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Optimization of Protein Extraction from Prickly Ash Seed by Response Surface Methodology

响应面法优化提取花椒籽蛋白质工艺研究


本研究以花椒籽为原料,采用盐提法提取花椒籽中蛋白质。在单因素实验基础上,根据Central-Composite中心组合实验设计原理,采用响应面分析法,考察NaCl浓度、提取时间、提取温度、料液比、pH值对蛋白质得率的影响。结果表明,响应面法优化所得的最佳工艺条件可靠,其最佳工艺条件为:NaCl浓度0.79mol·L-1,提取时间60min,提取温度35℃,料液比1:17.5,pH值8.78。在此最佳工艺条件下花椒籽粗蛋白得率为18.92%。


全 文 :核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊苑冤院园怨愿愿 耀 园怨怨缘
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄员园鄄圆远摇 接受日期院圆园员猿鄄园员鄄员远
基金项目院四川省人事厅留学人员择优项目专项渊川人函渊圆园园愿冤源愿愿 号冤袁 四川省教育厅重点项目渊园怨在粤园愿员冤
作者简介院张志清渊员怨苑远鄄冤袁 男袁副教授袁 研究方向为粮油加工遥 耘鄄皂葬蚤造院扎择扎澡葬灶早苑圆员岳 员远猿援 糟燥皂遥
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园苑鄄园怨愿愿鄄园愿
响应面法优化提取花椒籽蛋白质工艺研究
张志清员 摇 宋摇 燕员袁圆 摇 刘摇 翔员
渊员 四川农业大学食品学院袁四川 雅安摇 远圆缘园员源曰圆 重庆三峡职业技术学院农林科学系袁重庆摇 源园源员缘缘冤
摘摇 要院本研究以花椒籽为原料袁采用盐提法提取花椒籽中蛋白质遥 在单因素实验基础上袁根据 悦藻灶贼则葬造鄄
悦燥皂责燥泽蚤贼藻中心组合实验设计原理袁采用响应面分析法袁考察 晕葬悦造浓度尧提取时间尧提取温度尧料液比尧责匀
值对蛋白质得率的影响遥 结果表明袁响应面法优化所得的最佳工艺条件可靠袁其最佳工艺条件为院晕葬悦造
浓度 园郾 苑怨皂燥造窑蕴 原员袁提取时间 远园皂蚤灶袁提取温度 猿缘益袁料液比 员颐 员苑郾 缘袁责匀 值 愿郾 苑愿遥 在此最佳工艺条件下
花椒籽粗蛋白得率为 员愿郾 怨圆豫 遥
关键词院响应面法曰花椒籽曰蛋白质曰盐提法
摇 摇 花椒渊在葬灶贼澡燥曾赠造怎皂 遭怎灶早藻葬灶怎皂 酝葬曾蚤皂冤是芸香科花
椒属植物花椒或青椒的成熟干燥果皮袁是我国传统的
调味料尧中药和香料植物咱员暂 遥 花椒栽培历史悠久袁资
源丰富遥 其果实为蓇葖果袁圆球形袁成熟时果皮为红色
至紫红色袁种籽黑色袁有光泽袁果皮渊花椒皮冤与种籽
渊花椒籽冤的比例一般为 员颐 员渊宰 辕 宰冤咱圆暂 遥 花椒籽是花
椒果皮生产中的主要副产物袁理论产量是花椒果皮的
员圆园豫 遥 花椒籽外观椭圆 渊半圆冤球形袁粒径 猿郾 缘 耀
源郾 园皂皂袁千粒重 员圆郾 缘 耀 圆圆郾 园早咱猿暂 遥 由于人们尚未清楚
花椒籽的组成成分特性及用途袁长期以来一直未充分
利用袁目前只有一部分被留作育苗种子袁大部分被燃烧
掉或者作为肥料袁甚至被当作废料丢弃咱源暂 遥 随着经济
的发展和市场需求量的增加袁我国花椒生产迅速增长袁
废弃的花椒籽也与日俱增袁不仅会造成资源的浪费袁还
会导致环境污染袁因此袁开发利用占花椒籽相当比例的
蛋白质显得尤为重要遥 庄世宏等咱缘暂 尧王志勇等咱远暂研究
表明袁花椒籽中约含 员愿郾 苑豫的蛋白质袁猿园郾 圆猿豫的粗纤
维渊外壳冤袁而且各种氨基酸成分齐全袁脂肪酸成分丰
富遥 自此袁花椒籽这一长期被忽视的农业资源逐渐受
到了人们的关注遥
蛋白质渊孕则燥贼藻蚤灶冤是广泛存在于生物体中的一类生
物大分子袁是重要的结构物质尧功能物质和能源物质袁
作为六大营养素之一袁对生物体的一切生命活动有着
不可或缺的作用遥 现有研究得出部分植物蛋白具有抗
