全 文 ：第７卷第２期
２００９年３月
生 物 加 工 过 程
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
Ｖｏｌ．７Ｎｏ．２
Ｍａｒ．２００９
收稿日期：２００８－０８－２２
基金项目：江西省科技支撑计划项目（赣科发计字（２００７）１９６号）；广东省科技攻关项目（２００６Ｂ１３００１００４０）
作者简介：张智平（１９８３—），男，江西永丰人，硕士研究生，研究方向：微生物发酵工程；涂国全（联系人），教授，Ｅｍａｉｌ：ｔｕｇｕｏｑｕａｎ＠２６３．ｃｏｍ
大孔吸附树脂吸附链霉菌７０２抗真菌
活性物质工艺
张智平，倪国荣，赖崇德，涂国全
（江西农业大学 生物科学与工程学院，南昌 ３３００４５）
摘 要：研究大孔吸附树脂吸附链霉菌７０２抗真菌活性物质的工艺条件。采用５种不同大孔吸附树脂吸附链霉菌
７０２发酵液提取液中抗真菌活性物质，选择吸附效果较佳树脂进行吸附条件优化，以桔青霉为指示菌，纳他霉素为
对照抗生素，采用“管碟法”测定抗真菌活性物质含量。结果发现，ＸＡＤ１８树脂吸附效果较好，获得优化吸附条件：
上样液ｐＨ６，ＮａＣｌ质量浓度１０ｇ／Ｌ，上样量２２６３ｍｇ／ｇ湿树脂，吸附流速２５ｍＬ／ｍｉｎ，水洗体积１８０ｍＬ，洗脱流速
１５ｍＬ／ｍｉｎ，洗脱剂为体积分数１０％、５０％和９０％的甲醇，洗脱方式为梯度洗脱。在确定的工艺条件下 ＸＡＤ１８对
链霉菌７０２抗真菌活性物质的吸附率可达９０％，洗脱率可达７５％，回收率可达８０％。
关键词：抗真菌；大孔；树脂；链霉菌
中图分类号：ＴＱ４２４．３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２－３６７８（２００９）０２－００２３－０６
Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅｓｉｎｉｎａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆａｎｔｉｆｕｎｇａｌ
ｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ７０２
ＺＨＡＮＧＺｈｉｐｉｎｇ，ＮＩＧｕｏｒｏｎｇ，ＬＡＩＣｈｏｎｇｄｅ，ＴＵＧｕｏｑｕａｎ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＪｉａｎｇｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆａｎｔｉｆｕｎｇａｌｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ７０２ｂｙｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓＸＡＤ１８ｒｅｓ
ｉｎｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．ＦｉｖｅｔｙｐｅｓｏｆｒｅｓｉｎｓｗｅｒｅｓｃｒｅｅｎｅｄｆｏｒａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｆｕｎｇａｌｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍＳｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ７０２ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｂｒｏｔｈ．ＴｈｅｐｏｔｅｎｃｙｏｆｔｈｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＯｘｆｏｒｄＡｓｓａｙｕｓｉｎｇＰｅｎｉ
ｃｉｌｉｕｍｃｉｔｒｉｎｕｍａｓｉｎｄｉｃａｔｏｒｂａｃｔｅｒｉａａｎｄＮａｔａｍｙｃｉｎａｓｃｏｎｔｒｏｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ．ＸＡＤ１８ｒｅｓｉｎｗａｓｓｅｌｅｃｔｅｄａｓ
