全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊苑冤院员员远圆 耀 员员远愿
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园怨鄄园缘摇 接受日期院圆园员源鄄园猿鄄园猿
基金项目院国家自然科学基金项目渊猿园怨苑员苑怨源冤
作者简介院王继玥袁男袁主要从事玉米细胞质雄性不育研究遥 耘鄄皂葬蚤造院葬糟怎贼藻圆愿园猿苑远源岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院曹墨菊袁女袁教授袁主要从事玉米雄性不育研究遥 耘鄄皂葬蚤造院糟葬燥皂躁岳 泽蚤糟葬怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤园苑鄄员员远圆鄄园苑
玉米 悦酝杂鄄悦不育系及保持系 增凿葬糟基因的
克隆与表达分析
王继玥摇 汪生庆摇 曹墨菊
渊四川农业大学玉米研究所 辕教育部作物基因资源与遗传改良重点实验室 辕农业部西南玉米生物学
及遗传育种重点实验室袁四川 成都摇 远员员员猿园冤
摘摇 要院为了探讨玉米 悦胞质花粉败育的分子机制本研究利用 砸栽鄄孕悦砸 技术在玉米不育系 悦源愿 原 圆 及保
持系 晕源愿 原圆 单核期花药中克隆了 增凿葬糟员葬 和 增凿葬糟员遭基因遥 序列分析发现袁 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 间 增凿葬糟员遭
的序列完全一致袁而 增凿葬糟员葬在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 间存在单碱基差异遥 增凿葬糟员葬推定蛋白质的生物信息学
预测显示袁相对于 晕源愿 原圆袁悦源愿 原 圆 编码的 灾阅粤悦员葬蛋白理化性质以及结构发生了变化袁可能导致 悦源愿 原
圆线粒体膜上电压依赖性阴离子通道渊灾阅粤悦冤关闭袁活性氧渊砸韵杂冤上升袁线粒体渗透孔渊孕栽孕冤持续开放袁
最终引起细胞凋亡遥 通过 砸藻葬造鄄栽蚤皂藻 择孕悦砸检测了 增凿葬糟员葬基因在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 小孢子发育的花粉
母细胞时期尧四分体时期尧单核期以及双核期的表达情况遥 结果表明袁相对于 晕源愿 原 圆袁花粉母细胞时期
和双核期 增凿葬糟员葬基因在 悦源愿 原 圆 中上调表达遥 这些结果为进一步探索 增凿葬糟员葬基因差异表达与花粉败育
的关系奠定基础遥
关键词院玉米曰悦酝杂鄄悦曰电压依赖性阴离子通道曰差异表达
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 园苑援 员员远圆
摇 摇 细胞质雄性不育渊糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造蚤贼赠袁悦酝杂冤
对于植物杂种优势的利用有着重要作用袁是研究核质
互作和信号转导等分子机制的理想材料遥 砸怎蚤扎 等咱员暂
指出袁悦酝杂 主要是由于核基因组和细胞质基因组不相
容而导致花粉败育袁而最近对水稻野败型 悦酝杂 的研究
表明袁基因重排产生的线粒体嵌合基因 宰粤猿缘圆 与保守
核基因 糟燥曾员员 互作导致不育遥 当引入恢复基因 砸枣 后袁
可以消除这种不协调作用袁从而恢复育性咱圆暂 遥 关于
悦酝杂的分子机制的研究大多是通过比较不育系与保
持系或恢复系的线粒体基因组尧蛋白组以及转录组的
差异来确定 悦酝杂 相关的基因袁然后通过转基因或者
砸晕粤 干涉等技术验证候选基因的功能遥 杂贼藻佴责澡葬灶藻
月藻灶贼燥造蚤造葬等咱猿暂利用高通量测序技术袁对水稻不育系及
保持系线粒体全基因组测序袁推测具有跨膜结构的嵌
合基因 燥则枣员圆远 是 宰粤鄄悦酝杂 相关的候选基因遥 而
运藻蚤泽怎噪藻 陨早葬则葬泽澡蚤 等咱源暂用同样方法并结合 晕燥则贼澡藻则灶 月造燥贼
技术揭示 燥则枣员员猿 是水稻 砸栽怨愿 原 悦酝杂相关的候选基因遥
虽然 圆园园苑 年就对玉米正常胞质和不育胞质的线粒体
基因组进行了全基因组测序袁但至今仍无法确定与
悦酝杂鄄悦相关的候选基因遥
电压依赖性阴离子通道渊 增燥造贼葬早藻 凿藻责藻灶凿藻灶贼 葬灶蚤燥灶
糟澡葬灶灶藻造袁 灾阅粤悦冤位于线粒体外膜上袁是线粒体渗透孔
渊孕栽孕冤的重要组成蛋白袁主要负责离子和 阅晕粤尧贼砸晕粤
等大分子的运输遥 不同于哺乳动物或真菌类袁植物的
灾阅粤悦蛋白是由一个小的多基因家族编码的袁如拟南
芥基因组含有 缘 个 增凿葬糟基因袁白杨中发现了 员园 个 增凿葬糟
基因咱缘暂 袁水稻日本晴基因组中已预测了 愿 个 增凿葬糟 基
因咱远暂 遥 近年来陆续在多种哺乳动物和真菌中克隆了
