全 文 ：第44卷第4期
2005年4月
农药
Chinese Journal of Pesticides
Vol. 44, No. 4
Apl. 2005
宁南霉素、病毒A、娃儿藤碱对烟草花叶病毒的室内毒力活性测定
逄丽丽，宋宝安，汪华，金林红
（教育部绿色农药与农业生物工程重点实验室，贵州大学精细化工研究开发中心，贵阳 550025）
摘要 采用半叶法测定了宁南霉素、病毒A、娃儿藤碱对TMV的离体、活体的保护、治疗和钝化作用。试验
结果表明，宁南霉素的钝化、保护效果和离体治疗效果较好，抑制率分别为93.24％、67.23％、74.78％，明显
优于其他植物病毒抑制剂。
关键词 宁南霉素，病毒A，娃儿藤碱，烟草花叶病毒
中图分类号：S482.2 文献标识码：A 文章编号：1006-0413(2005)04-176-3
Laboratory Determination of the Toxic Activity of Ningnanmycin, Virus A, and
Antofine Against Tobacco Mosaic Virus
PANG Li-Li, SONG Bao-An, WANG Hua, JIN Lin-Hong
(Green Pesticide and Agricultural Bioengineering Lab, Ministry of Education, Fine Chemicals Research and Development Center,
Guizhou University, Guiyang 550025, China)
Abstract: A half-leaf method was used to determine protective, curative, and inactivation efficacies, both in vivo and
in vitro, of ningnanmycin, virus A, and antofine against tobacco mosaic virus (TMV). Ningnanmycin provided rela-
tively good inactivation and protective activity, and showed good in vitro curative efficacy, with inhibition rates of 93.2, 67.2,
and 74.8%, respectively. Ningnanmycin activity was significantly better than other plant virus inhibitors.
Key words: ningnanmycin, virus A, antofine, tobacco mosaic virus
烟草病毒病是世界各烟草产区普遍发生的一类
重要病害，素有植物癌症之称，也是我国各烟区的重
要病害。近年来，烟草病毒病给烟叶生产造成巨大损
失，成为烟草优质丰产的重要危害。目前使用的现有
药剂如病毒A、植病灵[1] 、井冈霉素A[2]等有一定防
效，但效果并不理想。
近年来对抗植物病毒剂的研究主要集中在合成
化合物和天然物质两大类。合成化合物方面主要有
金属盐类、有机化学物质[ 3 ]、植物激素类、蒽醌类、
杂环类[4]、硫脲类[5]、氨基酸、维生素类[6]等。天然物
质主要包括从高等植物、细菌、真菌等微生物的抗生
素类和培养液[7]、藻类、甚至昆虫等进行了广泛筛选[8]，
这些研究取得了一定成效。本文选择宁南霉素、娃儿
藤碱、病毒A3 种药剂，对TMV进行了离体、活体的
保护、治疗和钝化作用室内生测试验，结果表明宁南
霉素对烟草花叶病毒的防效较好，具有良好的活体
钝化、保护和离体治疗作用，并且有一定的活体治疗
作用。
1 材料和方法
1.1试验材料
1.1.1 供试病毒
烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，TMV），购
于中国科学院武汉病毒研究所。
1.1.2 供试烟草
心叶烟（Nicotiana glutinosa），种子购于中国农
业科学院烟草研究所。
1.1.3 对照药剂
宁南霉素：2％水剂，市售
病毒A：20％可湿性粉剂，市售
娃儿藤碱：南开大学元素有机化学研究所生测
室
1.2试验方法
1.2.1 病毒提纯
采用Gooding方法[9]，选取接种3周以上，TMV
系统侵染寄主Nicotiana glutinosa L.植株上部叶片，
在磷酸缓冲液中匀浆，双层纱布过滤，1000γpm离心，
经2次聚乙二醇处理，再离心，沉淀用磷酸缓冲液悬
浮，即得到TMV的粗提液。整个试验在4℃下进行[10]。
用紫外分光光度计测定260nm波长的吸光度值，根据
公式计算病毒浓度。
收稿日期：2005-02-04
基金项目：国家973计划 (No. 2003CB1144004) ；国家自然科学基金 (No. 20362004) ；国家“十五”攻关项目和贵州省攻关项目。
作者简介：逄丽丽(1980-)，女，在读硕士研究生，主要从事农药生物学研究工作。
通讯作者：宋宝安，E-mail：songbaoan22@yahoo.com
毒性与残留 -
