全 文 ：
摇 摇 摇 摇 摇 生 态 学 报
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摇 摇 第 猿猿卷 第 圆员期摇 摇 圆园员猿年 员员月摇 渊半月刊冤
目摇 摇 次
前沿理论与学科综述
生态系统生产总值核算院概念尧核算方法与案例研究 欧阳志云袁朱春全袁杨广斌袁等 渊远苑源苑冤噎噎噎噎噎噎噎噎
气候变化对传染病爆发流行的影响研究进展 李国栋袁张俊华袁焦耿军袁等 渊远苑远圆冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
好氧甲烷氧化菌生态学研究进展 贠娟莉袁王艳芬袁张洪勋 渊远苑苑源冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
氮沉降强度和频率对羊草叶绿素含量的影响 张云海袁何念鹏袁张光明袁等 渊远苑愿远冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
世界蜘蛛的分布格局及其多元相似性聚类分析 申效诚袁张保石袁张摇 锋袁等 渊远苑怨缘冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
风向因素对转基因抗虫棉花基因漂移效率的影响 朱家林袁贺摇 娟袁牛建群袁等 渊远愿园猿冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
个体与基础生态
长江口及东海春季底栖硅藻尧原生动物和小型底栖生物的生态特点 孟昭翠袁徐奎栋 渊远愿员猿冤噎噎噎噎噎噎噎
长江口横沙东滩围垦潮滩内外大型底栖动物功能群研究 吕巍巍袁马长安袁余摇 骥袁等 渊远愿圆缘冤噎噎噎噎噎噎噎
沣河沿岸土壤和优势植物重金属富集特征和潜在生态风险 杨摇 阳袁周正朝袁王欢欢袁等 渊远愿猿源冤噎噎噎噎噎噎
盐分和底物对黄河三角洲区土壤有机碳分解与转化的影响 李摇 玲袁仇少君袁檀菲菲袁等 渊远愿源源冤噎噎噎噎噎噎
短期夜间低温胁迫对秋茄幼苗碳氮代谢及其相关酶活性的影响 郑春芳袁刘伟成袁陈少波袁等 渊远愿缘猿冤噎噎噎噎
猿圆个切花菊品种的耐低磷特性 刘摇 鹏袁陈素梅袁房伟民袁等 渊远愿远猿冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
年龄和环境条件对泥蚶富集重金属镉和铜的影响 王召根袁吴洪喜袁陈肖肖袁等 渊远愿远怨冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
角倍蚜虫瘿对盐肤木光合特性和总氮含量的影响 李摇 杨袁杨子祥袁陈晓鸣袁等 渊远愿苑远冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
多噬伯克霍尔德氏菌 宰杂鄄云允怨对草甘膦的降解特性 李冠喜袁吴小芹袁叶建仁 渊远愿愿缘冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
金龟甲对蓖麻叶挥发物的触角电位和行为反应 李为争袁杨摇 雷袁申小卫袁等 渊远愿怨缘冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
种群尧群落和生态系统
白洋淀生态系统健康评价 徐摇 菲袁赵彦伟袁杨志峰袁等 渊远怨园源冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
珠海鹤洲水道沿岸红树林湿地大型底栖动物群落特征 王摇 卉袁钟摇 山袁方展强 渊远怨员猿冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎
典型森林和草地生态系统呼吸各组分间的相互关系 朱先进袁于贵瑞袁王秋凤袁等 渊远怨圆缘冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎
抚育间伐对油松人工林下大型真菌的影响 陈摇 晓袁白淑兰袁刘摇 勇袁等 渊远怨猿缘冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
百山祖自然保护区植物群落 遭藻贼葬多样性 谭珊珊袁叶珍林袁袁留斌袁等 渊远怨源源冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
土霉素对堆肥过程中酶活性和微生物群落代谢的影响 陈智学袁谷摇 洁袁高摇 华袁等 渊远怨缘苑冤噎噎噎噎噎噎噎噎
景观尧区域和全球生态
兴安落叶松针叶解剖结构变化及其光合能力对气候变化的适应性 季子敬袁全先奎袁王传宽 渊远怨远苑冤噎噎噎噎
盐城海滨湿地景观演变关键土壤生态因子与阈值研究 张华兵袁刘红玉袁李玉凤袁等 渊远怨苑缘冤噎噎噎噎噎噎噎噎
半干旱区沙地芦苇对浅水位变化的生理生态响应 马赟花袁张铜会袁刘新平 渊远怨愿源冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
杂宰粤栽模型融雪模块的改进 余文君袁南卓铜袁赵彦博袁等 渊远怨怨圆冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
科尔沁沙地湖泊消涨对气候变化的响应 常学礼袁赵学勇袁王摇 玮袁等 渊苑园园圆冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
贝壳堤岛 猿种植被类型的土壤颗粒分形及水分生态特征 夏江宝袁张淑勇袁王荣荣袁等 渊苑园员猿冤噎噎噎噎噎噎噎
三峡库区古夫河着生藻类叶绿素 葬的时空分布特征及其影响因素 吴述园袁葛继稳袁苗文杰袁等 渊苑园圆猿冤噎噎噎
资源与产业生态
煤炭开发对矿区植被扰动时空效应的图谱分析要要要以大同矿区为例 黄摇 翌袁汪云甲袁李效顺袁等 渊苑园猿缘冤噎噎
学术信息与动态
叶中国当代生态学研究曳新书推介 刘某承 渊苑园源源冤噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎
期刊基本参数院悦晕 员员鄄圆园猿员 辕 匝鄢员怨愿员鄢皂鄢员远鄢猿园园鄢扎澡鄢孕鄢 预 怨园郾 园园鄢员缘员园鄢猿园鄢圆园员猿鄄员员
室室室室室室室室室室室室室室
封面图说院 百山祖保护区森林植物群落要要要百山祖国家级自然保护区位于浙西南闽浙交界处袁由福建武夷山向东北伸展而成袁
主峰海拔 员愿缘远援苑皂袁为浙江省第二高峰遥 其独特的地形和水文地理环境形成了中亚热带气候区中一个特殊的区域袁
保存着十分丰富的植物种质资源以及国家重点保护野生动植物种袁尤其是 员怨愿苑年由国际物种保护委员会列为世界
最濒危的 员圆种植物之一的百山祖冷杉袁是第四纪冰川的孑遗植物袁素有野活化石冶之称遥 随着海拔的升高袁其植被为
常绿阔叶林尧常绿鄄落叶阔叶混交林尧针阔混交林尧针叶林尧山地矮林和山地灌草丛遥
彩图及图说提供院 陈建伟教授摇 北京林业大学摇 耘鄄皂葬蚤造院 糟蚤贼藻泽援糟澡藻灶躁憎岳 员远猿援糟燥皂
第 33 卷第 21 期
2013年 11月
生 态 学 报
ACTA ECOLOGICA SINICA
Vol.33,No.21
Nov.,2013
http: / / www.ecologica.cn
基金项目:国家自然科学基金资助项目(41271277 / D010504)
收稿日期:2012鄄07鄄17; 摇 摇 修订日期:2013鄄04鄄24
*通讯作者 Corresponding author.E鄄mail: yfwang@ ucas.ac.cn
DOI: 10.5846 / stxb201207171013
贠娟莉,王艳芬,张洪勋.好氧甲烷氧化菌生态学研究进展.生态学报,2013,33(21):6774鄄6785.
Yun J L, Wang Y F, Zhang H X.Ecology of aerobic methane oxidizing bacteria (methanotrophs) .Acta Ecologica Sinica,2013,33(21):6774鄄6785.
好氧甲烷氧化菌生态学研究进展
贠娟莉,王艳芬*,张洪勋
(中国科学院大学,北京摇 100049)
摘要:好氧甲烷氧化菌是以甲烷为碳源和能源的细菌。 好氧甲烷氧化菌在自然环境中分布广泛,人类已从土壤、淡水和海洋沉
积物、泥炭沼泽、热泉、海水和南极环境分离到甲烷氧化菌的纯培养。 好氧甲烷氧化菌可分为 14个属,包括研究较为深入的隶
属于变形菌门 Alpha和 Gamma纲的细菌,以及属于疣微菌门的极端嗜热嗜酸甲烷氧化菌。 最近,好氧甲烷氧化菌还被发现存
在于苔藓类植物(尤其是泥炭苔藓)共生体中,兼性营养好氧甲烷氧化菌也被发现。 通过对好氧甲烷氧化菌的分类、生理生化
特征、分子生物学检测方法以及微生物生态学中的研究成果的总结与分析,以及对甲烷氧化菌研究所面临的问题进行讨论,以
期为今后进一步开展好氧甲烷氧化菌及其在碳循环中的作用研究提供参考。
关键词:好氧甲烷氧化菌;微生物生态;分类学地位;多样性;碳循环
Ecology of aerobic methane oxidizing bacteria (methanotrophs)
YUN Juanli, WANG Yanfen*, ZHANG Hongxun
Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China
Abstract: Aerobic methane oxidizing bacteria (methanotrophs) are a fascinating group of bacteria that have the unique
ability to grow on methane as their sole carbon and energy source. They appear to be widespread in nature and have been
isolated from a number of different environments. There are now 14 recognized genera of methanotrophs belong to two phyla,
Proteobacteria and thermoacidiphilic Verrucomicrobia. The former was well studied and separated into two classes, Type玉
and Type 域 methanotrophs, which belong to Alpha and Gamma Proteobacteria. Extremely thermophilic, acidophilic
methanotrophs from the phylum Verrucomicrobia have been isolated, thus expanding both the taxonomic diversity and
physiological range of aerobic methanotrophy.
