全 文 :第 25 卷第 12 期
2005 年 12 月
生 态 学 报
A CTA ECOLO G ICA S IN ICA
V o l. 25,N o. 12
D ec. , 2005
北京市三个功能区空气微生物中值
直径及粒径分布特征
方治国1, 欧阳志云13 , 胡利锋1, 2, 王效科1, 林学强1
(1. 中国科学院生态环境研究中心系统生态重点实验室, 北京 100085; 2. 湖南农业大学生物安全与科技学院, 长沙 410128)
基金项目: 中国科学院知识创新工程方向性资助项目 (KZCX32SW 2424)
收稿日期: 2005204222; 修订日期: 2005208229
作者简介: 方治国 (1977~ ) , 男, 安徽黄山人, 博士生, 从事生物多样性和微生物生态研究。3 通讯作者A utho r fo r co rrespondence. E2m ail: zyouyang@m ail. rcees. ac. cn
Foundation item: T he P ro ject of Know ledge Innovation of CA S (N o. KZCX32SW 2424)
Rece ived date: 2005204222; Accepted date: 2005208229
Biography: FAN G Zh i2Guo, Ph. D. candidate, m ain ly engaged in b iodiversity and m icrob ial eco logy.
摘要: 空气中微生物对人类健康的危害除了与微生物的种类和浓度有关外, 还与微生物粒子的大小密切相关, 并且不同粒径的
空气微生物对人们健康影响的作用机理不同。通过定点试验调查, 运用国产安德森生物粒子取样器着重研究北京市 3 个功能区
(文教区2中国科学院生态环境研究中心所在区域、交通干线2西直门和公园绿地2北京植物园) 空气微生物的中值直径和粒径分
布。结果表明, 不同功能区空气微生物的粒径分布相同, 空气细菌, 真菌与放线菌的粒径分布各不相同。空气细菌粒径呈偏态分
布, 空气真菌呈对数正态分布, 空气放线菌的分布特征与空气真菌相反, 主要分布在> 8. 2Λm 和< 2. 0Λm 级中。不同属真菌的
粒径分布也不相同, 枝孢属、青霉属和曲霉属呈对数正态分布, 链格孢属和无孢菌为偏态分布。空气细菌的中值直径明显大于空
气真菌和放线菌。交通干线和公园绿地空气细菌和真菌粒子中值直径明显大于文教区, 放线菌粒子中值直径交通干线明显高于
文教区和公园绿地。空气微生物中值直径在一年各月中没有明显的变化规律。
关键词: 空气微生物; 中值直径; 粒径分布; 偏态分布; 对数正态分布
文章编号: 100020933 (2005) 1223220205 中图分类号: Q 938. 14 文献标识码: A
Study on m ed ian d iam eters and size d istr ibution s of a irborne m icrobes in three
functiona l reg ion s in Be ij ing
FAN G Zh i2Guo 1, OU YAN G Zh i2Yun13 , HU L i2Feng1, 2, W AN G X iao2Ke1, L IN Xue2Q iang1 ( 1. K ey
L abora tory of S y stem E cology , R esearch Cen ter f or E co2E nv ironm en ta l S ciences, Ch inese A cad emy of S ciences, B eij ing 100085, Ch ina; 2. Colleg e of
B io2S af ety S cience and T echnology , H unan A g ricu ltu re U niversity , Chang sha 410128, Ch ina). A cta Ecolog ica S in ica , 2005, 25 (12) : 3220~ 3224.
Abstract: T he effect of airbo rne m icrobes on hum an health no t on ly depended on their compo sit ions (genera and species) , bu t
also on their concen trat ions and sizes. M o reover, there are differen t m echan ism s of airbo rne m icrobes of differen t sizes w ith
differen t effects on hum an health. T he size distribu t ions and m edian diam etersw ere carried ou t in detailw ith A ndersen samp ler
in th ree differen t functional regions in Beijing. R esu lts show ed that there w ere sim ilar distribu t ion characterist ics of airbo rne
m icrobes in differen t functional regions, and differen t distribu t ion characterist ics among airbo rne bacteria, fungi, and
act inom ycetes. A irbo rne bacteria w ere p lo t ted w ith skew distribu t ion, and airbo rne fungiw ith no rm al logarithm ic distribu t ion.
