全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊愿冤院员园怨怨 耀 员员园缘允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄员员鄄员源摇 接受日期院圆园员猿鄄园猿鄄圆园
基金项目院野十一五冶国家科技支撑计划渊圆园员员月粤阅员员月园员曰圆园员员月粤阅员员月园圆冤
作者简介院李莹莹袁女袁讲师袁从事园林植物遗传育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院造赠赠蚤灶早愿园岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园愿鄄员园怨怨鄄园苑
牡丹 悦阅阅孕分子标记引物筛选及多态性分析
李莹莹
渊菏泽学院园林工程系袁山东 菏泽摇 圆苑源园员缘冤
摘摇 要院验证了牡丹 悦阅阅孕反应体系的稳定性和重复性遥 在 圆员 条 悦阅阅孕引物中筛选出了 圆园 条多态性引
物袁其中 员愿 条对牡丹品种具有较强的鉴别能力遥 用 圆园 条 悦阅阅孕多态性引物对 圆圆 个国内外牡丹品种进
行 孕悦砸扩增袁每条引物的扩增条带从 猿 耀 圆缘 条不等袁共获得 圆怨苑 条 阅晕粤 片段袁其中多态性片段 圆苑远 条袁
多态性比率为 怨圆郾 怨猿豫 袁平均每条引物扩增出 员源郾 愿缘 种多态性基因型遥 多态性好的 员愿 条引物对 圆圆 份牡
丹材料的位点多态性信息量分布在 园郾 愿猿苑怨 耀 园郾 怨缘怨苑 之间袁平均达 园郾 怨员圆源遥 可以运用 悦阅阅孕分子标记技
术对牡丹种质资源进行遗传多样性分析尧品种鉴定尧遗传图谱构建尧基因定位等研究遥
关键词院牡丹曰悦阅阅孕分子标记曰引物筛选曰多态性分析
摇 摇 牡丹渊孕葬藻燥灶蚤葬 泽怎枣枣则怎贼蚤糟燥泽葬 粤灶凿则援 冤袁芍药科芍药属
落叶灌木袁花香袭人尧花色丰富尧花型多样袁深受世界各
地人们的倾爱袁已成为世界名花遥 我国拥有最丰富的
野生牡丹资源袁是栽培牡丹的发源地咱员 原 圆暂 遥 在长期的
栽培驯化过程中袁通过自然进化尧人工杂交尧辐射育种
等手段已产生了极其丰富的品种资源袁而且袁目前牡丹
新品种的选育和推广呈快速增长的趋势遥 然而袁随着
市场需求的不断增加以及受到地域限制尧市场流通途
径不规范尧过分强调经济利益等因素的影响袁牡丹品种
一直存在多尧乱尧杂等现象遥 所以袁建立高效可靠的牡
丹品种鉴别技术具有十分重要的实用价值遥
由于依据生物学性状鉴定牡丹品种容易受环境及
主观等因素的影响而且周期较长咱猿暂 袁阅晕粤分子标记技
术成为牡丹品种特异性鉴定及构建栽培品种指纹图谱
的首选遥 如陈向明等咱源暂用 砸粤孕阅 技术构建了 猿缘 个不
同花色牡丹品种的指纹图谱遥 苏雪等咱缘暂应用 员园 个
砸粤孕阅随机引物完全鉴别出 员远 个紫斑牡丹品种遥 侯
小改等咱远暂用 愿 对 粤云蕴孕 引物组合将 猿园 个牡丹品种完