The discovery of the facultative methanotroph Methylocella silvestris has changed the view that methanotrophs were
obligate organism. They can cooxidize a considerable number of organic compounds and also have considerable potential in
biotechnology. A wide variety of methanotrophic symbionts in and on the mosses were recently detected, and showing the
global prevalence of this symbiosis. Traditional way used cultivation to enrichment or isolation to study methanotrophs in the
environment. Molecular ecology techniques applied in the last few decades have greatly expanded our knowledge of
methanotroph ecology. The most obvious marker for detecting methanotrophs in various environments is the 16S rRNA gene,
due to the large database of sequences available. Primers and probes targeting different genera or species have been designed
and used extensively in combination with polymerase chain reaction ( PCR) based clone library analysis, denaturing
gradient gel electrophoresis (DGGE) analysis, and fluorescent in situ hybridization ( FISH) analysis. Several functional
genes have also been used for the detection of methanotrophs in environmental samples, including pmoA (encoding the key
subunits of particulate methane monooxygenase), mmoX (encoding the key subunits of soluble methane monooxygenase),
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mxaF (encoding the key subunits of methanol dehydrogenase), nifH (encoding the dinitrogenase reductase), and genes
involved in C1 transfer pathways. To understand the active community of methanotrophs in the environment, stable isotope
probing (SIP) techniques have been developed, including DNA鄄SIP, RNA鄄SIP, mRNA鄄SIP, and phospholipid fatty acid
(PLFA)鄄SIP. SIP has also been combined with metagenomics to discover novel methanotrophs. Other very powerful
molecular techniques have been developed in the last few years, including microautoradiography (MAR)鄄FISH, isotope
array, Raman鄄FISH, nano鄄secondary ion mass spectrometry (NanoSIMS), and microfluidic digital PCR, these techniques
can now be used in the analyses of methanotrophs. Both cultivation and cultivation independent molecular methods have
been used intensively in last few decades to study the diversity, distribution, and abundance in environments of
methanotrophs, such as soils, freshwater, marine sediments, acid peat bogs, hot springs, seawater and extreme
environments. In the microcosm of soil, the growth and diversity of methanotrophs are also influenced by several
environmental factors. This review highlights recent progress in the research of the taxonomy, of the discovery of novel
aerobic methanotrophs, of the biochemistry, of the molecular techniques and the environment impacts on methanotrophs, we
also emphasize deficiencies and issues need to be solved in future studies. This review will provide theoretical foundation for
future methanotrophic ecology study and explain the key role methanotrophs play in carbon cycle.
Key Words: methanotrophs; microbial ecology; taxonomy; diversity; carbon鄄cycle
甲烷是大气中仅次于二氧化碳的第二号温室气体。 虽然大气中的甲烷的含量仅为二氧化碳的 1 / 27,但
甲烷引起的温室效应是同等质量二氧化碳的 20—30倍[1]。 造成甲烷浓度升高的主要成因有人为和自然两种
因素[2]。 人为活动造成的甲烷排放约占总排放量的 70%左右(图 1),包括水稻种植、垃圾填埋以及生物质燃
烧;自然界甲烷排放的主要来源包括自然湿地、植物以及海洋[3]。
大气中甲烷通过数量级相近的源(Source)和汇(Sink)达到平衡,随着大气中甲烷浓度的增加,甲烷的汇
也成相应比例增加,从而一定程度上削弱了甲烷源增加造成的环境气候影响,因而实际产生的甲烷量要比测
得的排放量大的多[4鄄5]。 一直以来,甲烷汇的增长小于总甲烷源的增长,从而导致工业革命以来大气中甲烷
浓度的持续稳定增长[3]。 好氧甲烷氧化菌是重要的甲烷的汇,在环境中起着甲烷生物过滤器的作用,它们能
使高达 90%由产甲烷古菌所产生的甲烷在排入大气之前被氧化[6鄄7]。 环境中存在两类截然不同的甲烷氧化
菌,好氧甲烷氧化菌(Methanotrophs)和厌氧甲烷氧化菌。
好氧甲烷氧化菌主要存在于甲烷与氧气共存的微小界面空间,包括土壤鄄空气、水鄄空气界面、植物根际以
及植物内部。 大量有关好氧甲烷氧化菌的研究工作显示,该类微生物能适应各种环境。 人类对于好氧甲烷氧
化菌的研究已较为深入,这些研究不断加深人类对全球甲烷循环的认知。 本文就好氧甲烷氧化菌的生理生化
及分类学特点、生态学地位以及微生物生态学研究方法进行全面深入的综述,以此阐明好氧甲烷氧化菌在全
球碳循环中的重要作用。
1摇 好氧甲烷氧化菌分类及生理生化特征
1.1摇 好氧甲烷氧化菌分类
好氧甲烷氧化菌(Aerobic methanotrophs)是以甲烷作为唯一碳源和能源的微生物,是甲基营养细菌
(Methylotrophic bacteria)的一个分支[8]。 好氧甲烷氧化菌于 1906 年首次被荷兰微生物学家 Sohngen 分离出
来[9]。 1970年 Whittenbury等[10]对分离和鉴定的 100多种好氧甲烷氧化菌进行了分类,这些分类方法至今仍
是鉴定好氧甲烷氧化菌强有力的依据。 在 Whittenbury等的基础上,Bowman等采用分离方法对更多好氧甲烷
氧化菌进行了保存,并进行了更加系统的分类和描述[11鄄15]。