T he distribu t ions of airbo rne act inom ycetes w ere comp letely oppo site to the fungal spo re. T he size distribu t ions of dom inan t
fungi w ere consisten t in differen t functional regions. C lad osp orium , P en icillium and A sp erg illus w ere reco rded w ith no rm al
logarithm ic distribu t ion, the fo rm er w as mo st co llected in stage3, stage4 and stage5 (1. 0~ 6. 0Λm ) , and the later w ere mo st in
stage4 and stage5 (1. 0~ 3. 5Λm ). A lternaria and nonspo ring w ere p resen ted w ith skew distribu t ion, the fo rm er w as mo st
found in the fo rm er th ree stages (> 3. 0Λm ) , and the later in the fo rm er five stages (> 1. 0Λm ). T he m edian diam eters of
airbo rne bacteria w ere larger than airbo rne fungi and act inom ycetes. In th ree functional regions, the largest bacteria l diam eter
w as founded in m ain traffic lines, and airbo rne fungi in garden green areas. T here w ere no sign ifican t varia t ions of m icrob ial
m edian diam eters w ith in the one2year of the study.
Key words: a irbo rne m icrobes; m edian diam eter; size distribu t ion; skew distribu t ion; logarithm ic no rm al distribu t ion
自然界中空气微生物是以气溶胶的形式存在于环境中的。细菌吸附在尘埃粒子表面, 真菌则以孢子的形态在空气中。特定
的空气微生物具有特定的动力学粒径[1~ 3 ]。风媒传粉的植物花粉为 17~ 58Λm , 真菌孢子为 1~ 30Λm , 细菌为 0. 25~ 8Λm , 病毒
的直径则小于 0. 3Λm [4~ 7 ]。然而, 空气中各种微生物的来源不同, 不同环境中微生物的种类和结构也不相同。微生物气溶胶的粒
径会随着各种环境条件和培养条件的变化而变化。研究表明, 空气真菌的直径可能与孢子菌龄和生长基质营养成分密切相关,
还与空气湿度和温度有关[1 ]。空气微生物粒径的变化还可能是由于孢子的聚合率不同, 孢子聚合率受到微生物粒子的来源和粒
子的释放机理的影响[2, 8 ]。
空气中病原菌可以在空气中进行繁殖并且能够向周围的环境中扩散, 导致人类过敏反应, 对免疫力低下的人们造成严重的
健康危害[9 ], 例如哮喘和多种呼吸性疾病等。空气中微生物对人类健康的危害除了与微生物的种类和浓度有关外, 还与微生物
粒子的大小密切相关[2 ]。并且不同粒径的空气微生物对人们健康影响的作用机理不同。较大的孢子 (> 10 Λm )沉积在上支气管
(鼻, 咽喉) , 能够引起干热发烧症状; 较小的孢子 (< 10 Λm , 特别< 5 Λm )可以渗透到下支气管, 可以导致过敏和哮喘; 那些更小
的孢子 (< 0. 1 Λm )则能够渗透到呼吸道或更深的部分, 不同程度地影响人们身体的健康[10 ]。此外, 微生物粒子在空气中的行为
与它们的粒径、密度和形态密切相关[11 ] , 而空气微生物的中值直径是衡量其粒径大小的重要标准, 所以空气中微生物的粒径分
布及其中值直径是衡量它对人们健康危害的重要指标。了解不同环境中空气微生物中值直径, 粒径分布特征及其动态变化规律