全区分开遥 刘萍等咱苑暂报道了 猿园 个河南牡丹品种的
粤云蕴孕指纹图遥 陨杂杂砸技术对牡丹种质资源也具有较高
的区别效率咱愿 原 怨暂 遥 然而袁这些传统上的随机 阅晕粤分子
标记袁得到的位点往往与目标性状基因距离较远袁其品
种鉴别效率相对较低遥 随着 阅晕粤 分子标记技术的不
断开发袁杂砸粤孕尧栽砸粤孕尧耘杂栽鄄杂杂砸 和 杂悦燥栽 等新型目标分
子标记技术也逐渐应用于牡丹种质资源的研究咱员园 原 员远暂 遥
悦阅阅孕渊糟燥灶泽藻则增藻凿 阅晕粤鄄凿藻则蚤增藻凿 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤分子
标记是由 悦燥造造葬则凿 和 酝葬糟噪蚤造造咱员苑暂开发的一种基于 阅晕粤
保守序列的多态性分子标记技术袁它基于单引物扩增
反应袁属于一种新型目标分子标记类型咱员苑 原 员愿暂 遥 这种分
子标记方法的开发得益于植物基因组学和功能基因组
学的迅速发展袁其引物序列是根据植物 阅晕粤中起重要
作用的保守序列设计遥 因为植物中 阅晕粤 保守序列在
不同物种间均相当保守袁所以 悦阅阅孕 分子标记技术可
以在不同物种间通用遥 在水稻上的研究表明袁悦阅阅孕
分子标记具有操作简单尧应用成本低尧多态性丰富袁可
有效产生与目标性状有关的标记等优点袁是对 砸粤孕阅尧
陨杂杂砸尧栽砸粤孕尧杂悦燥栽尧悦燥砸粤孕等标记方法的有效补充袁具
有较好的应用前景咱员远 原 员苑暂 遥 然而袁目前尚未报道过
悦阅阅孕分子标记在牡丹种质资源上的应用遥
本试验以牡丹为试材袁建立其稳定的 悦阅阅孕 反应
体系袁力图筛选出高效 悦阅阅孕引物袁并分析该标记方法
对牡丹品种资源的多态性袁以期为研究牡丹种质资源
的遗传多样性尧亲缘关系分析尧品种鉴别尧分子标记辅
助育种及遗传改良等提供理论和技术服务遥
员摇 材料和方法
员郾 员摇 材料
怨怨园员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
供试材料分别取自菏泽市曹州牡丹园和曹州牡丹
精品园 渊表 员冤袁品种类型参考王莲英咱员怨暂及李嘉珏
等咱圆园暂的报道遥 每份材料分别取健康无病虫害的 猿 耀 缘
个单株嫩叶袁混合后用液氮处理遥
表 员摇 供试牡丹品种的名称尧来源及类型
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 糟怎造贼蚤增葬则泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 泽葬皂责造蚤灶早 泽蚤贼藻 葬灶凿 贼赠责藻泽 燥枣 贼则藻藻 责藻燥灶赠 怎泽藻凿 蚤灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠
编号
晕燥援
品种
晕葬皂藻
来源
杂葬皂责造蚤灶早 杂蚤贼藻
类型
栽赠责藻
编号
晕燥援
品种
晕葬皂藻
来源
杂葬皂责造蚤灶早 杂蚤贼藻
类型
栽赠责藻
