全 文 ：第７卷第１期
２００９年１月
生 物 加 工 过 程
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
Ｖｏｌ．７Ｎｏ．１
Ｊａｎ．２００９
收稿日期：２００８０４２５
基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０７７００５４）；国家高技术研究发展计划（８６３计划）资助项目（２００７ＡＡ１００４０２）
作者简介：孟晨璐（１９８３—），女，辽宁鞍山人，硕士研究生，研究方向：生物资源与生物转化；石贵阳（联系人），教授，博士生导师，Ｅｍａｉｌ：ｇｙｓｈｉ＠
ｊｉａｎｇｎａｎ．ｅｄｕ．ｃｎ
构建羰基还原酶基因工程菌
生物转化产 ｌ－麻黄碱
孟晨璐，张 梁，丁重阳，王正祥，石贵阳
（江南大学 生物工程学院，无锡 ２１４１２２）
摘 要：以筛选得到的ＭｏｒｇａｎｅｌａｍｏｒｇａｎｉＪ８细菌的基因组为模板，通过 ＰＣＲ扩增得到目的基因 ｍｄｌｈ２。核苷酸
序列测定结果表明，基因全长１０４６ｂｐ。以 ｐＥＴ２８ａ（＋）为表达载体，构建重组质粒 ｐＥＴ２８ａ（＋）ｍｌｄｈ２，并在 Ｅ．ｃｏｌｉ
ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达。利用表达产物进行生物转化，发现其具有催化底物１－苯基－２－甲氨基丙酮（简称ＭＡＫ）产
ｌ－麻黄碱的活力。进一步考察了诱导时间和ＩＰＴＧ浓度对重组菌表达的羰基还原酶的影响，３７℃下用０５ｍｍｏｌ／Ｌ
的ＩＰＴＧ诱导４ｈ，重组羰基还原酶的酶活达到０２Ｕ／ｍｇ蛋白，转化液中ｌ－麻黄碱质量浓度达到４５ｍｇ／Ｌ。
关键词：不对称还原；羰基还原酶；麻黄碱
中图分类号：Ｑ７８９；ＴＱ９２０．６ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２－３６７８（２００９）０１－００２９－０５
Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｃａｒｂｏｎｙｌｒｅｄｕｃｔａｓｅｇｅｎｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
ｓｔｒａｉｎｉｎｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅ
ＭＥＮＧＣｈｅｎｌｕ，ＺＨＡＮＧＬｉａｎｇ，ＤＩＮＧＣｈｏｎｇｙａｎｇ，ＷＡＮＧＺｈｅｎｇｘｉａｎｇ，ＳＨＩＧｕｉｙａｎｇ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＪｉａｎｇｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ２１４１２２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＷｉｔｈｔｈｅｇｅｎｏｍｅｏｆＭｏｒｇａｎｅｌａｍｏｒｇａｎｉＪ８ａｓｔｈｅｐｌａｔｅ，ｇｅｎｅｍｌｄｈｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙＰＣＲａｍ
ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｔｈｅｇｅｎｅａｓ１０４６ｂｐ，ｗｉｔｈ９６％ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｗｉｔｈｔｈａｔｏｆｔｈｅ
ｌｅｕｃｉｎｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＬｅｕＤＨ）ｇｅｎｅ．ＵｓｉｎｇｐＥＴ２８ａ（＋）ａｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｖｅｃｔｏｒ，ｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ
ｐｌａｓｍｉｄｐＥＴ２８ａ（＋）ｍｌｄｈ２ｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｉｔ
ｗａｓｆｏｕｎｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｃｏｕｌｄｐｒｏｄｕｃｅｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｆｒｏｍ１ｐｈｅｎｙｌ２ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅａｃｅｔｏｎｅ．
Ａｄｄｉｔｉｏｎａｌｙ，ｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＩＰＴＧｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｉｍｅｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉ
ｎａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｕｎｄｅｒｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎ（ｂｅｉｎｇｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈ０５ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧｆｏｒ４ｈａｔ
３７℃），ｔｈｅｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｃｏｕｌｄｒｅａｃｈ０２Ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｉｎｔｒａｎｓ
ｆｏｒｍａｔｉｏｎｌｉｑｕｉｄｃｏｕｌｄｒｅａｃｈ４５ｍｇ／Ｌ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃｒｅｄｕｃｔｉｏｎ；ｃａｒｂｏｎｙｌｒｅｄｕｃｔａｓｅ；ｅｐｈｅｄｒｉｎｅ
麻黄碱是一种从麻黄中分离而得到的芳香族
氨基醇衍生物，其立体异构体ｌ－麻黄碱和 ｄ－伪麻
黄碱，由于具有较大的药理作用，广泛应用于临床
医疗中［１－２］。目前，麻黄碱主要来源于植物直接提
取和化学合成，但前者由于原料和生产成本高，后
者由于异构体分离困难和环境污染问题而限制了
其发展［３］。生物技术是目前解决麻黄碱大规模生
产的理想途径之一，主要包括植物细胞组织培养、
生物转化和基因工程微生物发酵。其中生物转化
法因反应条件温和、速度快、转化率高、产品光学纯
度高等优点而具有巨大发展潜力［４－５］。
江南大学分子生物学研究室筛选得到的 Ｍｏｒ
ｇａｎｅｌａｍｏｒｇａｎｉＪ８，是一种可以转化前体物质
１－苯基－２－甲氨基丙酮（ＭＡＫ）生成手性药物麻
黄碱的菌株，此转化过程为一种羰基还原酶所调
控。由于菌体本身具有致病性，转化得率较低，从
而限制了该菌的应用［６］。因此，本文利用基因工程
手段，从前期研究中得到的该羰基还原酶部分蛋白
序列出发，通过简并引物克隆出目的基因的部分序
列，分析其保守序列，进而克隆出该基因全序列连
接到表达载体 ｐＥＴ２８ａ（＋）上，使其在大肠杆菌
ＢＬ２１中进行初步表达。
１ 材料与方法
１１ 菌株和质粒
大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＪＭ１０９，Ｍｏｒｇａｎｅｌａｍｏｒｇａｎｉ
Ｊ８，表达载体 ｐＥＴ２８ａ（＋），大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＢＬ２１
（ＤＥ３）由江南大学分子生物学研究室保藏。
１２ 培养基
ＬＢ培养基（ｇ／Ｌ）：蛋白胨２０，酵母提取物１０，
ＮａＣｌ１０。ｐＨ７２。培养基使用前加氨苄青霉素至
终质量浓度为５０ｍｇ／Ｌ。
１３ 工具酶及试剂
碱性磷酸酶（ＣＩＡＰ）、Ｔ４ＤＮＡ连接酶和限制性
内切酶 ＢａｍＨⅠ等为晶美生物工程有限公司产品；
ＰｆｕＤＮＡ聚合酶、ＴａｑＤＮＡ聚合酶、λＤＮＡ／Ｅｃｏ１３０