对人们疾病的预防具有重要的理论和现实的意义。
1 研究材料和方法
1. 1 研究时间和地点
在北京市选取 3 个不同的功能区, 文教区 (Cu ltu re and education region, CER )、交通干线 (M ain traffic line,M TL ) 和公园
绿地 (Garden green region, GGR ) , 2003 年 6 月~ 2004 年 5 月取样。3 个地点分别选取在中国科学院生态环境研究中心、西直门
立交桥和植物园。中国科学院生态环境研究中心是研究机构, 院内有实验楼、办公楼与道路。绿地面积约占 50% , 车辆流动较
少, 而人员走动和人们活动较多; 西直门立交桥是北京市交通枢纽, 车辆流动很多, 各条道路平均每分钟共通过的车辆约 150 余
辆, 交通污染比较严重, 绿地面积很少, 地面灰尘较多, 容易飘在近地面的空气中造成空气污染; 植物园内有大量不同类型的树
木和花草, 如半乔木、灌木和草本植物, 绿地面积占 95% 以上, 草本植物占有绝大的比例。平时几乎没有车辆和行人通过, 是环
境质量非常良好, 非常洁净的地方。
1. 2 空气微生物取样器
采用国产的A ndersen 生物粒子取样器 (FA 2É 撞击式空气微生物采样器)进行测定。它是模拟人呼吸道的解剖结构和空气
动力学特征, 采用惯性撞击原理设计制造的。该取样器分为 6 级, 每级 400 个孔, 从É~ Î 级孔的直径逐渐缩小, 每一级的空气
流速逐次增大, 从而把空气中的带菌粒子按大小不同分别捕获在各级的培养皿上。采样器各级的特性见表 1。
表 1 FA-É 取样器各级特征
Table 1 Character istics of FA-É sampler
级数
Series
孔径 (mm )
A perture
空气流速 (m ös)
V elocity
of air flow
捕集范围 (Λm )
Range of
trapp ing
ECD 3
(Λm )
Stage 1 1. 18 1. 08 > 8. 2 8. 2
Stage 2 0. 91 1. 79 5. 0~ 10. 4 6. 0
Stage 3 0. 71 2. 97 3. 0~ 6. 0 3. 0
Stage 4 0. 53 5. 28 2. 0~ 3. 5 2. 0
Stage 5 0. 34 12. 77 1. 0~ 2. 0 1. 0
Stage 6 0. 25 23. 29 < 1. 0 0. 65
3 ECD 有效截留粒子径Rep resen ts effective cu t diam eter1. 3 取样方法和培养方法在这 3 个地点同时进行取样, 每月取样 1 次, 每次连续取样 3d, 每天分别在 9: 00, 13: 00 和 17: 00 取样 3 次, 每次 3 个重复。采样高度为人呼吸带, 距离地面 1. 5 m 处。采样空气流量为 28. 3 L öm in, 采样器各层的孔眼至采样面的距离 (即撞击距离)为 2 mm。空气细菌和真菌的采样时间为 3 m in, 空气放线菌的采样时间为 5 m in。采样用 9 cm 的玻璃平皿, 灭菌后在无菌的条件下加入 20m l 的培养基。细菌采用牛肉膏蛋白胨培养基, 采集的样品在37℃培养箱内培养 48 h; 真菌采样用沙氏培养基, 采集的真菌
样品在 25℃培养箱内培养 72 h; 放线菌采用高氏一号培养基,
每 300 m l 培养基中外加 1 m l 3% 的重铬酸钾溶液, 采集的样品在 25℃培养 120 h, 分别在各级采样皿上进行菌落记数。
1. 4 计算方法
1. 4. 1 各级带菌粒子百分比:
P = nT × 100%
122312 期 方治国 等: 北京市三个功能区空气微生物中值直径及粒径分布特征
式中, P 为各级带菌粒子百分比; T 为 6 级总菌落数; n 为各级菌落数。
1. 4. 2 带菌粒子中值直径 根据试验数据算出采样器各级的空气带菌粒子数占总数的百分比, 然后按照 Stage6~ Stage1 的顺
序进行累加, 算出各级的累计百分比, 再根据给定的采样器各级 ECD 和各级累计百分比, 求得对数回归方程, 累计百分比为
50% 时相对应的 ECD 值即为中值直径。
1. 5 空气真菌鉴定方法
根据真菌菌落的培养特性和显微镜下真菌孢子的形态特征把空气真菌鉴定到属[12~ 15 ]。对在原培养基上培养 7d 未产生孢