氧化和抗衰老的功能咱苑 原 愿暂 遥 但目前对花椒籽蛋白质的
研究较少袁尤其与加工生产相关的报道鲜见遥 已有的
研究证明咱怨 原 员员暂 袁花椒籽蛋白质各组分的相对分子质量
较小袁主要是一些盐溶性的球蛋白袁有利于人体消化吸
收袁是一种优质尧无毒的新兴植物蛋白资源袁可以开发
生产出类似大豆分离蛋白的一系列产品袁从而更好的
利用花椒资源袁提高花椒产业的附加值遥 因此袁本研究
以花椒籽为原材料袁采用盐提法提取其蛋白质袁并采用
响应面法对工艺条件进行优化袁以期为花椒籽的进一
步开发利用开辟前景袁为工业生产提供技术参考遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
员郾 员郾 员摇 材料摇 花椒籽由四川省金阳县花椒生产
办公室提供袁将花椒籽去杂后置于 远园益烘箱中干燥
员圆澡袁干燥后的花椒籽粉碎袁过 圆园 目筛备用遥
员郾 员郾 圆摇 主要试剂及仪器摇 石油醚渊沸程院猿园 耀 远园益冤袁
氯化钠袁氢氧化钠袁盐酸均为分析纯渊四川西陇化工有
限公司冤阅在运宰 原源 电子恒温水浴锅渊北京中兴伟业仪
器有限公司冤曰悦孕圆圆缘阅 型电子天平袁月孕 原 圆园 型 责匀 计
渊北京赛多利斯有限公司冤曰酝陨悦砸韵酝粤载 型离心机
渊栽澡藻则皂燥公司冤曰栽杂栽员园员粤 原 员月 电热鼓风干燥箱渊成都
特斯特仪器有限公司冤曰蕴郧允 原 员园悦 型冷冻干燥机渊北
京四环公司冤遥
愿愿怨
摇 苑 期 响应面法优化提取花椒籽蛋白质工艺研究
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 脱脂花椒籽的制备摇 采用索氏提取法除去花
椒籽中的油脂遥 每次实验称取 苑早 花椒籽袁以石油醚
渊沸点 猿园 耀 远园益冤为提取剂袁在提取温度 缘缘益袁提取时
间 圆澡袁料液比 员颐 员猿 的条件下进行提取袁将脱脂后的花
椒籽置于 远园益烘箱中烘干备用遥 再将脱脂后的花椒
籽粉碎至 愿园 目备用咱员圆 原 员源暂 遥
员郾 圆郾 圆摇 花椒籽蛋白质等电点测定摇 称取脱脂花椒籽
圆早袁加入浓度为 园郾 愿皂燥造窑蕴 原员的 晕葬悦造 溶液渊料液比为
员颐 圆园冤袁调 责匀值至 怨遥 于 源园益水浴搅拌处理 远园皂蚤灶袁以
猿缘园园则窑皂蚤灶 原员离心 员缘皂蚤灶 后袁分离去沉淀遥 将滤液 责匀
值分别调至 圆郾 缘尧猿郾 园尧猿郾 缘尧源郾 园尧源郾 缘尧缘郾 园袁静置沉淀
员园皂蚤灶袁以 苑园园园则窑皂蚤灶 原员离心 缘皂蚤灶袁去除滤液取沉淀袁真
空冷冻干燥即得花椒籽粗蛋白遥 蛋白质得率最高点所
对应的 责匀值即为蛋白质等电点袁每个处理平行试验 猿
次袁并计算平均值遥
员郾 圆郾 猿摇 制备花椒籽蛋白质工艺流程摇 试验参考杨令
叶咱员缘暂的工艺流程并作一定修改遥 脱脂花椒籽寅晕葬悦造
溶液处理寅分离去沉淀寅等电点沉淀蛋白质寅真空冷
冻干燥寅花椒籽粗蛋白遥
员郾 圆郾 源摇 花椒籽蛋白质得率计算
花椒籽蛋白质得率渊豫 冤 越
脱脂花椒籽中蛋白质质量
干燥花椒籽质量
伊员园园豫
员郾 圆郾 缘摇 单因素试验设计摇 分别称取 圆早 脱脂花椒籽袁
按上述工艺流程提取花椒籽中的蛋白质袁分别考察不
同 晕葬悦造溶液浓度袁料液比袁提取 责匀袁提取温度袁提取时
间等对花椒籽中蛋白质溶出效果的影响袁并在蛋白质
溶解后以 猿缘园园则窑皂蚤灶 原员离心 员缘皂蚤灶后袁分离去沉淀遥 等
电点沉淀蛋白质袁静置 员园皂蚤灶袁以 苑园园园 则窑皂蚤灶 原员离心
缘皂蚤灶后袁去除滤液取沉淀袁真空冷冻干燥即得花椒籽
粗蛋白遥 每个处理平行试验 猿 次袁以花椒籽蛋白质得
率考察提取效果并计算平均值渊表 员冤遥
员郾 圆郾 远摇 响应面试验设计摇 在单因素试验基础上袁采用
悦藻灶贼则葬造鄄悦燥皂责燥泽蚤贼藻中心组合设计原理袁选择对蛋白质得
率影响较大的 源 个因素料液比渊载员冤尧提取温度渊载圆冤尧责匀值渊载猿冤尧晕葬悦造 浓度 渊载源冤 渊每组 猿 个平行冤进行考
察袁设计因素水平编码表渊表 圆冤遥 所得试验结果采用
阅藻泽蚤早灶 耘曾责藻则贼苑郾 园郾 园 软件进行分析遥
表 员摇 花椒籽蛋白提取单因素试验水平表