ｔｈｅａｄｓｏｒｂｅｎｔｆｏｒｉｔｓｂｅｔｅｒｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ．ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｌｕｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓｐＨ６，ＮａＣｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｔ
１０ｇ／Ｌ，ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｗａｓ２２６３ｍｇ／ｇｗｅｔｒｅｓｉｎ，ｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ２５ｍＬ／ｍｉｎ，ｅｌｕｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ
１８０ｍＬ，ｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１５ｍＬ／ｍｉｎ，ａｎｄｅｌｕｔｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅ１０％，５０％ ａｎｄ９０％ （Ｖ／Ｖ）ｏｆｍｅｔｈａ
ｎｏｌｉｎｗａｔｅｒｂｙｇｒａｄｕａｌｅｌｕｔｉｏｎ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｒａｔｉｏｗａｓ９０％，ｔｈｅｅｌｕｔｉｏｎｒａｔｉｏ
ｗａｓ７５％，ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｉｏｗａｓ８０％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ；ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ；ｒｅｓｉｎ；Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
大孔吸附树脂是２０世纪６０年代发展起来的一
类具有多孔立体结构的非离子型人工合成的有机
高分子聚合物吸附剂，它在抗生素分离纯化、天然
产物的分离、中成药的制备及质量控制、色素的分
离纯化、生化药物研究、环境保护及其他领域有广
泛应用［１－２］。
江西农业大学生物工程系应用微生物研究室
从土壤中分离筛选到 １株链霉菌（简称链霉菌
７０２），本实验室对该菌株做了大量研究［３－７］。研
究结果表明链霉菌７０２的发酵液中存在抗细菌活
性物质和抗真菌活性物质。抗细菌物质鉴定为红
谷霉素［６］，抗真菌活性物质也做了相关研究［６－８］。
本文以大孔吸附树脂为试验材料，探索其对链
霉菌７０２抗真菌物质的吸附工艺条件。
１ 材料与方法
１１ 试验材料
链霉菌７０２发酵液提取液：在５０Ｌ不锈钢发酵
罐中进行１３２ｈ的免蒸生料发酵；抑菌测定指示菌：
桔青霉（本实验室自行提供）；对照抗生素：纳他霉
素（购自北京东方瑞德生物有限公司，质量分数为
５０％）；树脂：ＨＰ １０、ＤＡ ２０１、ＳＩＰＩ ２１，上海亚东
核级树脂有限公司；ＸＡＤ１８、ＸＡＤ１７ＨＰ：上海罗门哈
斯化工有限公司；甲醇：天津福晨化工厂；玻璃层析
柱：２０ｍｍ×４００ｍｍ。
１２ 试验方法
１２１ 静态吸附试验
１）树脂筛选试验
在５个２５０ｍＬ三角瓶中分别加入５ｇ处理好的
ＨＰ １０、ＸＡＤ１８、ＸＡＤ１７ＨＰ、ＤＡ ２０１、ＳＩＰＩ ２１５种
不同型号的湿树脂，然后分别加入含抗真菌活性物
质质量浓度为１５８６４９μｇ／ｍＬ的５０ｍＬ链霉菌 ７０２
提取液，置于摇床上，３０℃、２００ｒ／ｍｉｎ静态吸附
２４ｈ，并分别在０５、１、２、４、８、１２和２４ｈ取２ｍＬ母液
