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Effects of Triadimefon on Physiological Characteristics and Yield of Soybean under Drought and Rewatering at Flowering Stage

三唑酮预处理对花期大豆干旱胁迫及复水后生理特性及产量的影响


为探明三唑酮预处理对增强大豆抗旱性的影响,以南农99-6为材料,通过盆栽试验,研究了三唑酮预处理对花期干旱条件和复水后大豆叶片抗氧化系统、内源激素、光合性能及农艺性状的影响。结果表明:三唑酮预处理显著提高了不同水分条件下大豆叶片的SOD、POD酶活性及GSH含量,但降低了AsA含量;同时三唑酮预处理降低了胁迫期间和复水以后叶片H2O2、MDA含量和O2-的产生速率以及EL的值,但对正常水分条件下影响不显著;此外三唑酮预处理显著提高了干旱胁迫下及复水后大豆叶片Pn、Ci、Gs、Tr的值和IAA的含量,但降低了GA和ABA的含量。干旱条件下,三唑酮预处理显著提高了单株荚数、单株粒数、百粒重,增加了单株产量。


全 文 :  核 农 学 报  2013,27(11):1749 ~ 1755
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
收稿日期:2012⁃12⁃26  接受日期:2013⁃05⁃03
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划重点项目(2009BADA8B02),江苏省重点科技支撑与自主创新示范工程(BE2008618)
作者简介:吴园园,女,主要从事作物生理生态研究。 E⁃mail: 2010101070@ njau. edu. cn
通讯作者:周琴,女,副教授,主要从事作物生理生态研究。 E⁃mail: qinzhou@ njau. edu. cn
文章编号:1000⁃8551(2013)11⁃1749⁃07
三唑酮预处理对花期大豆干旱胁迫及复水
后生理特性及产量的影响
吴园园  田一丹  刘丽欣  邢兴华  江洪强  邢邯  江海东  周  琴
(南京农业大学农业部南方作物生理生态重点开放实验室 /江苏省信息农业高技术研究
重点实验室 /国家大豆改良中心,江苏 南京  210095)
摘  要:为探明三唑酮预处理对增强大豆抗旱性的影响,以南农 99 - 6 为材料,通过盆栽试验,研究了三
唑酮预处理对花期干旱条件和复水后大豆叶片抗氧化系统、内源激素、光合性能及农艺性状的影响。 结
果表明:三唑酮预处理显著提高了不同水分条件下大豆叶片的 SOD、POD酶活性及 GSH含量,但降低了
AsA含量;同时三唑酮预处理降低了胁迫期间和复水以后叶片 H2O2、MDA 含量和 O2 -的产生速率以及
EL的值,但对正常水分条件下影响不显著;此外三唑酮预处理显著提高了干旱胁迫下及复水后大豆叶
片 Pn、Ci、Gs、Tr 的值和 IAA 的含量,但降低了 GA 和 ABA 的含量。 干旱条件下,三唑酮预处理显著提
高了单株荚数、单株粒数、百粒重,增加了单株产量。
关键词:干旱;三唑酮;大豆;生理特性;产量
    近年来,全球性的干旱气候越发明显,已成为影响
作物产量的主要限制因素之一[1]。 中国统计年鉴数
据显示,1978 年至 2010 年我国每年干旱受灾面积平
均为 2461􀆰 18 万 hm2,成灾面积 1307􀆰 93 万 hm2,占总
灾害面积一半以上,仅 2010 年长江中下游地区的春、
夏大豆受旱面积就有 133􀆰 94 千 hm2,成灾面积达到
89􀆰 3 千 hm2[2]。 我国大豆生长期间会遭遇不同程度的
干旱[3],尤其花荚期干旱对大豆生长发育和产量影响
最大[4],由此对大豆产量造成的损失不可估量。 有研
究表明干旱胁迫能够造成大豆叶片及根系代谢失衡,
降低叶片的光合速率、碳同化物的积累[5 - 7],增加膜脂
过氧化程度、提高细胞膜透性[8 - 9],破坏根系的信号调
节,激素转运平衡[10 - 11],影响抗氧化酶活性[1,12]等。
应用植物生长调节剂是提高植物抗旱能力的有效途径
之一,如外源喷施 ABA 可以提高玉米、甘蔗的抗旱
性[13 - 14],6 - BA、PP333可一定程度提高小麦幼苗的抗
旱性[15 - 16],茉莉酸甲酯可提高水稻的抗旱性[17]。 三
唑酮(Triadimefon)是一种杀菌剂同时也是一种植物生
