作 者 :盛骏桢; 王亚军; 罗希; 郑裕国
期 刊 :生物加工过程 2013年 11卷 01期 页码:54-59
关键词:羰基还原酶;卡里比克毕赤酵母;阿托伐他汀;(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯;
摘 要 :从土样中分离得到一株具有差向选择性还原(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯活性的微生物菌株ZJB-09225,经生理生化特征鉴定和18S rDNA测序后鉴定为卡里比克毕赤酵母(Pichia caribbic ZJB-09225)。研究结果发现,在最适发酵条件下培养32 h,生物量为8.8 g/L,体积酶活达7.2 U/L; P.caribbic ZJB-09225最适作用温度、最适作用pH值分别为35 ℃和7.5。在最适的催化条件下,P.caribbic ZJB-09225细胞催化50.0 g/L(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯3 h后,产物6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯得率3.4%,产物d.e.值99.5%以上。
全 文 :!11
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Screeningformicrobedisplayingdiastereoselectiveketoreductaseactivity
towardstbutyl6cyano(5R)hydroxyl3oxohexanoate
SHENGJunzhen,WANGYajun,LUOXi,ZHENGYuguo
(EngineeringResearchCenterofBioconversionandBiopurificationoftheMinistryofEducation,
InstituteofBioengineering,ZhejiangUniversityofTechnology,Hangzhou310014,China)
Abstract:AstrainZJB09225displayingdiastereoselectiveketoreductaseactivitytowardstbutyl6cyano
(5R)hydroxyl3oxohexanoatewasisolatedandidentifiedasPichiacaribbicbyphenotypic,biochemical
characteristicsandalignmentanalysisof18SrDNAsequence.Resultsrevealedthatafter32hculture
undertheoptimizedfermentationconditions,thevolumetricactivityandthebiomassdensityofP.caribbic
ZJB09225were72U/Land88g/L,respectively.P.caribbicZJB09225wasmostactivetotbutyl6
cyano(5R)hydroxyl3oxohexanoateat35℃ andpH75.Inaddition,500g/Ltbutyl6cyano(5R)
hydroxyl3oxohexanoate was diastereoselectively reduced to tbutyl 6cyano(3R, 5R)
dihydroxyhexanoatebyP.caribbicZJB09225for3h,inayieldof34% withd.e.valueover995%.
Keywords:ketoreductase;Pichiacaribbic;atorvastatin;tbutyl6cyano(3R,5R)dihydroxyhexanoate
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