全 文 ：第 9 卷 第 2 期
19 7 7年 6 月
生物化学与生物物理学报
C AT B AI OCH 工 MI C Ae 七B I OP H YS I C AS 工N 工 O A
V o l
.
9
,
N心. 2
J nU e
,
1 9 7 7
抗肿瘤药娃儿藤的实验研究
1
. 抗肿瘤生物碱的化学研究
广西壮族自治区医药研究所
(南 宁 )
摘 要
本文报道了从娃儿藤中分离得抗肿瘤生物碱主要成分娃儿藤宁定 (拟 , 物 lo灿口灯、 似如的及
娃儿藤宁 ( T娜叩ho 而成、 ) 的化学性质与结构的鉴定 , 并对同属植物三分丹 、 通脉丹及通天连的
生物碱进行了初步分析。
一九七二年 , 我所曾将娃儿藤总碱试用于治疗慢性气管炎 , 在亚急性毒性试验时 , 发
现有明显的降低白细胞总数的作用〔1 , 这一现象引起了我们的注意 。
在毛主席革命路线指引下 , 我们坚持医药科学研究为工农兵服务 , 为无产阶级政治服
务的正确方向 , 坚持走与工 农相结合的道路 , 实行工人 、技术人员 、领导干部和科研 、 生产 、
使用两个 “三结合” 。 为了寻找抗肿瘤药物 , 进一步开展了对广西产娃儿藤属植物的化学
成分研究〔 , , 。
萝孽科娃儿藤属植物 , 在广西已发现有 15 种 t ”一 5] 。 本文报告娃儿藤中抗肿瘤有效的
生物碱主要为娃儿藤宁定 (物 Z吧汤 o r 感而 J俪 )及娃儿藤宁 (物乙叩入。: 伽伽的。 并从同属植物
三分丹又名蛇花藤 (望夕乙叩无口仍 时。 `画乙初诩“ 协 M咖 . ) 中也分得二个结晶 , 经熔点 、 薄层层
析 、 紫外光谱 、 红外光谱 、核磁共振谱 、 质谱等鉴定 , 与上述二种成分相一致。 同属植物通脉
丹又名绵毛娃儿藤 ( T . 二嘛s4 么。 a W i沙t) 及通天连又名信宜娃儿藤 (T . 无时 M o r . ) 的总
生物碱 , 与娃儿藤总碱经氧化铝薄层层析法对比 , 显示各有四个相应斑点 , 其比移值也相
似 , 初步认为与娃儿藤中所含生物碱相近 。 以上四种植物 , 除通脉丹仅有报道其予试化学
成分的初步结果外 f 61 , 其余均未见有化学成分的报道 。
一 、 娃儿藤生物碱的提取 、 分离
娃儿藤约 l叩h啊 。时a( iL n id . ) H o k . 眺 歇eu d( 又名三十六荡 ) 全植物粉末用 弱外
乙醇回流提取四次 , 每次 2 小时 , 滤过 , 合并滤液 , 减压 回收乙醇 , 得深绿色稠膏。 将此膏
用 1多盐酸反复捏溶 , 至酸液仅呈微弱的生物碱反应为止。 合并酸液 , 过滤 , 滤液经氨水碱
化至 p H g ~ 10 , 静置 , 滤取析出的生物碱沉淀 , 水洗 , 干燥 。 滤液用氯仿萃取 , 尽量将生物
碱萃取完全 , 回收氯仿 。 氯仿提出物与上述沉淀合并 , 得粗总碱 。 用 乙酸 乙醋反复溶洗 ,
除去脂溶性杂质 , 得黄色粉末状总碱 (得率为原生药 0 . 0 6外) 。 经氧化铝薄层层析 , 用氯
仿 一甲醇 ( 9 : 1) 为展开剂 , 改 良碘化秘钾为显色剂 (以下均同 ) , 显示 4 个生物碱斑点。 经硅
本文 王9 7 6 年 9 月 1 6 日收到。
本文采用简称如下 : D M 8 0 , 二甲基亚讽 ; CM C , 狡甲基纤维素。
生 物化学 与 生物 物 理 学报 9 卷
胶 C MO 板薄层层析 , 用氯仿一甲醇 ( 8 . 8 : 1 . 2 )为展开剂 , 则出现 7 个斑点 , 比移值分别为
0
.