长调节剂,具有高效、低毒、低残留、易降解、持效期长、
内吸性强的特点[18 - 19],它能够起到抑制株高,增加根
冠比[20],通过增强抗氧化系统清除活性氧的能力来提
高植物抗性[21]。 有报道指出,三唑酮可一定程度提高
水稻、长春花的抗旱能力[22 - 23],但利用其缓解大豆干
旱的研究鲜见报道。 因此,本试验以南农 99 - 6 为材
料,研究三唑酮预处理对不同干旱天数下大豆抗氧化
系统、内源激素、光合性能及产量的影响,明确三唑酮
对大豆干旱的缓解作用及机理,为大豆抗旱栽培提供
理论依据。
1  材料与方法
1􀆰 1  供试材料与栽培情况
供试大豆品种为南农 99 - 6,由南京农业大学国
家大豆改良中心提供。 试剂为 20%三唑酮乳油。
试验于 2011 年 6 月 - 11 月在南京农业大学牌楼
试验站通过盆栽试验进行。 盆高 20cm,内径 25􀆰 5cm,
每盆装土 8􀆰 65kg,每千克土壤中 N、P2O5、K2O 分别为
0􀆰 125、0􀆰 25、0􀆰 143g,置于防雨棚中。 6 月 25 日播种,
每盆播种 6 粒,V3 期(生育期根据 Fehr 等[24]的划分
法,下同) 定苗,每盆留长势一致的苗 4 株。
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1􀆰 2  试验设计
试验共设 4 组处理,分别为正常对照(CK)和干旱
处理(D),正常 +三唑酮(CK + T)和干旱 +三唑酮(D
+ T),每个处理 3 个重复。 在大豆 R1 期进行处理,
CK和 D喷清水,CK + T和 D + T喷浓度为240mg·kg - 1
三唑酮。 喷施后 D和 D + T停止浇水,进行干旱处理,
D和 D + T 土壤相对含水量在干旱的第 1 天保持在
70% ,以后每天降低 2􀆰 5% ,至第 9 天为 50% ,第 9 天
傍晚开始复水, CK和 CK + T 土壤相对含水量一直保
持在 75%左右,土壤相对含水量以称重法控制。 分别
于干旱处理后 3、6 和 9d及复水后 3、9 和 15d(代表字
母分别为 D3、D6、D9、W3、W9、W15)取样,进行抗氧化
系统中各项指标的测定,激素及光合参数测定样本时
期为干旱后 9d 和复水后 15d,每个处理测定 3 个重
复。 R8 期取样考查单株产量,每个处理测定 7 个重
复。
图 1  三唑酮对花期大豆干旱条件及复水后叶片 SOD、POD活性影响
Fig. 1  Effects of triadimefon on SOD, POD activities in leaves of soybean
under drought stress and after re⁃watering at flowering stage
1􀆰 3  测定项目与方法
超氧化物歧化酶(SOD)活性测定采用 NBT 法,过
氧化物酶(POD)活性测定采用愈创木酚法[25]。 采用
羟胺法测定超氧阴离子(O2 - )的产生速率[26],试剂盒
测定 H2O2 含量。 抗坏血酸(AsA)含量测定参照汤章
城[27]的方法,还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定参照
Guri[28]的方法。 丙二醛(MDA)含量测定采用赵世杰
等[29]的方法,相对电导率 ( EL) 采用电导仪法测
定[25]。 植物内源激素采用酶联免疫吸附法(ELISA),
试剂配制与测定步骤参照何钟佩[30]的方法进行,试剂
盒由中国农大化控室提供,使用美国 BIO—RAD680 自
动酶联测读仪进行测定。 光合参数用 LI - 6400(美国
LI⁃COR公司)便携式光合仪测定,测定叶位为倒三片
完全展开叶,测定时间为上午 9:00 - 11:00。
产量构成因素。 单株荚数、单株粒重、单株粒数、
每荚粒数、百粒重。
数据处理与统计分析。 采用 Excel 2003 软件处理
试验数据,并用 SPSS16􀆰 0 软件对试验数据进行差异显
著性分析。
2  结果与分析
2􀆰 1  三唑酮预处理对干旱胁迫及复水后叶片抗氧化
系统的影响
2􀆰 1􀆰 1  超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活
性  由图 1 看出,干旱后 3d 和 6d,D 和 D + T 处理的
叶片的 SOD、POD 活性明显高于 CK、CK + T,干旱后
9d,D、D + T叶片的 POD、SOD 活性大幅度降低,复水