员 乌龙捧盛 曹州牡丹精品园 中原品种 员源 金阁 曹州牡丹精品园 法国品种
圆 卷叶红 曹州牡丹园 中原品种 员缘 旭冈 曹州牡丹园 日本品种
猿 紫二乔 曹州牡丹精品园 中原品种 员远 黑豹 曹州牡丹精品园 美国品种
源 大朵蓝 曹州牡丹精品园 中原品种 员苑 青龙盘翠 曹州牡丹精品园 中原品种
缘 月光 曹州牡丹精品园 中原品种 员愿 红峰 曹州牡丹精品园 中原品种
远 满天星 曹州牡丹精品园 中原品种 员怨 紫金荷 曹州牡丹精品园 中原品种
苑 蓝绣球 曹州牡丹精品园 中原品种 圆园 青山贯雪 曹州牡丹精品园 中原品种
愿 蓝田玉 曹州牡丹精品园 中原品种 圆员 锦袍红 曹州牡丹精品园 中原品种
怨 日月锦 曹州牡丹精品园 日本品种 圆圆 海波 曹州牡丹精品园 中原品种
员园 海黄 曹州牡丹精品园 美国品种 圆猿 魏紫 曹州牡丹精品园 中原品种
员员 花王 曹州牡丹精品园 日本品种 圆源 花二乔 曹州牡丹精品园 中原品种
员圆 岛津 曹州牡丹精品园 日本品种 圆缘 粉紫映金 曹州牡丹精品园 中原品种
员猿 玲宝 曹州牡丹精品园 美国品种
员郾 圆摇 阅晕粤模板的提取
用天根公司的植物基因组 阅晕粤 提取试剂盒提取
阅晕粤遥 经 员豫琼脂糖凝胶电泳检测质量袁用分光光度
计测定其浓度并稀释成母液袁置于 原 圆园益保存备用遥
员郾 猿摇 悦阅阅孕鄄孕悦砸扩增
试验所用 圆员 条 悦阅阅孕 引物均由上海生工生物工
程有限公司合成袁引物编号及序列见表 圆遥
孕悦砸 扩增体系为 圆园 滋蕴袁 包括 圆 曾 耘泽 栽葬择
酝葬泽贼藻则酝蚤曾渊含染料冤 员园 滋蕴尧员园 责皂燥造窑滋蕴 原员引物 员郾 园
滋蕴尧猿园 灶早窑滋蕴 原员 阅晕粤模板 圆 滋蕴和 凿凿匀圆韵 苑 滋蕴遥 孕悦砸
反应程序为 怨源益预变性 猿皂蚤灶曰怨源益变性 员皂蚤灶袁缘园益退
火 员皂蚤灶袁苑圆益延伸 圆皂蚤灶袁猿缘 个循环曰苑圆益后延伸 缘皂蚤灶袁
源益保存遥
员郾 源摇 电泳及检测
取 远 滋蕴 扩增产物在 圆豫的琼脂糖凝胶上电泳分
离袁电压 缘 灾窑糟皂 原员袁电泳 员郾 缘 耀 圆 澡袁耘月 染色 缘皂蚤灶 后袁
在凝胶成像分析仪上观察并采集图像遥
员郾 缘摇 数据统计
将每条 悦阅阅孕引物扩增的每条带视为 员 个位点袁
用 郧藻造鄄孕则燥 葬灶葬造赠扎藻则条带统计软件并结合人工识别的方
法统计位点总数和多态性位点数袁条带清晰可辨的记
为 员袁 缺失的记为 园遥 引物的位点多态信息量
渊责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 糟燥灶贼藻灶贼袁孕陨悦冤按公式 孕陨悦 越 员
原移渊孕蚤冤圆 计算袁其中 孕蚤 为第 蚤 种等位位点占总等位
位点的比率咱圆员暂 遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 悦阅阅孕反应体系稳定性和重复性试验
应用上述 员郾 猿 部分的 悦阅阅孕 反应体系袁随机选择
