全 文 ：. 成分化学 ·
J L种贝母中总生物碱和西贝素的含量测定
陕西省药检所 沙振方 孙文基 苑 伟 *张登科价 *
贝母系止咳化痰药 , 生物碱是其主要成分 t l ]。 、咖
贝母类的总生物碱以西贝素含量为最高 〔 3 1。 本文对原
产于新疆而栽培于太白县的不同品种的贝母及野生木
白贝母 , 用两相滴定法测定了总生物碱的含量 , 用博
层扫描法测定了西贝素的含量 , 对考察贝母的内在质
量建立了分析方法 。
OO
实验部分
仪器及材朴
, 岛津 C s一93 。型双波长薄层扫描仪 , 微量定蚤毛 ,
细曾 ( D r u m m o n d科 学 公 司 , U S A ) , 西 贝素
( SI eP im i n 。 ) 对照 品 , 新疆药物研究 所 李芳桂同志 、
赠送 。栽培贝母样品 : 伊贝母 ( F r i t i l l a r i a p a ll i d i f l or `
s o h r e n k
.
)
, 黄花贝母 ( F . v e r e i e sn a t a w jl l d . ) 必
新级贝母 ( F . w a l u j ew i i R e g e l ) , 直花贝母 (F 。
o 18 a e V ed )
. 乌恰贝母 ( F . f e r g a n e n s二s A 。 LOg . ) ,
博乐贝母 ( F . b O l e n s i s C h a n g . e t L i u ) , 野生 贝母
释品 : 太白贝母 ( F . t a i p a i e n s i s p . Y . L i ) 。 以上 样
品均由太白县药材公司提供 , 西北大学张淑贤同志鉴
定原植物。 其它试剂均为分析纯 。
、 一 、 总生物碱的侧定
取干澡后的贝母材料粗粉 ( 过 40 目筛 ) 约 29,
精密称定 , 置 50 m l 具塞三 角 瓶中 , 以 Zm l氨水湿润后 , 加 3oml 混合溶媒 (乙醚 : 氯仿 : 乙醇 二 : 5 : 8 ` 2才5 )丁
室温浸泡过夜即可提取完全 〔, , 。 精密吸取上清展加功l
置试管中 , 水浴燕干 , 准确加入 10 iln 氯仿使其完龚溶
解 , 再准确取 1叫置小型分液漏斗中 , 加 l 。叹 _叙仿`
2 m l级冲溶液 ( 0 . 2M 邻苯二甲酸氢钾 2 5 m l , 0 . 2M N乒o H
1 1
.
8m3 l棍匀 , P H 二 5 . 0 ) , 用 0 . 0 1M 澳鳃香草珍蓝
溶液滴定。 接近终点时 , 分出氯仿层 , 再新加 入 : 5也 l
抓仿 , 滴定至水层显黄色即可 , 按下式计 算 总毕.物
碱 , 结果见表 2 。 ’ ·
1
. 薄层板制备 : 硅胶 O ( 10 ~ 切 林 m , 青岛海洋
化工厂 ) , 加 0 . 5 % CM C一 N a 水溶液调浆 , 涂布器铺
板 , 厚度约 。 . 25 m m , 白然干燥 后于 105 “ C 活化 1 小
时 , 置干燥器中备用 。
2
。 展开剂 : 乙 酸 乙醋一甲醉一氨水 ( 2 0 , 1 , 1 ) 。
3
. 显色 : 将展开后的薄板挥去溶剂 , 用自动 喷
雾器 ( 岛津 A P V一 1 型 ) 均匀喷以改良碘化秘钾显色
荆 , . 俊斑点清楚后 , 用干净玻瑞板盖其表面 , 以胶布
将玻板四周封严 , 层析结果如图 1 。
勺 O
曲 . 0 心 勃 0 6
O
0 Q
O 勺
0 0 0
. 一 `一卜一一闷卜一一书
2 3 4 5 6 7
图 1 不同贝母缤茎总生物喊 T cL 口徽
1
. 西 贝素 时 照 品 1 。
3