子的菌落, 接种培养 2 周后, 仍未见孢子生成, 则被认为是无孢菌群[18, 19 ]。
1. 6 统计分析
本研究数据分析和图表绘制用 SPSS V ersion 10. 0 和M icro soft Excel 2000 进行。
2 结果与讨论
2. 1 空气微生物粒径分布
2. 1. 1 不同功能区空气微生物粒径分布
(1)空气细菌粒径分布 3 个功能区空气细菌的粒径分布趋势相同。细菌粒子粒数百分比从 Stage1 到 Stage6 逐渐减少, 但
在 Stage2 有明显下降趋势, 呈偏态分布。文教区, 交通干线和公园绿地的细菌粒子主要分布在前 4 级 (> 210Λm ) 中, 分别占总
数的 7816% , 8410% 和 8115%。高峰分布在 Stage1 (> 812Λm ) 中, 分别占 2315% , 2710% 和 2513% ; 最低值分布在 Stage6 (<
110Λm ) 中, 分别占 611% , 619% 和 712% (图 1)。在前 4 级和 Stage1 中, 均为交通干线空气细菌所占的百分比最大。空气细菌
大多是吸附于尘埃粒子表面, 由于重力的作用, 较大的粒子沉降于近地面, 而较小的粒子则漂浮在高空, 所以人工呼吸带较大的
细菌粒子明显多于较小的粒子。交通干线汽车来往频繁, 地面的土壤细粒和灰尘粒子漂浮于近地面, 这些灰尘和细粒是交通干
线空气细菌的主要来源, 这可能是交通干线前 4 级中细菌粒子占的比例大于其它功能区的主要原因。这与胡庆轩等在北京西
单、丰台、天津塘沽和沈阳的研究结果相似, 只是他们的结果表明, 空气细菌粒子粒数百分比从 Stage1 到 Stage6 逐渐减少, 在
Stage2 没有下降趋势, 并且有树林的取样点> 610Λm 的细菌粒数百分比高于其它的取样点[16~ 18 ]。
(2)空气真菌粒径分布 3 个功能区空气真菌的粒径分布趋势相同, 呈对数正态分布。文教区, 交通干线和公园绿地的真菌
粒子主要分布在 Stage3, Stage4 和 Stage5 (110~ 610Λm ) 中, 分别占总数的 7116% , 7412% 和 6813%。高峰分布在 Stage4 (210
~ 315Λm ) , 分别占 2810% , 3612% 和 2915% ; 最低值与空气细菌一样, 也是分布在 Stage6 (< 110Λm ) 中, 分别占 510% ,
415% , 516% (图 1)。胡庆轩等在 20 世纪 90 年代初期研究北京西单和丰台空气微生物粒径分布时也发现, 空气真菌呈对数正
态分布, 但是高峰分布在 Stage3 中[16~ 18 ]。这可能与取样的环境有关, 而且随着城市化进程的加速, 各种环境因素的变化也可能
是引起空气真菌粒径高峰变化的原因。
(3)空气放线菌粒径分布 3 个功能区空气放线菌的粒径分布趋势相同, 它们的分布特征与空气真菌恰好相反。文教区, 交
通干线和公园绿地的放线菌主要分布在 Stage1, Stage5 和 Stage6 中, 3 级总和分别占总数的 6111% , 6017% 和 6418%。
Stage2, Stage3 和 Stage4 中空气放线菌分布比较均匀, 均约占总数的 10%~ 14% 之间 (图 1)。
图 1 不同功能区空气微生物粒径分布
F ig. 1 Size distribu tions of airbo rne m icrobes in differen t functional regions
CER 文教区Culture and education region; M TL 交通干线M ain traffic line; GGR Graden green region; 下同 the sam e below
2. 1. 2 不同功能区优势真菌粒径分布 不同真菌在空气中粒径分布特征如图 2。枝孢属、青霉属和曲霉属呈对数正态分布。枝
孢属主要分布在 Stage3, Stage4 和 Stage5 中, 文教区、交通干线和公园绿地 3 级总和分别占总数的 8010% , 8111% 和 8112% ,
高峰都出现在 Stage4 中, 分别占 3611% , 4612% 和 4316%。最低值出现在 Stage6 中, 分别占 316% , 319% 和 412%。青霉属主
要分布在 Stage4 和 Stage5 中, 3 个功能区 2 级总和分别占 8015% , 7311% 和 7614%。曲霉属也是主要分布在 Stage4 和 Stage5
2223 生 态 学 报 25 卷
