全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊愿冤院员员远圆 耀 员员远苑袁员员苑圆
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园愿鄄圆圆摇 摇 接受日期院圆园员猿鄄园缘鄄猿园
基金项目院国家自然科学基金渊猿员员园园圆园缘冤袁国家科技支撑计划渊圆园员圆月粤运员苑月员猿冤袁青岛市公共领域科技支撑计划渊员员鄄圆鄄猿鄄圆缘鄄灶泽澡冤
作者简介院刘洪对袁男袁助理研究员袁从事植物蛋白肽的开发和应用研究遥 耘鄄皂葬蚤造院造蚤怎澡凿苑愿岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院于丽娜袁女袁助理研究员袁从事植物蛋白和活性肽开发研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 造澡贼赠造灶园远圆远岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园愿鄄员员远圆鄄园苑
五种花生抗氧化肽体外抗氧化活性比较
刘洪对员 摇 于丽娜圆 摇 高俊安猿 摇 孙摇 杰圆 摇 朱摇 凤圆 摇 毕摇 洁圆 摇 张初署圆 摇 刘少芳圆
渊员山东省农业科学院袁山东 济南摇 圆缘园员园园曰 圆 山东省花生研究所袁山东 青岛摇 圆远远员园园曰
猿山东世纪春食品有限公司袁山东 临沂摇 圆苑远源园园冤
摘摇 要院以花生蛋白粉为原料袁采用 灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴预水解袁再分别用 粤造糟葬造葬泽藻尧云造葬增燥怎则扎赠皂藻尧孕则燥贼葬皂藻曾尧中性蛋
白酶和木瓜蛋白酶水解法制备 缘 种花生抗氧化肽袁依次简写为 粤孕尧云孕尧孕孕员尧晕孕 和 孕孕圆遥 应用 源 类体外
抗氧化试验院清除 阅孕孕匀自由基尧还原力尧铁离子螯合力和抗脂质体过氧化能力袁研究了 缘 种抗氧化肽的
抗氧化活性遥 通过综合分析抗氧化活性试验结果袁缘 种抗氧化肽的抗氧化活性大小为 孕孕圆 跃 粤孕 跃 云孕 跃
孕孕员 跃 晕孕遥 孕孕圆 有最大的清除 阅孕孕匀自由基活性尧还原力和抗脂质体过氧化能力袁表明制备抗氧化肽的
最佳蛋白分解酶是木瓜蛋白酶遥 因此袁使用木瓜蛋白酶研究和开发抗氧化肽是一种有效地进一步利用
花生蛋白的方法遥
关键词院灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴曰蛋白酶曰花生抗氧化肽曰抗氧化活性
摇 摇 员怨缘远 年 匀葬则皂葬灶 提出自由基理论袁认为自由基攻
击生命大分子造成组织细胞损伤袁是引起机体衰老尧肿
瘤和一些其它疾病的根本原因咱员暂 遥 圆园 世纪 远园 年代以
来袁人类就在不断寻找抗自由基尧抗衰老尧抗癌药物或
活性物质遥 由于化学合成抗氧化剂和抗癌药物对人体
有毒害作用袁于是从天然动植物中寻找低毒尧高效的天
然抗氧化剂和抗癌活性物质成为近年来研究的热
点咱圆暂 遥 研究发现袁蕴藏于蛋白质长链中的肽类物质具
有抑制生物大分子过氧化或清除体内自由基功效袁其
抗氧化活性强于蛋白质和氨基酸袁这类活性肽被称为
抗氧化肽咱猿暂 遥
一般地袁获得抗氧化肽途径有 猿 种院渊员冤从天然生
物体提取遥 但存在提取成本高袁不能大规模生产的缺
陷遥 渊圆冤水解蛋白产生遥 酸法水解蛋白袁氨基酸受损
严重袁水解难控制而较少应用曰酶解法反应条件温和袁
由于蛋白酶的高特异性酶切位点袁可大量生产高特异
性的抗氧化肽袁重复性好袁具有较高应用价值咱源暂 遥 渊猿冤
化学合成尧酶法合成或重组 阅晕粤 技术合成袁化学合成
法成本高尧副反应物及残留化合物对人体有害袁其发展
受到制约曰酶法合成反应周期长袁产率低不能满足工业
生产的需求曰重组 阅晕粤 技术合成法刚刚起步袁技术还
不成熟遥 因此袁运用蛋白酶水解蛋白制备抗氧化肽成
为目前获得抗氧化肽的主要途径遥
通常情况下袁评价抗氧化肽体外抗氧化活性的方
法有 源 类咱缘暂 院渊员冤清除自由基法渊清除 阅孕孕匀 自由基尧
羟自由基尧超氧阴离子自由基等冤曰渊圆冤还原力法渊铁还
原力尧钼还原力等冤曰渊猿冤金属离子螯合力法渊铁离子螯