增凿葬糟基因袁对 灾阅粤悦蛋白的结构和功能进行了大量系
统的研究遥 研究表明 灾阅粤悦 与动物线粒体内 粤栽孕 的
产生尧悦葬圆 垣平衡尧抗氧化力以及调控细胞凋亡有关袁并
参与多种生理代谢过程袁与人类癌症以及肌肉和心肌
衰弱等疾病有关咱苑暂 遥 但对植物 灾阅粤悦 的特性以及在
植物生长发育过程中的作用研究却相对滞后遥 少数研
圆远员员
摇 苑 期 玉米 悦酝杂鄄悦不育系及保持系 增凿葬糟基因的克隆与表达分析
究表明植物中的 灾阅粤悦蛋白可能在 粤月粤信号途径袁非
生物胁迫以及调控生殖发育等生理代谢过程中发挥作
用咱愿 原 怨暂 遥
研究表明 灾阅粤悦决定着 孕栽孕 的开放袁孕栽孕 过度开
放可以引起细胞凋亡遥 而植物 悦酝杂 的发生与细胞程
序性死亡密切相关袁细胞程序性死亡延迟或提前发生
可能是导致 悦酝杂 最直接的原因之一遥 本课题组前期
通过蛋白质双向电泳技术发现了不育系和保持系间的
圆 个差异表达蛋白 灾阅粤悦员葬 和 灾阅粤悦员遭咱员园暂 遥 灾阅粤悦员葬
只在不育系双核期被检测到袁而保持系中未检测到遥
相对于保持系袁灾阅粤悦员遭 在不育系单核期上调表达遥
为了进一步研究 灾阅粤悦与玉米 悦酝杂鄄悦的关系袁本研究
利用 砸栽鄄孕悦砸克隆了编码 灾阅粤悦员葬和 灾阅粤悦员遭蛋白的
基因袁并分析了 增凿葬糟员葬基因在花药不同发育时期的表
达模式遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
玉米 悦 型细胞质雄性不育系渊悦源愿 原 圆冤及其保持
系渊晕源愿 原 圆冤袁不育系经保持系多代回交遥
员郾 圆摇 砸晕粤提取
采用 栽葬运粤砸葬 公司渊大连袁中国冤的 砸晕粤蚤泽燥 孕造怎泽总
砸晕粤提取试剂盒分别提取 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 小孢子
发育至花粉母细胞时期尧四分体时期尧单核期以及双核
期的花药总 砸晕粤遥 员豫琼脂糖凝胶电泳检测花药总
砸晕粤质量遥
员郾 猿摇 糟阅晕粤第一链合成
分别以玉米 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 的花药总 砸晕粤 为
模版袁采用 栽葬运粤砸葬 公司去基因组污染的反转录试剂
盒反转录合成 糟阅晕粤第一条链遥
员郾 源摇 砸栽鄄孕悦砸扩增目的基因片段
根据玉米基因组数据库 增凿葬糟员葬 和 增凿葬糟员遭 基因的
悦阅杂序列设计特异引物袁扩增片段长度分别为 缘怨愿遭责
和 愿圆远遭责遥 采用 栽葬运粤砸葬公司的 孕则蚤皂藻杂栽粤砸誖 匀杂 阅晕粤
孕燥造赠皂藻则葬泽藻袁分别以 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 单核期花药
糟阅晕粤第一条链为模版进行 孕悦砸 扩增遥 反应体系
渊圆园滋蕴冤院稀释 员园 倍 糟 阅晕粤 员滋蕴袁凿晕栽孕 酝蚤曾贼怎则藻 员郾 远滋蕴袁
孕悦砸 孕则蚤皂藻则渊员园 怎酝冤 园郾 源滋蕴袁孕则蚤皂藻 杂栽粤砸 月怎枣枣藻则渊酝早圆 垣 冤
源滋蕴袁孕则蚤皂藻 杂栽粤砸 匀杂 园郾 圆滋蕴袁凿凿 匀圆韵员圆郾 源滋蕴遥 反应条
件院怨源益缘 皂蚤灶袁怨愿益 员园 泽袁缘愿益缘泽藻糟袁苑圆益 员 皂蚤灶袁猿缘 个
循环袁苑圆益 愿 皂蚤灶遥 引物序列如下院
增凿葬糟员葬院 云缘忆 粤栽悦郧栽悦郧郧粤悦悦粤郧栽栽悦栽悦栽粤悦粤猿忆袁
砸缘忆 郧悦栽栽郧粤栽郧栽悦悦粤悦粤郧悦粤悦栽栽悦悦 猿忆
增凿葬糟员遭院 云缘忆 粤栽悦郧栽悦郧郧粤悦悦粤郧栽栽悦栽悦栽粤悦粤悦 猿忆袁
砸缘忆 郧悦栽栽郧粤栽郧栽悦悦粤悦粤郧悦粤悦栽栽悦悦 猿忆遥
员郾 缘摇 序列分析
回收 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 增凿葬糟员葬 基因和 增凿葬糟员遭 基
因的 砸栽鄄孕悦砸产物袁连接 责耘粤杂再鄄扎藻则燥 渊全式金公司冤载
体袁转化大肠杆菌袁每个样品分别挑取 猿 个阳性克隆送
上海美吉公司测序遥 阅晕粤酝粤晕 软件进行基因以及蛋
白质序列间多序列比对遥 利用 杂韵孕酝粤 软件在线分析
蛋白质二级结构类型尧分子量尧等电点尧疏水性等理化
特性遥 利用 陨灶贼藻则孕则燥杂糟葬灶 软件在线分析蛋白质超二级
结构的保守位点和结构域遥 利用 杂宰陨杂杂鄄酝韵阅耘蕴
渊 澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 藻曾责葬泽赠援 燥则早 辕 泽憎蚤泽泽皂燥凿 辕 杂宰陨杂杂鄄
酝韵阅耘蕴援 澡贼皂造 冤在线软件袁通过同源建模的方法进行蛋
白质三级结构预测遥
员郾 远摇 砸藻葬造鄄栽蚤皂藻 择孕悦砸
根据 增凿葬糟员葬基因的保守序列设计荧光定量 孕悦砸