8
、
0
.
82
、
0
.
72
、 0
.肠 、 0 .加 、 0 . 05 、 0 . 0 。 显示其中含多种生物碱 。 因此 , 我们用硅胶
柱层析法进行分离。 取总碱溶于氯仿一甲醇的混合溶剂中 , 加适量硅胶拌匀 , 自然干燥 , 挥
去溶剂 , 装于硅胶柱顶端 (硅胶粒度 10 ~ 1 2 0 目, 1 2 0o C 活化 2 小时 , 柱长 3 7 厘米 , 直径
4
.
5 厘米 ) 。 先后用氯仿和不 同比例的氯仿 、 丙酮 、 甲醇洗脱 。 动0 毫升为一流份 , 按色带
收集之 。 各流份在蒸去溶剂后 , 室温放置 , 先后析出结晶 I 、 且 和结晶 V , 并用硅胶 CM C
板作各流份的薄层层析检查 (见下表 ) 。
一竺- 竺二竺一 {止1 竺鱼二- }一色一二一…李早卜粤卜生一1 壁狙氯 仿 } 1一 ” { 黄 } 油 状 物 }氯 仿 { 往一 “ { 红 棕 ! 细 _ 针 竺 结遏 }氯 仿 } “ 一 24 } 黄 ! 白色针晶 〔结晶 上1) } “ .8 “氯 仿 } “ 5 ~ 27 } 黄 } 混 _ 合 _ 晶 } “ .8 2、 “ .7 氛 “ .6 “氯仿一丙酮 (9 :1 ) } “ 8一 3 0 1 黄 } 白色针晶 (结晶 工) } “ .6 “纂仿一丙酮 (8 : 2) } “ l 一 4 6 { 黄 } 粒状结晶 ( 结晶 v ) }内酮一甲醇 (1 :1 ) ! 吐6 ~ 50 } _ 黄 _ _! 油 _ 竺 _ 些 ! _ ” ·。民 。 · o
将比移值相同部分合井处理 , 经精原细胞法试验 , 结合对 氏so 的抗肿瘤作用 , 作为分
离有效部位或成分的指标。 结果表明氯仿 、 氯仿一丙酮 (9 : 1) 洗脱部位有作用 , 氯仿一丙酮
(8
:
2) 及丙酮丁甲醇 (1 : 1) 洗脱部位无作用 。
从上述流份分得的结晶 I 、 结晶 且 有作用 ; 除去结晶 I 、 且 以外 , 各流份的合并物无
作用 。 因此 , 我们认为结晶 I 、 1 为总碱中抗肿瘤的有效成分。
在分离结晶 n 的同时 , 又从其母液中得黄色针状结晶 IV , 熔点为 2 6 8~ 2 7o0 q 在氯
仿一丙酮 (8 :即洗脱部位得结晶 V , 熔点 24 一 2 4 60 0, 经精原细胞法试验无作用 。
另取总生物碱用 9石界 乙醇处理 , 分成 乙醇可溶及不溶两部分 。 乙醇可溶部分经回收
乙醇后 , 残留物用 王界盐酸溶解 , 过滤 , 滤液氨水碱化 , 放置 , 滤取析出的沉淀 , 干燥 。 经氧
化铝柱层析 , 用氯仿 、 甲醇洗脱 。 氯仿洗脱部分得结晶 I 、 1 。 氯仿一甲醇 ( 9 : 1) 洗脱部位 ,
浓缩后滴加盐酸至酸性 , 放置 , 得结晶 工且 盐酸盐 , 经精原细胞法试验无作用。
二 、 鉴定份
1
. 结晶 I (娃 儿藤宁定 ) 白色片状结晶 , 熔点 2 1 9 ~ 2 2 2 o C (分解 ) , 间护一 1 3 9 . 6 0
(氯仿 , C 一 0 . 8) , 难溶于氯仿 、 苯 、 甲醇 , 不溶于 乙醚 , 氧化铝薄层层析呈单一斑点 , 比移值