进行抗真菌活性物质测定，并分别计算其吸附效
率。吸附效率定义为每ｇ湿树脂单位时间（ｈ）内吸
附物质的质量（ｍｇ），ｍｇ／（ｇ·ｈ）。
２）不同ｐＨ对ＸＡＤ１８树脂吸附的影响
分别称取５ｇ处理好的湿树脂 ６份于 ６个
２５０ｍＬ三角瓶中，然后分别准确量取含抗真菌活性
物质质量浓度为３４８０４５μｇ／ｍＬ的１００ｍＬ链霉菌
７０２提取液，调ｐＨ为２、４、６（发酵液ｐＨ自然）、８、１０
和 １２后加入三角瓶中，置于摇床上，３０℃、
２００ｒ／ｍｉｎ进行静态吸附４ｈ后，取吸附母液进行抗真
菌活性物质测定。
３）不同质量浓度的 ＮａＣｌ对 ＸＡＤ１８树脂吸附
影响［９］
分别加入５ｇ处理好的 ＸＡＤ１８湿树脂于６个
三角瓶中，然后再分别准确量取１００ｍＬ分别含 ０、１、
３、４和５ｇ的ＮａＣｌ及含抗真菌活性物质质量浓度为
３４８０４５μｇ／ｍＬ的链霉菌７０２提取液，置于摇床上，
３０℃、２００ｒ／ｍｉｎ吸附４ｈ后，取吸附母液测定抗真菌
活性物质。
４）ＸＡＤ１８树脂静态饱和吸附量测定
分别称取５ｇ处理好的ＸＡＤ１８湿树脂于２５０ｍＬ
三角瓶中，再加入１００ｍＬ含１％ＮａＣｌ及含抗真菌活
性物质质量浓度为３７７３８５μｇ／ｍＬ的链霉菌７０２提
取液，置于摇床上，３０℃、２００ｒ／ｍｉｎ吸附４ｈ后，分别
测定母液中残余抗真菌活性物质。
５）洗脱剂的筛选
分别称取５ｇ处理好的 ＸＡＤ１８湿树脂于２７个
２５０ｍＬ三角瓶中，然后加５０ｍＬ含１０ｇ／ＬＮａＣｌ及含
抗真菌活性物质质量浓度为６８８１４μｇ／ｍＬ的链霉
菌７０２稀释液，置于摇床上２００ｒ／ｍｉｎ、３０℃吸附４ｈ
后，用滤纸过滤除去残余母液，分别测定其中母液
残余抗真菌活性物质含量。过滤树脂分别用体积
分数 １０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、
８０％、９０％和１００％的甲醇、乙醇和丙酮进行解吸，
分别测定解吸液中抗真菌活性物质含量。
１２２ ＸＡＤ１８树脂的动态吸附
１）不同浓度提取液对ＸＡＤ１８树脂吸附影响
分别称取４份２０ｇ处理好的ＸＡＤ１８湿树脂，湿法
装柱于玻璃层析柱中（２０ｍｍ×４００ｍｍ）。取含抗真
菌活性物质质量浓度为３１５２２５μｇ／ｍＬ链霉菌７０２
提取液１００ｍＬ，分别稀释１、２、３和４倍，使其质量浓
度为３１５２２５、１５７６１３、１０５０７５、７８８０６μｇ／ｍＬ，然
后以２ｍＬ／ｍｉｎ流速进行柱层析，收集上样流出液。上
样完毕后，用２４０ｍＬ蒸馏水以２ｍＬ／ｍｉｎ流速洗柱，收
集水洗液。分别测定上样流出液和水洗液中的抗真
菌活性物质含量，计算穿透率和树脂吸附率。
２）较佳吸附流速筛选
取含抗真菌活性物质质量浓度为３２７３０８μｇ／ｍＬ
１００ｍＬ浓缩液，分别上柱，以 １０、１５、２０和 ２５
ｍＬ／ｍｉｎ流速进行吸附，收集上样流出液。上样完毕后，
用２４０ｍＬ蒸馏水以２ｍＬ／ｍｉｎ流速洗柱，收集水洗液。
分别测定上样流出液和水洗液中的抗真菌活性物质含
量，计算穿透率和树脂吸附率。
３）ＸＡＤ１８树脂动态饱和吸附
取２０ｇ处理好的ＸＡＤ１８湿树脂装柱，取含抗真
菌活性物质质量浓度为３０１６６７μｇ／ｍＬ链霉菌７０２
提取液６００ｍＬ上柱，以２５ｍＬ／ｍｉｎ流速进行吸附，
３００ｍＬ蒸馏水以２５ｍＬ／ｍｉｎ流速洗柱，依次用
４２ 生 物 加 工 过 程 第７卷
６０ｍＬ１０％、３０％、５０％、７０％和１２０ｍＬ９０％的甲醇
以２５ｍＬ／ｍｉｎ流速洗脱，每管１５ｍＬ分段收集洗脱
液。分别收集上样流出液、水洗液和洗脱液测定抗
真菌活性物质含量，计算穿透率和树脂吸附率并绘
制穿透曲线和洗脱曲线。
４）洗脱流速对解吸的影响
分别取含抗 真 菌 活 性 物 质 质 量 浓 度 为
２６９８７μｇ／ｍＬ链霉菌７０２提取液２２５ｍＬ上４根层
析柱，以２５ｍＬ／ｍｉｎ流速通柱，２４０ｍＬ蒸馏水以
２５ｍＬ／ｍｉｎ流速通柱除杂。均依次用６０ｍＬ１０％、
６０ｍＬ５０％、１８０ｍＬ９０％的甲醇分别以 １０、１５、
