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强心内酯在毛洋地黄和黄花毛地黄中的生物转化和贮藏



全 文 :国外医药 · 植物药分册 1 99 0年第 5卷第 5期
条件下培养仅 6天 , 邵可恢复生物合成能
力 .
这一 系统已被用于研究强心内醋合成中
可能的关键步骤 , 如胆固醉的侧链断裂及孕
酮的转化 . 用 〔’ `C 〕 标记的底物进行活体培
养 , 通过装备有放射性的液流检测器的高压
液相色谱仪鉴定产物的形成 . 发现胆固醇不
是一种好的底物 , 培养 10 天后仅有 8% 被转
化 , 而孕酮仅需 4 天即可转化为几种孕烷 、
孕烷贰或强心内酚 .
最近作者就强心 内醋转化的细胞组织方
面对毛洋地黄和黄花毛地黄进行了比较 , 结
果证明 , 除强心内酪的生物转化外 , 它的吸
收和贮藏过程还受这些细胞培养物 中存在的
一组强心内酚修饰酶的影响 .
3 3 0 强心内酷在毛洋地黄和黄花毛地黄
中的生物转化和贮藏 / K r ic s w … (联邦德
国 ) , p 6 6 9
在最近发表的有关强心 内酷生物转化的
酶和细胞结构的论文中 , 作者研究 了毛洋地
黄的细胞悬浮培养物中初生及次生强心俄及
有关强心内酷如萄糖基转移酶在亚细胞水平
上的定位 . 同时在离体细胞中还证明有另外
三种比较特异性的强心内酷酶 .
1
. 从毛洋地黄悬浮培养物中制备的部分
纯化 的提取物 , 显示出较高的毛花洋地黄贰
的水解活性 . 具有活性的酶是毛花洋地黄成
15 二 o 一 乙酞酪酶 , 位于 细胞壁 上 , 可 用
0
.
1 m o l / L 柠檬酸钠缓冲液 ( p H 6 . 0 ) 溶
出 .
2
. 其逆反应 , 即非乙酞化强心内醋转化
为相应的 1 5七。一乙酞化衍生物 、 是由乙酞辅
酶 A 依赖型乙酸转移酶催化的 , 此酶存在于
由培养的黄花毛地黄细胞制备的非细胞提取
物中 .
3
. 作者从毛地黄属各个 “种 ’ 植物的叶中
分 离 到 强 心 内醋特 异 性 葡萄 精 水解 酶
( d i g i l a n id a s e
,
d ig ip u r p id a s e )
. 这些 酶与膜
的结合力很强 , 只有用含去污剂的缓冲液才
能将其溶出 . 与在体内 、 体外都测不到这种
水解酶活性的毛洋地黄细胞培养物相反 , 在
D i ig t a l i s h e y w o o d i i 细 胞悬 浮培养液中 , 此
酶的活性是很高的 ( 1 0 0一 2 0 0 料k a t / k g 蛋
白质 ) .
一 2 3 6一
3 31 参与萝芙木生物碱类生物合成的膜
结合酶 ; 1 .连接柯楠类生物碱和蛇根碱 / 阿
马林的酶 / S e hm id t D… (联邦德国 ) , p 6 6 9
在 最 近 几 年 I下刁, 蛇 根 木 ( R a u w o l行a
sc 印“ n it “ a ) 细胞悬浮培养物己被成功地用于
阐明 aj m al a n 和 sa 巾 a g a n 类生物碱的生物合
成途径 , 合成这些生物碱的所有步骤几乎都
已清楚 , 而 且有关酶 也已 鉴定 . 但迄今为
止 , 在 其关键性 中昨.J产物 s t r i s t o s id i n e 脱葡
萄 糖 后 , 参 与 s a rP a g a n 生 物碱聚 精 胺 醛
(p o ly n c u r id in e a ld e h y d e ) 合成的机制和酶还
不 清 楚 , 而 且 , 在 低 p H 值 下 , 将
s t r i e t o s id i n e 与蛇根木的可溶性酶粗提取物和
N A D P H 一 起培养 , 合成 的产物分 别 为
h e te r o y o h im b i n e 类 生 物 碱 如 t e t r a h y一
d r o a ls t o n i n e
,
a如 a l i c i n e , l卜表阿马林和柯
楠类生物碱 gc i s o sc hi jinc , 在细胞培养系中
所有这些反应产物仅为痕量 . 在不 同条件
下 , 从 s t r ic t o s id i n e 开始用可溶性酶在非 细
胞 水 平 进 行 合 `成 没 有 发 现 任 : 何
s a r p a g a n / a如 a l a n 类生物碱的合成 .
本 文报道作者成功地用 s tr ic ot is d icn 作
底物在萝芙木植物细胞的微粒体部分完成了
s a r p a g a n 类生物碱的非细胞酶合成 .
本文讨论该酶反应机制的几种模型和酶
的性 质 , 其中包括被一种细胞色素一 P一 4 50
型酶催化的脂族经基化 . 完整的酶测定系统
是 由 s t r i e t o s id i n e 、 微粒体蛋白 、 酶粗提取
物 、 N A D P H 组 成 的 , 它 涉 及 到
s t r ie t o s id i n e 的去葡萄糖基化和合成聚精胺醛
的未知中问体 C S / C 16 键的形成 . 此中间体
醛经酷水解和 N A D P H 依赖性还原后生成一
种 sar p a g a n 生物碱 , 此生物碱已通过混合色
谱 , 合成衍生物 , 质谱和 ’ 3 c N M R 谱得到证