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病毒浓度 (mg/ml)＝(A260×稀释倍数)/E0.1%1cm260nm
其中 E表示消光系数，即波长260nm时，浓度为
0.1% (1mg/ml) 的悬浮液，在光程为1cm时的光吸收 (光
密度) 值。TMV的E0.1%1cm260nm是3.1。
1.2.2 化合物溶液的配制
宁南霉素、娃儿藤碱，病毒A配成各浓度的水
剂，按有效浓度计算。
1.2.3 药剂对TMV侵染的离体治疗作用
用磷酸缓冲液将TMV稀释至6 ×10-3mg/ml，人
工接种于撒有金刚砂 (500目) 的适龄叶片，接种后用
水冲洗接种的叶片。待叶面收干，剪下，沿叶片中脉
对剖，左右半叶分别浸入供试化合物溶液和灭菌水
中，分别代表处理组和空白对照组，30min后取出。置
于适宜温度及光照下保湿培养，3~4d后观察记录发
病情况。
1.2.4 药剂对TMV侵染的活体保护作用
选长势一致的心叶烟，用毛笔轻轻在左半叶涂
施药剂，右半叶涂施灭菌水作对照，12h，待叶片干后，
接种病毒。用毛笔蘸取病毒汁液，浓度为6 ×10-3mg/ml，
人工摩擦接种于撒有金刚砂的叶片上，在叶面 (全叶)
沿其支脉方向轻轻擦1 ~ 2次。叶片下方用手掌或多
层滤纸支撑。接种后用流水 (或洗瓶) 冲洗接种好的
叶片。3~4d后即出现病斑，到病斑容易计数时进行
统计。
1.2.5 药剂对TMV的活体钝化作用
将药剂与等体积的病毒汁液混合钝化30min，摩
擦接种心叶烟左半叶，灭菌水与病毒汁液混合接种
右半叶。3~4d后记录枯斑数。
1.2.6 药剂对TMV侵染的活体治疗作用
选长势一致的心叶烟，先用毛笔蘸取病毒汁液，
全叶接种病毒，接种后用水冲洗。待叶片干后，在左
半叶涂施药剂，右半叶涂施灭菌水作对照。3~4d后记
录枯斑数。
计算抑制率：
处理9片叶，重复3次。由表1可知，在离体条件下，
各浓度处理均对T M V有一定的治疗作用，宁南霉素
500mg/L、250mg/L、娃儿藤碱20mg/L的离体治疗效果
较好，抑制率分别为74.8%、66.7%、66.7%。
表1 药剂对TMV侵染的离体治疗随接作用
其中，未涂施药剂半叶的平均枯斑数和涂施药
剂半叶的平均枯斑数都采用各组3次重复的平均数。
2结果与分析
2.1药剂对TMV侵染的离体治疗随接作用
选取不同浓度对各化合物进行离体治疗随接作
用试验 (病毒A在高浓度下有药害，选取100mg/L)，每
2.2药剂对TMV侵染的活体保护作用
选取不同浓度 (娃儿藤碱高浓度下有药害，选
50mg/L和100mg/L) 对各化合物进行活体保护试验，每
处理3株，每株3片叶，重复3次。由表2可知，宁
南霉素500mg/L活体保护作用较好，可达67.2%。
表2 各药剂对TMV侵染的活体保护作用
2.3药剂对TMV的活体钝化作用
选取不同浓度梯度对各化合物进行活体钝化试
验，每处理3株，每株3片叶，重复3次。由表3可
知，钝化30min，宁南霉素效果最好，500mg/L抑制率
为93.2%，250mg/L的抑制率为86.7%，病毒A 500mg/l的
抑制率为78.7%。
表3 各药剂对TMV的钝化作用
2.4药剂对TMV侵染的活体治疗随接作用
选取100mg/L和500mg/L两个浓度 (娃儿藤碱选
100mg/L)，对各化合物进行活体治疗随接试验，每处
理3株，每株3片叶，重复3次。由表4可知，各药
剂的活体治疗效果均不理想，娃儿藤碱100mg/L的抑
制率为31.7%。
3 结论与讨论
测定结果表明，几种病毒抑制剂对烟草花叶病
逄丽丽，等：宁南霉素、病毒A、娃儿藤碱对烟草花叶病毒的室内毒力活性测定
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毒均有一定的防效，其中，500mg/L浓度下，宁南霉
素活体钝化作用最好，抑制率达93.2%，离体治疗效
果较好，抑制率达74.8%，活体保护作用较好，抑制
率67.2%，病毒A在此浓度下有药害。娃儿藤碱离体
治疗效果较好，20mg/L时抑制率达66.7%，活体治疗
效果在100mg/L时抑制率为31.7%。综上所述，宁南
霉素对烟草花叶病毒的防效最好，具有良好的活体
钝化、保护和离体治疗作用，并且有一定的活体治疗
表4 各药剂对TMV侵染的活体治疗作用
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责任编辑：赵平
作用，是目前较理想的抗植物病毒剂。
参考文献
国可湿性粉剂质量标准，而且部分技术指标已达国际
标准。具备了开发应用的技术保障。
铜基营养杀菌剂既能杀灭植物致病菌又能为植
物提供必要的Fe、Zn等微量营养元素。
室内毒力对比试验表明，本工艺合成生产的铜
基营养杀菌剂对致病真菌辣椒疫霉菌 (Phytophthora
capsici)具有良好的杀菌效果。
该合成工艺结合实际，工序简单、能耗少，成本
低，收率大于85%，环境污染小，经济效益和环境效
益高，具有广阔的开发应用前景。
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责任编辑：陈启辉
表2 铜基营养杀菌剂对辣椒疫霉菌丝的毒力
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