.0 肠 。 一 、
元素分析 C : : H , 3 N O 4 · H : O
计 算 值 (另) C 68 . 91 H 6 .熨
实 验 值 (界) C 6 9 . 1 9 ; 69 . 2 0 E 6 . 55 ; 6 . 4 3
紫外光谱嘿冷王2石8 , 2 8 7 , 3 1 2 , 3 4 1 , 3 6 8 毫微米 ( l吧 。 4 . 8 0 , 4 . 4 3 , 3 . 9 3 , 3 . 4 1 , 2 . 7 2 )。
显示与 2 , 3 , 尽三氧取代菲环结构的紫外光谱相似 。 加碱后偏移至 肠8 , 2 98 , 334 , 3良 ,
370 毫微米 , 说明有酚经基团。 红外光谱 ,欲 3 3 0 0~ 3 4 0 0 〔厘米 j 一 1 (宽阔 , 一 OH ) ; 1 6 1石,
1 52 5
,
1印8 【厘米〕一 1 (芳香骨架 ) 。 乙酞化后在 1 7 6 0 , 1 73 0 〔厘米〕一 l 出现两条淡基吸收 , 相
. 熔点系用显微熔点仪测得 , 未经校正 。 部分元素分析由中国医学科学院药物研究所代测 。
2 期 抗肿瘤药娃儿藤的实验研究 1 . 1 3
.应一个为酚经基 , 一个为醇经基的 乙酞衍生物的吸收 。
用质谱峰匹配法测定分子量 M 十一 365 . 1盯 , 仇: H幼N O ` 计算值 万~ 3 6 5 . 163 。
质谱峰 (二加) 及裂解程序如下 (括号内为相对丰度 , , 号表示经过 “直接子离子分析
法 ”数据处理确证 ) :
: , 二氢毗咯环 , l一 醇一 :夺 - - - 环上甲氧基一 {一邻甲氧基一 {一 2 6 7 ( 8 )
2 96 ( 1 0 ) 一 2 6 8 (5)浙
一 1 5 _ 一 2 8
}宁 “ 泌 “脚丫
1 一 3 0
、一 2 3 8 ( 3 )一 1 5 一 2 8 一 2 8一 2 8 1 ( 8 )一 2 5 3 ( 8 )一一
1 5 一 8 …-
!
“
!
5 (工。 ’了 名 l。 (一 : 、 2 ( 7,
`一` 环上鸭基一 :一 醇一沪 , ~ 一 1 5气 厂 于划 一一一》、— 一 ’ C H 3 尊为环上甲氧基及邻一甲氧基苯酚环的共同裂解特征)、 夕、 J
结晶 工的核磁共振谱 `见表 刀说明有两个甲氧基必 3 . 93 , 单峰 , 6 H ) , 五个芳香质子
( 6 7
.
12 ~ 8
.
1 4 )
。 由于 DM SO - d 6 中的 D M S住d 。 和水峰的影响 , 在 占2 . 6 ~ 3 . 6 处看不 出
其他质子信号 。 结晶 I 乙酞化后溶于 C D CI : 中的核磁共振谱则在 占2 . 4 3 , 2 . 1石处出现两
条乙酸基质子的信号 , 可相应指定为酚经基及醇经基的 乙酞衍生物 。
质谱基峰 。 / 。 2 9 6 是 由分子离子断裂一个二氢毗咯分子产生的 , 根据 已知文献 7[ , 8]
中关于同属植物生物碱的记载 , 可 以确定结晶 工具有菲骄叫噪叻院的骨架 :
断裂的 。 e/ 69 二氢毗咯中不含 OH 基 , 如果分子在断裂时没有特殊的重排反应的话
ù产O心ó尸ōO
+
肚
|
.