合力尧铜离子螯合力等冤曰渊源冤脂质过氧化抑制能力法
渊抑制亚油酸过氧化尧抗脂质体过氧化等冤遥 在目前状
况下没有一种方法可以代替其他方法而作为标准方
法袁因此袁本研究选取 源 种体外抗氧化活性试验渊清除
阅孕孕匀自由基尧还原力尧铁离子螯合力尧抗脂质体过氧
化冤来综合评价抗氧化肽的抗氧化活性遥 本文运用
灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴预水解花生蛋白粉袁再分别用 粤造糟葬造葬泽藻尧
云造葬增燥怎则扎赠皂藻尧孕则燥贼葬皂藻曾尧中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解
制备 缘 种花生抗氧化肽袁比较了它们的抗氧化活性袁旨
在为酶解法制备花生抗氧化肽筛选最佳用酶提供理论
依据遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料与试剂
圆远员员
摇 愿 期 五种花生抗氧化肽体外抗氧化活性比较
低变性脱脂花生蛋白粉由山东天申生物蛋白有限
公司提供遥 灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴渊员园园云月郧窑早 原员 冤尧粤造糟葬造葬泽藻 圆郾 源蕴
云郧 渊 圆郾 源粤哉窑早 原员 冤尧 云造葬增燥怎则扎赠皂藻 渊 缘园园蕴粤孕哉窑早 原员 冤尧
孕则燥贼葬皂藻曾渊员缘粤哉窑早 原员 冤院丹麦哥本哈根 晕燥增燥扎赠皂藻 公司曰
中性蛋白酶渊员园 万 哉窑早 原员 冤和木瓜蛋白酶渊员园 万 哉窑
早 原员冤院南宁庞博生物工程公司曰员袁员鄄二苯基苦基苯肼
渊 阅孕孕匀 冤尧 云藻则则燥扎蚤灶藻尧 蕴鄄琢鄄孕澡燥泽责澡葬贼蚤凿赠造糟澡燥造蚤灶藻 渊 枣则燥皂
泽燥赠遭藻葬灶冤尧 蕴鄄粤泽糟燥则遭蚤糟 葬糟蚤凿院 杂蚤早皂葬 公司曰 云藻悦造猿尧 运猿云藻
渊 悦晕冤远尧 三氯乙酸 渊 栽悦粤冤尧 云藻悦造圆尧硫代巴比妥酸渊栽月粤冤尧匀悦造均为分析纯试剂袁国药集团化学试剂有限
公司遥
员郾 圆摇 仪器与设备
表 员摇 蛋白酶酶解反应条件
栽葬遭造藻 员摇 耘灶扎赠皂葬贼蚤糟 则藻葬糟贼蚤燥灶 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 燥枣 责则燥贼藻葬泽藻
蛋白酶
孕则燥贼藻葬泽藻
加酶量
耘灶扎赠皂藻 凿燥泽葬早藻
责匀值
责匀 增葬造怎藻
温度
栽藻皂责藻则葬贼怎则藻 辕 益
时间
栽蚤皂藻 辕 皂蚤灶
粤造糟葬造葬泽藻 猿圆园园哉窑早 原员底物 杂怎遭泽贼则葬贼藻 愿郾 园 缘园 怨园
云造葬增燥怎则扎赠皂藻 圆缘粤哉窑早 原员蛋白粉 孕则燥贼藻蚤灶 责燥憎凿藻则 苑郾 园 缘园 怨园
孕则燥贼葬皂藻曾 猿圆园园哉窑早 原员底物 杂怎遭泽贼则葬贼藻 苑郾 园 缘园 怨园
中性蛋白酶 晕藻怎贼则葬造 责则燥贼藻葬泽藻 猿圆园园哉窑早 原员底物 杂怎遭泽贼则葬贼藻 苑郾 园 缘园 怨园
木瓜蛋白酶 孕葬责葬蚤灶 猿圆园园哉窑早 原员底物 杂怎遭泽贼则葬贼藻 远郾 缘 缘园 怨园
云阅鄄员悦鄄缘园 冷冻干燥机渊北京博医康实验仪器有限
公司冤曰杂匀粤鄄月双功能水浴恒温振荡器渊金坛市杰瑞尔
电器有限公司冤曰云耘圆园 实验室 责匀 计渊梅特勒鄄托利多
仪器有限公司冤曰 悦砸圆圆郧域高速冷冻离心机 渊日本
匀陨栽粤悦匀陨公司冤遥
员郾 猿摇 花生抗氧化肽制备工艺
低变性脱脂花生蛋白粉加入蒸馏水袁超声溶解
猿园皂蚤灶得到花生蛋白粉悬浮液遥 调节 责匀 值到 缘郾 园袁加
入 灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴袁在 源缘益 恒温水浴振荡器中酶解
员圆园皂蚤灶遥 反应结束后袁在 怨园益水浴中灭酶 圆园皂蚤灶袁快速
冷却到室温遥 按照表 员 调节 责匀 值袁加入蛋白酶袁在
缘园益的恒温水浴振荡器中酶解 怨园皂蚤灶遥 反应结束后袁
在 员园园益水浴中灭酶 员园皂蚤灶袁快速冷却到室温遥 在
圆园益条件下袁以 源缘园园则窑皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶袁取上清液袁在
冷冻干燥机中冻干袁得到 缘 种抗氧化肽袁 原 圆园益保存袁