栽葬遭造藻 员摇 云葬糟贼燥则泽 葬灶凿 造藻增藻造泽 燥枣 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 责则燥贼藻蚤灶 蚤灶 责则蚤糟噪造赠 葬泽澡 泽藻藻凿
水平
蕴藻增藻造泽
晕葬悦造溶液浓度
晕葬悦造 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊皂燥造窑蕴 原员 冤
提取时间
耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 辕 皂蚤灶
提取温度
耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 辕 益
料液比
杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥
提取 责匀值
耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 责匀 增燥造怎藻
员 园郾 源 源园 圆园 员颐 缘 苑
圆 园郾 远 远园 猿园 员颐 员园 愿
猿 园郾 愿 愿园 源园 员颐 员缘 怨
源 员郾 园 员园园 缘园 员颐 圆园 员园
缘 员郾 圆 员圆园 远园 员颐 圆缘 员员
表 圆摇 响应面因素水平表
栽葬遭造藻 圆摇 云葬糟贼燥则泽 葬灶凿 造藻增藻造泽 蚤灶 贼澡藻 糟藻灶贼则葬造 糟燥皂责燥泽蚤贼藻 凿藻泽蚤早灶
因素
云葬糟贼燥则泽
编码
悦燥凿藻
水平渊蕴藻增藻造泽冤
原 圆 原 员 园 员 圆
料液比
杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥 载员 员颐 员园 员颐 员圆郾 缘 员颐 员缘 员颐 员苑郾 缘 员颐 圆园
提取温度
耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 辕 益 载圆 猿园 猿缘 源园 源缘 缘园
提取 责匀值
耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 责匀 增葬造怎藻 载猿 愿 愿郾 缘 怨 怨郾 缘 员园
晕葬悦造溶液浓度
晕葬悦造 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕
渊皂燥造窑蕴 原员 冤
载源摇
园郾 远

园郾 苑

园郾 愿

园郾 怨

员郾 园

圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 花椒籽蛋白质等电点的测定
从图 员 可以看出袁在 责匀 值 圆郾 缘 至 猿郾 缘 范围内时袁
蛋白质得率随着 责匀的增大而提高曰当 责匀 值超过 猿郾 缘
时袁蛋白质得率反而下降袁证明在 责匀 值 猿郾 缘 时袁蛋白
质溶解度最小袁最易沉淀遥 因此袁本研究确定花椒籽蛋
白质的等电点为 猿郾 缘袁在提取工艺中遂采用此 责匀沉淀
析出粗蛋白遥
圆郾 圆摇 各单因素对花椒籽蛋白质得率的影响
圆郾 圆郾 员摇 晕葬悦造 溶液浓度对蛋白质得率的影响摇 由图 圆
可知袁当 晕葬悦造 溶液浓度在 园郾 源 耀 园郾 愿皂燥造窑蕴 原员范围内
怨愿怨
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 员摇 花椒籽蛋白质等电点测定结果
云蚤早援 员摇 陨泽燥藻造藻糟贼则蚤糟 责燥蚤灶贼 燥枣 糟则怎凿藻 责则燥贼藻蚤灶
藻曾贼则葬糟贼藻凿 枣则燥皂 责则蚤糟噪造赠 葬泽澡 泽藻藻凿
时袁蛋白质得率随溶液浓度的增加而增大袁在 晕葬悦造 溶
液浓度为 园郾 愿 皂燥造窑蕴 原员时达到最大值遥 随着溶液浓度
继续增加袁蛋白质得率逐渐下降遥 这可能是因为在一
定浓度范围内袁随着盐浓度的增加袁蛋白质表面裸露出
来的疏水性区域增加袁从溶液中析出的蛋白质也增加曰
当溶液浓度过高袁溶液中其它盐溶性物质的形成降低
了蛋白质溶出袁从而影响蛋白质得率遥 因此袁晕葬悦造 溶