Ⅰ（ＳｔｙⅠ）相对分子质量标准及引物为上海生工
生物工程技术服务有限公司产品；Ｔｒｉｓ平衡酚、
ＲＮａｓｅ购于上海华美生物工程有限公司；卡那霉素
购 于 北 京 拜 尔 迪 生 物 技 术 有 限 公 司；
１－苯基 －２－甲氨基丙酮（ＭＡＫ）为本实验室合
成；辅酶 ＮＡＤＨ为 Ｓｉｇｍａ公司产品；ＰＣＲ产物纯化
试剂盒购于碧云天公司；其他试剂药品皆为国产
或进口的分析纯和生化试剂。
１４ 方 法
１４１ 基因组ＤＮＡ的提取
提取方法参考文献［７］。
１４２ 目的基因的ＰＣＲ扩增条件
９５℃预变性５ｍｉｎ，９５℃变性１ｍｉｎ，６５℃退火
１ｍｉｎ，７２℃延伸１ｍｉｎ，３０个循环后于７２℃继续延
伸１０ｍｉｎ。
１４３ 重组大肠杆菌的构建
将扩增得到的羰基还原酶基因和质粒 ｐＥＴ２８ａ
（＋）用限制性内切酶ＢａｍＨⅠ酶切，酶切产物纯化后
于１６℃下用 Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接目的基因和质粒
片断，转化ＥｃｏｌｉＪＭ１０９感受态细胞，挑取菌落进行
筛选验证，得到重组大肠杆菌 ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）／
ｐＥＴ２８ａｍｌｄｈ２。重组子序列测定由上海生工生物工
程技术服务有限公司完成。
１４４ 表达产物ＳＤＳＰＡＧＥ分析
按文献［８］方法进行。
１４５ 粗酶液制备
１２０００ｒ／ｍｉｎ、４℃离心５ｍｉｎ收集菌体后，用５
ｍＬ０℃预冷的２０ｍｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ７５）磷酸缓冲液洗
涤悬浮菌体。超声破碎１０ｍｉｎ（工作１ｓ，停顿２ｓ），
保持菌液始终处于低温（０～４℃）。破壁后高速离
心，上清液即为粗酶液，用于不对称还原反应。
１４６ 重组菌的诱导表达与产物鉴定
挑取阳性克隆单菌落并接种于５ｍＬ含有质量
浓度为３０μｇ／ｍＬ卡那霉素的ＬＢ液体培养基中，于
３７℃、２００ｒ／ｍｉｎ振荡过夜。按１％接种量转接于５０
ｍＬ质量浓度为３０μｇ／ｍＬ卡那霉素的ＬＢ液体培养
基中，３７℃、２００ｒ／ｍｉｎ振荡至菌体浓度 Ａ６００约为
０６～０８，加入一定浓度的异丙基硫代半乳糖苷
（ＩＰＴＧ）诱导，继续培养４ｈ。收集菌体供电泳分析
及酶活力鉴定。
１４７ 酶活测定方法
采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ），检测条件见参考
文献［９］。酶反应体系：５０μｍｏｌＭＡＫ，１μｍｏｌＮＡＤＨ，
３００μｍｏｌ葡萄糖，１５个单位的葡萄糖脱氢酶和适量
粗酶液共１ｍＬ，３０℃转化１０ｈ。１００００ｒ／ｍｉｎ离心１０
ｍｉｎ，取上清液用 ＨＰＬＣ检测。一个酶单位（Ｕ）相当
于在规定条件（温度３０℃）下每小时还原１ｇＭＡＫ
所需酶量。
２ 结果与讨论
２１ 目的基因的扩增
１）利用前期对菌株Ｍ．ｍｏｒｇａｎｉＪ８蛋白分离纯
化后获得的羰基还原酶的部分核苷酸序列设计简并
引物，上游引物 Ｚ１为：５′ＡＴＨＧＣＮＡＴＨＣＡＹＧＡＹＡＣ
０３ 生 物 加 工 过 程 第７卷
ＮＡＣ３′；下游引物Ｚ２为：５′ＧＣＮＧＣＮＡＣＲＴＡＮＧＴＮＧ
ＣＤＡＴ３′，对 Ｍ．ｍｏｒｇａｎｉＪ８细菌基因组进行 ＰＣＲ
扩增。扩增出９００ｂｐ左右的基因片段ｍｌｄｈ１。回收
９００ｂｐ左右的特异性片段，测定该基因片段序列，
该段序列与ＧｅｎｅＢａｎｋ数据库比对以后，得到同源
性较高的均为芽孢杆菌的亮氨酸脱氢酶基因（ｌｅｕ
ｃｉｎｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｇｅｎｅ，ＬｅｕＤＨ）。
２）选取同源性较高的几个基因序列，分析其保
守序列，由此设计全基因 ＰＣＲ扩增引物 Ｚ３：５′
ＣＧＣＧＧＡＴＣＣＧＣＧＡＴＧＧＣＡＴＴＡＧＡＡＡＴＣＴＴＣＧＡ３′；
Ｚ４：５′ＣＧＣＧＧＡＴＣＣＧＣＧＴＴＡＧＣＧＡＣＧＧＣＴＡＡＴＡＡＴ
ＧＴ３′，下划线序列为引入的限制性内切酶酶切位
点：ＢａｍＨⅠ。以Ｍ．ｍｏｒｇａｎｉＪ８细菌基因组为模