备用遥 粤造糟葬造葬泽藻尧云造葬增燥怎则扎赠皂藻尧孕则燥贼葬皂藻曾尧中性蛋白酶尧木
瓜蛋白酶水解制备的抗氧化肽分别命名为院粤孕尧云孕尧
孕孕员尧晕孕尧孕孕圆遥
员郾 源摇 抗氧化活性试验方法
员郾 源郾 员摇 清除 阅孕孕匀自由基试验方法咱远暂 摇 圆皂蕴 样品加
入 圆皂蕴 阅孕孕匀 无水乙醇溶液渊圆郾 缘皂皂燥造窑蕴 原员 冤袁混合均
匀袁反应 圆园皂蚤灶袁猿园园园则窑皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶袁上清液在
缘员苑灶皂处测其吸光值为 粤蚤曰圆皂蕴 样品加入无水乙醇
圆皂蕴袁混合均匀袁反应 圆园皂蚤灶袁猿园园园则窑皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶袁
上清液在 缘员苑灶皂 处测其吸光值为 粤躁曰圆皂蕴 阅孕孕匀 无水
乙醇溶液渊圆郾 缘皂皂燥造窑蕴 原员 冤加入 圆皂蕴 蒸馏水袁混合均
匀袁反应 圆园皂蚤灶袁缘员苑灶皂处测其吸光值为 粤园遥 按照下式
计算样品对 阅孕孕匀自由基的清除率 运院
运渊豫 冤 越 咱员 原 渊粤蚤鄄粤躁冤 辕 粤园暂 伊 员园园豫
员郾 源郾 圆摇 还原力试验方法咱苑暂 摇 员皂蕴 样品液加入 园郾 员皂燥造
窑蕴 原员磷酸盐缓冲液渊责匀 值 远郾 远冤和 员豫的 运猿云藻渊悦晕冤远
溶液各 圆郾 缘皂造袁缘园益水浴 圆园皂蚤灶袁加入 圆郾 缘皂蕴 的 员园豫
栽悦粤 溶液袁猿园园园则窑皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶袁取上清液 圆郾 缘皂蕴
加入 圆郾 缘皂蕴 蒸馏水和 园郾 缘皂蕴 的 园郾 员豫的 云藻悦造猿 溶液袁
静置 员园皂蚤灶遥 在 苑园园灶皂处袁以参比液调节野园冶点袁测定
样品液的吸光值遥
员郾 源郾 猿摇 铁离子螯合力试验方法咱愿暂 摇 样品组院员皂蕴 样
品加入 圆郾 苑皂蕴 去离子水和 园郾 员皂蕴 的 云藻悦造圆 溶液
渊圆皂皂燥造窑蕴 原员冤袁混匀后加入 园郾 圆皂蕴 的 云藻则则燥扎蚤灶藻渊缘皂皂燥造
窑蕴 原员冤袁静置 员园皂蚤灶遥 在 缘远圆灶皂 下袁测定吸光值 粤遥 空
白组院以 员皂蕴双蒸水代替样品袁其他操作同样品组袁测
定吸光值 粤园遥
螯合率渊豫 冤 越 渊员 原 粤 辕 粤园冤 伊 员园园豫
员郾 源郾 源摇 抗脂质体过氧化活性的测定咱怨暂 摇 样品组院
员郾 园皂蕴 的 蕴鄄琢鄄孕澡燥泽责澡葬贼蚤凿赠造糟澡燥造蚤灶藻 溶 液尧 员郾 园皂蕴 的
云藻悦造猿 溶液渊园郾 源皂皂燥造窑蕴 原员 冤尧员郾 园皂蕴 的 蕴鄄粤泽糟燥则遭蚤糟 葬糟蚤凿
溶液渊园郾 源皂皂燥造窑蕴 原员 冤和 员郾 园皂蕴 样品袁混匀袁猿苑益水浴
远园皂蚤灶渊避光冤袁加入 圆郾 园皂蕴 栽悦粤鄄栽月粤鄄匀悦员 混合液袁
怨缘益水浴 员缘皂蚤灶袁猿园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶袁上清液在
缘猿缘 灶皂测吸光值 粤遥 空白组院以 员皂蕴 蒸馏水代替样
品袁其他操作同样品组袁测吸光值 粤园遥
抑制率渊豫 冤 越 渊员 原 粤 辕 粤园冤 伊 员园园豫
猿远员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
员郾 缘摇 陨悦缘园的计算及统计分析
陨悦缘园指 阅孕孕匀 自由基清除率尧铁离子螯合率和脂
质过氧化抑制率为 缘园豫或还原力的吸光值为 园郾 缘 时
所需抗氧化肽溶液的浓度遥 以抗氧化肽溶液浓度渊设
远 个梯度冤为自变量袁抗氧化活性为因变量进行一次或
二次曲线拟合袁根据拟合方程计算 陨悦缘园 咱员园暂 遥 用 杂孕杂杂
杂贼葬贼蚤泽贼蚤糟泽 员苑郾 园 以最小显著性差异法渊 造藻葬泽贼 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼
凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻袁 蕴杂阅冤袁对 缘 种蛋白酶水解得到的抗氧化肽
