全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员员袁圆缘渊远冤院员园愿愿 耀 员园怨猿允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员员鄄园员鄄圆员摇 接受日期院圆园员员鄄园猿鄄猿园
基金项目院国家科技支撑项目渊圆园园怨月粤粤圆源月园缘冤
作者简介院洪摇 隽渊员怨愿猿鄄冤袁男袁浙江温州人袁硕士研究生袁研究方向为诱变遗传和植物分子改良遥 栽藻造院 园缘苑员鄄愿远怨苑员源园缘
通讯作者院舒庆尧渊员怨远缘鄄冤袁男袁浙江新昌人袁教授袁主要从事水稻育种和生物技术研究遥 栽藻造院 园缘苑员鄄愿远怨苑员圆园圆曰 耘鄄皂葬蚤造院 择赠泽澡怎岳 扎躁怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员员冤园远鄄员园愿愿鄄园远
水稻光叶性状基因 早造员的精细定位与候选基因分析
洪摇 隽员 摇 王启钊员 摇 富昊伟圆 摇 吴殿星员 摇 舒庆尧
渊员郾 浙江大学原子核农业科学研究所 辕农业部浙江省核农学重点实验室袁浙江 杭州摇 猿员园园圆怨曰
圆郾 浙江嘉兴市农业科学院袁浙江 嘉兴摇 猿员源园员远冤
摘摇 要院光叶水稻是一类在叶片和谷粒等表面都光滑无毛的水稻袁是美国南部和非洲一些国家的主栽品
种遥 已有研究表明水稻的光叶性状受一对位于第 缘 染色体上的隐性基因 早造员 控制遥 本试验旨在对 早造员
进行精细定位袁分析候选基因袁为最终克隆 早造员 基因尧研究毛状体形态建成的调控奠定基础遥 首先根据
与 早造员 连锁的 砸云蕴孕标记在第 缘 染色体上的大致位置袁有选择地用第 缘 染色体上的部分微卫星渊杂杂砸冤标
记研究热带光叶粳稻渊粤孕怨冤与毛叶籼稻渊浙恢 苑怨缘源冤的杂交分离群体中与光叶性状的共分离袁获得了与
早造员 连锁的 杂杂砸 标记 砸酝员苑怨怨园遥 在此基础上袁采用与 砸酝员苑怨怨园 相邻的更多 杂杂砸 标记以及插入 辕缺失
渊 陨灶阅藻造冤标记将 早造员 定位在 砸酝员苑苑缘怨 耀 砸酝员苑愿猿员 之间渊物理区间为 缘猿愿噪遭 耀 员郾 远源怨酝遭冤遥 为进一步缩小范
围袁发展了毛细管电泳方法和能够识别单碱基多态性渊杂晕孕冤的四引物扩增受阻突变体系鄄孕悦砸渊栽藻贼则葬鄄
责则蚤皂藻则 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻枣则葬糟贼燥则赠 皂怎贼葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂 孕悦砸袁 粤杂孕悦砸冤标记袁将 早造员 的区间缩至 苑苑园郾 缘 耀 怨苑苑郾 员噪遭 之
间遥 结合其他实验室有关 早造员 定位的最新结果袁本研究将 早造员 定位在 怨苑员 耀 怨苑苑郾 员噪遭之间袁并对其中的全
部 源 个注释基因进行测序分析袁发现只有 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘园 的 缘爷端非翻译区在光叶水稻和毛叶水稻之
间存在一个碱基差异袁该差异可能是造成光叶突变的原因遥
关键词院水稻曰光叶曰 早造员曰毛状体曰精细定位
云陨晕耘 酝粤孕孕陨晕郧 粤晕阅 悦粤晕阅陨阅粤栽耘 郧耘晕耘 粤晕粤蕴再杂陨杂 韵云 郧蕴粤月砸韵哉杂 蕴耘粤云
粤晕阅 匀哉蕴蕴 郧耘晕耘 渊早造员冤 陨晕 砸陨悦耘 渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 蕴援 冤
匀韵晕郧 允怎灶员 摇 宰粤晕郧 匝蚤鄄扎澡葬燥员 摇 云哉 匀葬燥鄄憎藻蚤圆 摇 宰哉 阅蚤葬灶鄄曾蚤灶早员 摇 杂匀哉 匝蚤灶早鄄赠葬燥员
渊员郾 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽 燥枣 在澡藻躁蚤葬灶早 孕则燥增蚤灶糟藻 葬灶凿 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻
燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 在澡藻躁蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆怨曰
圆郾 允蚤葬曾蚤灶早 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 允蚤葬曾蚤灶早袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员源园员远冤
粤遭泽贼则葬糟贼院郧造葬遭则燥怎泽 则蚤糟藻 蚤泽 葬 噪蚤灶凿 燥枣 则蚤糟藻 贼澡葬贼 蚤泽 澡葬蚤则造藻泽泽 燥灶 贼澡藻 泽怎则枣葬糟藻 燥枣 蚤贼泽 造藻葬增藻泽 葬灶凿 早则葬蚤灶泽援 陨贼 蚤泽 贼澡藻 皂葬蚤灶 早则燥憎灶
糟怎造贼蚤增葬则 蚤灶 贼澡藻 泽燥怎贼澡藻则灶 则藻早蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 哉灶蚤贼藻凿 杂贼葬贼藻泽 葬灶凿 蚤灶 皂葬灶赠 粤枣则蚤糟葬灶 糟燥怎灶贼则蚤藻泽援 陨贼 澡葬泽 遭藻藻灶 责则燥增藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 早造葬遭则燥怎泽
贼则葬蚤贼 蚤泽 糟燥灶贼则燥造造藻凿 遭赠 贼澡藻 则藻糟藻泽泽蚤增藻 早藻灶藻 早造员 燥灶 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 缘郾 栽澡蚤泽 泽贼怎凿赠 葬蚤皂藻凿 贼燥 枣蚤灶藻 皂葬责 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣赠 糟葬灶凿蚤凿葬贼藻 早藻灶藻泽
枣燥则 贼澡藻 藻增藻灶贼怎葬造 糟造燥灶蚤灶早 燥枣 早造员 葬灶凿 枣燥则 枣怎则贼澡藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼则蚤糟澡燥皂藻 皂燥则责澡燥早藻灶藻泽蚤泽 葬灶凿 则藻早怎造葬贼蚤燥灶援 韵灶藻 泽藻早则藻早葬贼蚤灶早
责燥责怎造葬贼蚤燥灶 憎葬泽 藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿 遭赠 糟则燥泽泽蚤灶早 葬 早造葬遭则燥怎泽 贼则燥责蚤糟 允葬责燥灶蚤糟葬 则蚤糟藻 糟怎造贼蚤增葬则 渊粤孕怨冤 葬灶凿 灶燥灶鄄早造葬遭则燥怎泽 蚤灶凿蚤糟葬 糟怎造贼蚤增葬则
渊在澡藻澡怎蚤 苑怨缘源冤袁 葬灶凿 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 渊 杂杂砸冤 皂葬则噪藻则泽 憎藻则藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬则燥怎灶凿 贼澡藻 则藻早蚤燥灶 燥枣 砸云蕴孕 皂葬则噪藻则泽 憎澡蚤糟澡 憎藻则藻
责则藻增蚤燥怎泽造赠 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 贼燥 遭藻 造蚤灶噪藻凿 憎蚤贼澡 早造员郾 栽澡藻泽藻 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 憎藻则藻 怎泽藻凿 枣燥则 造蚤灶噪葬早藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 粤孕怨 伊 在澡藻澡怎蚤 苑怨缘圆
责燥责怎造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责则燥增藻凿 贼澡葬贼 早造员 憎葬泽 造蚤灶噪藻凿 贼燥 杂杂砸 皂葬则噪藻则 砸酝员苑怨怨园郾 云怎则贼澡藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽 怎泽蚤灶早 皂燥则藻 灶藻憎 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 葬灶凿
