全 文 ：化学与 生物 工程 2 0 0 4 年第 2 期
雀稗麦角菌产麦角碱发酵条件的优化
刘志国 ,王亚林 ,赵静国 ,熊万斌 ,王 柳 . 吴次容 , 汤叶青 , 俞盈盈
(武汉工业 学院生物与化学工程系 ,湖北 武汉 43 0 23 )
摘 要 :研究了雀稗麦 角菌产麦角碱发酵条件 。 通过正交实验确 定 了影响雀稗麦角菌产碱的主要因素为色获酸 ,共
次是琉角酸胺 , 进一步用单因素分析方法探讨了各影响 因素的浓度与产碱爹之间 的 关 系 , 确 定 了较为理 想的发酵条件 ,
即 : 色氛酸 0 . 1% 、 甘落 醇 10 % 、 琉角酸胺 4 % 、 M g SO ; · 7 H 2 0 0 . 02 5% , 用氛水调 p H S . 2 , 于 24 ~ 26 ℃ , 使用 二级种子摇
瓶发酵培养 , 经 n 一 13 d 培养 , 平均产碱率为 58 . 6 m g · L 一 ’ 。
关键词 :雀稗麦角菌 ;麦角碱 ;发酵
中圈分类号 : R 9 8 4 文献标识码 : A , 文章编号 : 1 6 7 2一 5 4 2 5 ( 2 0 0 4 ) 0 2 一 0 0 1 8一 0 4
1 前言
麦角菌属于真菌门 、子囊菌亚门 、 核菌纲 、 球菌目 、
麦角菌科 、 麦角菌属 。 该菌寄生在黑麦 、小麦 、燕麦 、鹅
冠草等禾本科植物的子房内 ,将子房变为菌核 ,形状如
同麦粒 ,故称之为麦角 lj[ 。 麦角菌属 ( lC a vi c eP : ) 真菌
多达 40 余种 ,最常见的有黑麦麦角菌 ( C . P u rP u ear ) 、
雀稗麦角菌 ( C . aP sP al i ) 、拂子麦角菌 ( C . m ic or c e Ph a -
la )和 C . fu s ifo r m : 等 。 它们的产碱类型有差 异 : .C
aP
s
aP il 和 C , fu s ifo r m : 等主要 产生结构简单 的棒状
麦角衍生物 ( 如麦角酞胺 ) , C , P u rP u er “ 能产生结构
复杂的麦角肤碱阁 。
麦角碱类药物主要用于治疗神经内分泌 、 脑血管
系统疾病以及用于子宫收缩〔3」。 几个世纪 以前 ,麦角
浸出物就被用于治疗妇科产后出血 。 而麦角的科学研
究始于上世纪初 , 1 9 18 年 tS al l 分离 出第一个纯麦角
碱— 麦角酞胺 。 到 19 3 5 年 , D ud dl cy 又发现 了第二个有生物活性的麦角碱 , 即麦角新碱 。 迄今为止 ,在人
们发现的所有天然麦角碱中仅有麦角酞胺 、 麦角新碱
直接用于临床 。 而其它的有临床价值的麦角碱都是经
过化学改造的麦角碱衍生物 4j[ 。
因野生麦角产量不足 ,并受到 自然条件的限制 , 因
此 ,麦角碱的生产主要依赖发酵技术 。 近几十年来 , 国
外科研人员不断在菌种 的选育 、 发酵技术及培养条件
等方面进行了大量研究 , 取得了很 多成果 , 并用于生
产〔5一 7〕 。 国内也有利用麦角菌发酵生产麦角酞胺 、麦
角新碱和麦角隐亭的报道 〔“一 ` ’ 〕 ,但由于研究工作不够
深入 , 麦角碱产率低 ,生产成本高 , 无法用于生产 。 至
今 , 国内的麦角碱类药物仍然依赖进 口 。 为了研究麦
角菌产碱的规律 ,提高产碱率 ,作者以雀稗麦角菌为研
究对象 ,系统研究了影响麦角菌产碱发酵的各种因素 ,
并对发酵条件进行优化 , 为发酵生产麦角碱类药物莫
定基础 。
2 材料与方法
2
.
1 材料
雀稗麦角菌 3 1 02 , 由国外收集 , 武汉工业学院生
化室保存 。 实验用试剂均采用国产分析纯试剂 。
斜面培养基 去皮马铃薯 3 0 9 切块煮沸 。 . s h
过滤 ,加琼脂 20 9 、 葡萄糖 20 9 , 加水至 10 0 0 m L , p H
5
.