已知的好氧甲烷营养菌可分为 Type玉型和 Type域型两类,分属于 酌鄄Proteobacteria 纲和 琢鄄Proteobacteria
纲。 Type玉型好氧甲烷氧化菌属于 Methylococcaceae 科,包含 Methylobacter,Methylomonas,Methylosoma,
Methylomicrobium,Methylococcus,Methylocaldum,Methylothermus,Methylohalobius,Methylosarcina 和 Methylosphaera
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10个属。 Type玉型好氧甲烷氧化菌中的 Methylococcus 和 Methylocaldum 也被称为 TypeX 型好氧甲烷营养菌,
是一类耐热的甲烷氧化菌,其生理生化及系统发育学特征与其他 Type玉型甲烷氧化菌有所不同。 Type域型
好氧甲烷氧化菌归属于 Methylocystaceae和 Beijerinckiaceae 2 个科,前者包含 Methylocystis 和 Methylosinus 属,
后者有 Methylocapsa和 Methylocella 属。 科学家获得的第 1 株兼性好氧甲烷氧化菌 Methylocella silvestris 为
Type域型甲烷氧化菌。 该菌除能利用甲烷外,还能利用多碳化合物作为碳源[16鄄17]。 后来,两种属于 Type玉型
好氧甲烷氧化菌的丝状甲烷氧化菌 Crenothrix polyspora[18]和 Clonothrix fusca[19]被发现,这 2 种甲烷氧化菌形
成了一个独特的 Type玉型甲烷氧化菌分支。 值得注意的是,Nature 和 PNAS 杂志报道了 3 株极端嗜酸嗜热
(pH 值 1. 5, 65 益) 的好氧甲烷氧化菌: Methylokorus infernorum[20]、 Acidimethylosilex fumarolicum[21] 和
Methyloacida kamchatkensis[22],它们不属于任何一类已知的好氧甲烷氧化菌, 而是属于疣微菌门
(Verrucomicrobia),研究人员将其命名为 Methylacidiphilum 属[23]。 图 1 是依据 16S rRNA 序列绘制的各好氧
甲烷氧化菌分支之间的系统进化树。
图 1摇 基于 16S rRNA序列的好氧甲烷氧化菌进化树[24]
Fig.1摇 16S rRNA gene phylogeny of the aerobic methane oxidizing bacteria
Type玉和 Type域型好氧甲烷氧化菌除系统发育学有各自特点外,在形态学上也具明显差异,Type玉型甲
烷氧化菌具有成束的分布于细胞质内的胞质内膜(图 2a),而 Type域型甲烷氧化菌一般只含有紧贴外壁的胞
质内膜(图 2b) [24]。
1.2摇 好氧甲烷氧化菌生理生化特征
环境中由好氧甲烷氧化菌推动的甲烷氧化主要过程为:好氧甲烷氧化菌首先利用自身携带的甲烷单加氧
酶(Methane monooxygenase, MMO)催化甲烷氧化为甲醇,甲醇接着被甲醇脱氢酶催化氧化生成甲醛。 最后,
好氧甲烷氧化菌通过丝氨酸途径(Serine pathway)或单磷酸核酮糖途径(RuMP pathway)将甲醛转化为细胞
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摇 图 2 摇 Type玉型好氧甲烷氧化菌代表菌 Methylomonas methanica
电镜照片 ( a);Type域型好氧甲烷氧化菌代表菌 Methylosinus
trichosporium电镜照片(b) [24]
Fig.2摇 Electron micrograph of a cross鄄section of a typical Type玉
methanotroph Methylomonas methanica ( a ); Electron
micrograph of a cross鄄section of a typical Type域 methanotroph
Methylosinus trichosporium (b) [24]
物质[25]。
好氧甲烷氧化菌中存在 2种甲烷单加氧酶:一种是
与细胞膜结合,含铜、铁离子的颗粒性甲烷单加氧酶
(Particulate methane monooxygenase,pMMO),存在于除
Methylocella[26]及 Methyloferula[27]以外的所有已发现的
好氧甲烷氧化菌中;另一种是分泌在周质空间中的可溶
性甲烷单加氧酶 ( Soluble methane monooxygenase,
sMMO),存在于部分甲烷氧化菌中。 由于 MMO是甲烷
氧化菌的功能酶系,且几乎所有好氧甲烷氧化菌都含有
pMMO,因此利用 MMO(尤其是 pmoA,编码 pMMO 的一
段基因)作为生物标记物进行好氧甲烷氧化菌生态学研
究已广为采用。 部分好氧甲烷氧化菌,如所有 Type域型甲
烷氧 化 菌、 Type玉型 甲 烷 氧 化 菌 的 Methylomonas、
Methylobacter和 Methylococcus属,除有氧化甲烷能力外,
还有固氮能力。 因此,利用 nifH 基因也可对该类好氧
甲烷氧化菌进行分子生态学研究[28]。 对于 MMO 的应
用研究主要集中在两方面:一是通过基因突变等手段,
对好氧甲烷氧化菌编码 MMO 等蛋白的基因进行改造,
从而满足不同工业催化的需要,例如提高 MMO的活性、改变 MMO 的底物范围、提高其对金属离子的耐受性
等;二是通过代谢工程手段,向好氧甲烷氧化菌内部引入外源基因,利用甲烷氧化菌为载体生产高附加值的工
业产品,如表达生产蛋白等生物产品[29]。
2摇 好氧甲烷氧化菌分子生态学研究方法
传统方法是利用 NMS及 ANMS等无机盐培养基对好氧甲烷氧化菌进行富集培养或者菌株分离[10]。 分
子微生物生态学方法的出现及应用极大扩展了人类对甲烷氧化菌的认知范围。
最常用的好氧甲烷氧化菌的分子标记物是 16S rRNA 基因,该项应用主要基于大量的 16S rRNA 基因数
据库。 针对好氧甲烷氧化菌各属或菌株的特异性引物和探针已有大量报道,这些引物与以 PCR 技术为基础
的克隆文库(Clone library)、变形梯度凝胶电泳(DGGE)、荧光原位杂交(FISH)等分析技术相结合,在环境微
生物生态学研究中发挥重要作用[30]。 但也会由于引物特异性不足,从而造成非特异性扩增,因此在以 16S
rRNA基因为对象研究环境中好氧甲烷氧化菌时需考虑到这一因素。 除了 16S rRNA 基因之外,功能基因也
是研究环境中好氧甲烷氧化菌的强有力工具,这些功能功能基因包括 mmoX、pmoA、mxaF及 nifH[28]。
DGGE和末端限制多态性研究(T鄄RFLP)为对比大量环境样品中甲烷氧化菌多样性差异提供了快速、灵
敏的技术。 许多针对这 2种方法设计的 16S rRNA基因和功能基因引物为研究环境中好氧甲烷氧化菌多样性
提供了强有力的工具[30]。 另外一种研究环境中甲烷氧化菌的高通量方法是生物芯片技术,尽管生物芯片最
初是作为基因组表达分析的研究工具,但基因诊断芯片已成功开发并已应用于环境中好氧甲烷氧化菌的检
测[31]。 为了定量环境中好氧甲烷氧化菌的数量,可培养方法(最大释然法,即 MPN法)和不依赖培养的分子
生物学方法(Real鄄time PCR和 FHSH)均被使用[30]。 这 2种方法各有利弊,MPN技术依赖于特定培养基中甲
烷氧化菌的生长情况,具有很大的偏好性;分子生物学技术虽不需培养,但很大程度上取决于环境样品的类型
和质量好坏。 为了检测研究环境样品中活跃的甲烷氧化菌菌群,稳定同位素探针技术(SIP)应运而生。 这项
应用技术包括 DNA鄄SIP [32]、RNA鄄SIP [33]、磷脂脂肪酸(PLFA)鄄SIP [34]以及最新使用的 mRNA鄄SIP [35]。 除此外,
SIP 技术也和宏基因组学相结合用于发现新的好氧甲烷氧化菌[36]。 除了以上常用的分子生态学研究方法
外,其他研究工具也逐渐被引入环境好氧甲烷氧化菌的研究,例如显微镜放射自显影(MAR)鄄FISH[37鄄38]、同位
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素芯片[39]、Raman鄄FISH[40]、纳米二次离子质谱(NanoSIMS) [41]和微流体数字 PCR[42]。 这些技术检出限更高、
可同时检测多个样品且能直接给出所测定菌株或菌群的功能特征。
3摇 好氧甲烷氧化菌的生态学研究
过去几十年中,培养及不依赖培养的分子生态学方法已经被广泛用于各种环境中好氧甲烷氧化菌的多样
性、分布及丰度研究,如稻田、垃圾填埋厂、淡水和淡水沉积物、海水、山地土壤以及极端环境。
稻田是大气甲烷的主要来源之一,全球人口激增导致大米需求增加,故而稻田甲烷排放量呈增加趋势。
研究表明稻田中好氧甲烷氧化菌多样性较高[43],包括 Methylomonas、Methylobacter、Methylomicrobium、Methylo鄄
coccus、Methylocaldum、Methylocystis和 Methylosinus属。 有关稻田中何种好氧甲烷氧化菌占据优势,各地研究结
