全 文 ：第 26卷第 8期
2006年 8月
生 态 学 报
ACTA ECOLOGICA SINICA
Vo1．26．No．8
Aug．，2006
青藏高原东部矮生嵩草遗传多样性的 RAPD研究
赵庆芳 一，李巧峡 ，马世荣 ，崔 燕 ，王 刚
(1．西北师范大学生命科学学院，兰州 730070；2．兰州大学生命科学学院，兰州 730000)
摘要：基于随机扩增多态 DNA(RAPD)方法分析了青藏高原东部矮生嵩草(Kobresia humilis)8个居群的遗传多样性及分化程度。
14条随机引物共扩增出 194个位点数，其中多态性片段 168个。研究表明，矮生嵩草无论是在物种水平 (多态条带比率 PPB
(％)为 86．6o％，Nei’s基因多样性( )为 0．2622，Shannon’s信息指数(，)为0．3983)，还是在居群水平(PPB=62．65％，h=0．2126，
，=0．3185)，都具有较高的遗传多样性，居群的遗传多样性大小与生境有相关性。而且，用 SPSS分析得出，8个居群的遗传多样
性大小与海拔没有明显相关性。用 AMOVA数据表明矮生嵩草的遗传变异主要分布在居群 内(83．04％)，居群间变异较小
(16．96％)。遗传分化指数 G 也显示了相似的结果(0．1891)。从矮生嵩草 8个居群的遗传距离和聚类分析发现，以及用 NTSYS
对矮生嵩草 8个居群的的遗传距离矩阵与地理距离矩阵间的关系进行 Mantel检测 ，其结果表明各居群间的遗传距离与地理距
离之 间没有 明显相关性 (r=0．37779，P=0．9718>0．05)。
关键词 ：RAPD；遗传多样性 ；矮生嵩草
文章编号 ：1000．0933(2oo6)08．2494．08 中图分类号 ：Q948 文献标 识码 ：A
RAPD analysis of genetic diversity of Kobresia humilis along the eastern of Qinghai-
Tibet Plateau of China
ZHAO Qing．Fang 一，LI Qiao．Xia ，MA Shi．Rong ，CUI Yan
University，Lanzhou 730070，China；2．College of断 Science，Lanzhou University，
2501．
，
W ANG Gang2 L1
． c0tk L sc ∞e。 N nhmest Nom Bl
Lanzhou 730000，China )．Acta Ecologica Sin~a，2O06，26(8)：2494一
Abstract：Kobresia humilis is a very important fine pasture and ecological grass in the Qinghai-Tibet Platau．In present study，the
genetic diversity of K．humilis collected from eastern of the Qinghai-Tibet plateau in China，were investigated using RAPD
markers．194 loci were identifed with 14 oligonucleotide primers，out of which 168 loci were polymorphic．K ．humilis showed
high genetic diversity：The percentage polymorphic loci(PP日％ )was 86．6o％ ，Nei’s gene diversity(h)was 0．2622 and
Shannon’s information index(，)was 0．3983 at the species level；while the PP日％ was 62．65％，h was 0．2126 and，was
0．3 1 85，at the level of po pulation．Moreover，the results showed that there was a relationship be tween the habitats and genetic
diversity of K．humilis，but no correlation between the altitude and genetic diversity．AMOVA showed that most of the genetic
variability(83，04％)resided among individuals within populations，whereas only 1 6．96％ resided among populations．The Gst-
values(0．1 89 1)showed the similar result．Additionally，Nei’s unbiased genetic distance matrix compared with a corresponding