特异性引物遥 以 员愿泽 和 茁 原 粤糟贼蚤灶 为双内参基因袁用
砸燥糟澡藻 蕴蚤早澡贼 悦赠糟造藻则岳 源愿园 杂赠泽贼藻皂 实时荧光定量 孕悦砸 扩
增仪和试剂盒 砸藻葬造 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾渊杂再月砸郧则藻藻灶冤检测不育
系和保持系母细胞时期尧四分体时期尧单核期以及双核
期 增凿葬糟员葬基因的表达水平遥 反应体系渊圆园滋蕴冤院稀释
员园 倍 糟阅晕粤 圆滋蕴袁 砸藻葬造 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾员园滋蕴袁正向引物
园郾 缘滋蕴袁反向引物 园郾 缘滋蕴袁凿凿匀圆韵 苑滋蕴遥 反应程序院怨源益
预变性 怨园 泽曰怨源益员缘 杂袁远员益圆园 泽袁远愿益猿园 泽袁源源 个循环遥
每个样品做 猿 次重复袁按照 圆 原 驻驻悦栽方法分析的基因
相对表达量遥 引物序列如下院
增凿葬糟员葬院 云缘忆 悦粤栽悦郧悦悦悦栽粤悦栽悦粤栽悦郧悦栽栽粤栽粤猿忆袁
砸缘忆栽悦栽郧粤郧粤粤郧郧粤粤郧栽粤栽栽郧郧悦栽粤栽郧悦猿忆
员愿泽院 云缘忆 悦栽郧粤郧粤粤粤悦郧郧悦栽粤悦悦粤悦粤猿 爷袁 砸缘忆
栽悦栽郧粤郧粤粤郧郧粤粤郧栽粤栽栽郧郧悦栽粤栽郧悦 猿忆
茁 原 粤糟贼蚤灶院院 云 缘忆 郧栽悦悦悦栽悦粤悦悦悦栽悦悦悦粤粤粤粤郧 猿忆袁
砸 缘忆 郧悦栽郧悦悦栽悦粤粤悦粤悦悦栽悦粤粤悦悦悦 猿忆遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 增凿葬糟员葬和 增凿葬糟员遭的克隆及序列分析
通过 砸栽鄄孕悦砸 在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 单核期花药中
分别扩增得到了 增凿葬糟员葬 和 增凿葬糟员遭 的 糟阅晕粤 序列渊图
员冤遥 每份样品分别挑取 猿 个克隆进行测序遥 测序结
果显示袁悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 增凿葬糟员遭 基因各自有 圆 个克
隆测序的结果完全一致遥 悦源愿 原 圆 增凿葬糟员葬 基因的 猿 个
克隆序列都完全一致袁晕源愿 原 圆 增凿葬糟员葬 基因也有袁圆 个
克隆序列完全一致袁另外 员 个克隆仅有 员 个碱基的差
异遥 序列对比发现 增凿葬糟员遭 在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 间序
猿远员员
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
摇 摇 摇 摇 摇 摇
图 员 增凿葬糟员遭和 增凿葬糟员葬 砸栽 原 孕悦砸电泳图
云蚤早援 员摇 栽澡藻 砸栽 原 孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 增凿葬糟员葬 葬灶凿 增凿葬糟员遭
图 圆摇 悦源愿 原圆 和 晕源愿 原圆 单核期 增凿葬糟员遭 糟阅晕粤序列比对遥
云蚤早援 圆摇 杂藻择怎藻灶糟藻 葬造蚤早灶皂藻灶贼 燥枣 增凿葬糟员遭
列完全一致渊图 圆冤袁而 增凿葬糟员葬 在 悦源愿 原 圆 有 圆 处插入
突变和 员圆 处单碱基替换袁其中 郧鄄哉的转换有 源 处渊图
猿冤遥 生物信息学预测发现袁悦源愿 原 圆 推定蛋白质的等电
点为 员圆郾 员猿袁而 晕源愿 原圆 为 缘郾 怨缘袁晕源愿 原 圆 编码的蛋白质
为疏水蛋白袁而 悦源愿 原 圆 编码的蛋白质只有中间部分
具有疏水性袁其余部分表现亲水性遥 二级结构的保守
位点和结构域预测显示渊图 源冤 晕源愿 原 圆 具有典型的
灾阅粤悦员葬蛋白结构域袁而 悦源愿 原 圆 的推定蛋白质未发现
保守位点和结构域遥 蛋白质三级结构预测渊图 缘冤显
示袁晕源愿 原 圆 推定蛋白质具有典型的 灾阅粤悦 茁 原桶式膜
孔复合体结构袁而 悦源愿 原 圆 的推定蛋白质不能通过同
源远员员
摇 苑 期 玉米 悦酝杂鄄悦不育系及保持系 增凿葬糟基因的克隆与表达分析
图 猿摇 悦源愿 原圆 和 晕源愿 原圆 单核期 增凿葬糟员葬 糟阅晕粤序列比对
云蚤早援 猿摇 杂藻择怎藻灶糟藻 葬造蚤早灶皂藻灶贼 燥枣 增凿葬糟员葬
源建模的方法获得稳定蛋白质三级结构遥
圆郾 圆摇 增凿葬糟员葬的基因表达模式
通过荧光定量 孕悦砸对 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 小孢子
源 个发育时期 增凿葬糟员葬 的表达模式进行了分析渊图 远冤遥
增凿葬糟员葬 在 圆 个材料中均以四分体时期的表达量最高袁
且明显高于其它发育时期遥 花粉母细胞时期和双核期