。 新疆 贝毋 4 . 直花贝毋
贝毋 7 。 太 白贝毋
三 、 扫描条件的选择
黄 花 贝 毋 2 . 伊贝毋
5
. 乌恰 贝 毋 6 . 博乐
, 截含奋黔丝簇丝 、 10心积 口砚 /” 一 W
N : 澳醉香章珊蓝溶液浓度 ( M )
V : 消耗浪脚香草酚蓝溶液体积 ( m l)
M
: 西贝素分子量 4 29
W
: 实际取样量 ( g )
二 、 样品薄层层析
1
.参数设定
(1 ) 测定波长的选择 : 对西贝素薄层显色后的斑
点 , 进行反射法光谱测定, 结果如图 2 。
选用 5 0 5 n m 为测定波长 , 6。。n m 为 参 比波长 ,
以双波长锯齿扫描法测定。
(2 ) 微机处理参数 : 线性化 因 子 S X = 3 , 横坐
标 x l / 2 , 纵坐标 x s , 最小峰面积 5 0 0 , 具背景 校正
功能 。
.西安医科大学药学斌实习 .生 , . “ 大白县药材公司工作。
中药材第n 卷第 1期 1 9 8 8 年 1月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1988. 01. 020
由于直线未过原点 , 所以样品按两点 法 , 以 I D
键输入 2 吨 / sP ot 和 4 砰g / sP ot 两个斑点 量 , 计算 出
F
:和 F ,值 , 最后直接标出含量 。
4
。 回收率和重复性试验
于薄板上点 5 协 1样 品溶液 , 再各 加入不同t 的
对照品溶液 , 展层显色后扫描测定 , 结果如表 1 。
、 衰 1
, 尸曰~ ` ~ ~ ~ ~ -一 ~一一 . .乙 QO 户月 西贝素加入量 (协g) 西贝素测定量 (“ ) { 回收率 (% )
洲960` .人心乙 J“ ó丹O26J工b圈 2 西贝讼斑点显色后的光姗口
.2 显色稳定性考察
将星色后薄板上西贝素斑点 , 按上述条件进行色
谱法扫描测定 , 以面积值为纵坐标 , 时间为横坐标 ,
结果如图 3 。
7
平 均
将五年生伊贝母鳞茎总碱溶液 10 川点于薄板上 四
点 , 对同一斑点测定 5次 ( 2 06 3 20 , 2 05 0 16 2 1 2 2 22 ,
2 19 06 3
,
2 09 40 0 )
, 变异系数 CV = 2 . 4 % , 对四个斑
点分别侧得峰面积值 ( 230 4 5 , 2 15 5 4 , 2 25 9 3 , 22 327 ) ,
求其四个月班点扫描的变异系数 C v = 4 . 。% 。
四 、 样品洲定及结果
对原产于新疆而栽培于太白县的不同品种的贝母
实生苗样品和野生太白贝母样品 , 按上述条件 , 以外
标两点法测得西贝素含量 , 结果见表 2 。
表 2 样品中总生物碱和西 贝众的洲定结果
小时
圈 3 显色后往定性考案
由图 3 可见 , 显色后放置 2 小 时即可侧定`
3
. 工作曲线
取西贝素乙醇溶液 ( l m g / m l ) 不同 量 点于薄层
板上 , 按上述条件扫描测定 , 结果如图 4
进鱼兰竺一…鲤竺三兰二{四呸丝些一乙~
、 黄花贝母 { “
· ` o ` ” · 0 7 ,
i
” · 0 9`。 · “
.0
3 ,
伊里母 { 。 · “ (。 · 。g , 1 。· 0“ 禾检 出 ,新姆贝母 } 0一 2 6 ( 0 . 1 0 ) } 0 . 0 4 ( 0 . 0 1 )
^ 减 工Q`
直花贝母
乌恰贝母
博乐贝母
太白贝母
一年生伊贝母
二年生伊贝母
三年生伊贝母
四年生伊贝母
五年生伊贝母
0
。
2 5 ( 0
。
1 5 )
0
。
2 1 ( 0
。
0 7 )
0
。
2 5 ( 0
.