geographic distance matrix showed the two matrices were not signifcantly corelated(r=0．37779，P=0．9718>0．05)．
Key words：RAPD；genetic diversity；Kobresia humilis
矮生嵩草(Kobresia humilis(C．A．Mey．ex TrautV．)Sergiev)属寒冷中生型多年生、莎草科嵩草属草本植物 ，
基金项目：兰州大学干旱农业生态教育部重点实验室基金资助项目
收稿日期：2004．11-01；修订日期：2005．12．10
作者简介：赵庆芳(1962一)，女，山东莱芜市人，副教授，主要从事植物生理生态及生态遗传学研究．E-mail：zhaoqingfang2001@yahoo．com．cn
致谢：感谢美国Michigan州大学植物生物学系植物生物学家 Eric W．Linton对英文摘要的润色
Foundation item：The project was supported by Key Laboratory of Arid Agroecology of Imnzhou University
Received date：2004-11-01；Accepted date：2005-12-10
Biography：ZHAO Qing-Fang，Asociate professor，mainly engaged in plant ecophysiology and ecological genetics．E-mail：zhaoqingfang2001@yaho．com．cn
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8期 赵庆芳 等：青藏高原东部矮生嵩草遗传多样性的RAPD研究
广布于青藏高原，是青藏高原高寒草甸植物群落建群种之一。它具有草质柔软、营养丰富等特点，为各类家畜
所喜食，是构成青藏高原的主要生态草种⋯，它的良好生长对维持青藏高原的生态平衡起着重要作用⋯。而
且青藏高原又是特殊生境的典型代表，独特的高寒生态环境因素对于嵩草植物在发生、演化、适应和发展等生
命活动过程的影响是极其深刻的 。因此，以青藏高原分布较广的高寒草甸主要建群种矮生嵩草(Kobresio
humilis)为研究对象，运用 RAPD分子标记对矮生嵩草的遗传多样性和居群遗传结构进行研究，旨在探讨在青
藏高原高寒生态条件下，矮生嵩草的遗传背景及居群遗传变异在时空中的分布式样。除此之外，虽然邓自发
等人 研究表明，矮生嵩草的繁育系统是以无性繁殖为主，有性繁殖为辅，但对于其基础的交配系统还不确
切，所以本论文通过对其遗传多样性和遗传结构分析来研究矮生嵩草确切的交配系统。
1 材料与方法
1．1 实验材料
矮生嵩草密丛状 ，株高 3～15cm，叶短于杆 ，下部对折 ，上部平张，宽 1～2mm，边缘稍粗糙 ；穗状花序椭圆
形或长圆形，小坚果倒卵形或倒卵状椭圆形，顶端骤缩成短喙，成熟时暗灰色。着生土壤为高山草甸土，较疏
松，水分适中。矮生嵩草的群落结构简单，仅草本层一层；外貌整齐，呈黄绿色。常见的伴生种类有线叶嵩草
(Kobresia capilifolia)、喜马拉雅嵩草 (Kobresia royleana)、异针 茅 (Stipa aliena)以及 杂类草 圆穗 蓼 (Polygonum
sphaerostachyum)、珠 芽 蓼 (Polygonum viviparum)、高 山 唐松 草 (Thalictrum alpinum)、矮 火绒 草 (Leontopodium
nanltm)、独一味(Lamiophlomis rotata)、雪 白委陵菜(Potentila nivea)、二裂委陵菜(Potentila biforca)、高山银莲花
(Anemone demissa)、假 全 叶银 莲 化 (Anemone pseudoholophylla)、毛 茛 (Ranuculus sp．)、鳞 叶 龙 胆 (Gentiana
squarosa)等 。于2003年 7月和8月，采集了分布于青藏高原东部的矮生嵩草(K．humilis)8个居群 161个个
体。采用居群取样的方法 ，随机采取 18～22个不同克隆系的新鲜叶片 ，分别用变色硅胶或吸水纸进行快速干
燥 ，带回实验室，室温干燥保存待用。8个居群具体的编号 、采集地点、生态环境和海拔高度见表 1，不同居群
大致的地理位置分布见图 1。
表 1 青藏高原东部矮生嵩草采样记录
Table 1 The sampling notes of K．humilis along the eastern of Qinghai-Tibet Plateau
1．2 DNA提取与检测
采用改进 的 CTAB法提取总 DNA 。提取的 DNA加 200~1 1×TE，在 4℃冰箱 中溶解。在含有 0．5p．g／ml
EB的 0．8％琼脂糖凝胶中电泳检测各模板有无降解，并以 ~,DNA为标准 ，电泳定量。
1．3 引物筛选
本研究所用引物购自上海生工公 司，从 250个 RAPD随机引物 中筛选 出 14条条带清晰、多态性高、反应