增凿葬糟员葬在 悦源愿 原 圆 中表达的量明显高于 晕源愿 原 圆袁且花
粉母细胞时期 圆 个材料基因表达量的差异要大于双核
期遥 单核期 悦源愿 原 圆 中 增凿葬糟员葬 的表达量比 晕源愿 原 圆 略
高袁四分体时期 悦源愿 原 圆 比 晕源愿 原 圆 略低袁但差异都不
明显遥 从理论上说袁花粉母细胞时期是决定小孢子发
育的关键时期袁因此母细胞时期的差异表达可能直接
影响到小孢子后期的发育进程遥 增凿葬糟员葬 在 悦源愿 原 圆 花
粉母细胞时期上调表达可能诱导细胞程序性死亡提前
发生袁使小孢子发育至单核早期开始退化袁单核中期大
量败育遥 前期蛋白质双向电泳结果显示双核期
灾阅粤悦员葬蛋白只在 悦源愿 原 圆 中检测到袁而在 晕源愿 原 圆 中
没有检测出该蛋白遥 结合本研究结果说明 增凿葬糟员葬 基
缘远员员
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
图 源摇 晕源愿 原圆 中 灾阅粤悦员葬推定蛋白质的二级结构保守位点和结构域
云蚤早援 源摇 杂藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻 糟燥灶泽藻则增藻凿 泽蚤贼藻泽 葬灶凿 凿燥皂葬蚤灶泽 燥枣 责则藻凿蚤糟贼藻凿 灾阅粤悦员葬 责则燥贼藻蚤灶泽 蚤灶 晕源愿 原圆
图 远摇 增凿葬糟员葬的基因表达模式
云蚤早援 远摇 郧藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶泽 燥枣 增凿葬糟员葬
因在 晕源愿 原 圆 中的表达量过低可能导致 灾阅粤悦员葬 蛋白
不表达袁或者表达水平过低没有检测到遥 增凿葬糟员葬 基因
的表达水平和 灾阅粤悦员葬 蛋白质的表达相吻合袁进一步
说明 增凿葬糟员葬基因以及蛋白质的差异表达可能与玉米
悦酝杂鄄悦的表型有关遥
猿摇 讨论
灾阅粤悦 位于线粒体外膜上袁是线粒体渗透孔
渊孕栽孕冤的重要组成蛋白袁主要负责大分子的运输遥 线
粒体的结构和功能对于植物雄配子的发育至关重要遥
本研究结果显示双核期 增凿葬糟员葬 基因的表达量不育系
悦源愿 原 圆 高于保持系 晕源愿 原 圆袁与 灾阅粤悦员葬 蛋白的表达
水平相吻合袁推测 增凿葬糟员葬基因在不育系的上调表达可
能促进了 灾阅粤悦员葬 蛋白的表达水平袁影响 悦 胞质花药
的发育遥 文李等咱员员暂的研究表明 灾阅粤悦 蛋白在红莲型
水稻细胞质雄性不育系渊再栽粤冤花药的上调表达可能
与花粉败育中 孕悦阅的发生有关遥 砸栽鄄孕悦砸结果显示单
核期 增凿葬糟员葬基因的 糟阅晕粤 序列在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆
之间存在单碱基差异袁生物信息学预测表明可能 悦源愿
原 圆 编码的 灾阅粤悦员葬蛋白的理化性质和结构发生了变
化袁从而导致线粒体电压依赖性阴离子通道关闭遥
灾阅粤悦是线粒体外膜上的膜蛋白袁通过在膜上形成的
亲水性通道袁调控阴阳离子尧粤栽孕以及其他代谢物进出
线粒体袁并与 悦葬圆 垣 尧晕粤阅匀 以及其他蛋白互作来调节
线粒体的通透性咱员圆暂 遥 灾阅粤悦 结构改变和功能缺陷会
远远员员
摇 苑 期 玉米 悦酝杂鄄悦不育系及保持系 增凿葬糟基因的克隆与表达分析
图 缘摇 晕源愿 原圆 中 灾阅粤悦员葬推定蛋白质的
三级结构建模
云蚤早援 缘摇 酝燥凿藻造蚤灶早 贼藻则贼蚤葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 责则藻凿蚤糟贼藻凿
灾阅粤悦员葬 责则燥贼藻蚤灶泽 蚤灶 晕源愿 原圆
引起线粒体膜生理代谢异常遥 结合本实验室对 悦 胞
质线粒体膜生理特性的分析 渊数据未发表冤袁推测
灾阅粤悦关闭袁导致线粒体渗透孔渊孕栽孕冤过度开放袁使线
粒体膜电位降低袁氧化磷酸化去偶联袁悦葬圆 垣外流袁悦赠贼糟
等凋亡诱导因子大量释放到线粒体膜外袁激活 糟葬泽责葬泽藻
渊半胱氨天冬酶冤袁从而诱导细胞程序性死亡咱员猿暂 遥 本实
验室黄玲等咱员源暂的研究表明玉米 悦 胞质单核期线粒体
阅晕粤存在明显降解袁而其保持系线粒体 阅晕粤 完整袁说
明细胞程序性死亡渊孕悦阅冤过程与玉米 悦 胞质花粉败
育有关遥 郧燥凿遭燥造藻援 粤 等咱员缘暂在水稻中也发现 灾阅粤悦 在
允怎则噪葬贼栽鄄糟藻造造株系中的过量表能引起细胞程序性死亡袁
而添加 灾阅粤悦 活性抑制剂却能有效减少细胞程序性
死亡遥 目前在水稻咱圆袁员远暂 尧玉米咱员源 原 员苑暂 尧向日葵咱员愿暂 尧拟南
芥咱员怨暂 尧小麦咱圆园暂 尧板栗咱圆员暂等多种植物的研究都发现细胞
程序性死亡与 悦酝杂的发生有密切的关系遥 因此袁本研
究结果表明 灾阅粤悦员葬结构和功能的改变可能与花药线