２０和２５ｍＬ／ｍｉｎ流速洗脱，分段收集洗脱液，每管
１５ｍＬ。分别收集上样流出液、水洗液和洗脱液测
定抗真菌活性物质含量，计算穿透率和吸附率并绘
制洗脱曲线。
５）水洗体积和洗脱剂体积的确定
分别称取３份２０ｇ处理好的ＸＡＤ１８湿树脂，装于
编号为１号、２号和３号的玻璃层析柱中。分别取含
抗真菌活性物质质量浓度为２２３９８μｇ／ｍＬ链霉菌
７０２提取液２２５ｍＬ，以２５ｍＬ／ｍｉｎ流速上柱，用
３００ｍＬ蒸馏水以２５ｍＬ／ｍｉｎ流速通柱除杂。１号柱
依次用６０ｍＬ体积分数１０％、５０％和１８０ｍＬ９０％的
甲醇；２号柱依次用６０ｍＬ体积分数 １０％、５０％和
１５０ｍＬ９０％的甲醇；３号依次柱用３０ｍＬ体积分数
１０％、５０％和１８０ｍＬ９０％的甲醇均以１５ｍＬ／ｍｉｎ洗
脱，分段收集洗脱液，每管１５ｍＬ。分别收集上样流出
液、水洗液和洗脱液测定抗真菌活性物质含量，计算
穿透率和吸附率并绘制洗脱曲线。
１３ 计算方法
树脂吸附量Ｑ（ｍｇ／ｇ）、吸附效率ｑ［ｍｇ／（ｇ·ｈ）］、
吸附率（％）、解吸率或洗脱率（％）、回收率（％）和穿
透率（％）按下列公式计算。
Ｑ＝（ρ０Ｖ０－ρ１Ｖ１）／ｍ
吸附效率＝树脂吸附量／Δｔ
吸附率＝（ρ０Ｖ０－ρ１Ｖ１－ρ２Ｖ２）／ρ０Ｖ０×１００％
解吸率或洗脱率 ＝ρＤ ×ＶＤ／（ρ０Ｖ０－ρ１Ｖ１－
ρ２Ｖ２）×１００％
回收率＝ρＤＶＤ／ρ０Ｖ０×１００％
穿透率＝ρ１Ｖ１／ρ０Ｖ０×１００％
式中：ρ０，Ｖ０为吸附母液质量浓度（μｇ／ｍＬ）和体积
（ｍＬ）；ρ１，Ｖ１为吸附后母液质量浓度或上样流出液
质量浓度（μｇ／ｍＬ）和体积（ｍＬ）；ρ２，Ｖ２为水洗液中
抗真菌活性物质质量浓度（μｇ／ｍＬ）和体积（ｍＬ）；
ρＤ，ＶＤ为洗脱液或解吸液中抗真菌活性物质质量浓
度（μｇ／ｍＬ）和体积（ｍＬ）；ｍ为处理好的湿树脂质
量（ｇ）；Δｔ为吸附时间（ｈ）。
１４ 树脂预处理方法
将树脂盛于容器中，加入高于树脂层８～１０ｃｍ
无水乙醇浸泡２４ｈ，并不时搅动，使树脂充分溶胀。
将已充分溶胀的树脂装柱，用４倍体积的无水乙醇
以５倍树脂体积每小时的流速通柱，至１份流出液
加５份水稀释不变混为止。再用蒸馏水以５倍树脂
体积每小时的流速通柱至流出液无醇味，即可投入
使用。
湿树脂质量是指预处理好的树脂经过滤纸滤
去水分后的树脂质量。
１５ 抗真菌活性物质效价测定
抗真菌活性物质效价测定采用管碟法［１０］。
２ 结果与分析
２１ 静态吸附试验结果
２１１ 树脂筛选试验结果
树脂筛选结果见图 １。由图 １可见 ＸＡＤ１８树
脂吸附５０ｍＬ质量浓度为１５８６４９μｇ／ｍＬ链霉菌
７０２提取液０５ｈ后，吸附母液无抗真菌活性。
ＸＡＤ１８树脂吸附效率高于其他型号树脂，这是因为
ＸＡＤ１８树脂孔径较其他树脂小，比表面积大，可能
属于快速吸附型树脂，所以表现出了吸附效率高于
其他树脂的结果，因此选择 ＸＡＤ１８树脂作为试验
树脂。
图１ 树脂筛选结果
Ｆｉｇ．１ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｓｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ
２１２ 不同ｐＨ对ＸＡＤ１８树脂吸附的影响
ＸＡＤ１８树脂在不同 ｐＨ条件下吸附结果见表
１。结果表明：不同ｐＨ条件下树脂的吸附量变化不
大，ｐＨ对吸附影响不显著，因此采用提取液自然
ｐＨ，在ｐＨ６０吸附。
５２ 第２期 张智平等：大孔吸附树脂吸附链霉菌７０２抗真菌活性物质工艺
表１ 不同ｐＨ链霉菌７０２提取液对ＸＡＤ１８树脂吸附的影响结果
Ｔａｂｌｅ１ ＥｆｅｃｔｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｐＨｏｆＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ７０２ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｎａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