液最佳浓度为 园郾 愿 皂燥造窑蕴 原员遥
图 圆摇 晕葬悦造浓度对蛋白质得率的影响
云蚤早援 圆摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 晕葬悦造 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
圆郾 圆郾 圆摇 提取时间对蛋白质得率的影响摇 由图 猿 可知袁
随着提取时间的增加袁蛋白质得率逐渐增加曰但是当提
取时间超过 远园皂蚤灶 后袁其增加的水平不明显遥 这可能
是因为球蛋白在稀盐溶液中溶解度较大袁溶解较快袁在
较短时间内蛋白质已充分溶出袁继续延长提取时间对
其溶解量无明显影响袁因此袁最佳提取时间为 远园皂蚤灶遥
图 猿摇 提取时间对蛋白质得率的影响
云蚤早援 猿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
圆郾 圆郾 猿摇 提取温度对蛋白质得率的影响摇 由图 源 可知袁
当提取温度在 圆园 耀 源园益时袁随着提取温度的升高袁蛋
白质得率增加袁并在 源园益时达到最大值遥 当温度进一
步升高袁其得率变化不显著袁几乎处于同一水平线上遥
这是由于在 圆园 耀 源园益时袁能量增大袁蛋白质分子的势
能无法迅速发生变化袁只能相应地增加动能袁此时蛋白
质分子热运动相对来说最剧烈曰温度继续升高袁其热运
动已达到极限袁得率不再继续增加遥 因此袁最佳提取温
度为 源园益遥
图 源摇 提取温度对蛋白质得率的影响
云蚤早援 源摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
圆郾 圆郾 源摇 料液比对蛋白质得率的影响摇 由图 缘 可知袁当
提取液的料液比在 员颐 缘 耀 员颐 员园 时袁蛋白质得率缓慢增
加曰当料液比在 员颐 员园 耀 员颐 员缘 之间时袁蛋白质得率急剧
增加袁并在料液比为 员颐 员缘 时达到最大值遥 随着料液比
的继续增大袁蛋白质得率变化不明显遥 由于在料液比
较低时袁溶液黏度较大袁影响分子扩散速度曰而当料液
比过大时袁分子扩散速度几乎不会发生明显变化遥 因
此袁最佳料液比为 员颐 员缘
圆郾 圆郾 缘摇 提取 责匀对蛋白质得率的影响摇 由图 远 可知袁
园怨怨
摇 苑 期 响应面法优化提取花椒籽蛋白质工艺研究
图 缘摇 料液比对蛋白质得率的影响
云蚤早援 缘摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 泽燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
当提取液 责匀 值在 苑 耀 愿 之间时袁蛋白质得率变化较
小曰当 责匀值在 愿 耀 怨 时袁随着 责匀 值的增大袁其得率也
增加袁在 责匀 值 怨 时接近最大值曰随着 责匀 值的不断增
大袁蛋白质得率增加的水平不明显遥 这可能是由于在
责匀值 怨 的条件下袁盐溶液中溶解的蛋白质含量最多袁
等电点调节后蛋白质量最大袁而 责匀 值过高袁会破坏部
分蛋白质袁其得率也不会增加遥 因此袁提取液的最佳
责匀值为 怨遥
图 远摇 提取 责匀对蛋白质得率的影响
云蚤早援 远摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 责匀 增葬造怎藻 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
圆郾 猿摇 响应面设计优化花椒籽蛋白质提取工艺
圆郾 猿郾 员摇 响应面实验设计结果摇 根据单因素实验
结果袁对 晕葬悦造溶液浓度尧提取温度尧料液比尧责匀 值这 源
个因素采取中心组合实验进行响应面优化袁实验设计
及结果见表 猿遥
用该中心组合模型袁做四因素五水平共 猿园 个实验
点的响应面分析实验袁蛋白质得率为响应值袁并以随机
次序进行遥 其中有 圆源 个为析因点曰有 远 个为零点袁即
水平的中心点袁零点实验重复 远 次袁据此估计实验误
差遥
摇 摇 利用 阅藻泽蚤早灶 耘曾责藻则贼软件袁对表 猿 实验数据建立二