粒体 孕悦阅的发生有关袁而绒毡层细胞的适时凋亡对于
花粉发育至关重要咱圆暂 袁这一过程提前或者延迟都会导
致花粉败育遥 在动物中的研究发现 灾阅粤悦圆 和 灾阅粤悦猿
分别位于睾丸和精子细胞线粒体膜上袁敲除大鼠的
灾阅粤悦猿 后袁由于其线粒体结构发生改变而导致雄性不
育咱圆圆暂 遥 与动物中 灾阅粤悦类似袁植物中 灾阅粤悦也可能参
与生殖发育的调控遥
本研究结果显示 增凿葬糟员遭 编码序列在 悦源愿 原 圆 和
晕源愿 原 圆 中完全一致遥 而前人研究表明相对于 晕愿 原 圆袁
灾阅粤悦 员遭在 悦源愿 原 圆 单核期花药上调表达袁可能参与
花药发育的调控遥 灾阅粤悦 员遭 蛋白表达量的差异可能
与转录调控或者转录后水平的调控相关遥 罗凤燕等
人咱怨暂比较了 愿 个 增凿葬糟 基因在红莲型水稻不育系不同
组织器官发育过程的表达模式袁结果表明院燥泽增凿葬糟源 可
能在营养生长过程中发挥功能袁而 燥泽增凿葬糟员 是在根尧茎尧
叶和花药发育各个时期都发挥功能遥 同时在干旱胁
迫尧盐胁迫以及渗透胁迫下袁愿 个 增凿葬糟 基因在水平不同
组织和器官的表达也存在较大差异遥 说明不同的 增凿葬糟
基因在参与植物生长发育过程中的功能可能存在差
别袁同时 增凿葬糟 基因的表达可能受到不同非生物胁迫的
影响遥
源摇 结论
通过 砸栽鄄孕悦砸技术袁以玉米 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 小
孢子发育至单核期花药的 砸晕粤 为模板对 增凿葬糟员葬 和
增凿葬糟员遭进行克隆遥 结果显示 增凿葬糟员遭 基因的转录本大
小及序列在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 之间表现一致遥 而
增凿葬糟员葬基因的转录本大小在 悦源愿 原 圆 和 晕源愿 原 圆 之间
具有一致性袁但存在一定碱基序列差异袁生物信息学预
测发现这些碱基序列的差异可导致蛋白质理化性质的
不同及高级结构的差异遥 增凿葬糟员葬基因结构和功能的不
同是否与玉米 悦型不育系及保持系的育性表现有关袁
以及 灾阅粤悦员葬是如何调控育性表型的还有待进一步深
入研究遥
参考文献院
咱 员 暂摇 砸怎蚤扎 韵袁 阅葬灶蚤藻造造 匀援 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早 糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造蚤贼赠 增蚤扎援 袁
糟澡造燥则燥责造葬泽贼 早藻灶燥皂藻 遭赠 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 噪藻贼燥贼澡蚤燥造葬泽藻咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造袁
圆园园缘袁 员猿愿院 员圆猿圆 – 员圆源远
咱 圆 暂摇 蕴怎燥 阅 孕袁 载怎 匀袁 蕴蚤怎 在 蕴袁 郧怎燥 允 载袁 蕴蚤 匀 再袁 悦澡藻灶 蕴 栽袁 云葬灶早 悦袁
在澡葬灶早 匝 再袁 月葬蚤 酝袁 再葬燥 晕袁 宰怎 匀袁 宰怎 匀袁 允蚤 悦 匀袁 在澡藻灶早 匀 匝袁
悦澡藻灶 再 蕴袁 再藻 杂袁 蕴蚤 载 再袁 在澡葬燥 载 悦袁 蕴蚤 砸 匝袁 蕴蚤怎 再 郧援 粤
凿藻贼则蚤皂藻灶贼葬造 皂蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造鄄灶怎糟造藻葬则 蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶 糟葬怎泽藻泽 糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟
皂葬造藻 泽贼藻则蚤造蚤贼赠 蚤灶 则蚤糟藻咱允暂 援 晕葬贼怎则藻 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园员猿袁源缘渊愿冤院缘苑猿 原 缘苑苑
咱 猿 暂摇 杂贼藻 佴责澡葬灶藻 月袁 杂贼藻枣葬灶 杂援 粤 砸藻藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 砸蚤糟藻酝蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造
耘增燥造怎贼蚤燥灶 月葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 悦燥皂责造藻贼藻 杂藻择怎藻灶糟藻 燥枣 酝葬造藻鄄云藻则贼蚤造藻 葬灶凿 酝葬造藻鄄