引物 孕则圆尧孕则远 和 孕则圆员 分别对牡丹品种乌龙捧盛和卷
叶红的 阅晕粤模板进行 孕悦砸扩增袁并重复扩增 猿 次袁以
检验牡丹 悦阅阅孕分子标记反应体系的稳定性和重复性
渊图 员冤遥 结果表明袁不同引物对不同品种的扩增条带
均清晰稳定袁且多态性丰富袁还能体现出品种间的遗传
差异遥 猿 次重复试验表明袁该体系稳定袁可应用于牡丹
基因组的 悦阅阅孕分析遥
圆郾 圆摇 引物的筛选
采用上述稳定的牡丹 悦阅阅孕 反应体系袁以牡丹品
种紫二乔基因组 阅晕粤袁对 悦燥造造葬则凿 和 酝葬糟噪蚤造造咱员远暂已报道
的 圆员 个引物进行多态性筛选遥 试验结果显示袁只有引
物 孕则员苑 没有扩增出任何条带袁其他引物均能扩增出清
晰可辨且多态性丰富的条带袁每个引物扩增条带数 员
耀 愿 条不等渊图 圆冤遥 因此袁除引物 孕则员苑 外袁其他引物均
可用于牡丹品种的多态性分析遥
圆郾 猿摇 悦阅阅孕分子标记鉴定牡丹品种的多态性分析
园园员员
摇 愿 期 牡丹 悦阅阅孕分子标记引物筛选及多态性分析
注院员 原 孕则圆院引物 孕则圆 对 员 号品种 悦阅阅孕鄄孕悦砸扩增的 猿 次重复曰圆 原 孕则圆院引物 孕则圆 对 圆 号品种 悦阅阅孕鄄孕悦砸扩增的 猿 次重复曰
其他编号的意义以此类推曰酝院阅晕粤标准分子量 阅酝圆园园园遥
晕燥贼藻院 员 原 孕则圆院 栽澡则藻藻 贼蚤皂藻泽 则藻责藻葬贼藻凿 悦阅阅孕鄄孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 孕则圆 孕则蚤皂藻泽 贼燥 贼澡藻 晕韵援 员 贼则藻藻 责藻燥灶赠 糟怎造贼蚤增葬则泽曰 圆 原 孕则圆院 栽澡则藻藻 贼蚤皂藻泽
则藻责藻葬贼藻凿 悦阅阅孕鄄孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 孕则圆 孕则蚤皂藻泽 贼燥 贼澡藻 晕韵援 圆 贼则藻藻 责藻燥灶赠 糟怎造贼蚤增葬则泽曰 燥贼澡藻则泽 皂藻葬灶 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 皂葬灶灶藻则曰 酝院 阅晕粤
摇 摇 摇 摇 酝葬则噪藻则 阅酝圆园园园援
图 员摇 引物 孕则圆尧孕则远 和 孕则 圆员 对 员 号和 圆 号牡丹品种 悦阅阅孕鄄孕悦砸扩增的 猿 次重复
云蚤早援 员摇 栽澡则藻藻 贼蚤皂藻泽 则藻责藻葬贼藻凿 悦阅阅孕鄄孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶泽 燥枣 孕则圆袁 孕则远 葬灶凿 孕则 圆员 孕则蚤皂藻泽 贼燥 贼澡藻
晕韵援 员 燥则 晕韵援 圆 贼则藻藻 责藻燥灶赠 糟怎造贼蚤增葬则泽
注院孕则员 至 孕则圆员院圆员 条 悦阅阅孕引物的编号曰酝院阅晕粤标准分子量 阅酝圆园园园
晕燥贼藻院 孕则员 贼燥 孕则圆员院 贼澡藻 晕韵援 燥枣 贼澡藻 圆员 悦阅阅孕 责则蚤皂藻则泽曰 酝院 阅晕粤 酝葬则噪藻则 阅酝圆园园园