摇 摇 摇 摇 摇表 猿摇 悦藻灶贼则葬造鄄悦燥皂责燥泽蚤贼藻实验设计及结果
栽葬遭造藻 猿摇 悦藻灶贼则葬造鄄悦燥皂责燥泽蚤贼藻 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 凿藻泽蚤早灶
皂葬贼则蚤曾 葬灶凿 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 则藻泽怎造贼泽
序号 晕燥援 载员 载圆 载猿 载源 蛋白质得率孕则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿 辕 豫
员 园 园 园 园 员愿郾 园园
圆 员 原 员 原 员 原 员 员苑郾 猿园
猿 原 员 原 员 员 员 愿郾 源远
源 员 原 员 员 原 员 员源郾 园猿
缘 员 员 原 员 原 员 员远郾 员员
远 园 园 园 园 员苑郾 远猿
苑 员 员 员 原 员 员猿郾 园园
愿 员 原 员 员 员 员员郾 缘远
怨 园 园 园 园 员苑郾 圆苑
员园 原 员 员 原 员 原 员 员员郾 缘远
员员 园 园 园 圆 员员郾 缘远
员圆 园 原 圆 园 园 员苑郾 源圆
员猿 园 园 原 圆 园 员员郾 愿源
员源 园 圆 园 园 员苑郾 远员
员缘 员 员 原 员 员 员苑郾 缘源
员远 原 圆 园 园 园 怨郾 远缘
员苑 园 园 园 原 圆 员员郾 缘远
员愿 原 员 员 员 员 愿郾 怨猿
员怨 园 园 圆 园 缘郾 愿园
圆园 员 员 员 员 员圆郾 员远
圆员 园 园 园 园 员愿郾 员愿
圆圆 员 原 员 原 员 员 员苑郾 园远
圆猿 原 员 原 员 原 员 原 员 员员郾 园怨
圆源 园 园 园 园 员远郾 怨员
圆缘 圆 园 园 园 员苑郾 园愿
圆远 原 员 员 原 员 员 员源郾 远苑
圆苑 园 园 园 园 员苑郾 圆园
圆愿 原 员 员 员 原 员 员园郾 缘远
圆怨 原 员 原 员 原 员 员 员猿郾 园园
猿园 原 员 原 员 员 原 员 员园郾 愿缘
次回归模型袁得到二次多元回归方程如下院
蛋白质得率渊豫 冤 越 员苑郾 缘猿 垣 员郾 愿缘载员 垣 园郾 园远缘载圆 原员郾 苑园载猿 原 园郾 园源苑载源 原 园郾 圆圆载员载圆 原 园郾 猿远载员载猿 原 园郾 员怨载员载源
原 园郾 员园载圆载猿 垣 园郾 猿猿载圆载源 原 园郾 愿缘载猿载源 原 员郾 园员载员 圆 垣
园郾 园圆缘载圆 圆 原 圆郾 员缘载猿 圆 原 员郾 源远载源 圆遥圆郾 猿郾 圆摇 花椒籽蛋白质提取工艺模型方差分析摇 对上
述模型进行方差分析袁结果见表 源遥 由表 源 可知袁此模
型的 孕 约 园郾 园园园员袁响应面回归模型达到极显著水平曰失
员怨怨
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
拟项表示模型预测值与实际值不拟合的概率袁该失拟
项 孕 跃 园郾 园缘袁不显著袁说明回归模型与实际测量值能较
好的拟合遥 模型的调整决定系数为 砸圆粤凿躁 越 园郾 怨愿园源袁说
明该模型能解释 怨愿郾 园源豫的响应值变化袁实验误差较
小袁可以利用该模型预测上述提取条件对蛋白质得率
的影响遥 对模型进行回归方程系数显著性检验可知院
一次项 载员 料液比尧载猿 提取 责匀 极显著袁其他一次项均
不显著曰交互项 载员载猿尧载圆载源 显著袁载猿载源 极显著袁其他交
互项均不显著曰平方项 载员 圆尧载猿 圆尧载源 圆 极显著袁载圆 圆 不显
著遥 因此袁各个单因素对花椒籽蛋白质得率的影响不
是简单的线性关系遥 各因素对蛋白质得率影响大小依
次为院料液比渊载员 冤 跃提取 责匀渊载猿 冤 跃提取温度渊载圆 冤 跃晕葬悦造溶液浓度渊载源冤遥
依据方差分析结果袁去除不显著项袁将回归方程简
化为院
蛋白质得率 渊豫 冤 越 员苑郾 缘猿 垣 员郾 愿缘载员 原 员郾 苑园载猿 原
园郾 猿远载员载猿 垣 园郾 猿猿载圆载源 原 园郾 愿缘载猿载源 原 员郾 园员载员 圆 原 圆郾 员缘载猿 圆
原 援 源远载源 圆
表 源摇 响应面二次模型方差分析