蚤灶泽藻则贼蚤燥灶 辕 凿藻造藻贼蚤燥灶 渊陨灶阅藻造冤 皂葬则噪藻则泽 皂葬责责藻凿 早造员 贼燥 贼澡藻 则藻早蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 砸酝员苑苑缘怨 葬灶凿 砸酝员怨愿猿员渊责澡赠泽蚤糟葬造 蚤灶贼藻则增葬造 缘猿愿噪遭
愿愿园员
摇 远 期 水稻光叶性状基因 早造员 的精细定位与候选基因分析
耀员郾 远源怨酝遭冤援 栽燥 枣怎则贼澡藻则 凿藻造蚤皂蚤贼 早造员袁 糟葬责蚤造造葬则赠 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 葬灶凿 贼藻贼则葬鄄责则蚤皂藻则 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻枣则葬糟贼燥则赠 皂怎贼葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂
孕悦砸 皂葬则噪藻则泽渊则藻枣藻则则藻凿 葬泽 粤杂孕悦砸 皂葬则噪藻则泽 澡藻则藻葬枣贼藻则冤 憎藻则藻 怎泽藻凿 枣燥则 杂晕孕 葬灶葬造赠泽蚤泽 葬灶凿 遭则葬糟噪藻贼藻凿 早造员 贼燥 苑苑园郾 缘怨苑苑郾 员噪遭援
栽澡蚤泽 则藻早蚤燥灶 憎葬泽 枣怎则贼澡藻则 灶葬则则燥憎藻凿 凿燥憎灶 贼燥 葬 远郾 员噪遭 泽藻早皂藻灶贼 遭藻贼憎藻藻灶 怨苑员 耀 怨苑苑郾 员噪遭 遭赠 糟燥皂遭蚤灶蚤灶早 皂葬责责蚤灶早 则藻泽怎造贼泽 燥枣 贼澡蚤泽
藻曾责藻则蚤皂藻灶贼 葬灶凿 葬 灶藻憎造赠 责怎遭造蚤泽澡藻凿 皂葬责责蚤灶早 则藻责燥则贼援 粤枣贼藻则 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 葬造造 枣燥怎则 葬灶灶燥贼葬贼藻凿 早藻灶藻泽 憎蚤贼澡蚤灶 贼澡藻 远郾 员噪遭 枣则葬早皂藻灶贼袁
燥灶造赠 燥灶藻 杂晕孕 憎葬泽 凿蚤泽糟燥增藻则藻凿 遭藻贼憎藻藻灶 早造葬遭则燥怎泽 则蚤糟藻 葬灶凿 责怎遭藻泽糟藻灶贼 则蚤糟藻 蚤灶 贼澡藻 缘爷鄄藻灶凿 怎灶贼则葬灶泽造葬贼藻凿 则藻早蚤燥灶 燥枣 蕴韵悦赃
韵泽园缘早园圆苑缘园袁 澡藻灶糟藻 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘园 蚤泽 增藻则赠 造蚤噪藻造赠 贼燥 遭藻 贼澡藻 早藻灶藻 糟燥灶贼则燥造造蚤灶早 早造葬遭则燥怎泽 贼则葬蚤贼泽 蚤灶 则蚤糟藻援
运藻赠 憎燥则凿泽院则蚤糟藻 渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 蕴援 冤曰 早造葬遭则燥怎泽 造藻葬枣曰 早造员曰 贼则蚤糟澡燥皂藻曰 枣蚤灶藻 皂葬责责蚤灶早
摇 摇 光叶水稻渊早造葬遭则燥怎泽 则蚤糟藻冤袁又称光身稻尧光壳稻袁因
其叶片尧茎秆尧叶鞘及谷粒等光滑无毛而著称袁主要分
布在非洲尧美洲及我国云贵高原等地袁是美国南部及一
些非洲国家的主栽品种类型咱员暂 遥 光叶水稻多属粳稻袁
程侃声等将光身稻作为一个生态群列入粳亚种袁作为
粳稻的一个生态型咱圆暂 遥 由于其叶片尧谷壳等表面光
滑袁相比普通水稻不仅更适合农事操作袁而且稻谷单位
容积可增加 员园豫 耀员缘豫的稻谷仓贮量咱猿暂 遥 但是袁植物
表皮毛的存在既增加植物表皮组织保护层的厚度袁也
可以减少热量和水分的丧失袁并且许多物种的表皮毛
可以抵御外界昆虫和病原菌的侵害袁也可以分泌化学
成分袁作为昆虫侵害的物理屏障咱源暂 袁因此袁水稻的光叶
特性也存在一些负面效应遥
胡培松等咱缘暂将 员缘 个美国主栽光叶水稻品种引入
杭州袁单季种植袁发现其生育期比中国晚籼品种略早
熟袁株高属于半矮秆及中秆类型袁普遍高抗倒伏袁穗形
中等偏大袁每穗粒数高袁结实率正常袁分蘖力较弱袁但是