果并不一致。 陆雅海等经研究发现,水稻根部对 Type玉型好氧甲烷氧化菌具有选择性,且水稻根部比根际土
壤中 Type玉型好氧甲烷氧化菌更为丰富[44]。 另有报道认为水稻根系对 Type玉型好氧甲烷氧化菌的偏好不
受水稻物种的影响。 除 Methylocaldum属的好氧甲烷氧化菌多在热带地区被发现外,稻田中的好氧甲烷氧化
菌在全球范围内并没有明显的地域性特征。 研究者认为 Type玉型好氧甲烷氧化菌成为水稻根际优势菌群的
原因在于其能适应较广的 O2 / CH4范围。 再者,水稻根系的 O2浓度非常不稳定,不适宜 Type域型好氧甲烷氧
化菌的生长[45]。 与以上结果相反,Luke等人通过 T鄄RFLP 和基因诊断芯片技术对 18 种不同水稻品种进行研
究,发现这些水稻根系中以 Type域和 TypeX 型好氧甲烷氧化菌为主,并显示出极大的多样性,该研究小组还
指出水稻根部的好氧甲烷氧化菌群落组成受水稻基因型影响很大[46]。 郑勇等[47]研究发现 Type域型甲烷氧
化菌在长期施肥的水稻土壤中占优势,定量 PCR结果发现所有处理中 Type域型甲烷氧化菌的数量是 Type玉
型好氧甲烷氧化菌的 1.88至 3.32倍。 不同施肥处理对甲烷氧化菌的菌群组成有所影响。 长期施氮磷钾和秸
秆的处理(NPK+C)、施氮肥和钾肥(NK)处理的稻田土壤中 Type域型甲烷氧化菌的数量明显比对照高,表明
长期施肥对 Type域型甲烷氧化菌的生长有促进作用。 稻田中甲烷氧化菌的分布和丰度受很多因素的影响,
如氧气的可用性及水稻的生长时期等因素[48]。 在稻田土壤中,高氧气、低甲烷的环境利于 Type玉型好氧甲烷
氧化菌的生长,反之则利于 Type域型甲烷氧化菌的生长[49]。 Shrestha 等研究发现,无论施肥与否,在水稻各
个生长阶段,根际土壤中好氧甲烷氧化菌以 Type域型为主,而水稻根部则以 Type玉型为主[50]。
垃圾填埋场是重要的甲烷排放源,填埋场中由有机物降解每年排放的甲烷约有 36—73 Tg[51],占全球甲
烷排放总量的 6%—12%。 这些甲烷主要靠填埋点土壤覆盖层中的好氧甲烷氧化菌降解[52鄄53]。 由好氧甲烷
氧化菌进行的甲烷氧化变化较大,根据研究地点的不同,从 10%至 100%不等[54]。 经研究发现其中的好氧甲
烷氧 化 菌 包 括 Methylobacter、 Methylosarcina、 Methylomicrobium、 Methylocystis 和 Methylosinus 属, 并 以
Methylobacter和 Methylocystis属为主,分子生物学方法则显示其多样性更大[55]。 Cebron 等[56]与 Chen 等[57]分
别利用稳定同位素培养方法(DNA鄄SIP)和 mRNA 的方法,结合分子生态学分析了 Roscommon 垃圾填埋场覆
盖层中活性好氧甲烷氧化菌菌群的 16S rRNA基因及功能基因(pmoA,mmoX),前者发现在该处微酸土壤环境
中,Type玉型的 Methylobacter和 Methylomonas属,Type域型的 Methylocella、Methylocapsa 和 Methylocystis 属好氧
甲烷氧化菌都在甲烷氧化过程中起重要作用。 Chen 等研究发现 Type玉型 Methylobacter、Methylosarcina 和
Methylomonas属,Type域型 Methylocella和 Methylocystis 属好氧甲烷氧化菌都在甲烷氧化过程中起重要作用。
这两个研究结果互相支撑,相互补充,证明了 DNA鄄SIP 和 mRNA都是研究环境中活性好氧甲烷氧化菌菌群的
有力工具。 Yang等[58]研究了不同剂量铵态氮对垃圾填埋场表层土壤好氧甲烷氧化菌群落组成的影响,发现
NH+4 不同剂量显著影响 Type域 / Type玉型甲烷氧化菌的比例,在每公斤干重土壤施加 100 mg NH
+
4时,该比值
达到最小,说明 NH+4 的施加对 Type域型好氧甲烷氧化菌有抑制作用,对 Type玉型甲烷氧化菌的生长有促进作
用。 该研究指出适当施加铵态氮对减少垃圾填埋场的甲烷排放有显著作用。
淡水和淡水沉积物是大气甲烷的又一重要来源,该类环境中好氧甲烷氧化菌主要以 Type玉型甲烷氧化
菌中的 Methylomonas、Methylobacter、Methylosarcina、Methylococcus和 Methylosoma属为主。 在对华盛顿湖沉积物
的研究中发现,Type玉型比 Type域型好氧甲烷氧化菌多 1—2个数量级[59]。 另外,在康士坦茨湖中,Type玉型
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甲烷氧化菌占 pmoA的克隆文库序列的 90%[60]。 Dumont 等利用 DNA鄄SIP 和 mRNA鄄SIP 相结合的方法,发现
在 Stechlin湖中也以 Type玉型甲烷氧化菌为主要菌群[35]。 张洪勋等通过对我国两处淡水沼泽湿地研究发
现:我国青藏高原若尔盖永冻土湿地中好氧甲烷氧化菌仅有 Methylobacter 属和 Methylocystis 两个属,且以
Type玉型甲烷氧化菌为优势菌群,不同植被覆盖的泥炭沼泽中好氧甲烷氧化菌数量有所不同[61鄄62];对我国东
北地区松嫩平原向海湿地中好氧甲烷氧化菌多样性进行研究,发现向海湿地好氧甲烷氧化菌多样性与淡水湖
泊相似,较若尔盖高寒湿地种类多,但仍以 Type玉型甲烷氧化菌的 Methylobacter 属为优势菌群[63]。 研究的两
个湿地中均有与 Methylococcus属甲烷氧化菌相似度较高的新的甲烷氧化菌存在。 另外,这 2个湿地中 Methyl鄄
obacter属的甲烷氧化菌亲缘关系相近,表明我国自然湿地中甲烷氧化菌具有地域性特点。
对海水和海洋沉积物中甲烷氧化菌的研究相对较少,虽然从海水中分离到了 Methylomonas 和 Methylomi鄄
crobium属的甲烷氧化菌,但分子生态学方面的研究却证明不可培养的好氧甲烷氧化菌 Methylococcaceae 科的
甲烷氧化菌在海洋水体中占主导地位[64]。 还有研究发现 OPU1, OPU3和 Group X是深海中占主导地位的好
氧甲烷氧化菌,其中 OPU1和 OPU3菌群在墨西哥湾和 Santa Monica海湾具有生长优势,且其在甲烷溪流的数
量比非甲烷溪流中多 50多倍,Group X则在加利福尼亚海岸中占优势,其生长不受甲烷溪流的影响[65]。 在黑
海浅海中发现了好氧甲烷氧化菌,Type玉和域型好氧甲烷氧化菌各占细菌总数的 2郾 5%,在深海中参与甲烷氧
化的菌群则主要是 ANME鄄1和 ANME鄄2厌氧甲烷氧化菌[66]。
山地和森林是大气甲烷主要的汇,这些环境中的好氧甲烷氧化菌对大气甲烷有很高的亲和力,并以 Type
域型的 Methylocystis属,山地土壤菌群 琢(USC琢)和 酌(USC酌)的甲烷氧化菌为主。 Kolb 等[67]发现“USC琢冶型
甲烷氧化菌是酸性森林土壤中的主要菌群,而“Cluster I冶则在中性森林土壤中占优势,研究者认为这两种甲
烷氧化菌能适应低甲烷浓度环境主要是由于其细胞特异性的甲烷氧化能力。 Horz等[68]在加利福尼亚山地土
壤中发现 3个不同的甲烷氧化菌分支,这些分支与已报道的 RA14或 VB5FH鄄A种群类似,这些甲烷氧化菌菌
群是典型的大气甲烷氧化菌群,其对气候变暖的响应程度与 Type域型甲烷氧化菌不同。 Mohanty 等[69]研究
发现,森林中的甲烷氧化菌以 Type域型的 Methylocystis 属为主,且有 Type玉型的 Methylomicrobium 和 Methylo鄄
sarcina属甲烷氧化菌存在。 Menyailo等[70]对西伯利亚森林中不同树种的土壤中好氧甲烷氧化菌的菌群组成
及丰度进行了调查,发现该地土壤中以 USC琢为主要甲烷氧化菌群,树种的不同并不会影响甲烷氧化菌的菌
群组成,但会影响土壤甲烷氧化速率,造成这一结果的原因可能是树种的不同会影响甲烷氧化菌的单个细胞
活性,但并不会影响其周围土壤中甲烷氧化菌的种类,这一过程是通过控制土壤中氮循环完成的。 有研究者
推测,USC琢和 USC酌为不可培养的可在大气低浓度甲烷下生长的甲烷氧化菌。 另一种解释则认为在高山和
森林中的好氧甲烷氧化菌以木质素降解产物甲醇作为能源和碳源。 直到近期,Baani 和 Liesack[71]发现在
Methylocystis sp. SC2中存在一种特殊的 pMMO酶,该酶对甲烷的亲和力不同,由此可解释为什么 Methylocystis
属的甲烷氧化菌能在山地和森林,以及其他环境中普遍存在。
极端环境中的好氧甲烷氧化菌研究一直备受关注。 从酸性从泥炭沼泽土壤和酸性森林土壤中分离出的
属于 Methylocella 和 Methylocapsa属的好氧甲烷氧化菌[72鄄73];从嗜盐和嗜碱环境中分离到的属于 Methylomi鄄
crobium属和 Methylohalobius的好氧甲烷氧化菌[74鄄75];从永冻土地区分离出的嗜冷甲烷氧化菌 Methylobacter
psychrophilus、Methylosphaera hansonii 和 Methylomonas scandinavica[13, 76],这些 Type玉型甲烷氧化菌生长于低温
环境中 (5—15 益)并且 G +C 含量较低;以及从热泉中分离的嗜热甲烷氧化菌 Methylococcus capsulatus