栽葬遭造藻 源摇 灾葬则蚤葬灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 枣燥则 贼澡藻 凿藻增藻造燥责藻凿 择怎葬凿则葬贼蚤糟 责燥造赠灶燥皂蚤葬造 皂燥凿藻造
方差来源
杂燥怎则糟藻泽 燥枣 增葬则蚤葬贼蚤燥灶
平方和
杂杂
自由度
阅云
均方
酝杂
云值
云 增葬造怎藻 孕 跃 云
显著性
杂蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼
模型 酝燥凿藻造 猿缘园郾 猿远 员源 圆缘郾 园猿 员园源郾 源员 约 园郾 园园园员 鄢鄢
载员 愿圆郾 缘员 员 愿圆郾 缘员 猿源源郾 圆猿 约 园郾 园园园员 鄢鄢
载圆 园郾 员园 员 园郾 员园 园郾 源圆 园郾 缘圆缘猿
载猿 远怨郾 缘远 员 远怨郾 缘远 圆怨园郾 圆圆 约 园郾 园园园员 鄢鄢
载源 园郾 园缘圆 员 园郾 园缘圆 园郾 圆圆 园郾 远源苑圆
载员载圆 园郾 苑缘 员 园郾 苑缘 猿郾 员圆 园郾 园怨苑远
载员载猿 圆郾 园远 员 圆郾 园远 愿郾 缘怨 园郾 园员园猿 鄢
载员载源 园郾 远员 员 园郾 远员 圆郾 缘源 园郾 员猿圆园
载圆载猿 园郾 员愿 员 园郾 员愿 园郾 苑源 园郾 源园源缘
载圆载源 员郾 苑猿 员 员郾 苑猿 苑郾 圆员 园郾 园员远怨 鄢
载猿载源 员员郾 源远 员 员员郾 源远 源苑郾 愿园 约 园郾 园园园员 鄢鄢
载员 圆 圆愿郾 员园 员 圆愿郾 员园 员员苑郾 圆员 约 园郾 园园园员 鄢鄢
载圆 圆 园郾 园员愿 员 园郾 园员愿 园郾 园苑源 园郾 苑愿怨源
载猿 圆 员圆远郾 缘怨 员 员圆远郾 缘怨 缘圆愿郾 员源 约 园郾 园园园员 鄢鄢
载源 圆 缘愿郾 苑猿 员 缘愿郾 苑猿 圆源缘郾 园源 约 园郾 园园园员 鄢鄢
残差 砸藻泽蚤凿怎葬造 藻则则燥则 猿郾 远园 员缘 园郾 圆源
失拟项 蕴葬糟噪 燥枣 枣蚤贼 圆郾 猿愿 员园 园郾 圆源 园郾 怨愿 园郾 缘源源苑
纯误差 孕怎则藻 藻则则燥则 员郾 圆员 缘 园郾 圆源
总方差 栽燥贼葬造 增葬则蚤葬灶糟藻 猿缘猿郾 怨缘 圆怨
模型的决定系数
糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥枣 凿藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 砸圆 越 园郾 怨愿怨愿
模型的调整决定系数
粤凿躁怎泽贼 糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥枣 凿藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 砸圆粤凿躁 越 园郾 怨愿园源
摇 摇 注院鄢表示在 琢 越 园郾 园缘 水平上显著袁鄢鄢表示在 琢 越 园郾 园员 水平上极显著遥
晕燥贼藻院 鄢 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 葬贼 造藻增藻造 燥枣 琢 越 园郾 园缘袁 鄢鄢蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 澡蚤早澡造赠 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 葬贼 造藻增藻造 燥枣 琢 越 园郾 园员援
圆郾 猿郾 猿摇 响应面分析摇 响应面图形能较直观地反映出
各因素对响应值的影响袁等高线的形状可以反映出交
互效应的强弱袁椭圆形表示两因素交互作用显著袁而圆
形则与之相反遥 各因素间的交互作用对蛋白质得率的
影响通过 阅藻泽蚤早灶 耘曾责藻则贼 苑郾 园郾 园 软件分析遥 显著的交互
项 载员载猿尧载圆载源 和极显著的交互项 载猿载源 的响应曲面和
等高线图分别见图 苑尧图 愿 和图 怨遥
摇 摇 从图 苑 耀图 怨 可以看出袁料液比渊载员 冤对蛋白质得
率的影响最为显著袁表现为曲面相对较陡袁提取 责匀 次