图 圆摇 圆员 条 悦阅阅孕引物对牡丹品种紫二乔的扩增遥
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 圆员悦阅阅孕 责则蚤皂藻则泽 贼燥 贼则藻藻 责藻燥灶赠 耶在蚤 耘则择蚤葬燥爷 援
采用筛选出的 圆园 条多态性引物袁对 圆圆 个国内外
牡丹品种渊表 员 中编号为 员 原 猿 的除外冤进行扩增遥 由
表 圆 可以看出袁每条引物的基因型表现从 猿 耀 圆缘 种不
等袁共获得 圆怨苑 条带袁其中多态性条带 圆苑远 条袁多态性
比率为 怨圆郾 怨猿豫 袁平均每条引物扩增出 员源郾 愿缘 种多态
性基因型遥 其中袁引物 孕则猿尧孕则缘尧孕则远尧孕则苑尧孕则员员 和 孕则员愿
的多态性比率均达到了 员园园豫 遥 综合考虑各个引物的
鉴别能力以及扩增效果等情况袁计算了除 孕则员 和 孕则源
以外其他 员愿 条高效引物对 圆圆 个国内外牡丹品种的位
点多态性信息量渊孕陨悦冤的值遥 引物的位点多态性信息
量分布在 园郾 愿猿苑怨 耀 园郾 怨缘怨苑 之间袁平均为 园郾 怨员圆源袁其
中引物 孕则圆园 值最低袁引物 孕则苑 最高遥 另外袁统计所有
引物对 圆圆 个供试品种的特异条带袁共发现 源远 条特异
带袁而且每个供试品种都有特异条带或特异缺失条带
渊表 猿冤遥 这说明袁筛选出的 员愿 条 悦阅阅孕引物对牡丹种
质资源有较强的鉴别能力袁可进一步用于牡丹品种的
鉴定与识别及牡丹种质资源的遗传多样性分析等研
究遥
员园员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
注院源 至 圆缘院国内外牡丹品种的编号渊表 员冤曰酝院阅晕粤标准分子量 阅酝圆园园园遥
晕燥贼藻院 源 贼燥 圆缘院 贼澡藻 灶怎皂遭藻则 燥枣 圆圆 贼则藻藻 责藻燥灶赠 糟怎造贼蚤增葬则泽 遭燥贼澡 凿燥皂藻泽贼蚤糟 葬灶凿 葬遭则燥葬凿渊栽葬遭援 员冤曰 酝院 阅晕粤 酝葬则噪藻则 阅酝圆园园园援
图 猿摇 引物 孕则员怨 对 圆圆 个牡丹品种的扩增结果
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 孕则员怨 责则蚤皂藻则 贼燥 圆圆 贼则藻藻 责藻燥灶赠 糟怎造贼蚤增葬则泽
表 圆摇 用于 悦阅阅孕鄄孕悦砸扩增的引物尧序列尧总条带尧多态性条带和多态性比率
栽葬遭造藻 圆摇 栽澡藻 责则蚤皂藻则泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿 灶怎皂遭藻则泽 枣燥则 悦阅阅孕鄄孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
引物
孕则蚤皂藻则
序列 缘忆 原 猿忆
杂藻择怎藻灶糟藻 缘忆 原 猿忆
总条带数
晕燥援 燥枣 贼燥贼葬造 遭葬灶凿泽
多态性条带数