Bath[10]、Methylocaldum spp.[77鄄78]和 Methylothermus thermalis[79]。 最为引人瞩目的是从世界不同区域火分离的
疣微菌门(Verrucomicrobia)的 3株极端嗜热嗜酸甲烷氧化菌[20鄄22],这些好氧甲烷氧化菌细胞内含有与其他菌
株不同的 pmoA基因,表明它们对碳的代谢和吸收可能有另外的途径。 对于疣微菌门好氧甲烷氧化菌物理化
学特征及分类学地位,Op den Camp等人给予了详细的综述[23]。 人类对极端环境中好氧甲烷氧化菌的探索有
待进一步深入,相信将来还会有更多极端环境中的好氧甲烷氧化菌被发现。
4摇 苔藓鄄好氧甲烷氧化菌共生体
很长一段时间内,人们认为只有厌氧甲烷氧化菌能够与其他生物形成共生体系,如厌氧甲烷氧化菌和硫
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还原细菌或硝酸还原菌共生。 最新研究发现,好氧甲烷氧化菌也能与环境中的其他生物形成共生体系。 Kip
与同事研究发现,泥炭苔藓可与好氧甲烷氧化菌共生,合作进行甲烷氧化(图 3) [80]。
图 3摇 泥炭沼泽中泥炭苔藓鄄甲烷氧化菌共生甲烷氧化途径示意图[80]
Fig.3摇 Methane oxidation by methanotrophs in a peat bog. Sphagnum mosses form symbioses with methane鄄consuming bacteria in Sphag鄄
num鄄dominated peat bogs[80]
稳定同位素标记实验证实了泥炭苔藓所同化的 35%的 CO2是通过甲烷氧化产生。 这种共生体系的形成
对于好氧甲烷氧化菌和苔藓来说是互利的(图 3):水下的泥炭苔藓由于缺乏气孔不能从大气得到足够的 CO2
进行光合作用,于是好氧甲烷氧化菌的代谢产物 CO2就成为其绝佳的 CO2来源。 与此同时,水下泥炭苔藓中
的好氧甲烷氧化菌也可利用泥炭苔藓光合作用产生的 O2完成甲烷氧化过程。 Kip 等人还指出,在温度升高
时,该共生体系能更好的减少甲烷排放。 当从土壤中去掉泥炭苔藓时,土壤的甲烷排放量升至原来的 4 倍,表
明泥炭苔藓鄄好氧甲烷氧化菌共生体系比游离生长的甲烷氧化菌在甲烷氧化过程中起更重要的作用[80鄄81]。
通过进一步研究,Kip等人从泥炭苔藓中分离出了多株嗜酸性甲烷氧化菌,所获多数菌株属于 Type域型
好氧甲烷氧化菌[82]。 另外,他们还在荷兰及巴塔哥尼亚泥炭苔藓中发现 Methylomonas 和 Methylocystis 分布最
为广泛[82鄄83]。 Liebner等人[84]通过研究证实,苔藓鄄甲烷氧化菌共生氧化甲烷的现象不仅存在于泥炭苔藓和
低 pH值的泥炭沼泽中,还存在于褐藓与永冻土中。 该研究同样通过稳定同位素方法研究了西伯利亚冻土水
体中的褐藓鄄好氧甲烷氧化菌共生体系,发现该体系氧化甲烷能力在淹水条件下增强,且在光照条件下是一个
纯的甲烷汇,当去掉光照时,土壤就变成了强大的甲烷排放源。 该研究还估测,褐藓鄄好氧甲烷氧化菌共生作
用使得北极多边苔原冻土甲烷排放总量至少减少了 5%,鉴于褐藻在永冻土淡水区域广泛生长,苔藓鄄甲烷氧
化菌共生作用可能是该地区淡水环境主要的甲烷氧化途径。
5摇 环境对好氧甲烷氧化菌的影响
影响甲烷氧化菌的环境因素可归为化学因素和生物因素两大类。 化学因素主要包括氧气,水分状况,含
氮化合物及重金属等;生物因素主要有竞争和捕食。 目前研究主要集中在化学因素方面。 水位和氧气会影响
好养甲烷氧化菌的活性,尤其是在泥炭沼泽湿地和稻田中。 有研究证明长期排水会影响土壤中甲烷氧化菌的
群落组成,不同形式的土地利用显著影响甲烷氧化菌的群落组成与活性[85]。 一方面,水位升高会降低土壤氧
气浓度,从而导致甲烷氧化菌可用氧气量减少;另一方面,排水会增加土壤氧气含量从而促进甲烷氧化菌
生长。
铵盐的沉积或施加对好氧甲烷氧化造成的影响存在很大争议[86]。 Mosier 等[87]首次报道草地土壤在施
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加氮肥后抑制了其对甲烷的吸收,但垃圾填埋场施加氮肥后却促进了甲烷的氧化。 Bodelier 等[88]研究发现,
NH+4 可以促进水稻根际甲烷的氧化作用。 由此可看出氮肥的影响在很大程度上依赖于环境中氮的存在
形态。
生物因素也会影响环境中好氧甲烷氧化菌对甲烷的氧化,如捕食。 Murase 和 Frenze[89]做了一项有趣的
研究,发现原生动物对甲烷氧化菌的捕食行为,他们从稻田中分离出了以好氧甲烷氧化菌为食的原生动物。
Murase等人还发现原生动物偏好捕食特定的甲烷氧化菌(如 Methylobacter),这可能是由于捕食这类甲烷氧化
菌后能最快速有效的进行自身的同化作用[90]。 Moon 等将含有蚯蚓的水稻土作为垃圾填埋场的覆盖层能有
效减少垃圾填埋场的甲烷排放,并且发现覆盖层土壤中的细菌及甲烷氧化菌主要来源于水稻土及蚯蚓排泄
物,Type玉 (主要为 Methylocaldum)和 Type域 (主要为 Methylocystis)型甲烷氧化菌都在甲烷氧化过程中起重
要作用[91]。 近期研究还表明在土壤中加入蚯蚓后能显著增加好氧甲烷氧化菌的多样性和数量[92]。
放牧对甲烷氧化菌有一定影响。 周小奇等对我国青藏高原草甸土壤研究发现,放牧显著影响土壤中好氧
甲烷氧化菌的群落组成[93]。 郑勇等研究发现,放牧增加了好氧甲烷氧化菌的数量,从而促进了土壤的甲烷氧
化能力[94]。
6摇 问题与展望
人类对好氧甲烷氧化菌及其在减少大气甲烷排放的作用研究历经数十载,逐渐阐明了其在大气碳循环中
的重要作用,但研究过程中仍涉及到几个重要问题仍值得深思,有待进一步研究[24]。
(1) 好氧甲烷氧化菌多样性及分布在微生物世界内究竟是怎样? 过去几年中不断有新的甲烷氧化菌菌
株分离出来,如丝状甲烷氧化菌 Crenothrix 以及嗜酸嗜低温的疣微菌门(Verrucomicrobia)好氧甲烷氧化菌的
发现。 这些新的发现令人不禁想到,环境中或许还存在更多未知的、新的好氧甲烷氧化菌有待发现。 另外,是
否存在一类“大气好氧甲烷氧化菌冶? 是否有好氧甲烷氧化古菌的存在? 所有这些问题的解决都将取决于新
的分离技术的出现。
(2) 不同种类的好氧甲烷氧化菌菌群之间是怎样相互竞争最基本的生存物质,如氧气和氮素? 随着新近
发明的可测定单个细胞的 Raman荧光原位杂交及纳米二次离子质谱(NanoSIMS)技术的问世,相信这一问题
也会迎刃而解。
(3) 兼性甲烷氧化菌是否只存在于 Methylocella属,如果不是,那么还有哪些? 它们何时以及怎样从异养
型微生物转换为甲烷营养型的? 作为兼性营养的好氧甲烷氧化有哪些生长优势? 比较基因组学和蛋白质组
学在定义代谢途径及兼性营养的基因调控机制方面具有重要作用,这些研究的应用将为以上问题的解决带来
可能。
References:
[ 1 ]摇 IPCC. Climate Change 2007: The physical science basis. Summary for policymakers. Contribution of Working Group I to the fourth assessment report
of the Intergovernmental Panel on Climate Change. Paris: Summary for Policymakers formally approved at the 10th Session of Working Group I of
the IPCC.
[ 2 ] 摇 Blake D R, Rowland F S. Continuing worldwide increase in tropospheric methane, 1978 to 1987. Science, 1988, 239(4844): 1129鄄1131.
[ 3 ] 摇 Conrad R. The global methane cycle: recent advances in understanding the microbial processes involved. Environmental Microbiology Reports,
2009, 1(5): 285鄄292.
[ 4 ] 摇 Frenzel P. Plant鄄associated methane oxidation in rice fields and wetlands / / Bernhard S, ed. Advances in Microbial Ecology. New York: Kluwer
Academic / Plenum Publisher, 2000: 85鄄114.
[ 5 ] 摇 Reeburgh W S. Global methane biogeochemistry. Treatise on Geochemistry, 2003, 4: 65鄄89.
[ 6 ] 摇 Roslev P, King G M. Regulation of methane oxidation in a freshwater wetland by water table changes and anoxia. FEMS Microbiology Ecology,
1996, 19(2): 105鄄115.
