全 文 ：狼毒大戟中杭癌活性成分 O的含量测 定
辽 宁中 医 学院 ( Ho o2 3 )王 玉珍 郭艳玲 刘 佳 芳 刘晓 冬 柒艳苹
提要 : 应用薄层扫描法测定狼毒大戟根及茎叶 中抗癌活性成分 0On o k i ld o i le日 )的含量
为控制药材质量提供依据 , 该法回收率为95 . 5 % , c v % 为 3 . 2 % 。
狼毒大戟佗 u p h o r b i a f i s c 卜e r i a n a s t -
e 。 d
.
)始载于 《神农本草经》 , 各类本草均有
记载 。 近代报道狼毒可治胃癌 、 肝癌 、 肺癌
等 , 其抗癌活性成分为二菇内醋类化合物 O
口o lk i n o li d e B ) , E Oo lk in o l id e A )等 〔 ` 毛狼毒
大戟中二菇内醋化合物含量测定未见报道 。
本文用薄层扫描法测定狼毒大戟根及茎叶中
O 的含量 , 样品液经薄层展开 用5% H Z S O 4
乙醇溶液显色 , 用荧光法测定 , 可大大提
高测量的灵敏度 (1 . 0 火 10 一” g ) 。
1
. 仪器与试药
日本津 岛C S一 920 型薄层扫描仪 , C S
厂一 I A 型超声波清洗器 。 O 对照品 : 本院
中药化学教研室刘佳芳老师提供 , 经高效液
相和薄层层析分离均呈单一组分 。 样品 I ,
11分别为狼毒大戟 (三。 p h o r b sa f is c h e r ia n a
s t e u d ) 的根和茎叶 , 于 19 8 8年初春采集于
辽 阳县草 帽山 ,经本院植物教研室郑大坤副
教授鉴定 。 硅胶 G : 青岛海洋化工厂 。 其余
试剂均为分析纯 。
2
. 实验条件选择
( l ) 薄层 测 试条件 : 薄层板 : 0 . 2 %
C M C一 N a硅胶 G 薄层板 , 厚度约 2 m m ,
10 5
“
C活化 30 m in , 规格 2 0 x ZO c m ; 展开剂
正己烷一丙酮 ( 10 : 3 ) 。 显色 : 以 5 %
H : 5 0 ; 乙醇溶液为显色剂 , 10 0 一 105 “ C加
热 4 m in 。 斑点 O 呈蓝色荧光 。 薄层扫描条
件 : 测定方法 : 荧光法 ; 激光波长 : 义= 3 13
n m
, 发射波长 , = 4 4 o n m ; S x = 3 ; 背景校正
:
O N
。
( 2 ) 线性范 围 : 精密称取 O 对照品
9
.
79 m g, 置 25 lm量瓶 中 , 用乙醇溶解并稀释
至刻度 。 精密吸取该溶液 .1 o ml ,置 50 ml 量瓶
中 , 用乙醇稀释至刻度 ( 7 . s x lo 一 m g/ m lo)
在同一块薄层板上分别点 O 对 照品溶液 1 . 0 ,
2
.
0
,
3
.
0
,
4
.
0
,
5
.
0 2, l
。层析缸下半部贴滤纸
上行展开 9 c m , 显色 , 扫描 , 测吸收度积分
值 ( )A 。 数据经 日本岛津 U v 一 26 5 F w 型 自记
式分光光度计处理 ,绘制标准曲线 。 结果点样
量在 2 . 0 x l 。一 ”一 5 . 0 x 10 “ ” 尽 g范围内呈线性
关 系 , 回归方程为 : C = 2 . 21 3 A 一 6 50 . 3 , 相
关系数 r = 0 . 9 8 。
( 3 ) 稳定性实验 : 准确点 O 对照品溶
液 4 . 0 l/ l , 展开 , 显色后 , 每隔一定时间测
斑点吸收度积分值 A 。结果表明 , 显色后在
0
.
5 一 12 h 稳定 。
( 4 ) 薄层 回 收实验 : 用定量毛细管点
样品溶液 1 3 . 0 月 l , 在样品斑点上再点 O 对
照品溶液 2 . 0 补 l , 在上述条件下展开 、 显色
测积分值 A 。 用随行外标两点法计算回收率 ,
见表 l 。
表 1 薄层回收率测定结果
样品 。 加入量 0 回收量 回收率 平均 回 变异系数
编号 ( , ` g ) ( 卜 g ) ( % ) 收率 ( % ) C V (% z
1 0
.
0 1 56 5 0
.
0 1 35 6 9 8 1
2 0
.
0 1 5 6 5 0 0 1 5 6 8 10 0
.
1
3 0 0 1 5 6 5 0
.
0 1 4 9 1 9 5
.
3 2 98
.
2 2
.
1
4 0
.
0 1 5 6 5 0
.
0 1 5 5 4 9 9
.
3
( 5 ) 加 样 回 收实验 : 取样品 I 约 2 9 ,
精密称定 , 准确加入 O 对照品 , 以下按样品
含量测定项下操作 , 测积分值 ( )A , 计算回
收率 。 实验结果见表 2 。
表 2 加样回收率实验结果
编号 样品原有 D 加入量 测定量 回收率 平均回收 C V
量 ( m g ) ( m g ) ( m g ) ( ,么 ) 率 ( % ) ( % )
1 1
.