的抗氧化活性的 陨悦缘园值进行方差分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 清除 阅孕孕匀自由基活性
图 员摇 清除 阅孕孕匀自由基活性渊葬冤和还原力活性渊遭冤
云蚤早援 员摇 粤糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 渊葬冤 葬灶凿 则藻凿怎糟蚤灶早 责燥憎藻则 渊遭冤
表 圆摇 抗氧化肽尧灾蚤贼悦尧郧杂匀尧月匀栽对 阅孕孕匀自由基清除的 陨悦缘园值
栽葬遭造藻 圆摇 杂糟葬增藻灶早蚤灶早 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 陨悦缘园 增葬造怎藻泽 燥枣 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻泽袁 灾蚤贼悦袁 郧杂匀 葬灶凿 月匀栽
回归方程 砸藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶 砸圆 陨悦缘园
粤孕 赠 越 原 园郾 员员愿圆曾圆 垣 远郾 远猿怨曾 垣 源郾 源缘缘猿 园郾 怨怨怨怨 愿郾 园园 依 园郾 圆圆凿 皂早窑皂蕴 原员
云孕 赠 越 原 园郾 园愿源员曾圆 垣 缘郾 源猿圆苑曾 垣 源郾 员源怨缘 园郾 怨怨怨圆 怨郾 怨愿 依 园郾 圆猿糟 皂早窑皂蕴 原员
孕孕员 赠 越 原 园郾 园愿怨圆曾圆 垣 远郾 员猿怨愿曾 原 源郾 远远远缘 园郾 怨怨怨猿 员园郾 缘员 依 园郾 猿远遭 皂早窑皂蕴 原员
晕孕 赠 越 原 园郾 园缘苑员曾圆 垣 缘郾 园圆怨愿曾 垣 员郾 远缘园圆 园郾 怨怨怨源 员园郾 怨愿 依 园郾 猿猿葬 皂早窑皂蕴 原员
孕孕圆 赠 越 原 园郾 员缘缘猿曾圆 垣 苑郾 苑圆圆源曾 垣 员郾 圆缘园员 园郾 怨怨怨苑 苑郾 源圆 依 园郾 圆缘藻 皂早窑皂蕴 原员
灾蚤贼悦 赠 越 原 园郾 员圆猿怨曾圆 垣 缘郾 愿远缘猿曾 原 园郾 员猿源员 园郾 怨怨远圆 员员郾 圆园 依 园郾 员圆枣滋早窑皂蕴 原员
郧杂匀 赠 越 原 园郾 园园猿猿曾圆 垣 园郾 愿圆园猿曾 垣 猿郾 远愿远猿 园郾 怨怨愿源 愿远郾 苑园 依 园郾 圆园枣 滋早窑皂蕴 原员
月匀栽 赠 越 原 园郾 园园猿源曾圆 垣 园郾 愿猿远远曾 垣 猿郾 猿缘愿员 园郾 怨怨怨园 愿缘郾 猿苑 依 园郾 员愿枣 滋早窑皂蕴 原员
摇 摇 注院同一列不同字母表示显著性差异渊责 约 园郾 园员袁灶 越 猿冤遥 下同遥
晕燥贼藻院 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园员 造藻增藻造 渊灶 越 猿冤援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 遭藻造燥憎援
花生抗氧化肽清除 阅孕孕匀 自由基活性如图 员 原 葬
所示袁缘 种蛋白酶水解制备的抗氧化肽均具有清除
阅孕孕匀自由基活性袁且呈明显的剂量效应关系遥 随着
花生抗氧化肽浓度的增大袁它们对 阅孕孕匀 自由基清除
率在增加袁但是增加的速率不同遥 各个浓度下袁粤孕 和
孕孕圆 的清除率要大于其它 猿 种抗氧化肽遥 圆 耀 源皂早窑
皂蕴 原员浓度范围内袁粤孕和 孕孕圆 的清除率差别不大曰而在
源 耀 圆园皂早窑皂蕴 原员范围内袁孕孕圆 的清除率的增加速率大于
粤孕遥 圆 耀 员圆皂早窑皂蕴 原员范围袁云孕 的清除率大于 晕孕袁并且
云孕和 晕孕的清除率的增加速率差别不大曰当浓度大于
员圆皂早窑皂蕴 原员时袁云孕 的清除率的增加速率逐渐减小袁导
致浓度大于 员远皂早窑皂蕴 原员时袁云孕 和 晕孕 几乎有相同的清
除率遥 当浓度小于 远皂早窑皂蕴 原员时袁孕孕员 的清除率小于
云孕和 晕孕曰由于 孕孕员 的清除率的增加速率较大袁远 耀
员源皂早窑皂蕴 原员浓度范围袁孕孕员 的清除率大于 晕孕 但小于
云孕曰随着 孕孕员 清除率的增加速率继续增大袁浓度大于
员源皂早窑皂蕴 原员时袁孕孕员 的清除率已经大于 云孕和 晕孕遥 表 圆
为 缘 种抗氧化肽和 灾蚤贼悦尧郧杂匀尧月匀栽对 阅孕孕匀自由基清
除率的 陨悦缘园值袁差异极显著渊责 约园郾 园员冤遥 通过比较 缘 种