2
。
液体种 子 培养基 甘露 醇 4% 、 貌 拍酸 1% 、
K H
Z
P O
; 0
.
1%
、 豌 豆 粉 0 . 1% 、 M g s O 4 · 7 H Z O
0
.
0 3写 ,用氨水调 p H 为 5 . 2 。
发酵培养基 甘 露醇 10 % 、 琉拍酸 3% 、 色氨酸
0
.
0 2%
、
K H
Z
P O
4 0
.
1%
、
M g SO
; · 7 H
:
0 0
.
0 3%
, 用
氨水调 p H 5 . 2 。 该培养基为发酵基础培养基 ,单个组
分研究在此基础上变化 。
2
.
2 方法
2
.
2
.
1 培养方法
取适量斜面培养基于 20 m L 试管中 , 灭菌后放成
斜面 , 接种后于 25 ℃培养箱中培养 7 d 。 种子培养时
荃金项目 : 湖北省教育厅科研资助项 目 ( 20 2 A 01 0 9)
收稿 日期 : 2 0 0 4 一 0 2一 0 9
作者简介 : 刘志 国 ( 1 9 6 3一 ) , 男 , 武汉市人 , 副教授 , 生物 工程实验 室主任 , 主要从事受体结 构与性 能的研究及 生物 药物研究 。 : h ig
u o l iu @ w h P
u
.
e d u
.
e n 。
2 0 0 4 年第2 期 刘 志国等 :雀稗麦角菌产麦角碱发酵条件的优化
从斜面培养基中铲取菌苔 ,加水研磨 ,用吸管接人液体
种子培养基中 , 2 4一 2 6℃ , 1 6 0 一 1 8 o r · m i n 一 ` 摇瓶振
荡培养 4 ~ s d , 菌丝体呈直径 5 ~ 8 m m 的白色小绒球
状 ,且菌液较稠 ,作为一级种子 。 一级种子按 10 % (体
积比 ) 接种量接种 到液体培养基中继续振荡培养 Z d
作为二级种 子 。 发 酵培养用 二级种 子 以 10 % ( 体积
比 ) 的接种量接人发酵培养基 中 2 4 ~ 2 6 OC , 1 6 0一 1 8 o r
·
m i n
一 ’ 振摇培养 1 0一 1 3 d 。
2
.
2
.
2 麦角碱含量的测定
发酵液 中麦角总碱含量采 用 V a n U kr 颜色反应
法测定 l[ 〕 :发酵菌液离心 ,取上清液 1 m L ,加 2 m L 的
V an U kr 试剂 ,室温下静置 4 h , 于 5 50 n m 波长下测
定吸光度值 ; 以麦角酞胺标准物配制标准系列 (1 m g ·
L
一 ` 、
3 m g
·
L
一 ’ 、 s m g
·
L
一 ` 、
l o m g
·
L
一 `
)按上述同
样方法检测并绘制标准曲线 。
2
.
2
.
3 正交实验
根据有关文献 ,选择 以下 7 个因素 3 个水平进行
正交实验 , 各因素水平列于表 1 中 。
表 2
T a b
。
2
lL
: 《3 , ) 7 因紊 3 水平正 交实验
Th e e x p er im比 t . l fO la t in s q u aer L : : ( 3 , )
实验号 A B C D E F G 麦角碱含量
表 1 7 因宋 3 水平正交实验分组表
T a b
.
1 T h e 既 Pe r lm e n t a l g r o u PS o f l a t i n s q u a er L , 。《3 7 )
因索 1 2 3
A 碳薄 /纬 甘露醇 15 甘露醉 10 山梨醇 7
B 瑰拍酸加氨水 /写 1 3 5
C F勺 5 0 ; /% 0 . 0 0 5 0 . 00 1 0 . 0 0 3
D 卜色氨酸 /% 。 . 。 。 . 05 0 . 1
E M g S O
4
·
7 H Z O /% 0
.
0 5 0
.
0 0
.
1
F K H Z P O; / % 0
.
0 1 0
.
0 3 0
.
0 5
G P H 5
.
2 4
.
4 6
.
0
K 3 1 1 3
.
8 13 9
.
6 10 8
.
4 1 7 9
.
9 12 9
.