人ù决乡2入I e OZ H O ZM e oZH O 〕
+ō|l|J
l3招
M
+ 饥 / e 3 6 5 裕 /巴 2 9 6
(看来不会有 ) , 则醇经基必定处于 。 e/ 29 6 这一半边 , 红外光谱及核磁谱均证实结晶 I 的
两个经基中有一个是醇经基 , 那么 , 醇经基可能位于 9一 或 1-4 位 。
结晶 I 二 乙酞化物的核磁谱中可以看到一组 a 3 . 69 , 4 . 76 的 A B 四重峰 J 一场H凡
两个质子 , 必为一个次 甲基 。 还有一组 占6 . 64 二重峰 J ~ ZH z , 一个质子 , 是一个亚 甲基。
次甲基的化学位移及 A B 自旋系统的图形 ,
合适 (、 、 N铭
, 二 、 。 , * 二二 _ 、 / , * 、 、 。 。 。 ,
I仁沁 七沁 /李 叮 H护 7 一目 尹 几’ 岁凡 一二、 \ 叮目 店上 习文 日妙 、 J一 。 只 J于 K
占值应为 3 . 32 、 3 . 82 ) 。 而亚甲基是二重峰 , 推定和 C一1a3 H 相偶
合是可以成立的。 结晶 工及其乙酞化合物的核磁共振谱 (均为 DM S-o d。 溶剂时 ) 进行比
较 , C一1 4 亚甲基质子 占4 . 80 乙酞化后移至品 .良 (一 1 . 7盛p Pm )也说明经基在 乙酞化后对
C一华 亚甲基质子直接产生影响 , 因此醇经基系位于 0 一1决而不在五元环或 C一9 位上 。
3 1 4生物 化学 与 生物物 理学报 9卷
. . . . . . . .~
-
` . . . . . . . . . .` 叫 . . .
弓因此结晶 I 的结构应为 :
Z Me O
表 l 核 磁 共 振 谱
晶 工
(D MS O
一裔)
晶 工 二 乙 酞 化 合 物 晶 工工乙酸化合物
.
l
l
to
ù
e
l
l .
e s
月月…e s一 3一入 J尹 OU(CD Cl s) (D MS O一璐) 晶 1 1(D C C3 1) (OD C 13)
8
·
14 (d
,
J g )
7
.
1 2 (妃 , J g , 2 )
7
.
7 8 (己, J Z )
7
.
9 8 (约
7
.
1 4 ( s)
7
.
7 5 (d
,
J g)
7
.
2 5 (面 , J g , 2 )
8
.
0 8 (d
,
J Z)
1 5
.
6盛(夕 )
7
.连3 ( s )
3 54
,
4
.
7 3
(A B g
,
J 1 6 )
8
.
3 3 d(
,
J g )
7
.
1 9 ( d d
,
J g
,
7
.
7 1 (尽, J Z )
7
.
6 0 (
s
)
6
.
3 7 (
:
)
ù土n口4SQéO曰C0O
C一 1 3 a
C一 1 4
O M O
4
·
8 0住 , 宽 )
3
.
9 3 (
s , 6 )H
7
.
8 4 (d
,
J g )
7
.
1 9 (由 , J g , 2 . 5 )
7
.
8 2 (d
,
J 2
.
5 )
8
.
2 4 (
,
)
7
.
26 (
s
)
3
.
5 9
,
4
.
7 5
(
之组刀 9 , 刀 5 )
~ 3
.
5 0 (。 )
6 6 4 (几 J Z )
盛 . 0 1 ( s , 6H )
6
·
5 4 (比 J Z )
3
.
9 8 (
夕 , 6H )
3
.
1 4
,
3
.
4 6
(』石9 , J 1 6 )
~ 5
.
2 3 (饥 )
怪. 9 1 (夕, 宽 )
4
.
0 6
,
4
.
0 0
,
3
.
(各 3H )
O A e 2
.
4 3
,
2
.
15 2
.
3 6
,
2
.
0 6
7
.
8 6 娜 , J g )
7
.
2盛 (翻 , J g , 2 )
7
.
8 8 ( d
,
J Z )
7
.
9 0 (
s
)
7
.
1 7 (S )
3
.
5 9
, 盛. 7 5
(A B g
,
J 1 5 )
~ 3
.