抗氧化肽对 阅孕孕匀自由基清除率的 陨悦缘园值可得到它们
对 阅孕孕匀自由基清除活性的大小顺序为院孕孕圆 跃 粤孕 跃
云孕 跃 孕孕员 跃 晕孕遥
圆郾 圆摇 还原力
缘 种抗氧化肽的还原力结果见图 员 原 遭袁它们均具
有还原能力袁 且吸光值与抗氧化肽浓度呈明显的相关
源远员员
摇 愿 期 五种花生抗氧化肽体外抗氧化活性比较
性遥 随着抗氧化肽浓度的增加袁吸光值增大遥 粤孕 和
孕孕圆 的还原力要大于其它 猿 种抗氧化肽遥 圆 耀 员源皂早窑
皂蕴 原员范围袁粤孕的吸光值要大于 孕孕圆曰当浓度大于 员源皂早
窑皂蕴 原员时袁孕孕圆 的吸光值超过 粤孕遥 圆 耀 员圆皂早窑皂蕴 原员范
围袁云孕尧孕孕员 和 晕孕的吸光值增加速率几乎相同袁晕孕 的
吸光值大于 云孕和 孕孕员渊云孕 和 孕孕员 吸光值相同冤曰当浓
度大于 员圆皂早窑皂蕴 原员时袁云孕 吸光值的增加速率加大袁使
得 云孕的吸光值大于 孕孕员袁且在浓度为 员远皂早窑皂蕴 原员以
后袁其值大于 晕孕遥 表 猿 为 缘 种抗氧化肽和 灾蚤贼悦尧郧杂匀尧
月匀栽还原能力的吸光值线性回归结果遥 当 粤 越 园郾 缘
时袁所需 缘 种抗氧化肽浓度差异极显著渊 责 约 园郾 园员冤遥
以上结果提示 缘 种抗氧化肽的还原力大小为院孕孕圆 跃
粤孕 跃 云孕 跃 孕孕员 跃 晕孕遥
表 猿摇 抗氧化肽尧灾蚤贼悦尧郧杂匀尧月匀栽还原力
栽葬遭造藻 猿摇 砸藻凿怎蚤灶早 责燥憎藻则 燥枣 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻泽袁 灾蚤贼悦袁 郧杂匀 葬灶凿 月匀栽
回归方程 砸藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶 砸圆 粤 越 园郾 缘 所需浓度 砸藻择怎蚤则藻凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
粤孕 赠 越 园郾 园员圆苑曾 垣 园郾 园猿园远 园郾 怨怨苑怨 猿远郾 怨远 依 园郾 猿猿凿 皂早窑皂蕴 原员
云孕 赠 越 园郾 园员员圆曾 垣 园郾 园圆员员 园郾 怨愿怨圆 源圆郾 苑远 依 园郾 源猿糟 皂早窑皂蕴 原员
孕孕员 赠 越 园郾 园员园愿曾 垣 园郾 园圆圆怨 园郾 怨怨远怨 源源郾 员愿 依 园郾 猿圆遭 皂早窑皂蕴 原员
晕孕 赠 越 园郾 园员园员曾 垣 园郾 园源园员 园郾 怨愿远员 源缘郾 缘猿 依 园郾 缘源葬 皂早窑皂蕴 原员
孕孕圆 赠 越 园郾 园员猿苑曾 垣 园郾 园圆园苑 园郾 怨怨怨苑 猿源郾 怨怨 依 园郾 猿源藻 皂早窑皂蕴 原员
灾蚤贼悦 赠 越 园郾 园源缘缘曾 原 园郾 园员猿缘 园郾 怨怨怨猿 员员郾 圆怨 依 园郾 园怨枣 滋早窑皂蕴 原员
郧杂匀 赠 越 园郾 园员远远曾 垣 园郾 园愿圆缘 园郾 怨怨怨园 圆缘郾 员缘 依 园郾 员圆枣 滋早窑皂蕴 原员
月匀栽 赠 越 园郾 园猿远猿曾 垣 园郾 园怨愿缘 园郾 怨怨愿远 员员郾 园远 依 园郾 园愿枣 滋早窑皂蕴 原员
表 源摇 抗氧化肽尧灾蚤贼悦尧郧杂匀尧月匀栽对铁离子螯合率的 陨悦缘园值
栽葬遭造藻 源摇 陨则燥灶 蚤燥灶 糟澡藻造葬贼蚤燥灶 陨悦缘园 增葬造怎藻泽 燥枣 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻泽 葬灶凿 耘阅栽粤
回归方程 砸藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶 砸圆 陨悦缘园
粤孕 赠 越 原 园郾 园圆猿员曾圆 垣 圆郾 园远缘源曾 垣 猿员郾 怨怨缘 园郾 怨愿怨苑 怨郾 苑怨 依 园郾 圆缘藻 皂早窑皂蕴 原员
云孕 赠 越 原 园郾 园园猿曾圆 垣 员郾 圆怨苑远曾 垣 猿园郾 愿源缘 园郾 怨怨苑愿 员缘郾 猿园 依 园郾 圆猿凿 皂早窑皂蕴 原员
孕孕员 赠 越 原 园郾 园员园圆曾圆 垣 员郾 猿源猿员曾 垣 圆缘郾 远源猿 园郾 怨怨园愿 圆员郾 苑圆 依 园郾 猿远糟 皂早窑皂蕴 原员
晕孕 赠 越 原 园郾 园园员怨曾圆 垣 园郾 怨猿愿远曾 垣 员苑郾 圆怨圆 园郾 怨怨愿源 猿苑郾 苑猿 依 园郾 猿猿葬 皂早窑皂蕴 原员