之曰并且提取 责匀 值渊载猿 冤和 晕葬悦造 溶液浓度渊载源 冤 的交
互作用最为显著袁表现为等高线图最扁平袁料液比
渊载员冤与提取 责匀渊载猿 冤的相互影响次之袁提取温度渊载圆 冤
圆怨怨
摇 苑 期 响应面法优化提取花椒籽蛋白质工艺研究
注院载员 院料液比袁 载猿 提取 责匀值遥
晕燥贼藻院 载员 院 杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥袁 载猿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 责匀 增葬造怎藻援
图 苑摇 料液比渊载员冤和提取 责匀渊载猿冤交互作用的响应面图和等高线图
云蚤早援 苑摇 砸藻泽责燥灶泽藻 泽怎则枣葬糟藻 责造燥贼 葬灶凿 蚤贼泽 糟燥灶贼燥怎则 责造燥贼 燥枣 糟则燥泽泽鄄蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 泽燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿
则葬贼蚤燥 葬灶凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 责匀 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
注院载圆 院提取温度袁载源 院晕葬藻造 溶液浓度
晕燥贼藻院 载圆 院 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻袁 载源 院 晕葬糟造 糟燥灶糟藻则贼则葬贼蚤燥灶
图 愿摇 提取温度渊载圆冤和 晕葬悦造溶液浓度渊载源冤 交互作用的响应面图和等高线图
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葬灶凿 晕葬悦造 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥灶 责则燥贼藻蚤灶 赠蚤藻造凿
与 晕葬悦造溶液浓度渊载源冤的相互影响最小袁与模型方差
分析结果一致遥 在所考察的因素范围内袁蛋白质得率
随料液比的增大而增加曰随提取 责匀 的增大呈现先增
加后减少的趋势曰随 晕葬悦造溶液浓度的增加而先增大后
减小曰随提取温度的变化其变化不明显遥
圆郾 猿郾 源摇 优化与验证摇 根据所得的模型袁对其求一阶偏
导袁并令其为零袁进一步确定各因素的最佳条件袁求得
优化的提取条件院载员 越 员苑郾 缘园袁载圆 越 猿缘郾 园园袁载猿 越 愿郾 苑愿袁载源越 园郾 苑怨袁此时 再 越员怨郾 园园曰将其转化为具体参数袁即在料
液比 员颐 员苑郾 缘袁提取温度 猿缘益袁提取 责匀值 愿郾 苑愿袁晕葬悦造溶
液浓度 园郾 苑怨 皂燥造窑蕴 原员时袁蛋白质得率达到最大值为
员怨郾 园园豫 遥
为检验试验结果与真实情况的一致性和可靠性袁
进行验证实验遥 为方便实际操作袁将最佳工艺条件修
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核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 怨摇 提取 责匀渊载猿冤和 晕葬悦造溶液浓度渊载源冤 交互作用的响应面图和等高线图
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正为料液比 员 颐 员苑郾 缘袁提取温度 猿缘益袁提取 责匀 值 愿郾 愿袁
晕葬悦造溶液浓度 园郾 愿 皂燥造窑蕴 原员袁在该条件下平行试验 猿
次袁得出蛋白质得率为 员愿郾 怨圆豫 袁与理论预测值
员怨郾 园园豫相比袁相对偏差小于 员豫 遥 因此袁响应面法优
化所得的最佳工艺条件可靠袁具有实用价值遥
猿摇 结论
本研究以花椒籽为原料袁采用盐提法提取花椒籽
中蛋白质遥 通过单因素试验对蛋白质得率的影响研究
得出袁料液比尧提取温度尧提取 责匀值尧晕葬悦造溶液浓度这
