 113 21140 ? 1149 22186 ? 2109*
20%含油量 113 21119 ? 1128 23128 ? 2186
30%含油量 113 21171 ? 1108 22185 ? 2103*
原药材 113 21130 ? 1115 22194 ? 1194*
注:与空白对照组比较, * P < 0105, * * P < 0101(下同 )。
打耳片后处死小鼠称重,并剥离小鼠胸腺和脾脏,
称重,计算脏器指数, 结果如表 4所示, 不同含油量木
鳖子霜对小鼠主要免疫器官具有不同程度的影响, 与
空白对照组比较,胸腺和脾脏指数不同程度降低,其中
以纯木鳖子霜降低较为明显, 20%含油量木鳖子霜的
影响最小。
表 4 不同含油量木鳖子霜对小鼠脏器指数的影响 ( n= 10, €x ? s)
组 别 剂量 ( g /kg) 胸腺指数 (m g /g) 脾脏指数 ( mg /g)
空白组 - 416859 ? 111430 613655 ? 112635
0%含油量 113 310432 ? 113980* * 510780 ? 017985* *
10%含油量 113 319728 ? 113916 510793 ? 111198*
20%含油量 113 410750 ? 115384 517379 ? 113453
30%含油量 113 411362 ? 017421 512458 ? 018127*
原药材 113 415816 ? 116407 513689 ? 114851
称取小鼠左右耳片后,计算耳肿胀率和抑制率,结
果如表 5所示,不同含油量木鳖子霜抗炎作用不呈现
明显的线性量效关系,随含油量的增加,抗炎作用先增
强后减弱, 20%左右时其抗炎作用最好。
表 5 不同含油量木鳖子霜对小鼠耳肿胀率的影响 ( n= 10, €x ? s)
组 别 剂量 ( g /kg) 耳肿胀率 (% ) 抑制率 (% )
空白对照组 - 018149 ? 012932 -
0%含油量 113 016942 ? 014292 14108
10%含油量 113 016421 ? 014211 22157
20%含油量 113 016134 ? 012479 26189
30%含油量 113 017052 ? 013788 15135
原药材 113 017622 ? 014544 12166
21 21 2 小鼠热板法观察不同含油量木鳖子霜的镇痛
作用 SPF级雌性 KM小鼠, 18~ 22g, 购进后按照文
献方法 [4 ] ( 55 ? 015 )e 条件下进行筛选, 剔除疼痛潜
伏期小于 5s和大于 30s的小鼠,剩余小鼠按疼痛潜伏
期、体重均衡随机分为空白对照组, 0%、10%、20%、
30%含油量木鳖子霜和木鳖子原药材组, 每组 10只。
给药组按照 20mL /kg分别给予同体积受试药,空白对
照组给予生理盐水 20mL /kg灌胃,连续给药 1周。
给药最后 1天 20B00时禁食, 第 8天给药 1h后相
同条件下测定痛阈值和 1m in内小鼠舔足次数, 按照公
式 4计算痛阈提高百分率 (% )。观察完毕后各组小
鼠继续饲养 1天,于第 9天给药 3m in后左耳两面涂混
合致炎液约 01 1mL, 致炎 4h后将小鼠脱颈处死, 称重
后 81 5mm打孔器分别在两耳同一部位打下一圆形耳
片,电子天平称重,每鼠左侧耳片重量减去右侧耳片重
量即为肿胀度。按照公式 1、2分别计算肿胀率和肿胀
抑制率。打完耳片后各组小鼠剥离胸腺、脾脏等主要
免疫器官,称重, 按照公式 ( 3)计算脏器指数。
痛阈提高百分率 =
给药组平均痛阈值 -对照组平均痛阈值
对照组平均痛阈值 @ 100% ( 4)
结果如表 6所示,不同含油量木鳖子霜均具有良
好的镇痛作用,但只是提高痛阈值和痛阈百分率,对舔
足次数影响不明显。对痛阈值的影响不呈现明显的线
性量效关系, 随含油量的增加, 镇痛作用先增强后减
弱, 10% ~ 20%左右时其镇痛作用最好。
表 6 不同含油量木鳖子霜对小鼠镇痛潜伏期和
舔足次数的影响 ( n= 10, €x ? s)
组 别 剂量
( g /kg )
药前痛阈 ( s) 药后痛阈 ( s) 舔足次数 痛阈提高百分率 (% )
空白组 - 1516 ? 4162 18130 ? 5129 5150 ? 2171 -
0%含油量 113 1516 ? 5140 22160 ? 7140 5100 ? 1183 23150
10%含油量 113 1517 ? 5131 25130 ? 7178* 5130 ? 3165 38125
20%含油量 113 1516 ? 5123 25170 ? 5142* * 5150 ? 2195 40144
30%含油量 113 1516 ? 4193 25144 ? 9129* 5178 ? 2111 39102
原药材 113 1516 ? 4153 23120 ? 7109 5130 ? 2158 26178
3 结 论
从木鳖子不同含油量霜的急性毒性试验观察可
见,木鳖子霜随着含油量的增加其毒性有逐渐降低的
趋势。药效学观察提示不同含油量木鳖子霜对小鼠体
重、免疫器官的脏器指数等指标有不同程度影响,小鼠
一般状况较空白对照组差,体重普遍低于空白对照组;
对小鼠主要免疫器官具有不同程度的抑制作用; 具有
明确的抗炎和镇痛作用,但对镇痛试验的舔足次数无
显著性影响。上述所有指标均未呈现明显的线性量效
关系,随含油量的增加,均呈现出先增强后减弱的变化
趋势,其中 10% ~ 20%含油量时其抗炎、镇痛作用最
好,且对体重和免疫器官的影响最小。
通过对急性毒性试验和药效学试验结果的综合分
析,认为木鳖子毒性部位可能以木鳖子霜内的皂苷成分
为主,随着含油量的增加毒性逐渐减小。而药效学随含
油量增加表现出先增强后减弱的趋势,考虑木鳖子油可
能是抗炎镇痛的有效成分,但随含油量增加其泻下作用
增强,加快其排泄是药效学作用降低的原因。综合其急
性毒性和药效学指标的观察,可以认为在 20%含油量时
抗炎、镇痛等药效学作用最为明显,对免疫器官的抑制
作用最小,对小鼠一般状况和体重影响最小。
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