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Karyotype Analysis of Four Herbaceous Flowers

四种草本花卉的染色体核型分析



全 文 :·研究报告·
生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2013年第2期
草本花卉多为 1-2 年生,种类繁多、繁殖容易,
同一种花卉又有多种品种和类型,株形、花形丰富
多彩,并且病害少,适应性强,所以它们在庭院及
城市绿化方面是极有价值的花卉,是美化生活不可
缺少的花材[1,2]。本文主要研究了 4 种草花的核型,
其中石竹属于石竹科石竹属,是我国传统名花之
一,观赏期较长,而且含有皂苷、糖类及维生素、
生物碱等,营养丰富,既可茶饮又可入药[3]。观赏
椒又名五色椒,属于茄科辣椒属,花期为全年,观
赏椒含有多种氨基酸和维生素,不仅可以在其新鲜
时直接食用,还可以腌制成泡菜,因此,好时椒的
种植有助于解决北方冬季蔬菜种类少的问题[4]。裂
收稿日期 :2012-08-17
基金项目 :哈尔滨市青年科技创新人才基金项目(2009RFQXN100)
作者简介 :齐宇晴,女,研究方向 :植物遗传育种 ;E-mail :46606441@qq.com
通讯作者 :李新玲,女,副教授,研究方向 :植物遗传育种 ;E-mail :lixinling2002@126.com
四种草本花卉的染色体核型分析
齐宇晴1  李新玲1  张彦妮2  李凤1
(1. 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院,哈尔滨 150025 ;2. 东北林业大学园林学院,哈尔滨 150040)
摘 要 : 采用常规制片方法对 4 种草本花卉的染色体数目、核型等进行了研究。结果分别为石竹(Diranthus chinensis)染
色体数 2n=14,核型公式为 K(2n)=14=12 m+2 sm,其核型为“1A”;裂叶花葵(Lavatera trimestris Linn.)染色体数 2n=14,核型
公式为 K(2n)=14=6 m+8 sm,核型为“2A”;观赏椒(Capsicum frutescans)染色体数 2n=24,核型公式 K(2n)=24=24 m,核型为“1B”;
凤仙(Impatiens balsamina)染色体数 2n=14,核型公式为 K(2n)=2x=14=10 m+4 sm,核型为“1B”。此 4 种植物的染色体核型均
为首次报道,可为花卉的良种选育和分类提供必不可少的依据。
关键词 : 石竹 裂叶花葵 好时椒 凤仙 染色体 核型
Karyotype Analysis of Four Herbaceous Flowers
Qi Yuqing1 Li Xinling1 Zhang Yanni2 Li Feng1
(1. College of Life Sciences and Technology,Harbin Normal University,Harbin 150025 ;2 . College of Landscape Architecture,Northeast
Forestry University,Harbin 150040)
Abstract:  In this paper, conven-tional pressed slice method was used to study chromosome number and karyotype of four herbaceous
flowers. The results showed that Diranthus chinensis:chromosome number 2n=14, karyotype formula K(2n)=14=12 m+2 sm, belonging to “1A”
type ;Lavatera trimestris Linn :chromosome number 2n=14, karyotype formula K(2n)=14=6 m+8 sm, belonging to “2A” type ;Capsicum
frutescans :chromosome number 2n=24, karyotype formula K(2n)=24=24 m, belonging to “1B” type ;Impatiens balsamina :chromosome
number 2n=14, karyotype formula K(2n)=2x=14=10 m+4 sm, belonging to “1B” type. This is the first report of karyotype of these four flowers,
and may help breeding and classification of flowers.