晕燥援 燥枣 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿泽
多态性比率
孕燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 则葬贼藻 辕 豫
孕则员 栽郧郧悦郧杂粤粤郧栽粤悦郧郧悦悦粤郧 猿 员 猿猿郾 猿猿
孕则圆 郧栽郧郧栽栽郧栽郧悦栽栽郧悦悦 员源 员猿 怨圆郾 愿远
孕则猿 郧悦悦悦栽悦郧栽粤杂郧栽杂郧栽 员缘 员缘 员园园郾 园园
孕则源 郧悦粤杂郧栽郧栽郧悦栽悦郧悦悦 苑 源 缘苑郾 员源
孕则缘 栽郧杂栽郧杂粤栽郧悦栽悦悦悦郧 员苑 员苑 员园园郾 园园
孕则远 悦悦郧悦栽悦郧栽郧栽郧杂粤悦郧 圆缘 圆缘 员园园郾 园园
孕则苑 郧郧悦粤粤郧郧郧悦栽郧悦悦郧悦 圆缘 圆缘 员园园郾 园园
孕则愿 郧郧悦粤粤郧郧郧悦栽郧悦悦郧郧 员远 员缘 怨猿郾 苑缘
孕则怨 悦粤悦栽粤悦悦郧悦郧郧杂悦栽杂悦郧 员员 员园 怨园郾 怨员
孕则员园 郧悦杂郧粤郧粤栽悦悦郧杂郧粤悦悦悦 员缘 员猿 愿远郾 远苑
孕则员员 栽郧郧悦栽杂郧郧悦粤悦杂栽栽悦郧粤 员怨 员怨 员园园郾 园园
孕则员圆 粤粤郧郧郧杂粤粤郧悦栽杂悦悦杂粤粤郧 员远 员源 愿苑郾 缘园
孕则员猿 悦粤悦栽郧郧栽郧郧郧粤郧悦栽杂悦粤悦 员圆 员员 怨员郾 远苑
孕则员源 粤粤郧悦郧杂悦粤悦栽郧郧粤粤郧悦悦 员圆 员员 怨员郾 远苑
孕则员缘 粤栽郧郧郧悦悦郧杂郧郧悦粤粤郧郧栽郧悦 员猿 员圆 怨圆郾 猿员
孕则员远 粤栽郧郧郧悦悦郧杂郧郧悦粤粤郧郧栽郧郧 怨 远 远远郾 远苑
孕则员苑 悦栽杂栽郧悦郧粤悦悦郧杂郧粤郧郧栽悦 园 园 园
孕则员愿 悦栽杂栽郧悦郧粤悦悦郧杂郧粤郧郧栽郧 员怨 员怨 员园园郾 园园
孕则员怨 粤悦杂悦悦杂粤栽悦悦粤悦悦郧悦 员怨 员愿 怨源郾 苑源
孕则圆园 粤悦杂悦悦杂粤栽悦悦粤悦悦郧郧 员员 员园 怨园郾 怨员
孕则圆员 悦粤悦郧粤郧郧粤悦悦栽杂悦粤郧郧 员怨 员愿 怨源郾 苑源
总计 栽燥贼葬造 圆怨苑 圆苑远 怨圆郾 怨猿
圆园员员
摇 愿 期 牡丹 悦阅阅孕分子标记引物筛选及多态性分析
表 猿摇 特异条带统计结果
栽葬遭造藻 猿摇 贼澡藻 泽贼葬贼蚤泽贼蚤糟葬造 则藻泽怎造贼泽 燥枣 泽责藻糟蚤枣蚤糟 遭葬灶凿泽
引物
孕则蚤皂藻则
特异条带
杂责藻糟蚤枣蚤糟 遭葬灶凿泽
引物
孕则蚤皂藻则
特异条带
杂责藻糟蚤枣蚤糟 遭葬灶凿泽
孕则员 无 孕则员圆 员圆圆缘渊员源鄢冤尧苑愿源渊圆员冤
孕则圆 圆园园园渊员员冤尧愿苑员渊圆园冤 孕则员猿 远园缘渊员远冤
孕则猿 圆缘苑远渊怨冤尧圆圆猿苑渊圆圆冤尧员猿圆远渊员缘冤尧苑员员渊员员鄢冤 孕则员源 员苑源员渊员园冤
孕则源 无 孕则员缘 愿缘圆渊圆员冤尧缘猿园渊远冤
孕则缘 圆缘圆园渊员员冤尧圆圆员怨渊员远冤尧员猿园源渊苑冤尧怨怨园渊圆缘冤 孕则员远 员愿远愿渊员远冤尧猿缘员渊员圆冤
孕则远 圆怨员源渊员猿冤尧员怨远员渊员苑冤尧员圆员怨渊员远冤尧愿圆愿渊员源冤 孕则员苑 无