板进行ＰＣＲ扩增。扩增出１１ｋｂ左右的基因片段，
暂命名为ｍｌｄｈ２，回收１１ｋｂ左右的特异性片段，测
定该基因片段序列，与前期以部分核苷酸序列简并
引物获得的片段比对分析，两段基因序列同源性在
９８％以上，初步认为为同一基因。ｍｌｄｈ２为该羰基
还原酶的完整基因。
１—ｍｌｄｈ１；２— ｍｌｄｈ２；Ｍ—λＤＮＡ／Ｅｃｏ１３０Ⅰ（ＳｔｙⅠ）Ｍａｒｋｅｒ
图１ 目的基因的ＰＣＲ扩增电泳图
Ｆｉｇ．１ ＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｌｄｈｇｅｎｅｂｙＰＣＲ
２２ 重组大肠杆菌构建
将扩增得到的羰基还原酶基因和质粒 ｐＥＴ２８ａ
（＋）用限制性内切酶 ＢａｍＨⅠ 酶切，酶切产物纯化
后进行连接，连接产物转化 ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）得到
重组质粒 ｐＥＴ２８ａｍｌｄｈ２。用限制性内切酶 ＢａｍＨ
Ⅰ 酶切，用琼脂糖凝胶电泳检测可能有插入的克
隆，如图２得到５４ｋｂ和１１ｋｂ２条带，证明重组
质粒构建成功。
２３ 表达产物ＳＤＳＰＡＧＥ分析
将重组菌细胞破碎液与５×试样缓冲液混合煮
图２ 重组表达载体ｐＥＴ２８ａｍｌｄｈ２酶切电泳图
Ｆｉｇ．１ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｌａｓｍｉｄ
ｐＥＴ２８ａｍｌｄｈ２ｂｙｅｎｚｙｍｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎ
沸５ｍｉｎ，离心取上清液１５μＬ作 ＳＤＳＰＡＧＥ分析，
如图３所示，与空载体ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ｐＥＴ２８ａ（＋））细
胞破碎液相比较，经 ＩＰＴＧ诱导后的重组菌细胞破
碎液中出现了一个新的条带，可知 ｍｄｌｈ２基因已在
ＥｃｏｌｉＢＬ２１中得到了表达。进一步证明重组表达
载体ｐＥＴ２８ａｍｌｄｈ２构建成功。
１—ＩＰＴＧ诱导后的ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ｐＥＴ２８ａ（＋）ｍｄｌｈ２）
２— ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ｐＥＴ２８ａ（＋））
图３ ＳＤＳＰＡＧＥ检测目的蛋白表达结果
Ｆｉｇ．３ ＳＤＳＰＡＧＥｐｒｏｆｉｌｅｏｆｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｐｒｏｔｅｉｎ
２４ 重组菌株转化产物的鉴定
将鉴定为阳性的 Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ｐＥＴ２８ａｍｌｄｈ２）
经ＩＰＴＧ诱导后，收集菌体，超声波破碎后取粗酶液
进行不对称还原反应，用高效液相色谱法对转化液
进行鉴定（图４）。在重组菌转化液色谱图（图４Ａ）
中，有保留时间分别为３０１ｍｉｎ和３２１ｍｉｎ的峰，
对照标样图谱（图４Ｂ），这２个峰对应ＭＡＫ和ｌ－麻
１３ 第１期 孟晨璐等：构建羰基还原酶基因工程菌生物转化产ｌ－麻黄碱
黄碱（Ｅ）的峰。因为图４Ａ中没有保留时间为３５２
ｍｉｎ的色谱峰，所以转化液中基本不含ｄ－伪麻黄碱
（ＰＥ）。因此可以判断，重组菌的生物转化液中含有
ｌ－麻黄碱，表明重组菌含有能够专一性转化 ＭＡＫ
为ｌ－麻黄碱的关键酶，初步认定所获得ｍｌｄｈ２基因
为目的羰基还原酶基因。而利用原始菌株 Ｍｏｒ
ｇａｎｅｌａｍｏｒｇａｎｉＪ８进行生物转化得到 ｄ－伪麻黄
碱。分析其原因，该现象可能是羰基还原酶目的基
因是以前期研究中测定的部分蛋白序列为基础，通
过简并引物获得的。由于该羰基还原酶全面、具体
的结构与功能尚未明确，张鹏华等［９］通过对该酶相
对分子质量的测定推断此羰基还原酶为二聚体，而
本研究克隆到的是其中一个亚基的基因序列，因
此，重组菌与原始菌株的转化产物不同。
图４ 标准试样和重组菌转化液的ＨＰＬＣ对比图谱