5 0 (仍 )
6
.
6 7 ( d
,
J Z )
4
.
0 8
,
4
.
0 3
,
3
.
9 7
(各 3 H )
2
.
1 0 恤)
还有三个取代基 (2 M创9一 , H -O )联结在芳环上 , 和剩余五个芳香质子一起 , 刚好等于
芳环上的空位 。
五个芳环质子中 , 有二个是尖锐的单峰 , (占7 . 98 , 7 . 14) (或偶合常数甚小 ) , 说 明有一
个芳环上只留有对位的二个质子 , 可能为 1 , 今或 石, 于两种配置 。 另外三个相互配合的
质子 ( a 8 . 1 4 , 7 . 1 2 , 7 . 7 8 ) 从偶合常数判断 , 质子可能位于 1 , 2 , 4一 , 1 , 3 , 4一 , 石, 6 , 卜 ,
5
,
7
,
8一四种配置 , 即三个取代基只有 以下四种定位方式 :
O H
从同一溶剂 (D M S O一日中结晶 工和二乙酞化合物的核磁共振谱进行比较 , 五个芳环
质子的化学位移中 , 有三个在变化前后是相对稳定的 : 占7 . 12 (d ) 。 7 . 2 5 ( d心 (一 0 . 13
p Pm ) ; a 7
.
7 8 ( d ) ” 8 . 0 8 ( d ) (一 0 . 3 0即m ) ; 占7 . 1 4 伪)” 7 . 4 3伽) ( 一 0 . 2 9 P pm ) 。 而有二
个质子数据变化较大 , 即 a s , 1 4 ( d , J = 9 )。 7 .肠但 , J = 9 ) (+ 0 . 39 PP间 和 占7 . 9 8 (g ) ”
2 期 抗肿瘤药娃儿藤的实验研究 工
8
.
4 6(s ) (一 O
.
6p P 6m )
。 这种变化的原 因只能是 乙酞化的影响 。
占8 . 14 的质子 (必有一个邻位质子 , J ~ 9) 在以上四种结构中只有 I 式可以解析 C吐4
经基 乙酞化后对 C一 1 产生的屏蔽影响。如果设另一变化较大的 占7 . 98 0 8 . 64 质子为 C-1
(即工1 , V1 式 ) , 则 乙酞化对 C书 或 C一8 质子没有理 由产生 + o . 3 9 p p m 的屏蔽影响 , 所
以 I 式是可以成立的 , 也符合了紫外光谱的推断 (与 2 , 3 , 6一三氧取代菲环相似的结构 ) 。
占7 . 98 单峰受乙酞化后的移位 , 说明酚经基有可能位于尽 或 卜位两个对位质子 。 无
论在结晶 I ,或二 乙酞化合物中 , 有一个始终处于较 “正常” 的数据必为 7 · 14 , 7 · 2 6) 。 一
般说处于芳环 “海湾” (菲环 的 4 , 5 位 )位置的质子去屏蔽影响特强 , 占值不会处于这样的
正常的高场 , 因此结晶 I 中 占7 . 1 4 质子为 C一 S H , 而 占7 . 98 为 C一S H 。 由于酚经基 乙酞
化后发生的影响 , 使 C巧 质子的 8 值有较大的变化 , 所以经基应处于 6一位 , 3 , 7一位即为
甲氧基。 结晶 工 (娃儿藤宁定 )的结构式为 :
H刃 O \ 八、咕粼
} l 入 ,
_ 几八八 /
H .O 丫
O C H s
这个式子和 .G vo i n d a hc ar 户 ,修正的 匆乙叩h 。 : 伽记沁 结构一致 , 各项物理常数也基本
一致 。 只是结晶 I 的核磁共振谱 (D M S〕 d 6 为溶剂 )的 C一1 和 G S 质子的化学位移和 文
献口〕值有所差别 。 我们测得 C一 I H占值为 8 . 14 , 偏低 0 . 14 P Pm , C一S H 我们测得 占值为
7
.