[ 7 ] 摇 Le Mer J, Roger P. Production, oxidation, emission and consumption of methane by soils: a review. European Journal of Soil Biology, 2001, 37
(1): 25鄄50.
1876摇 21期 摇 摇 摇 贠娟莉摇 等:好氧甲烷氧化菌生态学研究进展 摇
http: / / www.ecologica.cn
[ 8 ]摇 Hanson R S, Hanson T E. Methanotrophic bacteria. Microbiology and Molecular Biology Reviews, 1996, 60(2): 439鄄71.
[ 9 ] 摇 S觟hngen N L. 譈ber Bakterien welche methan kohlenstoffnahrung energiequelle gebrauchen. Zentrabl Bakteriol Parasitenkd Infectionskr, 1906, 15:
513鄄517.
[10] 摇 Whittenbury R, Phillips K C, Wilkinson J F. Enrichment, isolation and some properties of methane鄄utilizing bacteria. Journal of General Microbiol鄄
ogy, 1970, 61(2): 205鄄218.
[11] 摇 Bowman J P. The methanotrophs鄄the families Methylococcaceae and Methylocystaceae. Prokaryotes, 2006, 5: 266鄄289.
[12] 摇 Bowman J P. The methanotrophs鄄 the families Methylococcaceae and Methylocystaceae / / Dworkin D M, ed. The Prokaryotes. New York: Springer,
1999: 1953鄄1966.
[13] 摇 Bowman J P, McCammon S A, Skerratt J H. Methylosphaera hansonii gen. nov., sp. nov., a psychrophilic, group I methanotroph from Antarctic
marine鄄salinity, meromictic lakes. Microbiology, 1997, 143(4): 1451鄄1459.
[14] 摇 Bowman J P, Sly L I, Nichols P D, Hayward A C. Revised taxonomy of the Methanotrophs: Description of Methylobacter gen. nov., Emendation of
Methylococcus, Validation of Methylosinus and Methylocystis Species, and a proposal that the family Methylococcaceae includes only the group鄄I
Methanotrophs. International Journal of Systematic Bacteriology, 1993, 43(4): 735鄄753.
[15] 摇 Bowman J P, Sly L I, Stackebrandt E. The phylogenetic position of the family Methylococcaceae. International Journal of Systematic Bacteriology,
1995, 45(1): 182鄄185.
[16] 摇 Dedysh S N, Knief C, Dunfield P F. Methylocella species are facultatively methanotrophic. Journal of Bacteriology, 2005, 187(13): 4665鄄4670.
[17] 摇 Theisen A R, Ali M H, Radajewski S, Dumont M G, Dunfield P F, McDonald I R, Dedysh S N, Miguez C B, Murrell J C. Regulation of methane
oxidation in the facultative methanotroph Methylocella silvestris BL2. Molecular Microbiology, 2005, 58(3): 682鄄692.
[18] 摇 Stoecker K, Bendinger B, Sch ning B, Nielsen P H, Nielsen J L, Baranyi C, Toenshoff E R, Daims H, Wagner M. Cohn忆s Crenothrix is a fila鄄
mentous methane oxidizer with an unusual methane monooxygenase. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of Ameri鄄
ca, 2006, 103(7): 2363鄄2367.
[19] 摇 Kulichevskaya I S, Ivanova A O, Belova S E, Baulina O I, Bodelier P L E, Rijpstra W I C, Sinninghe Damst佴 J S, Zavarzin G A, Dedysh S N.
Schlesneria paludicola gen. nov., sp. nov., the first acidophilic member of the order Planctomycetales, from Sphagnum鄄dominated boreal wetlands.
International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2007, 57(11): 2680鄄2687.
[20] 摇 Dunfield P F, Yuryev A, Senin P, Smirnova A V, Stott M B, Hou S B, Ly B, Saw J H, Zhou Z M, Ren Y, Wang J M, Mountain B W, Crowe M
A, Weatherby T M, Bodelier P L E, Liesack W, Feng L, Wang L, Alam M. Methane oxidation by an extremely acidophilic bacterium of the phy鄄
lum Verrucomicrobia. Nature, 2007, 450(7171): 879鄄82.
[21] 摇 Pol A, Heijmans K, Harhangi H R, Tedesco D, Jetten M S, Op den Camp H J M. Methanotrophy below pH 1 by a new Verrucomicrobia species.
Nature, 2007, 450(7171): 874鄄878.
[22] 摇 Islam T, Jensen S, Reigstad L J, Larsen 覫, Birkeland N K. Methane oxidation at 55益 and pH 2 by a thermoacidophilic bacterium belonging to the
Verrucomicrobia phylum. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2008, 105(1): 300鄄304.
[23] 摇 Op den Camp H J M, Islam T, Stott M B, Harhangi H R, Hynes A, Schouten S, Jetten M S M, Birkeland N K, Pol A, Dunfield P F. Environ鄄
mental, genomic and taxonomic perspectives on methanotrophic Verrucomicrobia. Environmental Microbiology Reports, 2009, 1(5): 293鄄306.
[24] 摇 Murrell J C. The aerobic methane oxidizing bacteria (Methanotrophs) / / Timmis K N, ed. Handbook of Hydrocarbon and Lipid Microbiology. Ber鄄
lin Heidelberg: Springer, 2010: 1954鄄1963.
[25] 摇 Mancinelli R L. The regulation of methane oxidation in soil. Annual Review of Microbiology, 1995, 49(1): 581鄄605.
[26] 摇 Dedysh S N, Liesack W, Khmelenina V N, Suzina N E, Trotsenko Y A, Semrau J D, Bares A M, Panikov N S, Tiedje J M. Methylocella palustris
gen. nov., sp nov., a new methane鄄oxidizing acidophilic bacterium from peat bogs, representing a novel subtype of serine鄄pathway methanotrophs.
International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2000, 50(3): 955鄄969.
[27] 摇 Vorobev A V, Baani M, Doronina N V, Brady A L, Liesack W, Dunfield P F, Dedysh S N. Methyloferula stellata gen. nov., sp nov., an acido鄄
philic, obligately methanotrophic bacterium that possesses only a soluble methane monooxygenase. International Journal of Systematic and Evolution鄄
ary Microbiology, 2011, 61(10): 2456鄄2463.
[28] 摇 Trotsenko Y A, Murrell J C. Metabolic aspects of aerobic obligate methanotrophy / / Laskin A I, Gadd G M, Sariaslani S, eds. Advances in Applied
Microbiology. New York: Academic Press, 2008: 183鄄229.
[29] 摇 Han B, Su T, Li X, Xing X H. Research progresses of methanotrophs and methane monooxygenases. Chinese Journal of Biotechnology, 2008, 24
(9): 1511鄄1519.
[30] 摇 McDonald I R, Bodrossy L, Chen Y, Murrell J C. Molecular ecology techniques for the study of aerobic methanotrophs. Applied and Environmental
Microbiology, 2008, 74(5): 1305.
[31] 摇 Bodrossy L, Stralis鄄Pavese N, Murrell J C, Radajewski S, Weilharter A, Sessitsch A. Development and validation of a diagnostic microbial mi鄄
2876 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 33卷摇
http: / / www.ecologica.cn
croarray for methanotrophs. Environmental Microbiology, 2003, 5(7): 566鄄582.
[32] 摇 Radajewski S, Ineson P, Parekh N R, Murrell J C. Stable鄄isotope probing as a tool in microbial ecology. Nature, 2000, 403(6770): 646鄄649.
[33] 摇 Manefield M, Whiteley A S, Griffiths R I, Bailey M J. RNA stable isotope probing, a novel means of linking microbial community function to phy鄄
logeny. Applied and Environmental Microbiology, 2002, 68(11): 5367鄄5373.
[34] 摇 Bull I D, Parekh N R, Hall G H, Ineson P, Evershed R P. Detection and classification of atmospheric methane oxidizing bacteria in soil. Nature,
2000, 405(6783): 175鄄178.
[35] 摇 Dumont M G, Pommerenke B, Casper P, Conrad R. DNA鄄, rRNA鄄 and mRNA鄄based stable isotope probing of aerobic methanotrophs in lake sedi鄄
ment. Environmental Microbiology, 2011, 13(5): 1153鄄1167.
[36] 摇 Chen Y, Dumont M G, Neufeld J D, Bodrossy L, Stralis‐ Pavese N, McNamara N P, Ostle N, Briones M J I, Murrell J C. Revealing the uncul鄄
tivated majority: combining DNA stable‐ isotope probing, multiple displacement amplification and metagenomic analyses of uncultivated Methylo鄄
cystis in acidic peatlands. Environmental Microbiology, 2008, 10(10): 2609鄄2622.