孕孕圆 赠 越 原 园郾 园园猿曾圆 垣 员郾 猿圆猿远曾 垣 圆园郾 园员愿 园郾 怨怨苑园 圆猿郾 怨缘 依 园郾 圆源遭 皂早窑皂蕴 原员
耘阅栽粤 赠 越 原 园郾 园园远圆曾圆 垣 员郾 远员源曾 垣 园郾 猿猿源员 园郾 怨怨苑源 猿缘郾 远远 依 园郾 员园枣 滋早窑皂蕴 原员
圆郾 猿摇 铁离子螯合能力活性
图 圆渊左冤为五种抗氧化肽铁离子螯合能力活性结
果袁螯合率与抗氧化肽浓度呈明显的正相关性遥 随着
浓度增加袁抗氧化肽对铁离子螯合能力也增大遥 粤孕和
孕孕员 的铁离子螯合率的增加趋势几乎一样袁缘 耀 圆园皂早窑
皂蕴 原员浓度范围内袁增加速率较大袁之后增加速率减小袁
整体呈现平滑曲线形遥 云孕尧孕孕圆 和 晕孕 的螯合率增加
趋势一样袁呈直线上升遥 表 源 为 缘 种抗氧化肽和
耘阅栽粤对铁离子螯合能力的线性回归计算结果遥 缘 种
抗氧化肽和 耘阅栽粤对铁离子螯合率的 陨悦缘园值差异极显
著渊责 约 园郾 园员冤袁由此可知它们的对铁离子螯合能力大
小为院粤孕 跃 云孕 跃 孕孕员 跃 孕孕圆 跃 晕孕遥
圆郾 源摇 抑制脂质过氧化能力活性
缘 种花生抗氧化肽抑制脂质过氧化能力活性结果
见图 圆 原 遭所示袁它们对脂质过氧化抑制率与浓度呈现
明显的正相关性遥 随着抗氧化肽浓度的增加袁五种抗
氧化肽抑制脂质过氧化能力都增加袁其中袁粤孕尧云孕尧
孕孕员尧晕孕增加速率差别不大袁它们抑制活性大小为院
孕孕员 跃 粤孕 跃 云孕 跃 晕孕遥 而 孕孕圆 的抑制率增加速率较
大袁由较低浓度时抑制率位于第 源 位跃迁到较高浓度
时第 圆 位遥 表 缘 为五种抗氧化肽尧郧杂匀 和 栽月匀匝 抑制
脂质过氧化能力的线性回归计算结果遥 缘 种抗氧化
肽尧郧杂匀 和 栽月匀匝 对脂质过氧化抑制率的 陨悦缘园值差异
极显著渊责 约园郾 园员冤袁通过比较它们抑制率的 陨悦缘园值可知
它们的螯合能力大小为院孕孕圆 跃 孕孕员 跃 粤孕 跃 云孕 跃 晕孕遥
缘远员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
表 缘摇 抗氧化肽尧灾蚤贼悦尧郧杂匀尧月匀栽对铁离子螯合率的 陨悦缘园值
栽葬遭造藻 缘摇 粤灶贼蚤鄄造蚤责蚤凿 责藻则燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶 陨悦缘园 增葬造怎藻泽 燥枣 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻泽 葬灶凿 耘阅栽粤
回归方程 砸藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶 砸圆 陨悦缘园
粤孕 赠 越 园郾 远苑员怨曾 垣 苑郾 缘怨猿缘 园郾 怨怨怨远 远猿郾 员员 依 园郾 缘远糟 皂早窑皂蕴 原员
云孕 赠 越 园郾 缘愿员远曾 垣 怨郾 园苑远远 园郾 怨怨苑 苑园郾 猿远 依 园郾 源猿遭皂早窑皂蕴 原员
孕孕员 赠 越 园郾 远猿苑愿曾 垣 员园郾 愿员员 园郾 怨怨远愿 远员郾 源源 依 园郾 源远凿 皂早窑皂蕴 原员
晕孕 赠 越 园郾 远圆缘圆曾 垣 猿郾 源猿缘园 园郾 怨怨猿远 苑源郾 源愿 依 园郾 缘愿葬 皂早窑皂蕴 原员
孕孕圆 赠 越 园郾 苑愿苑怨曾 垣 猿郾 缘怨猿源 园郾 怨怨猿源 缘愿郾 怨园 依 园郾 源缘藻 皂早窑皂蕴 原员
郧杂匀 赠 越 员郾 远愿远园曾 原 园郾 苑苑圆园 园郾 怨怨远猿 猿园郾 员员 依 园郾 园缘枣 皂早窑皂蕴 原员
栽月匀匝 赠 越 员郾 远园园猿曾 垣 猿圆郾 远愿圆 园郾 怨怨源猿 员园郾 愿圆 依 园郾 园源早 滋早窑皂蕴 原员
图 圆摇 铁离子螯合力活性渊葬冤和抑制脂质过氧化活性渊遭冤
云蚤早援 圆摇 粤糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 蚤则燥灶 蚤燥灶 糟澡藻造葬贼蚤燥灶 渊葬冤 葬灶凿 葬灶贼蚤鄄造蚤责蚤凿 责藻则燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶 渊遭冤
猿摇 讨论