Key words:  Diranthus chinensis Lavatera trimestris Linn. Capsicum frutescans Impatiens balsamina Chromosome Karyotype
叶花葵是锦葵科花葵属的草本植物,盛开花径 10 cm
左右,是著名的园林观赏植物[5]。凤仙花属于凤仙
科凤仙花属,不仅供观赏,同时又是一种良好的药
用植物。此外,凤仙花对氟化氢反应灵敏,可以用
来监测氟化氢污染[6]。
目前,国内外关于草花的生活习性、繁殖技术、
栽培方法、经济价值等方面的研究报道较多,但对
于草花的细胞学研究基础理论比较薄弱,绝大多数
草花的染色体数目及其核型还没有被广泛研究。对
草花技术开发,特别是增强其适应性、抵抗病虫害、
新品种选育等工作缺少理论支持和发展后劲。染色
体是基因的载体,是生物进化发育、遗传变异的物
2013年第2期 73齐宇晴等 :四种草本花卉的染色体核型分析
质基础[7],对草花染色体的研究可以从细胞水平上
了解遗传变异的规律,研究草花不同科属种之间在
进化上的亲缘关系[8],同时,对草花的抗病虫害育
种及新品种选育提供必要的细胞学资料。
1 材料与方法
1.1 材料
供试用的石竹、裂叶花葵、观赏椒和凤仙花的
种子均来自于东北林业大学园林学院。
1.2 方法
选成熟的种子放在培养皿中加厚滤纸、水与少
量的杀菌剂,21℃处理 24-36 h,将发芽种子置于 8℃
下进行 48 h 低温处理,芽略有增长,然后将种子转
入 22.5-23℃条件下,处理 12 h,使芽迅速生长。将
上述处理的根尖剪下 1 cm 左右,立即放入有冰水
混合物的试管中处理 24 h,再用 Carnoy 固定液(无
水乙醇∶冰醋酸 =3∶1)固定 24 h,水洗后放入 1%
的醋酸洋红中染色。常规压片法压片,并在 Lecia
DM6000B 型显微镜下观察,选取图像清晰、中期染
色体分散较好的细胞用 Lecia DFC480 采集图像。参
照李懋学和陈瑞阳[9]的标准进行染色体计数和测量,
得到核型数据 ;参照 Levan 等[10]的标准进行染色体
类型分析 ;按照 Stebbins[11]的分类标准进行核型分
类 ;核型不对称系数按 Arano[12]的方法计算,比值
越大越不对称。
2 结果
2.1 石竹的染色体数目与核型
选择 30 个染色体分散良好的细胞观察计数,其
中 29 个细胞染色体数目为 14 条,占细胞总数的
97%,因此确定石竹体细胞染色体数目为 2n=14(图
1),观察中未发现染色体有随体。石竹的 7 对染色
体中有 6 对是中部着丝点,一对为近中部着丝点,
其核型公式为 2n=2x=14=12 m+2 sm。染色体相对长
度变异范围为 4.13-5.33,最长染色体与最短染色体
的比值为 1.29,臂比大于 2∶1 的染色体比率为 0,
核不对称系数(AS.K%)为 54.84%,根据 Stebbins
(1971)的分类标准,判定其核型为“1A”型(表 1)。
2.2 裂叶花葵的染色体数目与核型
选择 30 个染色体分散良好的细胞观察计数,全
表 1 石竹核型参数表
序号 相对长度(%) 着丝粒系数(%) 臂比 类型
1 3.51+1.82=5.33 34.15 1.93 sm
2 2.89+2.11=5.09 41.45 1.47 m
3 2.42+2.25=4.67 48.18 1.08 m
4 2.34+2.18=4.52 48.23 1.07 m
5 2.33+2.18=4.51 48.34 1.06 m
6 2.21+1.96=4.17 47.00 1.13 m
7 2.08+2.05=4.13 49.64 1.01 m
图 1 石竹的染色体中期相和核型
部 30 个细胞染色体数目均为 14 条,占细胞总数的
100%,未发现非整倍性变异现象和多倍体现象,因
此确定裂叶花葵体细胞染色体数目为 2n=14(图 2)。
裂叶花葵的 7 对染色体中,具近中部着丝点的是第
2、3、4、6 对 ;中部着丝点的染色体是第 1、5、7
对,裂叶花葵的核型中没有带有随体的染色体,其
核型公式是 2n=2x=14=6 m+8 sm。染色体相对长度
变异范围为 5.04-8.62,最长染色体与最短染色体的
比值为 1.71,臂比大于 2∶1 的染色体有 3 对,核不
对称系数(AS.K%)为 64.97%,根据 Stebbins(1971)
的分类标准,判定其核型为“2A”型(表 2)。