稳定并且重复性好 的引物进行扩增 ，引物编号见表 2。
1．4 RAPD．PCR
扩增反应在 Biometra UNOⅡPCR仪上进行。PCR运行程序如下：94℃预变性 5rain；然后进入 40个循环：
94℃ lmin；37℃ 1min；72C 1min；循环完成后，72C延伸 7min。最后于 4℃保存。10gl反应体系组成如下：
50mmol／L Tris-HC1(pH=8．3)，10％Ficoll，‘1mmol／L Tartrazine，500gg／mlBSA，2mmol／L MgC12，200gmol／L dNTP，
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图 1 矮生嵩草8个居群的地理位置图
Fig．1 Localities of eight populations of K ．humilis
1ptmol／L of primer，0．5 units TaqDNA polymerase和 5-10ng模板。扩增产物在含有 0．5gg／mlEB的 1．5％的琼脂糖
凝胶上 电泳 3．5～4h，电泳介质用 TBE。使用 uvi凝胶图像分析系统成像 ，使用 100～3000bp分子量标记。
表 2 RAPD-PCR反应 的引物名称 、扩增片段大小及其检测总位点数
Table 2 RAPD primer，band size and total loci
1．5 数据分析
根据反应产物在 电泳 图中的位置 ，按条带的有无记为“1”或“0”，形成 RAPD表 型的 0／1数据矩 阵。用
POPGENE 软件计算各居群的用多态位点百分率(PP )、Shannon’s信息指数(，)和 Nei’s基因多样性 (h)；居
群内遗传多样性( )、总的遗传多样性(胁)、基因分化系数( f)、基因流估计值(Nm)和 Nei’s遗传距离 。
用 SPSS软件分析遗传多样性大小与海拔的相关性 。用 AMOVA程序 计算居群内和居群间的遗传变异。根
据 Nei’s遗传距离用 NTSYS对不同居群进行UPGMA聚类分析。同时用 NTSYS对居群的的遗传距离矩阵与地
理距 离矩阵间的关系进行 Mantel检测 。
2 实验结果
2．1 矮生嵩草的遗传多样性
用筛选的 14条 RAPD引物 ，对矮生嵩草的 8个居群进行扩增 ，14条引物扩增的多态条带 比率(PPB％)、
Nei’s基因多样性(h)和 Shannon’s信息指数 (，)见表 3。矮生嵩草 8个居群总计 161个个体，共检测到 194条
扩增条带 ，多态条带 168条，所得片段 的大小从 130bp到 3500bp，平均每个引物扩增 的位点数为 13．9个(表
2)。物种水平的多态条带 比率 PP (％)为 86．60％，Nei’s基因多样性 (h)为 0．2622，Shannon’s信息指数(，)为
0．3983。居群平均多样性水平的多态条带 比率 PP (％)为 62．65％，Nei’s基因多样性 (h)为0．2126，Shannon’s
信息指数(，)为 0．3185。8个居群中以四川红原草滩 生境居群(A4)的遗传多样性最高(PP =65．98％，h：
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8期 赵庆芳 等：青藏高原东部矮生嵩草遗传多样性的 RAPD研究 2497
0．2313，，：0．3468)，甘肃天祝山地阳坡居群 (A3)的遗传多样性最低 (PPB：57．73％，h=0．1933，，=0．2917)。
表 3 矮生嵩 草 8个居群 的遗传 多样性
Table 3 The genetic diversity of eight population of K．humilis
2．2 矮生嵩草遗传多样性大小与海拔的关系
采用 SPSS分析了矮生嵩草 8个居群遗传多样性大
小与海拔 的关 系。SPSS是基于 Shannon’S信息指数所
做的统计 ，其结果表明矮生嵩草 8个居群遗传多样性大
小与海拔梯度没有 明显相关性 (r=0．369，P：0．369>
0．05)(图 2)。
2．3 矮生嵩草的遗传结构
用 AMOVA进行分子方差分析 ，显示矮生嵩草的遗
传变异主要存在居群 内(83．04％)，居群 间遗传变异较
籁
蹈
迎里
C
暑
』：
小(16·96％)，具1本见表 4。 图2 矮生嵩草8个居群的sh
an 0n，。信息指数(，)与海拔的相关性
用 POPGENE在假设遗传平衡时，计算 出矮生嵩草 Fig
． 2 The analv。i。of。。 lali。 bet ee 。ti。 dive itv d altit de f0
居群 内遗 传 多样性 ( )为 0．2126；总 的遗 传 多样性 。isht p0p latio‘ of K．humilis based。 。h 。 ，。informali。 inde (，)
( )为 0．2622；基因分化系数 (Gst)为 18．91％；基因流估计值(Nm)为 2．1445。
2．4 矮生嵩草居群间的遗传距离和聚类分析