6 10 3
.
8 9 10 2
.
99
k 1 1 8
.
6 6
.
1 6 1 9
.
0 5 2
,
8 1 1 7
.
8 1 1 7
.
75 1 9
.
2
k 2 18 18
.
76 1 7
.
0 5 2 1
.
7 14
.
4 3 1 8
.
8 1 7 4 8
k
:
19 2 3
.
2 7 1 8
.
0 6 2 9
.
9 8 2 1
.
3 1 7
.
3 1 1 7 16
R 1 17
.
11 2 2 7
.
8 6
.
8 7 1
.
0 5 1
.
7 2
050503221
乙·。写-如禅暇翻
3 结果
3
.
1 7 因素 3 水平正交实验
正交实验结果见表 2 。
由 R 值可见 ,在选定的浓度范围内影响产碱量的
最主要因素为色氨酸 , 其次是琉拍酸胺 。 根据正交实
验初步确定 的较好 条件为 : 色氨酸 0 . 1% 、 珑 拍酸胺
5%
,其它因素在选定的水平差别不大 。 为了进一步确
定各因素在不同水平对麦角菌发酵的影响 , 并确定最
佳发酵条件 , 以下进行 了单因素的分析 。
3
.
2 培养基中色氮酸浓度对麦角菌产碱的影响
选择不同色氨酸浓度 ,发酵培养 n d ,取发酵液检
测 ,结果如图 1所示 。
0
,
0 2 0
.
0 4
色氮酸 /%
0
.
0 6 0
.
0 8
图 1 色氮酸浓度对麦角菌产碱 t 的影晌
F lg
.
1 T h e er l a t io n be t w e
e n th e e o n ce n tar t ion o f t r y P t o Ph a he
叨d t恤呱皿 n t o f e r g o t a lk a l孟P r od u ct fo n
由图 1 可见 ,麦角菌产碱量随色氨酸浓度升高而
增加 ,但当色氨酸浓度升高到 0 . 04 % 以上时 ,产碱量
趋于平稳 , 呈现出饱和曲线的特点 。
3
.
3 唬拍酸浓度对麦角菌产碱的影响
在发酵培养基 中添加不同浓度唬拍酸 , 其它条件
刘志国等 :雀稗麦角菌产麦角碱发酵条件的优化 2 0 0 4 年第 2 期
相同 。 发酵培养 nd , 取发酵液检测 , 结果如 图 2 所
示 。
05032准1
,二·O写-如彼喇落
0 1 2 3 4 6 8
珑拍酸浓度%/
图 2 琉拍酸浓度对麦角菌产碱的影响
F .g
.
2 T h e r e la it o n b
e t w e e n t h e co n ce n t
r a t ion
o
f
s u e e i n am i d
e
. n d t h e
am
o u n t o f e r go t a l k a l正 Por d o e t io n
由图 2 可见 , 瑰拍酸浓度对麦角菌产碱有显著影
响 ,相对来讲 ,墟拍酸浓度升高 ,产碱量也缓慢升高 。
3
.
4 磷酸盐浓度对产碱的影响
发酵培养基中添加磷酸二氢钾 ,发酵培养 n d ,取
发酵液检测 ,结果如图 3 所示 。
0 0
.
0 1 0
.
0 2 0
.
0 3 0
.
0 4 0
.
0 5 0 1
磷酸二氮钾浓度瓜
图 3 磷酸二氮钾浓度对产碱的影响
F lg
.
3 T he r e l a t io n be tw e e n ht e e o n ce n t r a ti o n o f P o t as i
u m
d i h y d r o罗 n Ph as p h a t e an d t h e 咖o u n t Of e r g o t a l k a li P r od u e ti o n
由图 3 可见 ,磷酸二氢钾对产碱有负面影响 ,这主
要是其中磷的影响 ,低磷发酵明显有利于麦角菌产碱 ,
这与文献报道的一致 。
3
.
5 亚铁离子与镁离子浓度对产碱的影响
采用硫酸亚铁提供亚铁离子 ,实验 中 , 浓度为 。%
~ 8%的硫酸亚铁浓度对产碱无明显影响 。 同样添加
硫酸镁 。肠~ 8 %浓度范围于发酵液中对产碱的影 响
不明显 。
3
.
6 不同 p H 对产碱的影响
实验中检测 p H 4 ~ 6 条件下 的产碱情况 , 结果表
明 ,在此 p H 范 围内产碱量 呈正态分布 , 最适 p H 为
5
.