14
, 偏低 0 .印 P m (文献 7[ 〕相对应为韶 . 0 和 6 .肠) 。 而二 乙酞衍生物的 6 值又和文
献甚为一致 , 必定存在和 匆 IOphO 而耐d俪不 同的因素才会产生这种变化 。 文献 7[ , 8〕作
者认为 匆乙叩几时初赫d初叨 从分子结构模型上看 , 无论 C一14 OH 或氮上孤立电子对对 C一 H
均不会产生影响 。 但如 C一 1 3 : H 和 C一 14 O H 方向相反 , 均为直立配置时 , 一个分子的
C一14 0 H 可以和另一分子的氮原子生成氢键联结成二聚体 , 两分子的 C一 I H 相互去 屏
蔽 , C一S H 相互屏蔽 , 因此 C` I H 和 C一S H 的化学位移对溶剂是敏感的 (影响氢键生成 ) ,
结晶 I 虽然经过用通常的方法干燥 , 但红外光谱和核磁谱中仍有强烈的水峰 , 经元素分析
证实含有一分子结晶水 。 结晶水的存在 , 必然影响上述氢键二聚体的形成 , C一 I H 的低场
共振可能是和 C吐 4 O H 接近的缘故 9[J 。 当 C一14 O H 乙酸化后 , 去屏蔽影响即大为减低。
C一S H 在结晶 I 及二 乙酸化合物中均由于氮原子和水分子结合生成氢键 , 而不存在文献
所述 匆乙p灿。而耐d沁 的二聚体 , 所以比较接近于正常值 。
2
. 结晶 I 的盐酸盐 取结晶 1 10 0 毫克 , 加 甲醇 10 毫升加热溶解 , 滴加浓盐酸 (比
重 1 . 14 ) 0 . 1 毫升 , 放冷 , 析出白色固体 , 用氯仿一甲醇重结晶 , 呈白色针状结晶 , 熔点
24 ~ 2 4 6
o
C (分解 ) 。
元素分析 C : , H , 3N O 4 · H C I
计 算 值 (界 ) C 65 . 8 6
实 验 值 (多 ) C 6 5 . 3 3 ; 6 5 . 1 2
H 6
.
O3
H 6
.
1 3
C I 8
.
70
5
.
9 3 C 1 8
.
54
; 8
. 石7
生物化 学 与 生物物 理学报 9 卷
3
.结晶 I的苦味酸盐 取结晶 1 10 毫克 , 加甲醇 1 0 毫升加热溶解 , 然后缓缓滴
加苦味酸一甲醇饱和溶液至不再产生沉淀为止 , 放置过夜。 滤集析出物 , 用丙酮一甲醇重结
晶 , 得黄色针状结晶 , 熔点 2 2 2 ~ 2 2 4 o C (分解 ) 。
元素分析 C , : 百 : 3 N O 4 · C 6 H : 0 7凡
计 算 值 (多 ) C 石6石5 H 4 . 2 5
实 验 值 (界) 0 6 6 . 4 8 ; 5 6 , 2 5 H 4 . 1 9 ; 4 . 4 3
4
. 结晶 I 的二 乙 酞化合物 取结晶 1 10 0 毫克 , 加毗咤 2 毫升 , 醋配 2 毫升 , 在
7 0 ~ so oC 水浴上加热 2 小时 , 然后减压蒸干 , 残留物先用少量 甲醇洗涤 , 继用二氯甲烷一
甲醇重结晶二次 , 得白色针状结晶 , 熔点 1 93 ~ 1 9夕O (分解 ) , 紫外光谱 入撇不旧 2石5 , 2 73 ,
2 8 7
,
3 1 2
,
3 3 7
,
3良 毫微米 (1馆 5 4 . 6 6 , 4 . 4 8 , 4 . 3 4 , 3 . 8 1 , 3 . 3 1 , 3 . 2 1 ) 。 红外光谱 嵘轰
17 60
,
17 24 (醚键 ) , 161 6 , 1斑6( 芳香环 ) , 12 4D (乙酞基 ) 。 用质谱峰匹配法测得分子量
万 + 一 4 9 . 17 4 , 仇: 且二N O 4 · ZC H aC O 计算值 M 一 4 4 9 . 1 8 。 以上性质与文献 7[ 」所载娃儿
藤宁定的二 乙酞化合物相一致 。
6
. 结晶 1 (娃 儿藤宁 ) 白色或淡黄色短柱状结晶 , 熔点 24 7 ~ 24 o8 C (分解 ) 。 可