[37] 摇 Lee N, Nielsen P H, Andreasen K H, Juretschko S, Nielsen J L, Schleifer K H, Wagner M. Combination of fluorescent in situ hybridization and
microautoradiography鄄a new tool for structure鄄function analyses in microbial ecology. Applied and Environmental Microbiology, 1999, 65( 3):
1289鄄1297.
[38] 摇 Ouverney C C, Fuhrman J A. Combined microautoradiography鄄16S rRNA probe technique for determination of radioisotope uptake by specific micro鄄
bial cell types in situ. Applied and Environmental Microbiology, 1999, 65(4): 1746鄄1752.
[39] 摇 Adamczyk J, Hesselsoe M, Iversen N, Horn M, Lehner A, Nielsen P H, Schloter M, Roslev P, Wagner M. The isotope array, a new tool that em鄄
ploys substrate鄄mediated labeling of rRNA for determination of microbial community structure and function. Applied and Environmental Microbiolo鄄
gy, 2003, 69(11): 6875鄄6887.
[40] 摇 Huang W E, Stoecker K, Griffiths R, Newbold L, Daims H, Whiteley A S, Wagner M. Raman‐ FISH: combining stable‐ isotope Raman spec鄄
troscopy and fluorescence in situ hybridization for the single cell analysis of identity and function. Environmental Microbiology, 2007, 9( 8):
1878鄄1889.
[41] 摇 Li T L, Wu T D, Maz佴as L, Toffin L, Guerquin‐ Kern J L, Leblon G, Bouchez T. Simultaneous analysis of microbial identity and function using
NanoSIMS. Environmental Microbiology, 2008, 10(3): 580鄄588.
[42] 摇 Hashsham S A, Gulari E, Tiedje J M. Microfluidic systems being adapted for microbial, molecular biological analyses. Microbe鄄American Society
for Microbiology, 2007, 2(11): 531鄄536.
[43] 摇 Hoffmann T, Horz H P, Kemnitz D, Conrad R. Diversity of the particulate methane monooxygenase gene in methanotrophic samples from different
rice field soils in China and the Philippines. Systematic and Applied Microbiology, 2002, 25(2): 267鄄274.
[44] 摇 Wu L Q, Ma K, Lu Y H. Rice roots select for type I methanotrophs in rice field soil. Systematic and Applied Microbiology, 2009, 32( 6):
421鄄428.
[45] 摇 L俟ke C, Krause S, Cavigiolo S, Greppi D, Lupotto E, Frenzel P. Biogeography of wetland rice methanotrophs. Environmental Microbiology, 2010,
12(4): 862鄄872.
[46] 摇 L俟ke C, Bodrossy L, Lupotto E, Frenzel P. Methanotrophic bacteria associated to rice roots: the cultivar effect assessed by T鄄RFLP and microarray
analysis. Environmental Microbiology Reports, 2011, 3(5): 518鄄525.
[47] 摇 Zheng Y, Zhang L M, Zheng Y M, Di H J, He J Z. Abundance and community composition of methanotrophs in a Chinese paddy soil under long鄄
term fertilization practices. Journal of Soils and Sediments, 2008, 8(6): 406鄄414.
[48] 摇 Eller G, Stubner S, Frenzel P. Group鄄specific 16S rRNA targeted probes for the detection of type I and type II methanotrophs by fluorescence in situ
hybridisation. FEMS Microbiology Letters, 2001, 198(2): 91鄄97.
[49] 摇 Graham D W, Chaudhary J A, Hanson R S, Arnold R G. Factors affecting competition between Type玉 and Type域 methanotrophs in two鄄organ鄄
ism, continuous鄄flow reactors. Microbial Ecology, 1993, 25(1): 1鄄17.
[50] 摇 Shrestha M, Shrestha P M, Frenzel P, Conrad R. Effect of nitrogen fertilization on methane oxidation, abundance, community structure, and gene
expression of methanotrophs in the rice rhizosphere. ISME Journal, 2010, 4(12): 1545鄄1556.
[51] 摇 Howeling S, Kaminski T, Dentener F, Lelieveld J, Heimann M. Inverse modeling of methane sources and sinks using the adjoint of a global trans鄄
port model. Jounal of Geophysical Research, 1999, 104(D21): 26137鄄26160.
[52] 摇 Whalen S C, Reeburgh W S, Sandbeck K A. Rapid methane oxidation in a landfill cover soil. Applied and Environmental Microbiology, 1990, 56
(11): 3405鄄3411.
[53] 摇 Jones H A Nedwell D B. Methane emission and methane oxidation in landfill cover soil. FEMS Microbiology Ecology, 1993, 102(3 / 4): 185鄄195.
[54] 摇 Hilger H Humer M. Biotic landfill cover treatments for mitigating methane emissions. Environmental Monitoring and Assessment, 2003, 84(1 / 2):
71鄄84.
3876摇 21期 摇 摇 摇 贠娟莉摇 等:好氧甲烷氧化菌生态学研究进展 摇
http: / / www.ecologica.cn
[55]摇 Chen Y, Murrell J C. Ecology of aerobic methanotrophs and their role in methane cycling / / Timmis K N, ed. Handbook of Hydrocarbon and Lipid
Microbiology. Berlin Heidelberg: Springer, 2010: 3067鄄3076.
[56] 摇 C佴bron A, Bodrossy L, Chen Y, Singer A C, Thompson I P, Prosser J I, Murrell J C. Identity of active methanotrophs in landfill cover soil as re鄄
vealed by DNA鄄stable isotope probing. FEMS Microbiology Ecology, 2007, 62(1): 12鄄23.
[57] 摇 Chen Y, Dumont M G, C佴bron A, Murrell J C. Identification of active methanotrophs in a landfill cover soil through detection of expression of 16S
rRNA and functional genes. Environmental Microbiology, 2007, 9(11): 2855鄄2869.
[58] 摇 Yang N, L俟 F, He P J, Shao L M. Response of methanotrophs and methane oxidation on ammonium application in landfill soils. Applied Microbiol鄄
ogy and Biotechnology, 2011, 92(5): 1073鄄1082.
[59] 摇 Costello A M, Auman A J, Macalady J L, Scow K M, Lidstrom M E. Estimation of methanotroph abundance in a freshwater lake sediment. Environ鄄
mental Microbiology, 2002, 4(8): 443鄄450.
[60] 摇 Rahalkar M Schink B. Comparison of aerobic methanotrophic communities in littoral and profundal sediments of Lake Constance by a molecular ap鄄
proach. Applied and Environmental Microbiology, 2007, 73(13): 4389鄄4394.
[61] 摇 Yun J L, Zhuang G Q, Ma A Z, Guo H G, Wang Y F, Zhang H X. Community structure, abundance, and activity of methanotrophs in the Zoige
Wetland of the Tibetan Plateau. Microbial Ecology, 2012, 63(4): 835鄄843.
[62] 摇 Yun J L, Ma A Z, Li Y M, Zhuang G Q, Wang Y F, Zhang H X. Diversity of methanotrophs in Zoige wetland soils under both anaerobic and aero鄄
bic conditions. Journal of Environmental Sciences, 2010, 22(8): 1232鄄1238.
[63] 摇 Yun J L, Yu Z S, Li K, Zhang H X. Diversity, abundance and vertical distribution of methane鄄oxidizing bacteria (methanotrophs) in the sediments
of the Xianghai wetland, Songnen Plain, Northeast China. Journal of Soils and Sediments, 2013, 13 (1):242鄄252.
[64] 摇 Wasmund K, Kurtb觟ke D I, Burns K A, Bourne D G. Microbial diversity in sediments associated with a shallow methane seep in the tropical Timor
Sea of Australia reveals a novel aerobic methanotroph diversity. FEMS Microbiology Ecology, 2009, 68(2): 142鄄151.
[65] 摇 Tavormina P L, Ussler W, Joye S B, Harrison B K, Orphan V J. Distributions of putative aerobic methanotrophs in diverse pelagic marine environ鄄
ments. The ISME Journal, 2010, 4(5): 700鄄710.
[66] 摇 Durisch鄄Kaiser E, Klauser L, Wehrli B, Schubert C. Evidence of intense archaeal and bacterial methanotrophic activity in the Black Sea water col鄄
umn. Applied and Environmental Microbiology, 2005, 71(12): 8099鄄8106.
[67] 摇 Kolb S, Knief C, Dunfield P F, Conrad R. Abundance and activity of uncultured methanotrophic bacteria involved in the consumption of atmos鄄
pheric methane in two forest soils. Environmental Microbiology, 2005, 7(8): 1150鄄1161.
[68] 摇 Horz H P, Rich V, Avrahami S, Bohannan B J M. Methane鄄oxidizing bacteria in a California upland grassland soil: Diversity and response to simu鄄
lated global change. Applied and Environmental Microbiology, 2005, 71(5): 2642鄄2652.