矮生嵩草居群间的遗传一致性和遗传距离见表 5。在矮生嵩草的 8个 居群 中，以天祝 的两个居群 A2和
A3的遗传一致性最高(0．9792)，遗传距离最近 (0．0210)；以合作居群 A1与天祝居群 A3的遗传一致性最低
(0．9146)，遗传距离最远(0．0892)。在 聚类图中，A2和 A3聚为一支，A1和 A7聚为一支，A4、A6、A5和 A8聚为
一 支，具体见表 5和图 1。
表 4 矮生嵩草的 AMOVA分析
Table 4 AMOVA analysing of K．humUis
*1000次显著性测试；d．f，自由度；SSD，平方和；MSD，期望平均平方值；P(value)，缺失分布的可能性 Noof permutations：1000：d．f，degreeof
freedom；SSD，$1m of 8quire8；MSD，expected mes／l scIuares；P(value)，probability of nul distribution
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A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
0．0786
0．0892
O．0618
0．0861
O．O5l9
0．0355
O．0697
0．9244
O．O21O
O．0814
O．O863
0．0782
0．0710
O．O84o
O．9146
0．9792
0．0831
O．O89o
0．0820
0．0844
0．0871
0．9401
O．9219
0．9202
0．0470
0．04 l0
O．0675
O．O575
O．9175
O．9174
O．9149
O．9541
0．0584
0．0792
0．0409
0．9495
O．9248
O．9213
0．9598
O．9433
O．9651
O．9315
0．9190
0．9348
0．9238
O．9432
O．O585 一
O．o587 0．0695
O．9327
O．9195
0．9166
0．9441
O．9599
O．943O
0．9329
2．5 居群间的遗传距离与地理距离的关系
用 NTSYS对矮生嵩草 8个居群的的遗传距离矩阵
与地理距离矩 阵间的关 系进行 Mantel检测 ，其结果为
A 1
A7
A4
A6
A5
A8
A2
A3
0 0200 0 0358 0 0515 0 0673 0 0830
遗传距离 Nei s genetic distance
图3 矮生嵩草8个居群 Nei’s遗传距离 UPGMA聚类
Fig．3 UPGMA dendrograme for eight populations of K．humilis based on
Nei’s genetic distance
．目E
蓉
啦
0 0950
O O758
O O18O
地理距离 Geographic distance(km)
图4 矮生嵩草居群间遗传距离与地理距离的相关关系
Fig．4 The correlation between genetic distance and geographic distance for
eisht populations of K．hurrdlis
r=0．37779．P：0．9718>0．05(9999次置换)，说明各居群间的遗传距离与地理距离之间没有相关性。Mantel
检测得出的各居群间遗传距离和地理距离的相关关系见图 2。
M
图 5 引物 S1489对居群 A2(1～20泳道 )样品的扩增谱带
Fig 5 RAPD bands of A2 samples(1ans 1～20)amplifed with S1489
M为 DNA分子量标量 Marker(100～3000bp) ladder(100～3000bp)
M
图 6 引物 S186对居群 A3(1～2O泳道)样 品的扩增谱带
Fig 6 RAPD bands of A3 samples(1ans 1～20)amplifed with S186
M为 DNA分子量标量 Marker(100～3000bp) ladder(100～3000bp)
3 讨 论
3．1 矮生嵩草遗传多样性
采用 3种遗传 多样性参数对矮生嵩草遗传状况进行 了分析 ，包括多态条带比率(PPB％)、Shannon’s信息
多样性指数(，)和 Nei’s基因多样性(h)。其中多态条带比率(P尸B％)计算简单直观，在研究中得到广泛的应
用 ，但是它不能确定各条带频率变化，而且受到样本大小和条带总数的影响，只能是衡量居群遗传多样
性的一个粗略估计 值。在这种情 况下 ，基 于条带 表 型频 率的 Shannon’s信息多样性 指数 (，)和基于 Hardy—
Weinberg假设的 Nei’s基因多样性(h)，是更为可信 的衡量指标 。
5 3
6 7
5 3
O O
O O
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8期 赵庆芳 等：青藏高原东部矮生嵩草遗传多样性的 RAPD研究