溶于氯仿 、 热苯 , 难溶于甲醇 、 乙醇 、 乙醚 , 〔司 .15 5士 0o (氯仿 , C ~ 0 . 8 25) , 氧化铝薄层
层析比移值 0 . 89 , 硅胶 CM C 板薄层层析比移值 0 . 82 。
紫外光谱 入黑且 2 58 , 2 8 6 , 3 4 0 毫微米 ( l呛 5 4 . 6 8 , 4 . 4 , 2 . 8 2 ) 。 与娃儿藤宁定很相
似 , 但加碱不偏移 。 红外光谱中 3 1印~ 32 印 〔厘米〕一 1宽阔的 O H 吸收经乙酞化后 , 只有
一条拨基吸收 1 72 0 【厘米〕一王 , 位于脂醇醋位置 , 也证明不含酚经基而有几一个醇经基 。
结晶 n 质谱峰的断裂程序如下 :
耻蜂基 。 l一 仁鸭基一环毗氢二咯令 3…一{
:
月卜
- 一
一 2 8 , 一 1 5 _ _ 一 2 8 一 1 8
2勺7 (5 ) 一、 今 2誉9 ( 4 ) 飞 》 “ 艺4 `1 1 )一 1 9 6性 )一 1 7 8 ( 4)25 2 (3 )
2 9 5 ( 1 0 )
耻释基一 !一醇一 :(卡号表示经过 “直接子离子分析法” 数据处理确证)断裂程序和结晶 I 极相似 , 提示为菲骄叫噪叻咤骨架 , 有一个叔醇基 , 最后 2 39 ” 2 4 斗
19 6 0 1 7 8 是芳环上邻位二甲氧基取代的断裂方式 。
核磁共振谱 (见表 l) 有三个甲氧基信号 , 和质谱裂解结果一致 。 由子芳环质子仍为
五个 , 而且不含酚经基 , 从质谱 M +。 /。 379 和结晶 I 的 万 + 。 e/ 3日5 比较 , 可以假设酚经
基由另一 甲氧基所取代 。
五个芳环上质子的 占值和结晶 I 很接近 , 因此三个甲氧基应处于 3 , 6 , -7 位 , 韶 . 14 ,
3
.
4 6 A B 四重峰 ( J 一 1 6 ) , 应为 0刁 的两个质子 , 8 4 . 91 宽峰为 0一 4 质子 (乙酞化后
C一14 质子受淡基负屏蔽作用 占值移至 6 . 67 , 0以 质子向高场移至 占7 . 86 , 同时 出 现
2 期 抗肿瘤药娃儿藤的实验研究 I
加 . 1 0两个质子的 乙酞质子峰 , 确证只有一个经基 ) 。 此外在 占~ 3 . 23 处的复峰可以指定
为 C e 1 3 a H (与 C吐4 , C一13 的质子相偶合 ) 。
6
, 结晶 n 的 乙酞化合物 取结晶 1 10 毫克 , 加毗咤 2 毫升 , 醋配 2 毫升 , 在
70 ~ 80 ℃ 水浴上加热 1 小时 , 减压蒸干后 , 先用少量 甲醇洗涤 , 再用苯一石油醚重结晶二
次 , 得白色针状结晶 , 熔点 2 2 ~ 2 23o C (分解) , 用质谱峰匹配法测得分子量万十 ~ 421 . 1 9 2 ,
C那H , N O咬 . C瓦 C O 计算值 M 一 42 1 . 18 90
根据以上数据 , 确认结晶 1 为娃儿藤宁 (物 l叩 h o r感耐哪 ) 。
F ao / 丫
O C H 3
7
. 结晶 m 为黄色针状生物碱盐酸盐结晶 , 熔点 2 30 0 (分解 , 21 宁C 时熔融 ) ,
可溶于热甲醇 、 乙醇及水 , 对生物碱试剂呈阳性反应 。 氧化铝薄层层析呈现单一斑点 , 比
移值 0 . 6 2 ; 硅胶 CM C 板薄层层析比移值 0 . 2 5 。
8
. 结晶 VI 黄色针晶 , 熔点 2 68 ~ 27 0o C , 可溶于热氯仿 、 丙酮 、 乙酸 乙醋 、 无水 乙
醇 ,不溶于酸或碱液中 , 对生物碱试剂无反应 。
9
. 结晶 V 白色颗粒状结晶 , 熔点 2 4 4 ~ 2 46o C , 微溶于氯仿 、 易溶于热氯仿 、 乙酸
乙醋 、 丙酮 、 甲醇 , 不溶于苯 , 对生物碱试剂呈阳性反应 , 硅胶 C M C 板薄层层析比移值
0
.