后 SOD和 POD活性均有不同程度回升,随后与 CK和
CK + T接近。
正常水分条件下,三唑酮预处理对叶片 SOD 活性
影响不明显,但显著增加了叶片 POD活性。 干旱条件
下,三唑酮处理的叶片 SOD、POD 活性在各时期均表
现为 D + T > D,且在干旱后 3、6、9d D + T处理的 SOD
活性较 D处理分别增加了 10􀆰 07% 、6􀆰 46%和 4􀆰 42% ,
POD分别了增加 9􀆰 47% 、13􀆰 15%和 8􀆰 63% 。 复水后
SOD、POD活性仍然表现为 D + T > D,其中 SOD 活性
D + T和 D处理差异显著(P < 0􀆰 05),POD活性差异不
显著(P > 0􀆰 05)。
2􀆰 1􀆰 2  抗坏血酸(AsA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量
  图 2 显示, AsA、GSH含量在干旱期间表现为 D + T、
D高于 CK + T、CK。 由图 2 - A可以看出,无论正常水
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  11 期 三唑酮预处理对花期大豆干旱胁迫及复水后生理特性及产量的影响
分条件下还是干旱胁迫下,处理后 3、6d 的 AsA 含量
接近,9d 及复水后各点 AsA 含量均表现为 CK + T <
CK、D + T < D,且处理间差异达显著水平。
图 2 - B 结果表明,不同水分条件下的 GSH 含量
除处理后 3d接近外,其它各点均表现为 CK + T > CK、
D + T > D,且处理间差异显著。
图 2  三唑酮对花期大豆干旱条件及复水后叶片 AsA、GSH含量的影响
Fig. 2  Effects of triadimefon on the contents of AsA and GSH in leaves of soybean under
drought stress and after re⁃watering at flowering stage.
图 3  三唑酮对花期大豆干旱条件及复水后叶片 H2O2 含量、O2 -产生速率的影响
Fig. 3  Effects of triadimefon on H2O2 content and O2 - production rate in leaves of soybean
under drought stress and after re⁃watering at flowering stage
2􀆰 2  三唑酮预处理对干旱及复水以后叶片活性氧自
由基的影响
从图 3 可以看出,过氧化氢(H2O2)含量及超氧阴
离子(O2 - )的产生速率整体表现为干旱期间 D + T、D
显著高于 CK + T、CK,复水后趋于一致。
正常水分条件下三唑酮预处理对 H2O2 含量、O2 -
产生速率无显著影响;干旱胁迫下,H2O2 含量随胁迫
程度的加深呈现先升高后降低的趋势,除干旱后 3d外
均表现为 D + T < D, D + T处理的 H2O2 含量在干旱后
6d、9d 分别比 D处理低 12􀆰 5%和 6􀆰 4% ,差异显著,复
水后处理间差异缩小。 干旱期间的 O2 -产生速率呈逐
渐升高,复水后逐渐下降,D + T 的 O2 -产生速率在干
旱后 6d和 9d分别比 D低 14􀆰 1%和 9􀆰 4% ,差异显著,
复水后趋于一致。
2􀆰 3  三唑酮预处理对干旱及复水后叶片细胞膜伤害
程度的影响
干旱处理显著提高了 MDA 含量和 EL,随时间延
长,迅速升高,复水后逐渐下降。 正常水分条件下三唑
酮预处理对叶片 MDA 含量及 EL 无显著影响。 干旱
胁迫下,三唑酮预处理显著降低了叶片中 MDA 含量
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核  农  学  报 27 卷
和 EL。 复水后干旱胁迫处理的叶片 MDA 及 EL 急剧
下降而后趋于平缓,仍表现为 D + T 处理略低于 D 处
理,但差异未达到显著水平(图 4)。
图 4  三唑酮对花期大豆干旱条件及复水后叶片丙二醛含量、相对电导率的影响
Fig. 4  Effects of triadimefon on MDA content and EL in leaves of soybean under drought stress
and after re⁃watering at the flowering stage.