孕则苑 员员苑员渊缘冤尧怨猿园渊员源冤尧愿愿园渊圆猿冤 孕则员愿 员源怨源渊圆猿冤尧员猿源源渊员缘冤尧愿圆愿渊员源冤尧远愿怨渊员园冤尧源圆怨渊源冤
孕则愿 圆远怨缘渊员怨冤尧圆苑猿渊远冤 孕则员怨 怨愿远渊员园冤
孕则怨 员圆园苑渊愿冤尧怨园怨渊圆猿冤尧圆远园渊员苑冤 孕则圆园 员远猿员渊员员冤尧员圆源源渊员圆鄢冤
孕则员园 员缘苑远渊圆源冤尧怨圆缘渊圆园冤 孕则圆员 圆猿圆愿渊怨鄢冤尧猿怨园渊圆源冤
孕则员员 猿圆园猿渊员缘冤尧圆缘猿愿渊员愿冤尧远猿圆渊远冤尧员园圆渊员圆冤
摇 摇 注院括号外数字表示特异条带的大小渊遭责冤袁括号内的数字是供试品种的编号遥 野鄢冶指特异缺失条带遥
晕燥贼藻院 贼澡藻 枣蚤早怎则藻泽 燥怎贼 燥枣 遭则葬糟噪藻贼泽 皂藻葬灶 贼澡藻 皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼泽 燥枣 贼澡藻 泽责藻糟蚤枣蚤糟 遭葬灶凿泽渊遭责冤 葬灶凿 贼澡藻 枣蚤早怎则藻泽 蚤灶 遭则葬糟噪藻贼泽 葬则藻 贼澡藻 灶怎皂遭藻则泽 燥枣 糟怎造贼蚤增葬则泽 泽贼怎凿蚤藻凿援
杂赠皂遭燥造泽 燥枣 野鄢冶 皂藻葬灶 泽责藻糟蚤枣蚤糟 皂蚤泽泽蚤灶早 遭葬灶凿泽援
猿摇 讨论
与其他分子标记方法相比袁悦阅阅孕 分子标记属于
一种新型目的基因分子标记方法袁可有效产生与性状
连锁的标记袁而且具有操作简单尧成本低廉尧引物具有
通用性尧多态性高尧易获得丰富的遗传信息等优
点咱员远 原 员愿暂 袁能更好地反应物种的亲缘关系和遗传多样
性遥
本研究分析了 圆园 个 悦阅阅孕引物对国内外 圆圆 个牡
丹品种的扩增结果袁多态性高达 怨圆郾 怨猿豫 袁平均每条引
物扩增出 员源郾 愿缘 条多态性条带袁其多态性显著高于传
统的随机分子标记方法遥 如陈向明等咱源暂利用 砸粤孕阅
技术对 苑 个花色 猿缘 个牡丹品种进行基因组 阅晕粤多态
性分析袁用 猿源 个随机引物扩增出 源员愿 个 阅晕粤片段袁其
中 猿猿苑 条表现为多态性袁多态性为 愿园郾 远豫 曰粤云蕴孕 技术
对 猿园 个牡丹品种的扩增产生了 员缘员 个位点袁其中 怨远
个为多态性位点袁占 远猿郾 缘豫 咱苑暂 曰杨淑达等咱圆圆暂用 陨杂杂砸标
记方法对 缘员员 个滇牡丹个体的研究表明其多态位点百
分率为 源源郾 远员豫 遥 与目标型分子标记方法相比较袁
悦阅阅孕技术也具有明显的优势遥 如王娟等咱圆猿暂用 圆园 对
杂砸粤孕引物在 圆园 个牡丹品种中扩增出了 员猿员 条 阅晕粤
条带袁其中 怨园 条谱带表现多态性袁多态性检测率为
远怨郾 远豫 曰当 杂砸粤孕引物对增加到 圆猿 对袁对 远猿 份牡丹材
料的分析共得到 圆怨远 条带袁其中 圆远圆 条具有多态性袁占
愿愿郾 缘员豫 咱员园暂 遥 与目标分子标记方法 栽砸粤孕 相比较而
言袁虽然 栽砸粤孕 对 缘远 份牡丹资源的多态性高达
怨怨郾 猿豫 咱员源暂 袁但这种标记方法依赖于牡丹基因组 耘杂栽序