研究表明，对于植物物种水平和居群水平上的遗传多样性而言，多态条带比率(PP 在 50％左右被认为
遗传多样性是丰富的 ¨ 。矮生嵩草的 PP 值无论是在物种水平上(PP =86．60％)，还是在居群水平上
(PP ：62．65％)均较高。就 Nei’s基因多样性(h)来看 ，与用 RAPD分析的其它植物 ’“ 相 比，矮生嵩草 的 h
无论是在物种水平上(0．2622)，还是在居群水平上(0．2126)，均具有较高的遗传多样性。
作为青藏高原高寒草甸的主要建群种 ，矮生嵩草主要 以地下短根茎进行 营养繁殖 ，野外研究发现和邓
自发的研究表明 矮生嵩草产生种子的能力不小，但 由于青藏高原恶劣的环境 以及种皮坚硬等原因 ，最后能
萌发为实生苗的种子比例较小。邓自发等 对海北站高寒草甸矮生嵩草种群繁殖对策的研究表明，通过营养
繁殖矮生嵩草无性系种群每年新增个体数 711．34个·m～，种子 萌发的实生苗数为 3．46个 ·m～，野外种子萌
发率为 3％。有研究表明n ’ ]，在一个居群 内，比例非常低 的实生苗的补充对于维持其高 的遗传多样性是足
够的。由此可见，对于多年生草本植物矮生嵩草 ，实生苗的不断补充是维持其遗传多样性 的主要原因。所 以
在高寒生境中矮生嵩草的居群主要依靠营养繁殖来延续 ，而兼性的有性恢复系统尽管在矮生嵩草居群结构的
建造上作用较小 ，但它在促进矮生嵩草的进化与适应上具重要意义。
3．2 矮生嵩草遗传多样性 的大小与海拔和生境的关系
有研究表明 ¨，海拔越高的地方 ，由于传粉昆虫数量 的减小和植物花期 的减短 ，以及小居群效应的产生 ，
某些种的有性繁殖会受到影响，克隆繁殖会随着海拔的升高而增加 ，居群 内的遗传变异反而减少。本研究中，
矮生嵩草 8个居群遗传多样性的大小与海拔梯度无明显相关性(r=0．369，P=0．369>0．05)(图 2)。如居群
A7所处的海拔最高(3820m)，但并未表现出最小的遗传多样性 ；A3居群所处的海拔最低(2800m)，反而表现出
最小的遗传多样性 ；A4居群所处 的海拔较高 (3530m)，但具有最 大的遗传多样性 (表 3)。其原 因是矮生嵩草
在有性繁殖中主要为风媒传粉 ，另外矮生嵩草在长期的 自然选择下 ，在垂直分布上有着广泛的生态适应 ，因
此，在所研究的海拔高度范围之内(2800～3820m)，矮生嵩草的遗传变异与海拔梯度没有明显相关性。
在所研究的矮生嵩草 8个居群 中，不同居群的遗传多样性与生境有相关性。大量资料表明“ ，植物居
群遗传多样性的大小与生境有关 。在 8个居群 中，A4(四川红原县草滩居群 ，PPB=65．98％，h=0．2313，，=
0．3468)、A5(四川红原阴坡居群，PP =64．43％，h=0．2232，，=0．3341)、A6(四川若尔盖县草滩居群，PP =
61．34％，h=0．2234，，=0．3326)、A2(甘肃天祝 阴坡居群 ，PP =63．40％，h=0．2131，，=0．3208)、A1(甘肃合
作森林草滩居群 ，PPB=60．31％，h=0．2141，，=0．3194)5个居群的遗传多样性参数无论是 PP 指数 ，还是
h和 ，指数均大于 A7(甘肃玛曲阳坡居群 ，PP =59．79％，h=0．2024，，=0．3052)、A8(青海海北站山顶 ，PP
：58．25％，h=0．2003，，=0．3021)和 A3(甘肃天祝阳坡居群 ，PPB=57．73％，h=0．1933，，=0．2917)3个居群
的遗传多样性参数，这说明处于山地阴坡和滩地生境居群 的遗传多样性均高于山地 阳坡居群 的遗传多样性 ，
其原因可能是处于阴坡及草滩生境 的水分条件较阳坡的好 ，利于植物的生长及实生苗的建成。
3．3 矮生嵩草的遗传结构与交配系统分析
一 个物种或群体的进化潜力，在很大程度上取决于它的居群遗传结 构 ，即遗传变异 在空间的分布式
样 。确定一个物种的居群遗传结构，是 了解其生物学属性 ，探讨物种进化过程和机制的重要一步 。基因分
化系数(Gst)是衡量居群遗传分化最常用的指标，它表示在总的遗传变异 中居群 间变异所 占的 比例。一般情
况下，对于濒危物种来说 ，居群间的遗传变异相对较大，分化明显 ，如 中国疣粒野生稻 、银杉 等。植物 的
居群遗传结构受多种因素的影响，Hamfick&Godt_2 的研究表明，植物的繁育系统 、基因流和种子扩散机制 、繁
殖方式及 自然选择等因素对植物的遗传结构 有明显的影 响。Sagna~等 ¨认为，环境异质性对遗传结构也有
一 定的影响。
此外，也有很多学者利用遗传结构来研究植物的繁育系统 ¨。 。 。如 Tomoshi等人利用等位酶分析的遗
传分化系数来推测 Carex sociata的繁育系统，研究表明 Carex sociata的遗传分化系数(Fst=0．737～1．000)很
高，因而推测这种植物的繁育系统是以自交繁殖为主 。De pace等人利用同工酶研究表明 Das~ m
vilosum的遗传变异主要分布在居群 内(90％)，而居群间的遗传变异只占 10％，因此估计 Dasypyrum vil~sum主
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2500 生 态 学 报 26卷