测定项目
吸附母液 ｐＨ
２ ４ ６ ８ １０ １２
吸附残余母液抗真菌活性物质
质量浓度／（μｇ·ｍＬ－１）
２３６０７ ２４４７９ １９９８４ ２０８１６ ２２９８０ ２２８７９
树脂吸附量／（ｍｇ·ｇ－１） ２３３６ ２３３０ ２３６２ ２３５６ ２３４１ ２３４０
图４ 洗脱剂筛选结果
Ｆｉｇ．４ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｅｌｕｅｎｔｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ
２１３ 不同质量浓度的 ＮａＣｌ对 ＸＡＤ１８树脂吸附
影响
不同质量浓度的ＮａＣｌ对ＸＡＤ１８树脂吸附影响
结果见图 ２。由图 ２可知，１０ｇ／ＬＮａＣｌ提高了
ＸＡＤ１８树脂对抗真菌活性物质的吸附容量。
图２ 不同质量浓度的ＮａＣｌ对ＸＡＤ１８树脂吸附影响
Ｆｉｇ．２ ＥｆｅｃｔｏｆＮａＣｌｏｎａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
２１４ ＸＡＤ１８树脂饱和吸附量测定结果
ＸＡＤ１８树脂饱和吸附量测定结果见图３。由图
３可知，ＸＡＤ１８树脂吸附链霉菌７０２提取液４ｈ后
基本平衡，其饱和吸附量为７０３８ｍｇ／ｇ湿树脂。
２１５ 洗脱剂筛选
洗脱剂筛选结果见图４。由图４可知，体积分
数为 ６０％～１００％的甲醇、４０％～１００％的乙醇和
３０％～１００％的丙酮均能解吸树脂中吸附的抗真菌
图３ ＸＡＤ１８树脂静态吸附动力曲线
Ｆｉｇ．３ ＡｄｓｏｒｐｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｃｕｒｖｅｏｆＸＡＤ１８ｒｅｓｉｎ
ｓｔａｔｉｃａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
活性物质，因此动态洗脱时，可用以上体积分数的
甲醇、乙醇或者丙酮进行梯度洗脱抗真菌活性物
质；可用体积分数小于６０％的甲醇、体积分数小于
４０％的乙醇或者体积分数小于 ３０％的丙酮洗脱
杂质。
２２ ＸＡＤ１８树脂动态吸附试验
２２１ 不同质量浓度提取液对ＸＡＤ１８树脂动态吸
附影响结果
不同质量浓度提取液对 ＸＡＤ１８树脂动态吸附
影响结果见表２。由表２可知，提取液在３１５２２５～
７８８０６μｇ／ｍＬ范围内对 ＸＡＤ１８树脂动态吸附影响
不显著。
６２ 生 物 加 工 过 程 第７卷
表２ 不同质量浓度提取液对ＸＡＤ１８树脂动态吸附影响结果
Ｔａｂｌｅ２ Ｅｆｅｃｔｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｎｄｙｎａｍｉｃａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
ρ（提取液）／
（μｇ·ｍＬ－１）
抗真菌活性物质量／ｍｇ
上样液 上样流出液 水洗液
穿透率／
％
吸附率／
％
３１５２２５ ３１５２２ １３３ １０３５ ０４２ ９６３０
１５７６１３ ３１５２２ ４３４ ９３５ １３８ ９５６６
１０５０７５ ３１５２２ ６１５ ９７１ １９５ ９４９７
７８８０６ ３１５２２ ０ ９７５ ０ ９５９１
２２２ 较佳吸附流速筛选结果
不同吸附流速对吸附效果影响结果见表３。由
表３可知吸附流速为１～２５ｍＬ／ｍｉｎ时，对 ＸＡＤ１８
树脂吸附率影响不大，根据效率优先原则选择
２５ｍＬ／ｍｉｎ为较佳吸附流速。
表３ 较佳吸附流速筛选结果
Ｔａｂｌｅ３ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｆｌｏｗｒａｔｅｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ
吸附流速／
（ｍＬ·ｍｉｎ－１）
抗真菌活性物质量／ｍｇ
上样液 上样流出液 水洗液