列的开发袁操作也较 悦阅阅孕 技术复杂袁应用成本也较
高咱圆源暂 遥 因此袁在目前牡丹分子标记研究中袁悦阅阅孕 技
术具有更好的多态性袁能更有效地应用于牡丹品种的
鉴定尧种质资源的分类与遗传图谱构建等研究遥
牡丹 悦阅阅孕反应体系稳定性试验表明袁该反应体
系咱圆 曾 耘泽 栽葬择 酝葬泽贼藻则酝蚤曾渊含染料冤 员园 滋蕴尧员园 责皂燥造滋造 原 员
引物 员郾 园 滋蕴尧猿园 灶早窑滋蕴 原员 阅晕粤 模板 圆 滋蕴 和 凿凿匀圆韵 苑滋蕴暂获得了重复性好且结果稳定的良好试验效果袁而
且使用 酝蚤曾试剂可以大大减少试验的工作量袁因此袁可
以采用此体系对牡丹基因组进行 悦阅阅孕鄄孕悦砸 扩增开
展更为深入的资源评价等试验研究遥 但毕竟 悦阅阅孕分
子标记方法是基于 孕悦砸 反应的一项技术袁影响 孕悦砸
反应的许多因素都会影响 悦阅阅孕 分析的效果袁故而有
必要进行多因素正交试验及单因素试验咱圆缘暂以确定适
用于牡丹基因组 悦阅阅孕鄄孕悦砸的最佳反应条件和体系遥
本试验结果证明了 悦阅阅孕分子标记在牡丹种质资
源的遗传多样性分析尧品种鉴定尧分子图谱构建以及基
因定位等方面具有应用的可行性袁为今后利用 悦阅阅孕鄄
孕悦砸 这一新型目的分子标记技术进行牡丹分子遗传
学和分子辅助选择育种打下了基础袁也为此标记在其
它植物上的应用研究提供了经验与借鉴遥
猿园员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
参考文献院
咱 员 暂摇 周志钦袁 潘开玉袁 洪德元援 牡丹组野生种间亲缘关系和栽培牡
丹起源研究进展咱允暂 援园艺学报袁 圆园园猿袁 猿园渊远冤院 苑缘员 原 苑缘苑
咱 圆 暂 摇 任磊袁 王雁袁 周琳袁 彭镇华援 牡丹 孕泽酝粤阅杂缘 基因的克隆尧表达及
载体构建咱允暂 援 核农学报袁圆园员员袁 圆缘 渊缘冤院 怨猿怨 原 怨源源
咱 猿 暂 摇 韩凤龙袁 李正玲袁 胡琳袁 许为钢援用于河南省小麦品种特异性和
一致性鉴定的 杂杂砸分子标记研究咱允暂 援 中国农业科学袁 圆园员园袁 源猿
渊员愿冤院 猿远怨愿 原 猿苑园源
咱 源 暂 摇 陈向明袁 郑国生袁 孟丽援 不同花色牡丹品种亲缘关系的 砸粤孕阅鄄
孕悦砸分析咱允暂 援 中国农业科学袁 圆园园圆袁 猿缘 渊缘冤院 缘源远 原 缘缘员
咱 缘 暂 摇 苏雪袁 张辉袁 董莉娜袁 张建清袁 朱学泰袁 孙坤援 应用 砸粤孕阅 技术
对甘肃栽培牡丹品种的分类鉴定研究 咱 允暂 援 西北植物学报袁
圆园园远袁 圆远 渊源冤院 远怨远 原 苑园员
咱 远 暂摇 侯小改袁尹伟伦袁李嘉珏袁王华芳援 部分牡丹品种遗传多样性的
粤云蕴孕分析咱允暂 援 中国农业科学袁 圆园园远袁 猿怨 渊愿冤院 员苑园怨 原 员苑员缘
咱 苑 暂 摇 刘萍袁 王子成袁 尚富德援 河南部分牡丹品种遗传多样性的 粤云蕴孕
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