5 6 4 2
.
7 0 9 4
.
07 9 9 2
.
9
2 1
.
6 0 0 1
.
6 2 4 3
.
20 8 99
.
0
3 1
.
6 7 5 5 2 0 0 6
.
5 1 0 9 3
.
0 9 5
.
5 3
.
2
_
4 L 574 .2 59 2
_ 一生旦些匕卫互卫 一一— 一3 . 样品测定分别取样品 I 和 n 约 2 9 , 精密称定 ,
置 10 ml 具塞锥形瓶 中 , 加 40 ml 乙醚浸泡过
夜 , 上清液过滤 。 残渣加 40 洲乙醚 , 超声振
荡 0 . 5卜 , 过滤 。 残渣用 30 叫乙醚分 5 次洗
中 成 药
人参花 、 叶挥发油化学成分的研究
马家聪* 汪 捷
丁 适跃 李益杆
一 人参花 、 人参叶中挥发油成分进行了分
人参叶有2 3种化学成分 , 并测定了它们的相对
4
. 测试结果 :
( 1 ) 气相 色谱图 : 人参花挥发油见
图 1 , 人参叶挥发油 见图 2 。
叨;les: : 。、 _ ` _ ( : _ _ _ _刁{山
( 2 ) 质谱鉴 定 :
①人参花挥发油 : 从分离出色谱峰中共
鉴定出 4 5种化学成分 。 见表 1 。
表 1
一髓一.01526.73黔化 学 成 分3 一甲基丁酸甲酷己醛经基乙酸甲酷丙酸异丙酷2 一 庚醛丙酸戊酷2 一戊基吠喃2 , 4 一庚二烯醛3 一 乙基 一 1 , 4 一己二烯 0 · ’ {0 . 1汤撇一467259673084
杭州 第二 中药厂 ( 3 1 0 0 2 3 )
浙 江 省 测试技 术研 究所
提要 : 运用色质联用法 , 对人参地上部分
析研究 。 初步鉴定出人参花有45 种化学成分 ,
含量 。
按传统概念 , 人参制品中应采用人参的
地下部分 , 而不能采用人参花 、 人参茎叶等
人参的地上部分 。 本研究 以测定人参花 、叶挥
发油的化学成分 , 结果可作为检测人参制品
中是否掺杂人参地上部分的一种依据 。
1
. 样品 : 人参花干品 从 吉林 四 平市制
药厂获得 ; 人参叶干品 从吉林 省 药 检所获
得 。
2
. 样品处理 : 称取 20 9 粉碎的样品 `人
参花或人参叶 ) , 置于索氏提取器 中 , 以乙
醚连续提取 24 卜 。 挥干乙醚后 , 得到黄绿色
的油状物 , 再以 l ml 的氯仿 一 甲醇 ( 2 二 l 夕
溶液溶解油状物 , 备用 。
3
. 测试条件 : 仪器 : 美国 曰 n in g a n
M A 丁 8 23 O E / 5 5 3 0 0 。 ( 一 ) 气相条件 : 色
谱柱 O B一 5 ; 柱长 30 m , 直径0 . 25 m m 。
载气 : 氮 ;进样器温度 : 2 7 0 “ C ; 分离器温度 :
27 0
O
C ; 准直进样杆温度 : 25 0 “ C ; 分流比 : 10 二
1 ;进样量 : 。 、 2产 l ;柱温 : 50 “ C (4 。 C / m i n) 呻
2 5 0
O
C ( 1 4 m i
n ) * 2 5 0
“
C
。
质谱条件 : lE : 了。 e v ;发射电流 : 1 m A ;
分辨率 : 10 0 ; 扫描范围 : 3 一 4 0 ( 人参花
挥发油 ) , 3 一 4 50 ( 人参叶挥发油 ) ; 扫描速
率 : 1 5 / t s / 火 10 ;扫描间隔 : 0 . 3 m i n 。
<) 丫 丫义声丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫 买丫 丫丫丫又丫丫丫丫丫 ) 丫军 丫丫 兴丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫丫又 丫丫丫丫丫声冤丫丫丫冰了半丫狱丫丫:《 、
涤 , 再用 10 ml 乙醚洗涤滤纸 。 合并滤液 , 水
浴 回收乙醚至干 。 残渣用氯仿溶解 , 转移至
25 ml 量瓶中 , 加氯仿至刻度 , 摇匀 。 精密量
取 1 m l置 25 ml 量瓶中 ,加氯仿至刻度 , 摇匀 ,
即得样品溶液 I和 H 。准确点样 3 . 0产 l , 并在
同一块薄层板上 点 0 对照品溶液 2 . 0 , 4 . 0
产 ! , 在以上条件下展开 , 显色 , 测定积分值
用随行外标两点法计算含量 。 结果见表 3 。
表 3 样品测定结果
样品 测定次数 平均含量 ( % ) 变异系数
0
.
16 2 3
0
.
0 1 2 1 3
2
.
8 %
1
.
4 %
4
. 讨 论
实验结果表明 , 狼毒大戟根中O 的含量
是茎叶中的 13 倍 , 说明初春时采集狼毒大戟
根 是合理的 。
1 9 9 2年第 14 卷第 4 期