全 文 ： 万方数据
·22- 熊物加I过程 第4卷第2期
菌体的存活率在逐渐降低，紫外线照射90s以后，
存活率接近予◇，也就是砉芟平板不再有菌落生长。
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图l效应蓝线
Fig．1Curveoflivabil时arIdUVdose
当致死率达到75％左右，鄂存活率25％左右
时，产生正突变的几率较高，照射时间为30s时，致
死率为72％，因此选取照射时间为30s的平板菌落
进行摇瓶筛菌蜜验。
2．3高产腺苷磺氨酸的摇瓶发酵筛选
取诱变后的突变菌分批在摇瓶中发酵进行筛菌
实验，黼时取缀始菌株徽为对照，最后得到l株产量
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较高的正突变菌sAM．06，采用HPLC进行分析，结
梁SA麓毯摇瓶产量可达嚣1．0∥己，鲍源始菌株提
高了17％。
2．4遗传稳定性的考察
对该突变菌连续培养5代，每次叛懑发菌株作
为对照，产量都提高15％左右，见表2，说明该突变
株遗传稳定性较好。
表2遗传稳定健考察
Table2 studyofstability
2。5发酵罐闫歇培养耱连续培养的毙较
采用5L发酵罐间歇培养，在24h后一次性补
加1．0g几￡。蛋氨酸和30g，L葡萄糖溶液，sAM的积
繁和菌体生长过程觅隧2。控铡菌俸达到最高质量
浓度时流加1．Og／L五．蛋氨酸和30g，L葡萄糖溶液
的sAM积累和生长情况如图3。
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一。一sAM产量；一◆一SAM质量分数
图2间歇培养方式对SAM积累的影响
Fig．2掰k￡《ba|馥e越姐je∞垃玲ace黝越硅蛀on《sAM
国图2和图3可以看出，采用间歇培养方式，由
于前期底糖消耗过快，24h后一次性加入￡．蛋氨酸
羲体时，融麓积累到一定浓度时就达到稳定期，不
再积累，并且由于L．蛋氨酸对菌体生长有一定的抑
制作用，使得生物量与sAM积累量郝不够高。丽采
蔫流糯培养方式，待菌体生长到最大浓度时再开始
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流加三一蛋氨酸和葡萄糖溶液，由图3可以看出流加
后的sAM积累量有明显的升高，最高值可达
5。34∥￡，楚闻歇发酵产量的一倍。但是，果震流加
方式补加前体￡．蛋氨酸，sAM积累量升高到最高点
需要的时间比问歇发酵的时间要长，这可能是因为
闻歇培养楚在篮h一次性枣}热髓簿￡一蛋氨酸，此时
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2006年5月 董函竹等：高产腺苷蛋氨酸菌株的诱变选育及垮养方式研究 ·23·
菌体生长到对数生长期，正处在生长旺势阶段，因此
李}加前体￡一蛋氯酸后，SA麓在酵母体内就会较快的
积累，而流加方式培养是在菌体生长到最大浓度后
开始漉加前体己，蛋氨酸，此时菌体生长达到了延迟
3结论
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期，所以对SAM的积累较为缓慢，但却可以减轻￡．
甏氨酸在对数生长期时对菌体生长的摊制作用，弗
且生物量和产量都要高于间歇培养，是较好的一种
培养方式。
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一-一S矗麓；一圈～乙醇体瓢分数；一V一残糖质量分数；一。一生物量
圈3流加培养方式对sAM积累的影响
Fig．3嬲妖tof ed_bacchcuhureontheaccumulationofSAM
i纛过紫外线。氯化锂复合诱变方法对清酒酵母
SAM．04。01进行诱变筛选，得到一株突变菌SAM．06，
其产量可比原始菌株提高17％，遗传稳定性也较
好。同时考察了闻歇发酵和流加发酵两种培养方
式，作了比较分析，认为在菌体生长到最大浓度时开
始流加前体￡一蛋氨酸比一次性加入前钵效果好，
SAM的产量也有大幅提高，5L发酵罐中流加培养
sAM产量最高可以达到5．34g／L，生物量104．3{；i；，L。
参考文献：
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高产腺苷蛋氨酸菌株的诱变选育及培养方式研究
作者： 董函竹， 刘沛溢， 谭天伟， DONG Han-zhu， LIU Pei-yi， TAN Tian-wei
作者单位： 北京化工大学,生命科学与技术学院,北京,100029
刊名： 生物加工过程
英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
年，卷(期)： 2006,4(2)
被引用次数： 6次
参考文献(5条)
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