0 2 )
0
。
1 0
0
。
1 8 ( 0
。
1 5 )
0
。
1 4 ( 0
。
1 5 )
0
。
1 5 ( 0
。
1 9 )
0
。
1 2 ( 0
。
1 2 )
0
。
1 4
0
.
0 1 (未检出 )
0
。
0 7 ( 0
。
0 0 4 )
0
。
07 ( 0
。
0 1 )
0
。
07
0
.
06 (未检出 )
0
.
02 (未检出 )
O
。
02 (未检出 )
0
。
05 ( O
。
0 2 )
0
.
04
/ 鳍俩介占 - ~一
4
注 括号外含盈 , 样品系瞬茎 , 括号内含 t , 样品系
枝叶 .
讨 论
口 4 西贝索班色后的工作曲钱
; 肠卜
. 产于新福的贝母 , 其药材商品常统 作伊贝母
中药材第 11卷第 李期 工 , 8 8年 未尽
出售 , 这些商品伊贝母中 , 总生物碱以新疆贝母为最
高 , 黄花贝母最低 ; 西贝素含量以乌恰贝母为最高 ,
直花贝母为最低 ; 产于太白县的太白贝母 , 总碱含量
与黄花贝母相近 , 西贝素含量高于伊贝母品种的近一
倍。
2
. 栽培于太白县的伊贝母品种 , 其总 碱 以一年
生为最高 , 四年生最低 , 西贝素含量仍以一年生为最
高 , 四年 、 五年生其次 。 一年生虽然含量较高但产量
最低 , 故仍以 4一 5年采收为最好 。
3
。 产于新孤不同品种 的贝 母 , 地上部分西贝素
的含量远低于鳞茎 , 有的地上部分未能检出西贝素 ,
说明鳞茎是西贝素这个次生物质的存贮器官 。
4
. 街体生物碱经碘化秘钾显色后 , 用薄层 扫描
法测定 , 简单易行 , 准确度高 。
今 考 文 献
〔 z 〕 张秀琴等 : 中草 药 通 讯 , 2 , 1 3 , 1 9 7 6
〔2〕 章育中等 : 药 学 学 报 , 9 , 5 4 1 , 1 9 6 2
〔 3〕 江苏新医学院 : 中药大辞典 , 上海科技出版
社 , 2 25页 , 1 98 5
山鸡椒根中胡萝 卜贰的分离鉴定
广州医药工 业研究所 陈凤庭 葛发欢 谢丽华 潘志馨
山鸡椒 [L i t s e a e ub eb a (功 u r . )p e r s . 〕又名山苍子 、
豆豉姜 , 系樟科木姜子属植物。 根茎叶果均可入药 ,
性温味辛 , 中医用以祛风散寒 、 理气止痛 [ ` ]。 对冠心
病 、 气管炎均有一定的治疗效果2[ · 3 J 。 近年 来 , 经药
理 、 临床证明 , 山鸡根有抑制血栓形成的作用。
山鸡椒果实 、 种子 、 叶的化学成分国内外早已有文
献报道 “ 、匀 。 但山鸡椒根的化学成分尚未见 报道 。 为
此 , 我们对根部化学成分进行初步研究 , 从乙醚提取
物中得到一白色结晶性粉末 (C : ) , 经物理 、 化学及四
大光谱鉴定为胡萝 卜贰 ( D a uc o st er ol ) 。该成分系首次
从山鸡椒根中分离到 。
实脸部分
实验材料取自湖南桂东 , 经鉴定为山鸡椒〔L针s ea
e ub e b a (oL
u r
.