2
。
4 讨论
M ot he
s 等利用同位素标记的 D , 卜色氨酸 的方法
首次证明色氨酸参与了麦角碱的生物合成 。 这一初步
观察后来得到了进一步的证实 。 现在知道色氨酸既是
麦角碱生物合成的前体物 ,也是合成的诱导物 ,对产碱
影响很大 。 实验表明色氨酸是影响产碱量的最主要因
素之一 ,且成正相关 。 如不添加色氨酸 ,产碱量很低 。
麦角菌产碱发酵时 ,氮源的选择有多种 ,本实验选
择效果较好的珑拍 酸加氨水的方式 10[ 〕 。 正交实验与
单因素实验均发现琉泊酸浓度对产碱有明显影响 , 随
着琉拍酸浓度的增加 ,产碱量逐渐增加 。
文献报道 〔 ` 2〕 ,无磷或低磷会限制糖的利用及菌丝
体的生长 ,并促进麦角碱的合成 。 本实验也观察到低
磷对麦角碱合成的促进作用 , 当磷酸二氢钾浓度低于
0
.
01 % 时 ,产碱明显升高 。
麦角菌可以利用多种碳源 ,对照试验表明 : 葡萄糖
和蔗糖作碳源时 , 麦角菌生长不良 , 而以甘露醇或山梨
醇作碳源 ,菌体生长 良好 。 山梨醇浓度一般选用 7% ,
甘露醇一般选用 10 肠~ 17 环 。 作者比较了 10 % 、 15 绒
的甘露醇和 7% 的山梨醇对产碱的影响 , 结果表明三
者之间几无差别 , 考虑价格 因素 , 本实验选择 10 % 的
甘露醇作为碳源 。
铁离子 、镁离子和 p H 也都是可能影响产碱的重
要条件 。 在本实验结果选用浓度范 围内 , 二价铁离子
与镁离子对产碱的影响也不明显 。 p H 的影响基本呈
正态分布 ,最适 p H 为 5 . 2 ,与文献报道的一致 ls[ 〕 。
根据上述结果及分析 , 本实验确定了麦角菌产碱
发酵的较理想条件为 : 色氨酸 0 . 1% 、 唬拍酸胺 4% 、 甘
露醇 1 0环 、 K H : P O ; o % 、 M g SO 4 · 7 H Z O 0 . 0 2 5 % ,用
氨水调 p H 5 . 2 , 在此条件下摇瓶发酵培养 lC “ 沉肥户、
户a s户a zi 3 10 2 ,经 1 1一 1 3 d 培养 ,二级种子发酵液中麦
角碱含量平均可达 58 . 6 m g · L 一 ’ 。
参考文献 :
仁z〕 刘家熙 . 麦角菌〔J」. 生物学通报 , 19 9 7 , 32 ( 4 ) : 1 7 .
〔幻 朱平 . 麦角生物碱生物合成研究进展〔J] . 药学学报 , 2 00 , 3 5 ( 8) :
6 3 0
一
6 3 4
-
〔3〕 何惹霞 ,朱平 ,等 . 麦角碱的类型 , 药理活性及临床应用〔J〕. 中国
药学杂志 , 1 9 9 2 , 2 7 ( 4 ) : 1 9 8一 20 1 .
〔4〕 M u k h e rj e 。 J . M e n g e M . P r o g r e s s a n d p or s p e e t s o f e馆 o t a l k a lo id
r e s e a r e h
. 仁J〕 A d y 肠 o e h e m E n g Bi o t e e h n o l , 2 00 0 , 6 8 : l 一2 0 .
[ 5〕 R i e ie o v a A , F lie g e r M , R e h a e e k 2 . Q u a n t i t a t i v e e h a n g e s o f t h e
a lk a lo id c o m p le x i n a : u bm e r g e d e u l t u r e o f C l a饭 c e sP 加 saP z: [ J〕.
F o l i a M i
e r o b i o l
,
19 8 2
,
2 7 ( 6 )
: 4 3 3
一
4 4 5
.
[ 6〕 oB i e h e n k o L v , 氏 i e h e n k o D M , V i n o k u r o v a N G , R e s h e t i lo v a T
A
,
A r in b a s a r o
v
M U
.