表 1  三唑酮对花期大豆叶片干旱期间及复水后叶片中激素的影响
Table 1  Effects of triadimefon on plant hormone in leaves of soybean during drought stress and
after re⁃watering at the flowering stage
处理
Ttreatment
干旱期间 During drought 复水以后 Re⁃watering
GA / (ng·g - 1FW) IAA / (ng·g - 1FW) ABA / (ng·g - 1FW) GA / (ng·g - 1FW) IAA / (ng·g - 1FW) ABA / (ng·g - 1FW)
CK 36􀆰 81c 289􀆰 53d 528􀆰 26b 36􀆰 8a 236􀆰 11ab 571􀆰 83ab
CK + T 65􀆰 92a 346􀆰 07c 453􀆰 37d 28􀆰 39b 248􀆰 77a 536􀆰 38b
D 54􀆰 08b 395􀆰 05b 585􀆰 68a 32􀆰 73ab 210􀆰 05b 585􀆰 4a
D + T 28􀆰 75d 417􀆰 9a 506􀆰 51c 22􀆰 9c 256􀆰 48a 586􀆰 87a
    注:同列无相同小写字母表示不同处理差异显著 (P < 0􀆰 05)。 下同。
Note: No different small letters in the same column indicated significant difference among treatments at 0􀆰 05 level. The same as below.
2􀆰 4  三唑酮预处理对干旱期间及复水后叶片中激素
含量的影响
表 1 结果表明,在干旱期间赤霉素(GA)含量为
CK + T > CK、D + T < D,脱落酸(ABA)含量表现为 CK
+ T < CK、D + T < D,GA和 ABA各处理间差异均达到
显著水平。 生长素(IAA)含量为 CK + T > CK、D + T >
D,各组中处理差异显著。
复水以后,GA含量为 CK + T < CK、D + T < D,且
差异显著。 IAA含量与干旱期间一致,表现为 CK +
T > CK、D + T > D,但正常水分下差异不显著。 ABA
含量 CK + T < CK、D + T > D,干旱胁迫下差异不明
显。
2􀆰 5  三唑酮预处理对干旱期间及复水后光合性能的
影响
表 2 说明,干旱期间,D + T 处理的净光合速率
(Pn)、气孔度(Gs)、胞间 CO2 浓度(Ci)及蒸腾速率
(Tr)均高于 D处理,而 CK + T处理较 CK显著降低了
光合参数。 复水后 CK + T 处理的 Pn、Gs、Ci 及 Tr 均
有所提高,且除 Pn 外差异均达到显著水平。 D + T 处
理除 Ci外,其它各项光合参数均表现为 D + T 处理显
著高于 D处理。
2􀆰 6  三唑酮预处理对不同水分条件下大豆产量及农
艺性状的影响
三唑酮处理对不同水分条件下的大豆均显著降低
了株高和每荚粒数。 正常水分条件下,CK 与 CK + T
处理的产量及其构成因素差异均不显著。 干旱条件
下,D + T处理较 D处理显著提高了单株荚数、单株粒
数、百粒重以及单株产量。
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  11 期 三唑酮预处理对花期大豆干旱胁迫及复水后生理特性及产量的影响
表 2  三唑酮对花期大豆叶片干旱期间及复水后光合性能的影响影响
Table 2  Effects of triadimefon on photosynthesis characteristics in leaves of soybean during drought stress and
afteer re⁃watering at the flowering stage
处理
Treatment
干旱期间 During drought 复水以后 Re⁃watering
Pn /
(μmol CO2·
m - 2·s - 1)
Gs /
(mol H2O·
m - 2·s - 1)
Ci /
(μmol CO2·
mol - 1)
Tr /
(mmol H2O·
m - 2·s - 1)
Pn /
(μmol CO2·
m - 2·s - 1)
Gs /
(mol H2O·
m - 2·s - 1)
Ci /
(μmol CO2·
mol - 1)
Tr /
(mmol H2O·
m - 2·s - 1)
CK 17􀆰 57a 0􀆰 51a 289􀆰 99a 9􀆰 11a 13􀆰 84b 0􀆰 165c 229􀆰 93b 1􀆰 67c