要是以远交为主的植物 。
本研究 中，AMOVA数 据 表 明矮 生 嵩 草 的遗 传 变 异 主要 分 布 于居 群 内 (83．04％)，居 群 间变 异 较小
(16．96％)。Gst也显示了相似的结果。矮生嵩草 的遗传分化系数 Gst(0．1891)，小 于单子叶植物的平均分化
系数(Gst=0．231)和多年生草本植物 的平均分化系数 (Gst=0．233) 。对于矮生嵩草来说，维持居群 内较 高
的遗传变异与繁育系统有关。虽然矮生嵩草在每平方米种子的萌发率相对较低 ，但邓 自发等 的研究表明矮
生嵩草产生种子的能力并不低，在矮生嵩草枯黄期，种子库每个体积单位(1m×lm×0．1m)中矮生嵩草种子有
483粒。Hamrick 的统计表明，居群间的多样性差异受繁育系统影响很大，自交繁育的植物有 51％的遗传变
异存在于居群之间。Bussel 统计 了用 RAPD分析 的 35种植物 ，其中 6个 自交植物的平均 Gst为 0．625，29个
远交植物的平均 Gst为 0．193。因此从本实验结果得知 ，矮生嵩草 的有性繁殖符合远交植物的特点 。另外矮
生嵩草的基因流在很大程度上也减小了居群间的分化。矮生嵩草为风媒传粉植物 ，青藏高原上的强风 、多风
在一定程度上会促进居群间基因的交流。矮生嵩草 的基因流估计值 Nm(2．1445)大于 1，一般情况下 ，当 Nm
>1时，就能够有效阻止遗传漂变的发生及居群间的遗传分化 J。
3．4 矮生嵩草 8个居群的遗传距离与聚类分析
用 NTSYS对矮生嵩草 8个居群的的遗传距离矩阵与地理距离矩 阵间的关系进行 Mantel检测 ，其结果表
明各居群间的遗传距离与地理距离之间没有相关性(r：0．37779，P=0．9718>0．01)。但基于 Nei的遗传距离
和遗传聚类图结果显示 ，地理距离较近的某些居群 的遗传相似性较 大，这与沙伟 等人 。。的研究结果 比较相
似。如 A2和 A3居群同处于甘肃天祝县的抓喜手龙乡，两居群只被金 强河所分开 ，具有最近的遗传距离 ，聚
为一支；A1和 A7分别位于甘肃甘南藏族 自治州的合作和玛 曲，具有较近的遗传距离 ，也聚为一支。同在四川I
阿坝藏族 自治州的的 A4(红原)，A5(红原)和 A6(若 尔盖)相 比较也具有相近的遗传距离 ，聚在 同一分支 内。
所以在较近的地理区域 内，尤其在同一地区内，由于环境条件及物候条件不会出现太大的变化 ，自然选择压力
趋于一致 ，加之种子 、花粉交流频繁，在一定程度上增加了居群间的基因交流 ，结果 表现为矮生嵩草在较近距
离内居群间的遗传分化相对较小。
I【eferenees：
[1] Zhang J．The characteristics of reproductive 0wth of Kobresia humilis on alpine meadow．Seed，2003，(2)：3～4．
[2] Han F，Ben G Y Shi S B．Comparative study on the resistance Kobresia humilis grown at diferent altitudes in Qinghai—Xizang Plateau．Acta Ecologica
Sinica，1998，18(6)：654～659．
Deng Z F，Xie X L，Zhou X M．Primary study on reproductive strategies of Kobreasia humilis population in alpine meadow．Chinese Journal of Ecology，
2001，20(6)：68～70
Zhou X M．China Kobresia meadow．Beijing：Science Press．2001．40—62．
Li A，Ge S Genetic variation and clonal diversity of Psamochloa vilosa(Poaceae)detected by ISSR markers．Annals of Botany，2001，87：585—590．
Yeh F C，Yang R C，Boyle T B J，Ye Z H，Mao J X．POPGENE V1．31．1997．http：／／www．ualberta．ca／一fyeh
Nei M ．Estimation of average heterozygosity and genetic distan ce from a small number of individuals．Genetics，1978，89：583—590．
Excoffier L Analysis of molecular variance(AMOVA)．Version 1．5．Genetics and Biometry Laboratory，University of Geneva．1993．