Ｆｉｇ．４ ＨＰＬＣｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓａｎｄｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｓａｍｐｌｅ
２５ 羰基还原酶的诱导表达
２５１ 诱导剂浓度对羰基还原酶表达的影响
用不同浓度的ＩＰＴＧ在３７℃下对重组菌诱导４
ｈ，然后分别检测羰基还原酶活性。如图 ５所示，
ＩＰＴＧ浓度为０５ｍｍｏｌ／Ｌ时酶活达到最高值，此后
随着ＩＰＴＧ浓度的增大，菌体的酶活反而有所下降。
这有可能是诱导剂 ＩＰＴＧ有一定毒性，对菌体生长
不利，从而使外源蛋白的表达随着 ＩＰＴＧ浓度达到
一定值以后反而下降。
图５ ＩＰＴＧ浓度对比酶活的影响
Ｆｉｇ．５ ＥｆｅｃｔｏｆＩＰＴＧｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
２５２ 诱导时间对羰基还原酶表达的影响
将重组菌于３７℃用０４ｍｍｏｌ／Ｌ的ＩＰＴＧ诱导，
每隔２ｈ取样测菌体的羰基还原酶活性。如图６所
示，诱导４ｈ后，随着诱导时间增长，酶活反而下降。
有可能是随着外源蛋白的大量积累，酶蛋白不能折
叠成有活性的目的蛋白。
图６ 诱导时间对比酶活的影响
Ｆｉｇ．６ Ｅｆｅｃｔｏｆｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｉｍｅ
２５３ 优化结果
经诱导条件的优化后，在２５０ｍＬ摇瓶中，３７℃
用０５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＩＰＴＧ诱导４ｈ，重组菌的羰基还原
酶比酶活可达０２Ｕ／ｍｇ蛋白。收集菌体制备粗酶
液应用于不对称还原反应，最终测得反应液中ｌ－麻
黄碱的质量浓度约为４５ｍｇ／Ｌ。
３ 结 论
从已经测定的目的羰基还原酶部分蛋白序列
出发，通过设计合适的简并引物，克隆出该基因的
部分序列ｍｌｄｈ１。测定序列后，与ＮＣＢＩ公布的已有
２３ 生 物 加 工 过 程 第７卷
序列比对，获得同源性在９６％左右的几个芽孢杆菌
亮氨酸脱氢酶基因，这与前期得到的蛋白序列分析
结果一致，而且ＭｏｒｇａｎｅｌａｍｏｒｇａｎｉＪ８菌株也属于
芽孢杆菌，且羰基不对称还原酶与亮氨酸脱氢酶都
为氧化还原酶系，因此推测二者有一定的同源性。
分析它们的保守序列，设计引物，进而成功克隆出
目的基因全序列ｍｌｄｈ２。构建重组表达载体ｐＥＴ２８
ｍｌｄｈ２，并在 ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中表达。利用表达
产物进行生物转化，发现其有催化底物 ＭＡＫ生产
ｌ－麻黄碱的能力。通过对重组大肠杆菌的诱导剂
浓度和诱导时间的优化，最终羰基还原酶的比酶活
可达到０２Ｕ／ｍｇ蛋白，ｌ－麻黄碱产率为４５ｍｇ／Ｌ。
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櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
２６８２７２．
国外动态
新西兰航空、波音、劳斯莱斯和 ＵＯＰ联合进行首架可持续生物燃料飞机试飞
世界上第一架装备第二代可持续生物燃料的商业飞机试飞于２００８年１２月３日进行，新西兰航空公司
的一架７４７－４００承担试飞工作，其中一台劳斯莱斯ＲＢ２１１发动机由麻风籽油混合燃料驱动。
这次试飞由新西兰航空公司、波音、劳斯莱斯和Ｈｏｎｅｙｗｅｌ旗下的ＵＯＰ公司联合执行。这种基于麻风籽
油的燃料按１∶１的比例与ＪｅｔＡ１混合，并经劳斯莱斯认证为适宜燃料。通过采用 ＵＯＰ“独有”的燃油加工技
术将麻风籽原油成功转化为生物喷气燃料，这几家公司表示，“这标志着世界首次大规模生产航空用商业性
可持续生物燃料”。
美国科学家研究出新的生物燃料制氢催化剂
美国俄亥俄州州立大学的研究人员已经找到一种新的催化剂，可以高效地从乙醇及其他生物燃料中提
取Ｈ２。这种催化剂成本约为９美元／ｋｇ，可以使得乙醇制Ｈ２达到９０％的产量。
（文伟河）
３３ 第１期 孟晨璐等：构建羰基还原酶基因工程菌生物转化产ｌ－麻黄碱