CK + T 17􀆰 09a 0􀆰 29b 245􀆰 64b 7􀆰 73b 14􀆰 75ab 0􀆰 514a 316􀆰 47a 3􀆰 10a
D 4􀆰 70b 0􀆰 023c 37􀆰 80d 1􀆰 00c 13􀆰 15b 0􀆰 332b 303􀆰 22a 2􀆰 69b
D + T 6􀆰 26b 0􀆰 037c 96􀆰 82c 1􀆰 50c 16􀆰 96a 0􀆰 486a 301􀆰 01a 3􀆰 25a
表 3  三唑酮对花期大豆产量及农艺性状的影响
Table 3  Effects of triadimefon on yield and agronomic characteristics of soybean at the flowering stage.
处理
Treatment
株高
Plant height / cm
单株荚数
Pod number per plant
单株粒数
Grain number per plant
百粒重
100 seeds weight / g
每荚粒数
Grain number per pod
单株产量
Yield per plant / g
CK 149􀆰 71a 33􀆰 00ab 77a 23􀆰 95a 2􀆰 35a 18􀆰 78a
CK + T 94􀆰 00c 36􀆰 43a 73ab 24􀆰 15a 2􀆰 12b 18􀆰 82a
D 116􀆰 29b 30􀆰 43b 66c 21􀆰 67b 2􀆰 21b 15􀆰 79c
D + T 98􀆰 00c 38􀆰 00a 74ab 24􀆰 11a 1􀆰 94c 17􀆰 94b
3  讨论
3􀆰 1  三唑酮预处理对干旱条件及复水条件下大豆叶
片抗氧化系统的影响
正常水分条件下,三唑酮处理后 3d、6d 的活性氧
含量升高,MDA 含量和 EL 值增加,同时 SOD、POD 活
性提高。 这可能是由于试验所用三唑酮本身作为一种
调节剂能够影响大豆植株的活性氧代谢,诱发保护酶
系统提高抗氧化能力,减少其对大豆植株的伤害。
干旱胁迫导致大豆活性氧增加,诱导植株 SOD、
POD活性增加,AsA和 GSH含量上升。 三唑酮处理后
6d内 SOD、POD的酶活性显著增加,而 AsA和 GSH含
量变化不显著,说明三唑酮主要通过影响抗氧化酶系
统来缓解大豆干旱胁迫。 随后在 6 ~ 9d内由于干旱加
剧,SOD、POD的酶活性显著下降,而 AsA 含量显著上
升,说明在酶系统抗氧化能力下降的情况下,非酶系统
起着主要作用。 在这种情况下,三唑酮处理的 SOD、
POD的酶活性仍高于干旱处理,而 AsA含量则上升较
少,也从另一个方面说明三唑酮缓解干旱引起的氧化
胁迫的主要机理是诱导和激活酶系统清除活性氧,从
而提高植株的抗氧化能力,而对非酶系统作用较小。
复水后,三唑酮处理的 AsA、GSH 含量维持原有
趋势,但处理间差异减小,而 SOD 活性仍维持较高水
平。 H2O2 的含量和 O2 -的产生速率以及 MDA 和 EL
逐渐降低最后趋于一致,说明三唑酮处理后在干旱期
间缓解了胁迫对植株的伤害,复水后作用逐渐减小。
3􀆰 2  三唑酮预处理对干旱条件及复水条件下大豆内
源激素、光合及生长的影响
干旱期间,三唑酮处理均降低了 GA、ABA 含量,
提高了 IAA 含量及光合参数。 已有研究表明,三唑酮
与稀效唑同属三唑类化合物,是 GAS生物合成抑制剂,
可以降低植物内源 GAS [19,31],本试验结果也表明,三
唑酮处理后 GA 含量下降,从而显著降低了不同水分
条件下的株高。 由于三唑酮能够降低细胞内酚类物质
的含量,从而减少 IAA 氧化酶的合成,减少了 IAA 的
分解[32],因此 IAA 含量升高,进而促进植株生长。 三
唑酮作为生长调节剂处理后影响了 ABA的合成,降低
了 ABA含量,在轻中度土壤干旱过程中,大豆叶片的
气孔关闭主要受 ABA 的控制[33],因此增加了气孔导
度,CO2 进入叶片受到阻碍减小,提高了羧化中心对
CO2 的吸收,从而提高了净光合速率。 由于三唑酮处
理后光合速率和蒸腾速率明显提高,所以叶片中的光
合同化物也随之升高,进而更多的转运到籽粒中,从而
达到增产的效果。 复水后,三唑酮处理的大豆叶片中
ABA含量趋于一致,GA 含量仍较低,IAA 含量、光合
速率较高,说明三唑酮在内源激素调控上有一定的后
效作用。 本试验选用 240mg·L - 1的三唑酮喷施花期大
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核  农  学  报 27 卷
豆叶片对缓解干旱有较为明显的效果,但对干旱条件
下苗期大豆的缓解作用并不明显(未发表数据)。
4  结论
三唑酮预处理对正常水分条件下大豆抗氧化系统