杂贼藻则蚤造藻 酝蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造 郧藻灶燥皂藻泽咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁圆园员圆袁远园渊远冤院
怨怨远 原 员园员苑
咱 源 暂摇 运藻蚤泽怎噪藻 陨袁 栽燥皂燥澡蚤噪燥 运袁 运藻蚤躁蚤 酝援 宰澡燥造藻 郧藻灶燥皂蚤糟 杂藻择怎藻灶糟蚤灶早 燥枣
砸栽怨愿 酝蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬 阅藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 韵则赠扎葬 则怎覱责燥早燥灶 葬灶凿 晕燥则贼澡藻则灶 月造燥贼
粤灶葬造赠泽蚤泽 贼燥 哉灶糟燥增藻则 葬 悦赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 酝葬造藻 杂贼藻则蚤造蚤贼赠鄄粤泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 郧藻灶藻
咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 孕澡赠泽蚤燥造袁圆园员猿袁 缘源渊圆冤院 圆猿苑 原 圆源猿
咱 缘 暂摇 云葬遭则蚤糟藻 匀袁 耘增葬鄄酝葬则蚤葬 运援 酝葬则贼蚤灶藻 孕援 孕造葬灶贼 灾阅粤悦院 云葬糟贼泽 葬灶凿
泽责藻糟怎造葬贼蚤燥灶泽咱允暂 援 月蚤燥糟澡蚤皂蚤糟葬 藻贼 月蚤燥责澡赠泽蚤糟葬 粤糟贼葬 袁 圆园员圆袁员愿员愿渊远冤院
员源愿远 – 员缘园员
咱 远 暂摇 夏春皎袁刘学群袁王春台援 水稻线粒体渗透性转换孔相关基因家
族的系统发育研究咱阅月 辕 悦阅暂援 中国科技论文在线袁 圆园园苑袁 论文
编号 圆园园苑园猿 原 缘缘缘
苑远员员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员源袁圆愿渊苑冤院员员远圆 耀 员员远愿
咱 苑 暂 摇 灾葬则凿葬 杂 月袁 灾蚤贼燥 阅 孕袁 酝葬则噪怎泽 在援 灾阅粤悦袁 葬 皂怎造贼蚤 原 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造
皂蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造 责则燥贼藻蚤灶 则藻早怎造葬贼蚤灶早 糟藻造造 造蚤枣藻 葬灶凿 凿藻葬贼澡 咱 允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则
粤泽责藻糟贼泽 燥枣 酝藻凿蚤糟蚤灶藻 袁圆园员园袁猿员渊猿冤 院圆圆苑 原 圆愿缘
咱 愿 暂 摇 何菡袁严金平袁张建军袁刘震袁张皖蓉袁童仕波袁杨毅援 拟南芥
粤贼郧造怎砸杂相互作用蛋白质 灾阅粤悦及其转基因植物表型分析咱 允暂 援
四川大学学报渊自然科学版冤袁圆园员园袁源苑渊圆冤院猿怨愿 原 源园圆
咱 怨 暂 摇 罗凤燕援 水稻 增凿葬糟尧葬灶贼及 匀蕴鄄泽责员 基因的表达研究咱阅暂援武汉院中
南民族大学袁 圆园员园
咱员园暂摇 许珂袁曹墨菊袁朱英国袁潘光堂袁荣廷昭援 玉米 悦 型细胞质雄性不
育系 悦源愿 原 圆 及其保持系线粒体差异蛋白分析咱 允暂 援 作物学报袁
圆园园愿袁 猿源渊圆冤院 圆猿圆 原 圆猿苑
咱员员暂摇 文李袁刘盖袁王坤袁彭晓珏袁李国民袁陶钧袁朱英国援 红莲型水稻细
胞质雄性不育花粉总蛋白质初步比较分析咱允暂 援武汉植物学研究
圆园园苑袁 圆缘 渊圆冤 院 员员圆 原 员员苑
咱员圆暂摇 汤新慧袁高静袁徐强援 线粒体电压依赖性阴离子通道及其调控功
能咱允暂 援细胞生物学杂志袁 圆园园缘袁 圆苑 渊圆冤院 员员猿 原 员员远
咱员猿暂摇 在澡怎 再袁 载怎 再 蕴袁 匀怎葬灶早 运援 酝蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造 责藻则皂藻葬遭蚤造蚤贼赠 贼则葬灶泽蚤贼蚤燥灶
葬灶凿 糟赠贼燥糟澡则燥皂藻 悦 则藻造藻葬泽藻 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 泽藻造藻灶蚤贼藻咱允暂 援 允 陨灶燥则早 月蚤燥糟澡藻皂袁
圆园园圆袁 怨园院 源猿 原 缘园
咱员源暂摇 匀怎葬灶早 蕴袁载蚤葬灶早 允袁允蚤葬扎澡燥怎 蕴蚤怎袁栽蚤灶早扎澡葬燥 砸燥灶早袁允蚤灶早 宰葬灶早袁再葬灶造蚤 蕴怎袁
匝蚤造蚤灶 栽葬灶早袁 宰藻灶 宰藻灶袁 酝燥躁怎 悦葬燥援 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣
早藻灶藻泽 枣燥则 悦酝杂鄄悦 蚤灶 皂葬蚤扎藻咱 允暂 援 孕则燥贼燥责造葬泽皂葬 袁 圆园员员袁圆源怨院员员员怨 –
员员圆苑
咱员缘暂摇 郧燥凿遭燥造藻 粤袁灾葬则早澡藻泽藻 允袁杂葬则蚤灶 粤 酝援 运援 酝葬贼澡藻憎援 灾阅粤悦 蚤泽 葬糟燥灶泽藻则增藻凿
藻造藻皂藻灶贼 燥枣 凿藻葬贼澡 责葬贼澡憎葬赠泽 蚤灶 责造葬灶贼 葬灶凿葬灶蚤皂葬造 泽赠泽贼藻皂泽咱 允暂 援 月蚤燥糟澡蚤皂
月蚤燥责澡赠泽 粤糟贼葬袁圆园园猿袁员远源圆渊员 原 圆冤院愿苑
咱员远暂摇 杂燥贼葬 云袁 运蚤灶赠葬 栽援 杂怎责责则藻泽泽藻凿 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 砸藻贼则燥早则葬凿藻 砸藻早怎造葬贼凿藻
酝葬造藻 杂贼藻则蚤造蚤贼赠 则藻泽贼燥则藻泽 责燥造造藻灶 枣藻则贼蚤造蚤贼赠 蚤灶 糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造藻 则蚤糟藻
责造葬灶贼泽咱允暂 援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 晕葬贼蚤燥灶葬造 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽 燥枣 贼澡藻
哉灶蚤贼藻凿 杂贼葬贼藻泽 燥枣 粤皂藻则蚤糟葬袁圆园园怨袁圆猿渊员园远冤院 怨缘员猿 原 怨缘员愿
咱员苑暂摇 穆蕊袁张祖新袁张方东袁郑用琏援 玉米 悦酝杂鄄杂 小孢子败育过程中
的细胞程序性死亡咱允暂 援作物学报袁圆园园缘袁猿圆渊缘冤院远远园 原 远远苑
咱员愿暂摇 月葬造噪 允袁 蕴藻葬增藻则 悦援 栽澡藻 孕耘栽 原 员 悦酝杂 皂蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造 皂怎贼葬贼蚤燥灶 蚤灶
泽怎灶枣造燥憎藻则 蚤泽 葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 憎蚤贼澡 责则藻皂葬贼怎则藻 责则燥早则葬皂皂藻凿 糟藻造造 凿藻葬贼澡 葬灶凿
糟赠贼燥糟澡则燥皂藻 糟 则藻造藻葬泽藻咱 允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造援 圆园园员袁员猿 渊员 原 圆冤院 员愿园猿 原
员愿员愿
咱员怨暂摇 匀怎赠 粤援 孕澡葬灶 袁 杂燥灶早 云援 蕴蚤袁 砸燥早藻则 宰援 孕葬则蚤泽澡援 酝再月愿园袁 葬 则藻早怎造葬贼燥则
燥枣 贼葬责藻贼葬造 葬灶凿 责燥造造藻灶 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 蚤泽 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造造赠 糟燥灶泽藻则增藻凿 蚤灶 糟则燥责泽
咱允暂 援 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员圆袁苑愿院 员苑员 原 员愿猿
咱圆园暂摇 郭宝健袁李鹏袁牟秋焕袁刘保申援 小麦 灾鄄悦酝杂和杂种 云员 代线粒体
蛋白质组表达差异咱允暂 援分子植物育种袁圆园员员袁怨渊猿冤院猿园圆 原 猿园愿
咱圆员暂摇 张婧袁董清华袁杨凯袁 曹庆芹袁冯永庆袁秦岭援 板栗短雄花序异常
死亡的超微结构观察咱允暂 援园艺学报袁圆园园苑袁猿源渊猿冤院远园缘 原 远园愿
咱圆圆暂摇 酝藻灶扎藻造 灾 粤袁悦葬泽泽葬则觃 酝袁月藻灶扎 砸袁凿藻 孕蚤灶贼燥 灾袁酝藻泽泽蚤灶葬 粤袁悦怎灶泽燥造燥 灾袁
杂葬造藻贼贼蚤 运袁 匀蚤灶泽糟澡 运 阅袁 匀蚤灶泽糟澡 耘援 酝燥造藻糟怎造葬则 葬灶凿 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 灾阅粤悦圆 责怎则蚤覱藻凿 枣则燥皂 皂葬皂皂葬造 泽责藻则皂葬贼燥扎燥葬咱 允暂 援
月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻 砸藻责燥则贼泽袁圆园园怨袁圆怨 渊远冤袁 猿缘员 – 猿远圆援
悦造燥灶蚤灶早 葬灶凿 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 增凿葬糟 枣则燥皂 悦 栽赠责藻 悦赠贼燥责造葬泽皂蚤糟
酝葬造藻 杂贼藻则蚤造藻 蕴蚤灶藻 葬灶凿 造贼 酝葬蚤灶贼葬蚤灶藻则 蕴蚤灶藻 蚤灶 酝葬蚤扎藻
宰粤晕郧 允蚤鄄赠怎藻摇 宰粤晕郧 杂澡藻灶早鄄择蚤灶早摇 悦粤韵 酝燥鄄躁怎