穿透率／
％
吸附率／
％
１０ ３２７３１ ２６１ ９１８ ０８０ ９６４０
１５ ３２７３１ ２７２ ９４８ ０８３ ９６２７
２０ ３２７３１ ２２８ ８３０ ０７０ ９６７７
２５ ３２７３１ ０８０ ５６２ ０２４ ９８０４
２２３ ＸＡＤ１８树脂动态饱和吸附试验
ＸＡＤ１８树脂动态饱和吸附试验结果见图５。图
５结果表明 ＸＡＤ１８树脂动态饱和吸附量为
３３４９ｍｇ／ｇ，为静态饱和吸附量的４３２８％。
图５ ＸＡＤ１８树脂动态饱和吸附曲线
Ｆｉｇ．５ ＳａｔｕｒａｔｅｄａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｃｕｒｖｅｏｆＸＡＤ１８ｒｅｓｉｎ
２２４ 洗脱流速对解吸的影响结果
洗脱流速对解吸的影响结果见图６。图６结果
表明随着流速的增大，洗脱曲线出现一定的拖尾现
象，以１ｍＬ／ｍｉｎ和１５ｍＬ／ｍｉｎ流速洗脱时，洗脱峰
尖锐，峰形较好，因此选择１５ｍＬ／ｍｉｎ流速洗脱。
图６ 不同洗脱流速的洗脱曲线
Ｆｉｇ．６ Ｅｌｕｔｉｏｎｃｕｒｖｅｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎｆｌｏｗｒａｔｅｓ
２２５ 水洗体积和洗脱剂体积确定结果
水洗体积和洗脱剂体积确定结果见表４、图７。
１号、２号和３号柱试验结果表明水洗体积用量为
１２０ｍＬ时，水洗液中均无抗真菌活性物质，至
１８０ｍＬ时，水洗液基本澄清，因此水洗体积用量确
定为１８０ｍＬ；从表４和图７可知洗脱用量为６０ｍＬ
１０％、６０ｍＬ５０％、１８０ｍＬ９０％的甲醇。
７２ 第２期 张智平等：大孔吸附树脂吸附链霉菌７０２抗真菌活性物质工艺
表４ 水洗体积和洗脱剂体积确定结果
Ｔａｂｌｅ４ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｗａｓｈｗａｔｅｒｖｏｌｕｍｅａｎｄｅｌｕｅｎｔｖｏｌｕｍｅ
柱号
ｍ（吸附液中抗
真菌活性物质）／
μｇ
ｍ（上样流出液中抗
真菌活性物质）／
μｇ
ｍ（水洗液中抗
真菌活性物质）／
μｇ
ｍ（洗脱液中抗
真菌活性物质）／
μｇ
吸附率／
％
洗脱率／
％
回收率／
％
１ ５０３９６１８ ２１２６２５ ２２０８ ４１６２１８５ ９１４０ ７５４９ ８２５９
２ ５０３９６１８ ２８８７７５ ２２４７ ３７４８５４５ ８９８１ ６６８０ ７４３８
３ ５０３９６１８ ２９６６５０ ２２８９ ２９９８９０６ ８９５７ ５３３０ ５９５１
注：１号柱依次用６０ｍＬ１０％、６０ｍＬ５０％和１８０ｍＬ９０％的甲醇进行洗脱；２号柱依次用６０ｍＬ１０％、３０ｍＬ５０％、
１５０ｍＬ９０％的甲醇进行洗脱；３号依次柱用３０ｍＬ１０％、３０ｍＬ５０％和１８０ｍＬ９０％的甲醇进行洗脱。
图７ 洗脱剂体积的确定结果
Ｆｉｇ．７ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｅｌｕｅｎｔｖｏｌｕｍｅ
３ 结 论
１）ＸＡＤ１８树脂吸附链霉菌７０２抗真菌活性物质
的条件为：上样液ｐＨ为６，ＮａＣｌ质量浓度为１０ｇ／Ｌ，
上样量为２２６３ｍｇ／ｇ，吸附流速为２５ｍＬ／ｍｉｎ，水洗
体积为１８０ｍＬ，洗脱流速为１５ｍＬ／ｍｉｎ，洗脱剂为
１０％、５０％和９０％的甲醇，洗脱方式为梯度洗脱。在
确定的工艺条件下ＸＡＤ１８对链霉菌７０２抗真菌活性
物质的吸附率可达９０％，洗脱率可达７５％，回收率可
达８０％。利用ＸＡＤ１８树脂吸附链霉菌７０２抗真菌活
性物质是可行的。
２）在利用 ＸＡＤ１８树脂吸附链霉菌７０２抗真菌
活性物质时，吸附母液的浓度不宜太高，太高容易
堵住层析柱，吸附液应该以不出现明显沉淀为好；
洗脱时醇浓度跨度不宜太大，避免产生气泡。
参考文献：
［１］ 黎海彬，李小梅．大孔吸附树脂及其在天然产物研究中的应用
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８２ 生 物 加 工 过 程 第７卷