的影响不大,在干旱条件下,三唑酮缓解大豆植株干旱
胁迫的途径之一是增强抗氧化酶系统活性来清除活性
氧,对非酶系统作用较小;三唑酮能够调控大豆植株中
内源激素的平衡,显著降低 GA 含量,从而抑制了株
高,通过降低 ABA含量来提高光合性能,增加 IAA 含
量促进植株生长,且复水后仍有一定的调控作用,从而
增加了大豆的单株产量。
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Effects of Triadimefon on Physiological Characteristics and Yield of
Soybean under Drought and Rewatering at Flowering Stage
WU Yuan⁃yuan  TIAN Yi⁃dan  LIU Li⁃xin XING  Xing⁃hua  JIANG Hong⁃qiang
XING Han  JIANG Hai⁃dong  ZHOU Qin
(Ministry of Agriculture Key Laboratory of Crop Physiology and Ecology in Southern China / Jiangsu Province
Hi⁃Tech Key Laboratory of Information Agriculture / National Center for Soybean Improvement,
Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu  210095)
Abstract:In order to investigate effects of triadimefon on soybean drought resistance, a pot experiment was conducted
using soybean variety of Nannong99 - 6 (Glycine max var. ) to study the effects of triadimefon on antioxidant system,
endogenous hormones, photosynthetic characteristic and yield under drought stress. Results showed that the
photosynthesis and yield were inhibited under drought stress. Under drought conditions, the contents of POD, SOD
activity and GSH were increased but AsA content was decreased by triadimefon. Meanwhile, H2O2, MDA contents, the
production rate of O2 - and the value of EL in soybean under drought conditions significantly decreased by triadimefon.
The contents of Pn, Ci, Gs, Tr and IAA in drought stressed plant significantly declined, while GA and ABA contents
decreased by triadimefon. However, under normal watering condition, H2O2, MDA contents, the production rate of O2 -
and the value of EL were not significantly affected by triadimefon, and photosynthesis parameters were decreased by
triadimefon. As a result, pod number, grain number, seed size and yield per plant under drought stress were
significantly improved by triadimefon.
Key words:Drought; Triadimefon; Soybean; Physiological characteristics; Yield
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