图 2 裂叶花葵的染色体中期相和核型
序号 相对长度(%) 着丝粒系数(%) 臂比 类型
1 4.66+3.96=8.62 45.94 1.17 m
2 5.13+2.80=7.93 35.31 1.83 sm
3 5.60+2.33=7.93 29.38 2.40 sm
4 5.82+2.10=7.92 26.52 2.77 sm
5 5.13+1.86=6.99 26.61 2.75 sm
6 3.96+2.56=6.52 39.26 1.54 m
7 2.80+2.24=5.04 44.44 1.25 m
表 2 裂叶花葵核型参数表
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第2期74
准,判定其核型为“1B”型(表 4)。
3 讨论
石竹、裂叶花葵、观赏椒及凤仙花等都是我国
北方广泛种植的草本观赏花卉,但目前我国对这些
草花的研究仅限于生活习性、繁殖技术、栽培方法
等方面,而对它们的染色体数目、染色体形态结构
特征等方面的研究几乎没有。核型是生物体最稳定
的细胞学特征之一,与外部形态性状相比,核型受
外界环境因素影响较小,而能保持相对稳定。而且
还可以根据核型分析来判断物种间的亲缘关系,推
测物种在进化过程中彼此的分化历程[9]。核型相似
程度往往与物种同源性和亲缘关系存在一致性,物
种间在分类阶梯上越远,它们的核型差异越大[13]。
Stebbins[11]认为,在生物的进化过程中,染色体核
型是由对称性向非对称性演化的,核型对称性程度
越高的生物,其染色体变异越小,进化程度也越低;
而非对称性程度越高的生物,其染色体变异越大,
进化程度越高。本研究中 4 种草花的染色体核型类
型分别为 1A、2A、1B、1B,是对称程度较高的染
色体组成,因此这 4 种观赏花卉在进化上也都是比
较保守的。由此,对这些花卉的染色体核型进行研
究,不仅对它们的遗传和育种工作是一个极大的促
进,而且对它们的演化、地理分布的研究也具有较
大的推动作用。
表 3 观赏椒核型参数表
序号 相对长度(%) 着丝粒系数(%) 臂比 类型
1 5.97+5.31=11.28 47.07 1.12 m
2 5.53+4.98=10.51 47.38 1.13 m
3 5.22+5.12=10.34 49.52 1.02 m
4 5.22+4.96=10.18 48.72 1.05 m
5 5.13+4.89=10.02 48.80 1.05 m
6 4.72+3.87=8.59 45.05 1.22 m
7 4.62+3.85=8.47 45.45 1.20 m
8 5.13+3.22=8.35 38.56 1.59 m
9 4.12+4.09=8.21 49.82 1.01 m
10 4.02+2.89=6.91 41.82 1.39 m
11 3.13+2.88=6.01 47.92 1.09 m
12 2.68+2.56=5.24 48.85 1.05 m
2.3 观赏椒的染色体数目与核型
选择 30 个染色体分散良好的细胞观察计数,全
部 30 个细胞染色体数目均为 24 条,占细胞总数的
100%,因此确定观赏椒体细胞染色体数目为 2n=24
(图 3)。观赏椒的 12 对染色体均为中部着丝点,其
核型公式为 2n=2x=24=24 m。染色体相对长度变异
范围为 5.24-11.28,最长染色体与最短染色体的比
值为 2.15,臂比大于 2∶1 的染色体比率为 0,核不
对称系数(AS.K%)为 53.30%,根据 Stebbins(1971)
的分类标准,判定其核型为“1B”型(表 3)。
2.4 凤仙的染色体数目与核型
选择 30 个染色体分散良好的细胞观察计数,
其中 29 个细胞染色体数目为 14 条,占细胞总数
的 97%,因此确定凤仙体细胞染色体数目为 2n=14
(图 4),观察中未发现染色体有随体。凤仙的 7 对
染色体具中部着丝点的染色体是第 1、4、5、6、7
对,近中部着丝点的是第 2、3 对,其核型公式为
2n=2x=14=10 m+4 sm。染色体相对长度变异范围为
4.87-10.31,最长染色体与最短染色体的比值为 2.12,
臂比大于 2∶1 的染色体比率为 0,核不对称系数
(AS.K%)为 60.78%,根据 Stebbins(1971)的分类标
图 3 观赏椒的染色体中期相和核型
图 4 凤仙花的染色体中期相和核型
表 4 凤仙核型参数表