一般来讲袁抗氧化肽的抗氧化活性与肽段的氨基
酸序列尧氨基酸侧链基团渊疏水性氨基酸尧抗氧化性氨
基酸和酸性氨基酸冤尧相对分子质量大小和空间构象
有关袁而这些影响因素又取决于所用原料蛋白和蛋白
酶种类咱员员暂 遥 杂葬凿葬贼 等咱员圆暂用嗜热菌蛋白酶水解乳白蛋
白袁发现其粗水解物和纯化的 缘 种肽都表现出抗氧化
活性遥 其中袁纯化的 缘 种肽序列一端至少含有一个 栽赠则
或 栽则责 残基遥 尤其 陨造藻鄄粤泽灶鄄栽赠则鄄栽则责 和 蕴藻怎鄄粤泽责鄄郧造灶鄄栽则责
这两种肽有更显著的自由基清除活性遥 花生蛋白中含
员愿 种氨基酸袁包括人体不能自身合成的 愿 种必需氨基
酸遥 花生蛋白中蕴涵着许多具有生物活性的氨基酸序
列袁用特异的蛋白酶水解就有可能释放出有活性的肽
段遥 匀憎葬灶早等咱员猿暂研究发现袁用益瑞蛋白酶渊耘泽责藻则葬泽藻冤
水解脱脂花生饼得到的水解产物的抗亚油酸过氧化活
性要高于中性蛋白酶尧胃蛋白酶尧蛋白酶 粤和蛋白酶 晕
的水解产物遥 其水解产物通过超滤膜分离后得到的分
子量段在 猿鄄缘噪阅葬 的抗氧化肽具有较高的 阅孕孕匀 自由
基清除活性和金属离子螯合活性遥 酶与底物的反应表
现出一定的特异性袁某种蛋白酶可能只对某些肽键或
带有某种基团的氨基酸所形成的肽键作用袁导致不同
蛋白酶对同一种蛋白质底物的作用结果并不相同袁蛋
白质水解物中多肽的长度及结构也不同袁因此袁酶的种
类及酶对蛋白的水解能力对酶解产物的抗氧化能力具
有很大的影响遥 在澡葬灶早 等咱员源暂用 缘 种蛋白酶渊粤造糟葬造葬泽藻尧
孕葬责葬蚤灶尧云造葬增燥怎则扎赠皂藻尧晕藻怎贼则葬造 责则燥贼藻葬泽藻尧孕则燥贼葬皂藻曾冤水解花
生分离蛋白制备抗氧化水解产物袁发现木瓜蛋白酶水
解效果最好遥
文中选用 缘 种蛋白酶水解花生蛋白制备花生抗氧
化肽袁通过 源 类体外抗氧化活性总体分析得到抗氧化
活性大小顺序为院孕孕圆 跃 粤孕 跃 云孕 跃 孕孕员 跃 晕孕遥 木瓜蛋
白酶是一种混和蛋白酶袁它既可以酶解羧端或氮端疏
水性氨基酸渊郧造赠尧郧造葬尧灾葬造尧蕴藻怎尧陨造藻尧孕澡藻尧孕则燥冤袁也可以
酶解芳香族氨基酸遥 木瓜蛋白酶水解所得肽段中含有
疏水性氨基酸或芳香族氨基酸袁含量占总氨基酸残基
量的 猿园豫以上袁且分布于肽段两端袁这种结构非常有
利于提高抗氧化肽的抗氧化活性袁所以其水解得到的
抗氧化肽的抗氧化活性好咱员缘暂 遥 栽葬灶早 等咱员远暂研究了木瓜
蛋白酶水解花生分离蛋白制备的水解产物的功能特性
与抗氧化活性袁发现其具有清除 阅孕孕匀自由基尧清除羟
远远员员
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自由基尧还原力和总抗氧化力活性遥 粤造糟葬造葬泽藻 是一种
深度内切水解蛋白酶袁对酶解羧端疏水性氨基酸有较
强的专一性袁可以制备出末端具有疏水性氨基酸的短
肽遥 疏水性氨基酸能加强抗氧化肽与脂肪酸相互作
用袁带动亲水抗氧化氨基酸残基向脂质靠近袁从而可提
高其对脂质自由基捕捉能力遥 再怎 等咱怨暂采用超声波辅
助 粤造糟葬造葬泽藻 水解花生粕制备抗氧化水解产物袁具有很
好的清除自由基尧还原力尧金属离子螯合力和抑制脂质
过氧化等 源 类抗氧化活性遥 云造葬燥怎则扎赠皂藻 是一种内切酶
与外切酶的混合酶袁其内切作用位点多为芳香族氨基
酸袁这些氨基酸残基对维持肽段的抗氧化活性具有重
要作用袁如色氨酸和酪氨酸将氢原子给予自由基后袁自
身形成的自由基中间体苯氧自由基和吲哚自由基借助
共振求得稳定袁导致自由基链反应减慢或终止咱员苑暂 遥 而
外切酶可能会去除这些残基袁从而减弱抗氧化活性袁所
以袁抗氧化活性没有前两种大遥 孕则燥贼葬皂藻曾 是一种杆菌
蛋白酶复合体袁属于内切酶袁得到的 孕孕员 可作为电子
受体袁阻断因自由基引发而造成不饱和脂肪酸氧化链
延长遥 中性蛋白酶是一种内切酶袁主要针对羧基端是
栽赠则尧孕澡藻尧栽则责等芳香族疏水性氨基酸的肽键进行水解袁
但是袁其水解能力没有其他 源 种蛋白酶高袁因此袁晕孕抗
氧化活性最小遥
源摇 结论
以低变性花生蛋白粉为原料袁超声波分散溶解和
灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴 水 解 蛋 白 粉 后袁 采 用 粤造糟葬造葬泽藻尧