Xie L，Li L Q，Zhang D M．Asesment of genetic variation and distribution patern of Thalictrum petaloideum detected by RAPDs．Acta Botanica Sinica，
2004，46(2)：165～170．
Hu B Z，bu D，Hu B F，et a1．Random Amplied polymorphic DNA study oflocal breeds in Chinese dfdfa．Acta Phytoecologica Sinica，2000，4(6)：697
～ 7O1．
Qian W，Ge S Analysis of population genetic structure by using dominant markers．Acta Genetica Sinica，2001，28(3)：244～255．
Ma X J，Wang X Q，Xu Z X，et a1．RAPD Vriation within and among populations of Ginseng cuhivars．Acta Botanica Sinica，2000，42(6)：587—590．
Liu G H．Jia B L．The study of genetic diversity of U／mus pumila Var．sabulosa．Journal of Arid Land Resources and Environment，2003，17(5)：123～
128．
Sun K．Chen W，Ma R J A study on the genetic diversity of subpopulations of Aippophae rhamnoides sp．Sinensis at Ziwuling．GanSu(J)．Joumal of
Lanzhou University，2004，40(3)：72～75．
引 ¨ ¨ 引 ⋯ ⋯
维普资讯 http://www.cqvip.com
8期 赵庆芳 等：青藏高原东部矮生嵩草遗传多样性的 RAPD研究 2501
[15] Soane I D，Watkinson A R．Clonal variation in population of Ranunc02us repens．New Phytologist，1979，82：557～573．
[16] Watkinson A R，Powel J C．Seedling recruitment and the maintenance of clonal diversity in plant population—acomputer simulation of Ranuncul~repens
Journal of Ecology，1993，1：707～717．
[17] Younga A G，Hil J H，Muray B G，et ．Breeding system，genetic diversity and clonal structure in the subalpine forb Rutidosis如 脚 F．Muel
(Asteraceae)，Biological Conservation，2002，106：71—78．
[18]
[19]
[20]
[21]
[22]
[23]
[24]
[25]
[26]
[27]
[28]
[29]
[30]
Liu H F，Gao Y B，Wang D，et ．Genetic diferentiation in eisht populations of厶 chinensis in Inner MongoIia Steppe． Acta Ecologica Sinica，
2004，24(3)：423—431．
xu L，Wang Y L，Wang X M，et ．Genetic structure of Reaumuria soongorica population in Fukang desert，Xinjing and its relationship with ecological
factors．Acta Botanica Sinica，2003，45(7)：787～794．
aId F，Barberet C，Fady B．Structure of genetic diversity in Abies 02ba Mil1．from southwestern Alps：multivariatean alysis of adaptiveand non—adaptive
traits for conservation in France．Forest Ecology an d Management，2002，157：175～ 189．
Hamrick J L，Godt M J W ．ALLozyme diversity in plant species．In：Brown A．H．D．，Clegg M．T．，Kabler A．L．，Weir BS eds．Plant population
genetics，breeding and genetic resources．Sinauer Associates，Inc．，Sunderland，MA，1990．43～63．