U s e o f 即 ly m e r a s e e h a i n r e a e t i o n fo r
s e a r e h i n g fo r P r o d u e e r s o f e r g o t a lk a lo id s f r o m a m o n g m ie r o s e o p i e
f u n g i[ J〕. M i e r o bio l o g y , 2 00 1 , 7 0 ( s ) : 36 0一3 6 4 .
005432
月,
l二·口写-如禅暇翻
2 0 0 4 年第 2 期 刘 志 国等 :雀稗麦角菌产麦角碱发酵条件的优化 2 1
ǐ I J门es门1.
9曰峨且1r lL Jes
〔 7〕 M e ng e M , M u k h e rj e e J , S e h e p e r T . A p p li e a t i o n o f o x y g e n v e e -
t o r s t o C za 。 。 e P: P u rP o r e a C u l t i v a t i o n 仁J〕. A p p l M i e r o b io l B i o -
t e e h n o l
,
20 0 1
,
5 5 ( 4 )
: 4 1 1
一4 1 6
.
「8〕 朱平 , 王全 , 朱慧新 , 何慧霞 . s o m L 管摇床培养 暨 24 孔板法筛
选麦角菌突变株〔J」. 微生物通报 , 2 0 0 0 , 2 7 ( 3 ) : 1 9 2一 29 4 ,
仁9〕 岳德超 ,杨云鹏 , 等 . 麦角酞胺生物合成研究仁J ] . 中 国医学 科学院
学报 , 1 9 8 3 , 5 ( 4 ) : 2 5 9一 2 6 1 .
〔10 〕 何慧艘 ,岳德超 , 等 . 深层 发酵技 术生产麦 角酞胺的研究 〔J〕 . 中
〔1 3〕
药及天然药物 , 1 9 9 2 , 2 7 ( 9 ) : 5 2 3一 5 2 5 .
袁萍 , 杨庆尧 . 麦角隐亭产生菌的营养条件〔J〕. 南京师范大学学
报 , 1 99 6 , 1 9 ( 3 ) : 6 3一6 8 .
K o b e r s J E
, e t a l
.
P h y s i o l o g i e a l s t u d i e s o n e r g o t
,
f u r t h e r s t u d i e s
o n t h e in d u e t i o n b y p h o s p h a t e 〔 J〕 . J o u r n a l o f B a e t e r i o l o g y ,
1 9 7 2
, 1 1 2 ( 2 )
: 7 9 1
一 7 9 6
.
冯慧琴 , 钱秀萍 , 杨庆尧 . p H 对麦角菌产麦角隐亭的影响仁J」.
上海 师范大学学报 ( 自然科学版 ) , 19 9 6 , 2 5 ( 3 ) : 7 3一7 7 .
l h e Q tP 初吐劝ilt on of R洲” 组 t o 犯d l t10 n fo r 曰a l触料 卫七斗舰 il to P找日. 笼 D即 t A 压al i
L r U Zh卜g 幻 , 胡A NG Y份 lin , Z H AO J i啥多幻 , X ION G 叭初卜悦n , 切八N G U u , V匹 J住 n闻g扩r AN G Y卜q ign 八刃 y加 g 扣魂
(块如 r t m e n t of B i o t e ch n o l`唱夕 a n d hC e m 艺c a l E n g i n e e r i n g , W 况h a n oP ly t e c h n i c U刀 i v e sr i yt , W u h a n 4 3 0 0 2 3 , hC i n a )
A b s t r ac t
:
T h e p a p e r s t u d i e d f e r m e n t e o n d i t i o n o f C l a v i c e P S P a s P a l泛 t o P r o d u e i n g e r g o t a lk a l i . T h e m a i n f a e -
t o r s w h i e h a f f e e t e d e r g o t a l k a l i p r o d u e t i o n w e r e t
r y p t o p h a n e a n d s u e e i n a m i d e b y t h e m e t h o d o f la t in s q u a r e
L
一s
( 3
?
)
.
S i n g l e f a e t o r t e s t w a s f u r t h e r u s e d t o a n a l y z i n g t h e r u le o f e r g o t a lk a l i p r o d u e t i o n
.
T h e i d e a l in e u b a
-
t i o n 。 o n d i t i o n w a s d e t e r m i n e d a s f o l l o w i n g : t r y p t o p h a n e 0
.
1%
,
m a n n i t o l 10 写 , s u e e i n a m id e 4% , M g S O魂 ,
7 H Z O 0
.