云造葬增燥怎则扎赠皂藻尧孕则燥贼葬皂藻曾尧中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解
法制备 缘 种花生抗氧化肽遥 通过考察 缘 种抗氧化肽体
外抗氧化活性袁木瓜蛋白酶是制备花生抗氧化肽的最
适水解酶袁其制备的抗氧化肽清除 阅孕孕匀自由基能力尧
抑制脂质过氧化能力以及还原力最强遥 利用木瓜蛋白
酶水解花生蛋白来研究和开发具有抗氧化功能的抗氧
化肽不失为进一步开发花生蛋白的有效途径遥
参考文献院
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咱 远 暂摇 王飞袁封琼袁刘程智袁林琳袁田兵袁华跃进援 奇球菌属类胡萝卜素
提取物的抗氧化活性研究咱允暂 援 核农学报袁 圆园员圆袁 圆远渊远冤院 怨园园 原
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咱 苑 暂摇 张捷袁丁韩英袁戚向阳袁袁勇军援 枯草芽孢杆菌 再 原 远 产抗菌肽的
体外抗氧化效果研究咱允暂 援核农学报袁 圆园员员袁 圆缘渊猿冤院 缘员愿 原 缘圆圆
咱 愿 暂摇 于丽娜袁孙杰袁刘少芳袁朱凤袁毕洁袁张初署袁杨庆利援 花生抗氧化
水解产物制备及其抗氧化活性研究咱 允暂 援 核农学报袁 圆园员猿袁 圆苑
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陈子元援 夏桑叶的体外抗氧化活性及其主要功能成分研究咱 允暂 援
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咱员远暂摇 蒋妮袁 覃柳燕袁 陈乾平袁 刘威援 员园 种香料植物挥发油的抑菌活
性研究咱允暂 援 植物保护袁 圆园员圆袁 猿愿渊员冤院 员园源 原 员园苑
咱员苑暂摇 曲春阳袁潘磊庆袁 屠康袁杨立之援 复合精油对黄曲霉联合抑菌作
用研究咱允暂 援 食品工业科技袁 员园员圆袁 猿猿渊员园冤院 猿圆 原 猿源
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栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 责则燥贼藻燥造赠贼蚤糟 藻灶扎赠皂藻 枣燥则 责则藻责葬则蚤灶早 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻 憎葬泽 责葬责葬蚤灶援 粤皂燥灶早 贼澡藻 枣蚤增藻
葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻泽袁 孕孕圆 澡葬凿 贼澡藻 皂燥泽贼 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 燥枣 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造袁 则藻凿怎糟蚤灶早 责燥憎藻则袁 葬灶贼蚤鄄
造蚤责蚤凿 责藻则燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶援 栽澡藻则藻枣燥则藻袁 贼澡藻 则藻泽藻葬则糟澡 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻 憎蚤贼澡 贼澡藻 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 枣怎灶糟贼蚤燥灶 遭赠 怎泽蚤灶早
责葬责葬蚤灶 蚤泽 葬灶 藻枣枣藻糟贼蚤增藻 葬责责则燥葬糟澡 贼燥 枣怎则贼澡藻则 藻曾责造燥蚤贼 责藻葬灶怎贼 责则燥贼藻蚤灶援
运藻赠 憎燥则凿泽院灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴曰 孕则燥贼藻葬泽藻曰 孕藻葬灶怎贼 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻曰 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠
圆苑员员