序号 相对长度(%) 着丝粒系数(%) 臂比 类型
1 6.39+3.92=10.31 38.02 1.63 m
2 6.17+3.53=9.70 36.39 1.75 sm
3 5.04+2.80=7.84 35.71 1.80 sm
4 4.09+2.80=6.89 40.64 1.46 m
5 3.36+2.42=5.78 41.87 1.50 m
6 3.08+2.42=5.50 44.00 1.38 m
7 2.80+2.07=4.87 42.51 1.33 m
2013年第2期 75齐宇晴等 :四种草本花卉的染色体核型分析
对染色体核型进行分析的前提是要获得一张好
的染色体制片,而获得好的染色体片子的基础是取
材,关键是对材料进行预处理。预处理成功则整个
染色体制片工作便成功了一大半。可以利用药物进
行预处理,如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。
也可以采取低温的方法进行预处理。本试验采用低
温 24 h,染色体长度适中,形态良好。在处理的过
程中一定要保证冰水混合物的状态,处理时间过长,
染色体高度浓缩,不利于染色体的识别。低温处理
的方法简便易行、效果良好。
4 结论
本试验研究结果表明,石竹染色体数 2n=14,
核 型 公 式 为 K(2n)=14=12 m+2 sm, 其 核 型 为
“1A”;裂 叶 花 葵 染 色 体 数 2n=14, 核 型 公 式 为 K
(2n)=14=6 m+8 sm, 核 型 为“2A”;观 赏 椒 染 色
体数 2n=24,核型公式 K(2n)=24=24 m,核型为
“1B”;凤仙染色体数 2n=14,核型公式为 K(2n)
=2x=14=10 m+4 sm,核型为“1B”。此 4 种草本花卉
的染色体不对称系数(AS.K%)为 53.30%-64.97%,
属于对称程度较高的类型。根据 Stebbins[14]有花植
物核型进化中“对称 - 原始、不对称 - 进化”的观点,
可认为该 4 种草花的核型进化程度较低,属于比较
保守的进化类型。
参 考 文 献
[1] 刘志虎,陈江,于永武 . 草本花卉繁种、制种、引种试验研究
初报[J]. 林业实用技术,2012,3 :44-46.
[2] 刘宏涛 . 草本花卉栽培技术[M]. 北京 :金盾出版社,1999 :
2-28,70-161.
[3] 田永久 . 石竹的繁殖与栽培管理[J]. 花木盆景 :花卉园艺版,
2010(9):11.
[4] 余文中,刘崇政,杨红,等 . 观赏辣椒种质材料主要园艺性状
差异性分析[J]. 湖南农业科学,2010(19):7-9.
[5] 吉醒 . 多姿多彩的锦葵科植物[J]. 花木盆景 :花卉园艺版,
2010(4):2-3.
[6] 潘继兰 . 凤仙花高效栽培技术[J]. 花木盆景 :花卉园艺版,
2010(3):9.
[7] 侯小改,段春燕,刘素云,等 . 中国牡丹染色体研究进展[J].
中国农业通报,2006,22(2):317-319.
[8] 杨汉民 . 细胞生物学实验[M]. 第 2 版 . 北京 :高等教育出版
社,1997.
[9] 李懋学,陈瑞阳 . 关于植物核型分析的标准化问题[J]. 武汉
植物学研究,1985,3(4):297-302.
[10] Levan A,Fredga K,Sandberg AA. Nomenclature for centromeric
position on chromosomes[J].Hereditas,1964,52 :201-220.
[11] Stebbins GL. Chromosomal and evolution in higher plants[M].
London :Edward Arnold,1971.
[12] Arano H. Cytological studies in subfamily Carduoideae(Compos-
itae)of Japan[J]. Botanical Magazine of Tokyo,1963,76 :
32-39.
[13] 陈瑞阳,宋文芹,李秀兰,等 . 中国主要经济植物基因组染
色体图谱(第 3 册)[M]. 北京 :科学出版社,2003 :1-52.
[14] Stebbins GL. 植物的变异和进化[M]. 复旦大学遗传研究所,
译 . 上海 :上海科学技术出版社,1950.
(责任编辑 狄艳红)