0 2 5肠 , p H 5 . 2 a d iu s t e d w i t h a rn m o n i a , 2 4 ~ 2 6 oC i n s h a k e f l a s k s f o r 1 1一 1 3 d . T h e a v e r a g e 。 o n t e n t o f
e r g o t a l k a l i w a s 5 8
.
6 m g
·
L
一 ’ u n d e r a b o v e e o n d i t i o n
.
K e yw
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:
C la v i c eP s aP
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; e r g o t a lk a l i ; f e r m e n t a t io n
搞好 “ 两评 ” ,将石油和化工行业信息化提升到一个新水平
— 庆祝石油和化工信息事业创建 45 周年
为庆祝 石油和化工信息事业创建 4 5 周年 , 把 石 油和化工行业信息化提升到一 个新水平 , 2 0 0 4 年 2 月 中旬 , 中国石 油和化学工
业协会作为主办单位 , 委托中国化工信息中心 和 中国化工情报信息协会承办 , 连续发 出了关于开展 第五 届全 国石 油和化工行 业优
秀信息成果评选和第二 次全国石 油和 化工行 业优秀信息工作者评选的通知 , 简称“ 两评 ” 。
随着计算机的广 泛应用和 互联网的迅速普及 , 以信 ,息化带动工 业化 , 以人 为本 . 走新型工业化之路 已成为振兴我国经济必由之
路 。 “ 有路没有车 , 有车没有货 , 有货不会用 ” ; “ 信 ,息产品质量较低 , 服务水平 较差 , 人 员素质不 高” , 已成为制约信息化的 “ 瓶 颈 ” 。
因此 , 搞好“ 两评 ” ,对于提高行业信息化水平 , 具有重大而 深远 的意义 。
本届优秀信息成果评 比 , 共分情报调研 、 论文著作 、信息技术 、 会议 展览和 影视 作 品等五 大类 , 其中会议展 览和影视 、 著作等是
历届评比未曾设置的新类别 。 各类成果的起 止时 限也根据实 际情况作 了不 同规定 。 如论文类的起 止 时限为 2 0 02 年 1 月 1 日至
2 0 0 4 年 5 月 3 1 日 ;会议展览的起止时限为 1 9 9 0 年 1 月 1 日 至 2 0 0 4 年 5 月 3 1 日 。
本次优秀信 息人 员评选也与上次有所不 同 。 通知规定“ 1 990 年 1 月 1 日 至 2 0 0 4 年 5 月 31 日期 间 , 在全国石 油和 化工行 业所
属或相关的企业 、 事业 、 科研设计院所 、 大专院校 、 社会团体或行政机关从事信息研 究与咨询 、 刊物编辑出版发行 、 计算机及其网络
应用开发 、 统计 、 文献图书资料管理 、 会展影视 等业务满 3 年 (含 3 年 ) 以上的工作人 员或管理 人 员 ; 其它 与信息工作相关的人 员 , 皆
有资格参评 。 ” 此规定可使更多的信息工作者有资格加入评选的行列 , 但又对 工作年 限做 了适 当限制 。 拟授予的荣誉称号 , 也不局
限于 “ 优秀信息工作者 ” 一 项 , 而是扩大到优秀信息工作者 、 管理 、撰稿人和从业者等 , 做到 了“ 不拘一 格选人才 ” , 能使从李不 同信息
岗位的人都有可 能获得相应荣誉 口
评选方法由原来的一 级直接评 审改为初评 与终评二 级评审并加 以公示 。 经研 究 ,并请示中国石油和化学工业 协会有关部门同
意 , 原通知中有关涉及地区信 `息成果和人员的申报与初评 , 现委托中国石 油化工情报信 ,息协会信息与刊物分会地 区信息部负责实
施 。 专业信息成果和统计成果 等及其人员的初 评仍按原通知精神进行 。
中国化工情报信息协会号召全体会员和有关机构及 人员 , 按照中国石油和化学工 业协会 的通知精神与要 求 , 立即行动起来 , 除
积极参与“ 两评 ” 外 , 要充分利用手 中的媒体及一 切 宣传手段 , 积极宣传 “ 两评 ” , 动员参加 “ 两评 ” , 将 “ 两评 ” 搞得 热热 闹闹 , 扎扎实
实 , 评出水平 , 评 出劲头 , 评 出实效 , 为将我 国石 油和 化工行业信息化提升到一 个新水平 而努力 !