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乳白香青治疗气管炎的动物实验研究



全 文 :2004年 12月
第 14卷 第 6期
中国比较医学杂志
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
December , 2004
Vol.14 No.6
论著摘要
乳白香青治疗气管炎的动物实验研究
袁彦平1 ,刘兆平1 , 金东庆2
(1.山东大学药学院 ,济南 250012;2.山东省医学科学院)
1 材料
实验动物:普通级豚鼠(200~ 250 g),购自中澳合资米歇
尔生物制品有限公司[ SCXK(鲁)20030011] ;普通级新西兰兔
(2.5 Kg)购自山东鲁抗医药集团[ SCXK(鲁)20030006] ;KM
小鼠(SPF 级), 18 ~ 22 g , 雌雄各半 , 山东大学[ SCXK(鲁)
20030004] 。
植物药:为菊科植物乳白香青 , 又名大白毛青(毛草青),
多生于低山草地及剑叶林下 ,为多年生草本 , 须根 ,高 15~ 30
cm , 全草味苦 ,有芳香气味。药用为地上部分 ,夏秋季割取。
2 方法和结果
2.1 乳白香青有效成分的预试验 对乳白香青的水 、酸性
乙醇 、乙醚和甲醇提取物进行了化学成分预试验。
根据实验结果 ,可知全草含有:酸性皂甙 、蛋白质 、有机
酸 、鞣质 、挥发油 、油脂 、黄酮 、香兰精甙 、树脂 、微量生物碱 ,
并进行了总黄酮初步化学分离工作 , 制成溶液(乳白香青总
黄酮提取液 , 含总黄酮 1%;乳白香青煎剂 , 相当于原生药
100%:乳白香青全草注射液 , 相当于原生药 80%, 含吐温-
80 0.05%, 苯甲醇 0.05%)。
2.2 镇咳试验:采用氨自然挥发法 , 即 KM 小鼠用氨自然挥
发法进行实验。在约 5 000 ml的钟罩上口 , 悬挂纸片一条 ,
用0.25 ml注射器滴注 0.2 ml浓氨溶液于纸片上 、塞紧上口 ,
使氨在容器内自然挥发 2 min ,然后迅速放入实验动物 , 以带
塞医用听诊器在容器上口 ,听取小鼠的咳嗽声音 , 以听到典
型的咳嗽声为主 ,张口收腹等反应为参考。首先测得小鼠正
常发生咳嗽反应所需的时间 , 然后经胃 、腹腔给药 , 0.5 h 后
重复上述实验 , 测得给药后小鼠出现咳嗽反应所需要的时
间 ,以实验对照比较 , 作统计学处理。
2.3 祛痰试验:采用酚红排泄法 将试验药溶液按 0.5 ml
20 g的剂量给KM 小鼠灌胃 , 0.5 h 后腹腔注射0.25%酚红溶
液 ,再经 0.5 h 后腹腔注射 5%硫喷妥钠溶液 0.3 ml ~ 0.4 ml
处死 ,然后剖开颈部 、分离气管插入较粗针头于气管内 , 用丝
线结扎固定 ,以 5%碳酸氢钠溶液 1.5 ml分 3次冲洗气管 , 每
次使液体在气管内停留 15 s , 冲洗液合并置于比色玻管中 ,
静置 24 h 与已配好的标准比色管进行比色 , 求出每毫升冲
洗液内酚红的含量。 对照组动物用蒸馏水 0.5 ml/20 g 灌
胃 ,按上述试验过程同样处理。比较两组冲洗液中酚红浓
度 ,作统计学处理。
2.4 平喘试验 采取离体豚鼠气管法。将豚鼠麻醉后 , 取
出完整气管放入气管营养液中 , 剥去外附组织 , 用营养液冲
洗气管管腔 ,将气管两端分别固定在 U 形毛细管(系用 0.1
ml吸管制作)的尖端 , 和 L 形玻璃管上 , L 形玻管接一注射
器 ,内吸有营养液 ,放入盛有 20 ml营养液的浴池中 , 保持气
管有一定的紧张度 , 浴池中保持 37~ 38℃, 并通入氧气 ,将注
射器营养液徐徐注入气管内 , 排除气管内气泡并调节毛细管
液面 , 保持一定水平 , 恒定约 10 min , 可进行试验 , 以连接在
豚鼠气管一端的毛细管液面的升降作为气管平滑肌的收缩
与扩张。
乳白香青制剂对静止气管的直接作用:待浴管内液面相
对稳定后 ,浴管内加入乳白香青制剂 0.08~ 0.2 ml观察液面
无变化 ,结果表明乳白香青对豚鼠气管平滑肌无松弛作用。
乳白香青制剂对抗乙酰胆碱收缩豚鼠气管的作用:浴管
内加入氯化乙酰胆碱 1×10-5约 0.1 ~ 0.2 ml , 使气管发生强
直性收缩。待稳定后加入乳白香青制剂 0.08 ~ 0.2 ml , 观察
液面的下降。以乙酰胆碱引起液面升高的毫米数为 100%,
计算液面下降的百分数 , 即为拮抗率。并以氨茶碱0.6 mg ml
的拮抗率进行比较。液面无变化 , 表明乳白香青制剂无抗乙
酰胆碱收缩豚鼠离体气管的作用。
乳白香青煎剂 、蒸馏液 、黄酮和全草注射液 , 用氨自然挥
发法做 KM小鼠镇咳试验 ,表明有一定的镇咳作用 , KM 小鼠
酚红排泄法实验能促进 KM 小鼠支气管分泌酚红 , 都具有较
明显的祛痰作用。对离体豚鼠气管和肠段标本自动收缩无
抑制作用 ,对抗乙酰胆碱引起平滑肌挛缩无明显作用。提示
乳白香青的主要作用是祛痰 、镇咳 、无明显平喘解痉作用 ,与
临床试用结果基本相符。
〔收稿日期〕2004-04-08