源 个因素对蛋白质得率影响较大遥 通过响应面试验优
化工艺参数袁得出最佳工艺条件为院晕葬悦造 浓度 园郾 苑怨
皂燥造窑蕴 原员袁提取时间 远园皂蚤灶袁提取温度 猿缘益袁料液比 员院
员苑郾 缘袁责匀值 愿郾 苑愿遥 在此工艺条件下袁蛋白质的理论得
率为 员怨郾 园园豫 袁实际平均得率为 员愿郾 怨圆豫 遥
研究表明袁球蛋白类蛋白质能溶于稀盐溶液中袁
晕葬悦造溶液是典型的稀盐溶液遥 阎娥等咱员远暂采用不同浓
度的硫酸盐提取首蓓叶蛋白袁研究发现采用 猿园豫硫酸
盐提取首楷叶蛋白效果最好曰首楷叶中蛋白氨基酸种
类齐全袁含量高袁比例协调袁是一种蛋白含量高的植物
蛋白遥 黄文等咱员苑暂选用江苏省泰兴市大佛指白果为原
料袁采用盐溶和盐析的方法袁从白果中制备出清蛋白尧
球蛋白和碱溶蛋白袁制得蛋白质纯度高袁氨基酸组成丰
富尧合理袁属于优质蛋白质袁本试验结果也表明袁盐提法
提取花椒籽中蛋白质具有实际可行性遥 但是本研究与
酶法尧碱溶酸析法等提取花椒籽蛋白质的结果相比袁得
率相对较低遥 考虑到本法成本低袁设备简单袁工艺流程
简便袁操作快捷方便袁提取试剂来源广泛袁同样适合工
业化大量生产遥 从花椒籽中提取蛋白质袁变废为宝袁可
以提高其附加值袁不仅节约了资源袁也减轻了环境污
染袁为花椒籽的进一步开发利用开辟前景袁并为花椒籽
蛋白质的工业生产提供技术参考遥
参考文献院
咱 员 暂摇 吴素蕊袁阚建全袁刘春芬援花椒的活性成分与应用研究咱 允暂 援 中国
食品添加剂袁圆园园源袁渊圆冤院苑缘 原 苑愿
咱 圆 暂摇 李桂华袁付黎敏袁薛开发援花椒种籽化学成分分析研究咱 允暂 援 郑州
粮食学院学报袁员怨怨源袁员缘渊源冤院圆员 原 圆猿
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咱 源 暂摇 张氽袁阚建全援 花椒籽的研究进展 咱 允暂 援 西部粮油科技袁圆园园猿袁
渊远冤院源源 原 源远
咱 缘 暂摇 庄世宏袁李孟楼援花椒籽油的成分分析咱允暂 援西北农业学报袁圆园园圆袁
员员渊圆冤院源猿 原 源缘
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圆渊猿冤院员缘 原 员愿
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究援 咱允暂 援营养学报袁圆园园圆袁圆源渊圆冤院员怨圆 原 员怨源
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咱 怨 暂摇 寇明珏援花椒籽蛋白质分离提取及功能性质的研究咱阅暂援 重庆院
西南大学袁圆园园远
咱员园暂摇 杨令叶袁田呈瑞袁权麻玉援 大红袍花椒籽种仁蛋白的分类研究
咱允暂 援中国油脂袁圆园园愿袁猿猿渊怨冤院员远 原 员愿
咱员员暂摇 杨令叶袁权麻玉袁田呈瑞援韩城大红袍花椒籽的研究咱 允暂 援陕西农
业科学袁圆园园苑袁渊源冤院苑圆 原 苑源
咱员圆暂摇 马荣萱袁李继忠援 花椒籽油的提取研究与应用咱 允暂 援 中国油脂袁
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圆园园远袁猿员渊远冤院怨源 原 怨远
咱员猿暂摇 张军华袁陈汀汀援 花椒籽油提取工艺研究咱 允暂 援 中国粮油学报袁
圆园园愿袁圆猿渊源冤院员缘源 原 员缘远
咱员源暂摇 黄文捷袁苏印泉袁杨芳霞袁李秀红袁薛刚袁小林昭雄援溶剂法提取花
椒籽油的研究咱允暂 援西北林学院学报袁圆园园愿袁圆园园猿渊源冤院员源怨 原 员缘员
咱员缘暂摇 杨令叶援韩城大红袍花椒籽种仁蛋白质分离提取及性能的研究
咱阅暂援西安院陕西师范大学袁圆园园愿
咱员远暂摇 阎娥袁范月君袁谢春花援 首楷叶蛋白提取效果及蛋白氨基酸组成
的研究咱允暂 援青海师范大学学报袁圆园园远袁渊 造冤院远远 原 远愿
咱员苑暂摇 黄文袁谢笔钧袁王益袁杨尔宁袁罗锐援 白果蛋白质的分离尧纯化尧理
化特性及其抗氧化活性的研究 咱 允暂 援 中国农业科学袁圆园园源袁猿苑
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