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 悦则燥责 郧藻灶藻贼蚤糟 砸藻泽燥怎则糟藻 葬灶凿 陨皂责则燥增藻皂藻灶贼袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 耘凿怎糟葬贼蚤燥灶 辕 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿
郧藻灶藻贼蚤糟 陨皂责则燥增藻皂藻灶贼 燥枣 酝葬蚤扎藻 蚤灶 杂燥怎贼澡憎藻泽贼 砸藻早蚤燥灶袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 辕 酝葬蚤扎藻 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻袁
杂蚤糟澡怎葬灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁悦澡藻灶凿怎袁 杂蚤糟澡怎葬灶摇 远员员员猿园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽燥 则藻增藻葬造 贼澡藻 皂燥造藻糟怎造葬则 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 悦 贼赠责藻袁 糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造藻 蚤灶 皂葬蚤扎藻袁 增凿葬糟员葬 葬灶凿 增凿葬糟员遭 憎藻则藻
糟造燥灶藻凿 枣则燥皂 葬灶贼澡藻则 燥枣 悦酝杂鄄悦 泽贼藻则蚤造藻 造蚤灶藻渊悦源愿 原 圆冤 葬灶凿 蚤贼泽 皂葬蚤灶贼葬蚤灶藻则 造蚤灶藻 渊晕源愿 原 圆冤 蚤灶 皂葬蚤扎藻 遭赠 砸栽鄄孕悦砸援 杂藻择怎藻灶糟藻
葬灶葬造赠泽蚤泽 泽怎早早藻泽贼藻凿 贼澡藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 增凿葬糟员遭 蚤灶 悦源愿 原 圆 蚤泽 贼澡藻 泽葬皂藻 憎蚤贼澡 蚤灶 晕源愿 原 圆袁遭怎贼 增凿葬糟员葬 蚤灶 悦源愿 原 圆 怎灶凿藻则憎藻灶贼
泽燥皂藻 泽蚤灶早造藻鄄遭葬泽藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶援 月蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽 葬灶葬造赠泽蚤泽 责则藻凿蚤糟贼藻凿 贼澡葬贼 责澡赠泽蚤糟燥糟澡藻皂蚤糟葬造 责则燥责藻则贼蚤藻泽 葬灶凿 泽贼则怎糟贼怎则藻泽 燥枣 灾阅粤悦员葬
蚤灶 悦源愿 原 圆 皂蚤早澡贼 澡葬增藻 遭藻藻灶 葬造贼藻则藻凿援 宰澡蚤糟澡 憎燥怎造凿 皂葬噪藻 灾阅粤悦 糟造燥泽藻凿袁 则藻造藻葬泽藻 皂燥则藻 则藻葬糟贼蚤增藻 燥曾赠早藻灶 泽责藻糟蚤藻泽 渊砸韵杂冤 袁
葬灶凿 贼澡藻灶 皂蚤贼燥糟澡燥灶凿则蚤葬造 责藻则皂藻葬遭蚤造蚤贼赠 责燥则藻 渊 孕栽孕冤 则藻皂葬蚤灶 燥责藻灶蚤灶早袁 糟燥灶泽藻择怎藻灶贼造赠袁 蚤灶凿怎糟藻 糟藻造造 葬责燥责贼燥泽蚤泽援 粤灶凿 早藻灶藻
藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 造藻增藻造 燥枣 增凿葬糟员葬 葬贼 贼澡藻 责燥造造藻灶 皂燥贼澡藻则 糟藻造造泽 渊 孕酝悦泽冤 泽贼葬早藻袁 贼澡藻 贼藻贼则葬凿 泽贼葬早藻袁 贼澡藻 怎灶蚤灶怎糟造藻葬贼藻 泽贼葬早藻 葬灶凿 贼澡藻
遭蚤灶怎糟造藻葬则 泽贼葬早藻 憎藻则藻 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 遭赠 则藻葬造鄄贼蚤皂藻 择孕悦砸援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 增凿葬糟员葬 憎葬泽 怎责鄄则藻早怎造葬贼藻凿 蚤灶 悦酝杂鄄悦 泽贼藻则蚤造藻
造蚤灶藻 葬贼 贼澡藻 责燥造造藻灶 皂燥贼澡藻则 糟藻造造泽 渊孕酝悦泽冤 泽贼葬早藻 葬灶凿 贼澡藻 怎灶蚤灶怎糟造藻葬贼藻 泽贼葬早藻袁憎澡蚤糟澡 憎葬泽 糟燥灶泽蚤泽贼藻灶贼 憎蚤贼澡 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶泽 燥枣
灾阅粤悦员葬援 栽澡藻 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 增凿葬糟员葬 葬灶凿 责燥造造藻灶 葬遭燥则贼蚤燥灶 皂怎泽贼 遭藻 泽怎遭躁藻糟贼藻凿 贼燥 枣怎则贼澡藻则 泽贼怎凿赠援
运藻赠 憎燥则凿泽院酝葬蚤扎藻曰悦酝杂鄄悦曰灾阅粤悦曰阅蚤枣枣藻则藻灶贼 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶
愿远员员