Loveless M D，Hamrick J L．Ecological determinants of genetic structure in plant populations．Ann Rev Ecol Syst，1984。15：65～95．
Qian W，Ge S，Hong D Y．Assessment of genetic variation of OryzagranuIata detected by RAPDs and ISSRs．Acta Botanica Sinica，2000，2(7)：741
750．
Wang X Q，Zou Y P，Zhang D M，et a1．RAPD analysis of genetic diversity of Cathaya argyrophyla．Science in China(Series C)，1996，26(5)：436～
431．
Tomoshi O，Masatsuga Y，Takuji H Aneuploidal population diferentiation in Carex sociata Boot(Cyperaceae)of the Ryukyu Islands。Japan．Botanical
Journal of the Linnean Society，2000，132：337—358．
De pace C，Qualset c．o．Mating system and genetic diferentiation in Dasypyrum vilosum(Poaceae)in Italy．Plant Systematics and Evolution(Historical
Archive)，1995，197：123—147．
Hamrick J L．Gene flow and distrubution of genetic variation in plant populations．In：Urbanska，K ed，Differentiation patterns in higher plants．New York：
Academic Press．1987 53—67．
Bussel J D．The distrubution of random amplifed polymorphic DNA(RAPD)diversity am ongst population of lsotoma patraea(Lobeliaceae)． Molecular
Ecology，1999，8：775—789．
Slatkin M ．Gene flow in natural po pulations Ann Rev Ecol Syst，1985，16：393—430．
Sha W，Zhou F J，zu Y G Genetic variability and diferentiation of Ambrosia artemisifolia from Northeast China．Bulletin of Botanical Research，1999。
19(4)：452～456
参考文献
1] 张静 ．高寒草甸矮 嵩草(Kobresia humil~)生殖生长特性观测 ．种子 ，2003，(2)：3～4．
2] 韩发 ，贲桂英 ，师生波．青藏高原不同海拔矮嵩草抗逆性的比较研究 ．生态学报 ，1998，18(6)：654—659．
3] 邓自发，谢晓玲，周兴民．高寒草甸矮生嵩草种群繁殖对策的研究．生态学杂志，2001，20(6)：68—70．
4] 周兴民 ．中国嵩草草甸 ．北京 ：科学出版社 ，2001，40—62
10] 胡宝 忠，刘娣 ，胡 国富 ，等 ．中国紫花苜蓿地方品种随机扩增多态 DNA的研究 ．植物生态学报 ，2000，24(6)：697～701
11] 钱韦 ，葛颂 ．居群遗传结 构研究中显性标记数据分析方法初探 ．遗传学报 ，2001，28(3)：244—255．
12] 马小 军，汪小 全，徐昭玺 ，等 ．人参不同栽培群体遗传关系的 RAPD分析 ．植物学报 ，2000，42(6)：587—590．
13] 刘果厚，贾宝丽．浑善达克沙地榆遗传多样性的研究．干旱区资源与环境，2003，17(5)：123～128．
14] 孙坤，陈纹，马瑞君，等．子午岭中国沙棘亚居群的遗传多样性研究 ．兰州大学学报，2004，40(3)：72—75．
18] 刘惠芬，高玉葆，王丹，等 内蒙古典型草原羊草种群遗传分化的 RAPD分析．生态学报，2004，24(3)：423—431．
23] 钱韦，葛颂，洪德元．采用 RAPD和 ISSR标记探讨中国疣粒野生稻的遗传多样性．植物学报，2000，42(7)：741～750．
24] 汪小全，邹喻萍，张大明，等．银杉遗传多样性的 RAPD分析．中国科学(C辑)，1996，26(5)：436～431．
30] 沙伟，周福军，祖元刚．东北地区豚草种群的遗传变异和遗传分化．植物研究，1999，19(4)：452～456．
维普资讯 http://www.cqvip.com