[69] 摇 Mohanty S R, Bodelier P L E, Floris V, Conrad R. Differential effects of nitrogenous fertilizers on methane鄄consuming microbes in rice field and
forest soils. Applied and Environmental Microbiology, 2006, 72(2): 1346鄄1354.
[70] 摇 Menyailo O V, Abraham W R, Conrad R. Tree species affect atmospheric CH4 oxidation without altering community composition of soil methanotro鄄
phs. Soil Biology and Biochemistry, 2010, 42(1): 101鄄107.
[71] 摇 Baani M, Liesack W L. Two isozymes of particulate methane monooxygenase with different methane oxidation kinetics are found in Methylocystis sp.
Strain SC2. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2008, 105(29): 10203鄄10208.
[72] 摇 Dedysh S N, Khmelenina V N, Suzina N E, Trotsenko Y A, Semrau J D, Liesack W, Tiedje J M. Methylocapsa acidiphila gen. nov., sp nov., a
novel methane鄄oxidizing and dinitrogen鄄fixing acidophilic bacterium from Sphagnum bog. International Journal of Systematic and Evolutionary Micro鄄
biology, 2002, 52(1): 251鄄261.
[73] 摇 Dunfield P F, Khmelenina V N, Suzina N E, Trotsenko Y A, Dedysh S N. Methylocella silvestris sp. nov., a novel methanotroph isolated from an a鄄
cidic forest cambisol. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2003, 53(5): 1231鄄1239.
[74] 摇 Trotsenko Y A, Khmelenina V N. Biology of extremophilic and extremotolerant methanotrophs. Archives of Microbiology, 2002, 177(2): 123鄄131.
[75] 摇 Heyer J, Berger U, Hardt M, Dunfield P F. Methylohalobius crimeensis gen. nov., sp. nov., a moderately halophilic, methanotrophic bacterium iso鄄
lated from hypersaline lakes of Crimea. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2005, 55(5): 1817鄄1826.
[76] 摇 Omel忆Chenko M V, Vasil忆Eva L V, Zavarzin G A, Savel忆Eva N D, Lysenko A M, Mityushina L L, Khmelenina V N, Trotsenko Y A. A novel psy鄄
chrophilic methanotroph of the genus Methylobacter. Microbiology, 1996, 65(3): 339鄄343.
[77] 摇 Bodrossy L, Holmes E M, Holmes A J, Kov佗cs K L, Murrell J C. Analysis of 16S rRNA and methane monooxygenase gene sequences reveals a no鄄
vel group of thermotolerant and thermophilic methanotrophs, Methylocaldum gen. nov. Archives of Microbiology, 1997, 168(6): 493鄄503.
[78] 摇 Bodrossy L, Kov佗cs K L, McDonald I R, Murrell J C. A novel thermophilic methane鄄oxidising 酌鄄Proteobacterium. FEMS Microbiology Letters,
1999, 170(2): 335鄄341.
[79] 摇 Tsubota J, Eshinimaev B T, Khmelenina V N, Trotsenko Y A. Methylothermus thermalis gen. nov., sp. nov., a novel moderately thermophilic ob鄄
4876 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 33卷摇
http: / / www.ecologica.cn
ligate methanotroph from a hot spring in Japan. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2005, 55(5): 1877鄄1884.
[80] 摇 Kip N, Van Winden J F, Pan Y, Bodrossy L, Reichart G J, Smolders A J P, Jetten M S M, Damst佴 J S S, Op den Camp H J M. Global preva鄄
lence of methane oxidation by symbiotic bacteria in peat鄄moss ecosystems. Nature Geoscience, 2010, 3(9): 617鄄621.
[81] 摇 Chen Y, Murrell J C. Geomicrobiology: Methanotrophs in moss. Nature Geoscience, 2010, 3(9): 595鄄596.
[82] 摇 Kip N, Ouyang W J, van Winden J, Raghoebarsing A, van Niftrik L, Pol A, Pan Y, Bodrossy L, van Donselaar E G, Reichart G J, Jetten M S
M, Damste J S S, and den Camp H J M O. Detection, Isolation, and characterization of acidophilic methanotrophs from Sphagnum Mosses. Applied
and Environmental Microbiology, 2011, 77(16): 5643鄄5654.
[83] 摇 Kip N, Fritz C, Langelaan E S, Pan Y, Bodrossy L, Pancotto V, Jetten M S M, Smolders A J P, Op den Camp H J M. Methanotrophic activity
and diversity in different Sphagnum magellanicum dominated habitats in the southernmost peat bogs of Patagonia. Biogeosciences, 2012, 9(1):
47鄄55.
[84] 摇 Liebner S, Zeyer J, Wagner D, Schubert C, Pfeiffer E M, Knoblauch C. Methane oxidation associated with submerged brown mosses reduces meth鄄
ane emissions from Siberian polygonal tundra. Journal of Ecology, 2011, 99(4): 914鄄922.
[85] 摇 Knief C, Dunfield P F. Response and adaptation of different methanotrophic bacteria to low methane mixing ratios. Environmental Microbiology,
2005, 7(9): 1307鄄1317.
[86] 摇 Bodelier P L E, Laanbroek H J. Nitrogen as a regulatory factor of methane oxidation in soils and sediments. FEMS Microbiology Ecology, 2004, 47
(3): 265鄄277.
[87] 摇 Mosier A, Schimel D, Valentine D, Bronson K, Parton W. Methane and nitrous oxide fluxes in native, fertilized and cultivated grasslands. Nature,
1991, 350(6316): 330鄄332.
[88] 摇 Bodelier P L E, Roslev P, Henckel T, Frenzel P. Stimulation by ammonium鄄based fertilizers of methane oxidation in soil around rice roots. Nature,
2000, 403(6768): 421鄄424.
[89] 摇 Murase J, Frenzel P. A methane鄄driven microbial food web in a wetland rice soil. Environmental Microbiology, 2007, 9(12): 3025鄄3034.
[90] 摇 Murase J, Hordijk K, Tayasu I, Bodelier P L E. Strain鄄specific incorporation of methanotrophic biomass into eukaryotic grazers in a rice field soil
revealed by PLFA鄄SIP. FEMS Microbiology Ecology, 2011, 75(2): 284鄄290.
[91] 摇 Moon L E, Lee S Y, Lee S H, Ryu H W, Cho K S. Earthworm cast as a promising filter bed material and its methanotrophic contribution to meth鄄
ane removal. Journal of Hazardous Materials, 2010, 176(1 / 3): 131鄄138.
[92] 摇 Kim T G, Moon K E, Lee E H, Choi S A, Cho K S. Assessing effects of earthworm cast on methanotrophic community in a soil biocover by concur鄄
rent use of microarray and quantitative real鄄time PCR. Applied Soil Ecology, 2011, 50: 52鄄55.
[93] 摇 Zhou X Q, Wang Y F, Huang X Z, Hao Y B, Tian J Q, Wang J Z. Effects of grazing by sheep on the structure of methane鄄oxidizing bacterial com鄄
munity of steppe soil. Soil Biology and Biochemistry, 2008, 40(1): 258鄄261.
[94] 摇 Zheng Y, Yang W, Sun X, Wang S P, Rui Y C, Luo C Y, Guo L D. Methanotrophic community structure and activity under warming and grazing
of alpine meadow on the Tibetan Plateau. Applied Microbiology and Biotechnology, 2012, 93(5): 2193鄄2203.
参考文献:
[29]摇 韩冰, 苏涛, 李信, 邢新会. 甲烷氧化菌及甲烷单加氧酶的研究进展. 生物工程学报, 2008, 24(9): 1511鄄1519.
5876摇 21期 摇 摇 摇 贠娟莉摇 等:好氧甲烷氧化菌生态学研究进展 摇
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叶生态学报曳圆园员源年征订启事
叶生态学报曳是由中国科学技术协会主管袁中国生态学学会尧中国科学院生态环境研究中心主办的生态学
高级专业学术期刊袁创刊于 员怨愿员年袁报道生态学领域前沿理论和原始创新性研究成果遥 坚持野百花齐放袁百家
争鸣冶的方针袁依靠和团结广大生态学科研工作者袁探索生态学奥秘袁为生态学基础理论研究搭建交流平台袁
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叶生态学报曳主要报道生态学及各分支学科的重要基础理论和应用研究的原始创新性科研成果遥 特别欢
迎能反映现代生态学发展方向的优秀综述性文章曰研究简报曰生态学新理论尧新方法尧新技术介绍曰新书评价和
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本期责任副主编摇 余新晓摇 摇 摇 编辑部主任摇 孔红梅摇 摇 摇 执行编辑摇 刘天星摇 段摇 靖
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