50
。
在实践中我们发现上述几种生物碱 , 不论是在层析分离或重结晶的过程中 , 特别是以
氯仿为溶剂 , 并经阳光照射时 , 极易转变成黄色 , 同时发生化学变化 。 变化后的产物经硅
胶 C M C 板检查 , 以娃儿藤宁定及娃儿藤宁为例 , 由原来单一斑点 , 演变成 3 ~ 4 个斑点 ,
而且比移值较原有斑点为低。 如下图所示 :
0
. 仍
,
0 0
.
0 5
0 0
.
3 4
0 0
.
84
3
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、 。 _
4君’ L脚 · 07 0 0 · 15
0 0
·
4 8
0 0
·
4 8
1一娃儿藤宁定 ; 召一娃儿藤宁定的分解产物 ; 3一 娃儿藤宁 ; 4一娃儿藤宁的分解产物
这类生物碱容易变质 , 给分离和鉴定工作带来一定的困难 , 而且变质后的总碱对小鼠
6L 1 6 的实验不显效 , 因此在操作中应快速 , 避光 , 即可防止变化 。 或将游离碱制成盐 , 则
性质较稳定 。
娃儿藤生物碱对皮肤及粘膜均有较强的刺激性 , 能引起痒痛 、 发肿或溃烂 , 因此要尽
量避免直接接触 。
1 38 生物 化 学 与 生物物 理学 报 9卷
根据药理试验结果 , 我们曾将娃儿藤总碱制成注射剂 ,在临床上试用于治疗各种类型
白血病共 印 例 。 单用组部分缓解率为 43 . 7多 , 并用激素组缓解率为 67 . 7多 , 说明总碱是
一种有效的抗白血病药物 。
参 考 文 献
〔 1 〕 广西壮族自治区医药研究所 : 三十六荡洽疗老年慢性气管炎的实验研究和临床观察。 1 972 (未发表资料 ) 。
〔 2 〕 广西壮族自治区医药研究所 : 74 36 抗肿瘤的化学成分研究 。 19 74 (未发表资料) 。
〔 3 〕 广西壮族自治区植物研究所 : 广 西植物名 录。 1 9 71 (未发表资料 ) 。
〔 4 〕 中国科学院北京植物研究所主编 : 中 国高等植物 图鉴 , 第三册 。 19 74 , 51 3 , 科学出版社。
[ 5 〕 蒋英、 李秉滔 : 中国萝拳科植 物志预报 , 十二 , 娃儿藤属 。 1 9 7 4 , 12 , 1 , 1 3 7 。
[ 6 ] K
a r n i e k C
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1 9 7 5
,
2 7
,
4
,
3 3 3
.
[ 7 〕 G o v i n d ac h a ir T . R . 的 a l . T e t r a h叭 r o n 1 97 3 , 2 9 , 8 9 1 .
[ 8 〕 P h il isP o n J . D . 眺 a l . 尸 at 耐a 卫讼d化 a 1 9 74 , 2 5 , 3 0 1 .〔 9 〕 万滋。 . K . V . J . 孙a : ” 委, S ` 1 1 9 7。 , 5 . , 1 6 0 8
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