图 2 不同功能区优势真菌粒径分布
F ig. 2 Size distribu tions of dom inant fungi in differen t functional
regions
中, 3 个功能区 2 级总和分别占 7313% , 7311% 和 7514%。链格
孢属和无孢菌呈偏态分布。链格孢属主要分布在前 3 级中, 文教
区、交通干线和公园绿地 3 级总和分别占 7513% , 7913% 和
8013% , 高峰都出现在 Stage1 中, 分别占 3411% , 3210% 和
3017%。无孢菌主要平均分布在前 5 级中, 总和分别占 9419% ,
9610% 和 9215%。最低值都出现在 Stage6 中, 分别占 511% ,
410% 和 715%。
2. 2 空气微生物中值直径
2. 2. 1 不同功能区空气微生物中值直径 不同功能区空气微
生物粒子中值直径不相同 (图 3)。空气细菌粒子中值直径约为
215Λm , 空气真菌和放线菌粒子约为 210Λm。空气细菌的中值直
径明显大于空气真菌和放线菌 (p < 0101)。研究表明, 细菌主要
吸附在尘埃粒子表面, 真菌则以单个孢子的形式存在于空气环
境中, 这可能是细菌中值直径大于真菌和放线菌的原因。空气细
菌和真菌粒子中值直径交通干线和公园绿地明显大于文教区
(p < 0105) , 放线菌中值直径交通干线明显高于文教区和公园绿
地 (p < 0105)。
2. 2. 2 不同功能区空气微生物中值直径的月变化特征 空气
微生物中值直径的月变化特征如图 4。在一年各个月中, 3 个功
能区空气微生物的中值直径的变化趋势不明显, 没有显著的变
化规律。空气细菌中值直径主要在约 215Λm 的上下范围波动, 最
低值出现在中国科学院生态环境研究中心 10 月份, 为 2112 Λm ,
最高值出现在植物园 5 月份, 为 2187 Λm。空气真菌和放线菌主
图 3 不同功能区空气微生物中值直径
F ig. 3 M edian diam eter of airbo rne m icrobes in differen t functional
regions
图 4 不同功能区空气微生物中值直径月变化
F ig. 4 M onth ly variat ions of m edian diam eter in differen t functional regions
要在 210Λm 的上下范围波动。
空气微生物的中值直径和粒径分布还受到各种环境条件的
影响, 如沙尘暴天气能够增加大粒子的浓度, 而降雨和降雪则对
大粒子有冲刷作用, 降低它们的比例, 从而改变空气微生物的粒
径分布特征和中值直径[19 ]。
3 结论
3. 1 不同功能区空气微生物粒径分布相同
空气细菌粒子主要分布在前 4 级 (> 210Λm )中, 粒数百分比
从 Stage 1 到 Stage 6 逐渐减少, 在 Stage 2 有明显下降趋势, 呈
偏态分布。空气真菌主要分布在 Stage 3, Stage 4 和 Stage 5 (110
~ 610Λm )中, 高峰出现在 Stage 4 中, 呈对数正态分布。空气放线
菌粒径分布与空气真菌恰好相反, 主要分布在 Stage 1, Stage 5
和 Stage 6 中。
322312 期 方治国 等: 北京市三个功能区空气微生物中值直径及粒径分布特征
3. 2 不同属的空气真菌粒径分布不同
枝孢属主要分布在 Stage 3, Stage 4 和 Stage 5 级 (110~ 610Λm )中, 青霉属和曲霉属主要分布在 Stage 4 和 Stage 5 中, 呈对
数正态分布; 交链孢属主要分布在前 3 级 (> 310Λm ) , 无孢菌主要分布在前 5 级 (> 110Λm ) , 呈偏态分布。
313 北京市空气细菌的中值直径
空气中的细菌中值直径约为 215Λm , 空气真菌和放线菌约为 210Λm。空气细菌的中值直径明显大于空气真菌和放线菌。交
通干线和公园绿地空气细菌和真菌粒子中值直径明显大于文教区, 交通干线空气放线菌中值直径明显大于文教区和公园绿地。
314 在一年中, 不同功能区空气微生物中值直径没有显著的变化规律。空气细菌中值直径主要在约 215Λm 的上下范围波动,
而空气真菌和放线菌主要在 210Λm 的上下范围波动。
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