) P e r s
. 〕的根 , 秋季采集 。
实验所用熔点测定仪为 P e kr i n · E lm e r D T A 一 1犷。。
热分析仪 , 熔点未经校正 。 紫外 用 B e ck m a n C o D U
S B光谱仪 。红外用F T一 I R N i e o l七t C o S D X 光谱仪 。
质谱用V G z A B H S G C一M S质谱仪 `核磁共振用封义
90 Q
一 J E O L核磁共振仪。 硅胶为青岛海洋 化 工 厂 生
产 。 展开剂 : 醋酸 : 水 : 正丁醉 ( 1 : 5 : 4 ) , 显
色剂 : 茵香醛 、 苯胺邻苯二甲酸盐 。
一 、 山娜椒根化攀成分的提取分离
取山鸡椒根粗粉 , 用乙酸回流二次 ( 6 、 4小时) ,
乙醚液放置即析出结晶 , 回收乙醚至一定体积 , 又析
出结晶 , 合并两次结晶 , 用一定比例的甲醇 、 氯仿重
结晶得C : , 收率约 0 . 05 ~ 。 . 1 % 。
二 、 结舀 C : 的鉴定
取结晶C :用一定比例的甲醇 、 氯仿溶解后作菌体
母核的鉴别反应 。 L i e b e r m a n n 一 B u r e h a r d 反应成正反
应 , S a l k o w s k i反应成正 反应。 取 C , 0 . 1 2 4 3 9 加 5 % 乙
醉盐酸液 40 m l , 置于 1 0 0℃的水液上煮沸 10 小时 , 减
压回收乙醇 , 加水稀释 , 加入乙醚反 复 萃 取 , 得 乙
醚和水溶性两部分 。 屯 乙醚部分用水洗至中性 , 水溶液
加碱调至中性 。 取水溶性部分进行M ol i hs 反应 , 结果
反应成阳性 。 将乙醚部分 、 水溶性部分分别与标准的
日一谷菌醇 、 葡萄糖进行薄层层析 , 结果显示相同的
层析行为 。 取水溶性部分与标准的葡萄 糖 进 行 纸层
析 , 也显示一致的层析结果 。
结晶c 、的m · p : 3 ` 2 · 7℃ , 〔a 〕否= 一 4 8 · 3 ` c =
0
.
0 1 9
, n比吮 ) , 元素分析测定值 : C , , 2 . ` 。 H ; : 。 . 。。
u v 、 m a x n m : 2 1 0 ; I R v 黑二e m 一 , : 3 4。。 , : 9 2 5 一
2 96 0
,
1峨5 0一 1 4 5 1 , 1 3 5 1~ 1 3 5 2 , 1 03 0~ 2 0 60 , 与文
献一致〔` 1 ; M S 一E l m / z ( 相对强度 ) : 4 1 4 ( 1 8 ) , 3 96
(砧 ) , 3 8 2 ( 5 7 ) , 3 2 9 ( 1 0 ) , 2 3 1 <1 0 ) , 1 0 7 ( 2 5 ) , 8 5
( 25 )
, 6 9 ( 4 5 )
,
5 5 ( 7 9 )
,
4 3 ( 1 0 0 )
,
4 1 ( 8 9 ) , M S一
F A B : 5 7 6 (M
+
4 0 )
,
4 1 4 ( 6 0 ) , 分子 式 : C 3 : H 6。 0 。 ,
, 3CN M R一 D E P T谱 6 P Pm : 二 C H a ( 1 2 . 0 8 0 , 1 2 . 2 4 3 ,
1 2
。
2 4 3 , 1 9
.
4 4 8
,
1 9
.
4 4 8
,
1 9
.
93 6 )
,
) C氏 ( 2 1 。 4 5 3 ,
3 3
。
7 2 8
,
24
。
5 9 4
,
2 7
。
0 8 7
,
2 8
。
4 95
,
30
.
3 3 7
,
3 2
。
2 88
-
3 4
。
5 6 3
,
37
。
705
,
39
.
4 9 3
,
4 0
.
4 5 1
,
6 3
.
1 1 3 ) 一 C H
中药材第 n 卷第 1期 1 9 8 8 年 1月
( 29
。
95 8
,
3 2
。
3 4 2
,
3 6
。
4 0 5
,
4 5
。
4 2 7
,
5 0
。
7 0 7
,
5 6
。
6 6 6
,
5 7
。
15 4
,
7 2
。
0 5 2
,
7 5
。
1 9 4
,
7 7
。
9 0 2
,
7 8
.
4 1
·
1
,
7 8
。
6 0 7
,
1 0 2
。石60 , 1 2 1 。 7 8 4 ) 。
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·
3 7
-