成穗率极高袁叶片较厚袁光合作用的光饱和点高遥 近年
来随着我国超高产育种研究的不断深入袁发现许多美
国光叶稻品种与我国粳稻和籼稻相比袁具有一定亲和
性袁加之美国光叶稻品种的米质优良尧高抗倒伏以及产
量潜力大咱远暂 遥 因此袁在我国水稻品种改良中袁光叶稻
品种已成为重要的育种中间材料遥 已有研究表明袁水
稻的光叶性状受一对隐性基因 早造员 控制咱苑袁 愿暂 袁并已将
早造员 定位在第 缘 染色体上 砸云蕴孕 标记 砸郧员愿圆 和 砸郧源园猿
之间咱怨暂 遥 最近袁蕴蚤等咱员园暂则将 早造员 精细定位到第 缘 染色
体的 怨苑员噪遭 耀 员园圆缘噪遭 区间袁并且通过对其中的部分基
因进行测序分析袁发现 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘园 基因的 缘爷端
非编码区有一个单核苷酸的变异遥
水稻作为单子叶模式植物袁其研究成果不但对水
稻这一粮食作物具有意义袁也可能为其他重要作物相
关性状的研究提供借鉴作用遥 本试验通过精细定位
早造员袁筛选和分析候选基因袁以期推动水稻光叶性状的
育种和研究袁推进植物表皮绒毛形成和发育的遗传控
制与分子机制的研究遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 亲本材料和群体构建
用于本试验的光叶水稻材料有高代光叶水稻育种
品系 粤孕怨渊粳型袁本组自育冤和美国水稻品种 运葬赠遭燥灶灶藻贼
渊粳型袁简称 运月晕栽冤曰普通毛叶水稻包括浙江省农业科
学院作物与核技术利用研究所选育杂交籼稻恢复系浙
恢 苑怨缘源 和中国水稻研究所选育的籼稻保持系中 怨月遥
本试验中袁用 粤孕怨 和浙恢 苑怨缘源 杂交尧自交得到 云圆尧云猿
代分离群体袁用于光叶渊早造员冤基因的定位遥 光叶单株和
普通单株的区别在于其叶片尧茎杆尧叶鞘和谷粒表面都
光滑无毛袁本试验采用触摸叶片上表皮和显微镜观察
谷粒表面的方法来鉴别光叶单株遥 在田间选取光叶单
株时袁用手指自叶尖向叶基部滑动触摸叶片的上表面袁
手感光滑的为光叶单株遥 也可以在收获后从穗子上选
取几粒稻谷放在 源 伊 员园 显微镜下观察袁光叶水稻的谷
粒表面周身光滑无毛袁而普通水稻的谷粒表面有明显
的遍布全身的毛状体遥
员郾 圆摇 基因定位
本试验中袁基因定位和随后的序列分析所需基因
组 阅晕粤均采用田间生长叶片或者室内种子发芽幼苗
嫩叶袁用 悦栽粤月裂解法提取咱员员暂 遥 杂杂砸标记 孕悦砸反应体
系总体积 圆园滋造袁包括模板 阅晕粤 缘园灶早袁员园 伊 孕悦砸 缓冲液
圆滋造袁 园郾 圆滋皂燥造 辕 蕴 引 物袁 园郾 圆皂皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕袁 圆皂皂燥造 辕 蕴
酝早悦造圆 和 员哉 栽葬择酶遥 反应程序为院怨愿益预变性 员园皂蚤灶曰怨愿益变性 员皂蚤灶尧缘缘益退火 猿园泽尧苑圆益延伸 怨园泽袁循环 猿苑
次曰苑圆益延伸 苑皂蚤灶咱员圆暂 遥 孕悦砸 扩增产物根据预计的片
段差异大小分别用 猿豫琼脂糖凝胶电泳或 愿豫的聚丙
烯酰胺凝胶电泳进行分离遥 所有 杂杂砸 标记的引物序
列数据从 憎憎憎援 早则葬皂藻灶藻援 燥则早 网站上获得袁引物由上海
生工生物工程技术有限公司合成遥
采用混合分离分析渊月杂粤冤初步定位光叶性状基
因袁 基因池构建方法如下院选取光叶水稻和普通水稻
云圆 单株各 圆园 株袁分别提取 阅晕粤 后等量混合为光叶水
稻 阅晕粤 池和普通水稻 阅晕粤 池遥 利用 郧砸粤酝耘晕耘
怨愿园员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
渊憎憎憎援 早则葬皂藻灶藻援 燥则早冤上的资料袁采用生物信息学技术筛
选与先前报道的 早造员 连锁 砸云蕴孕标记 砸郧缘缘远 和 杂杂砸标
记 砸酝员猿 相近的第 缘 染色体上的 杂杂砸 标记对 早造员 进行
初步定位遥 利用连锁多态性标记进一步对定位群体的
光叶单株进行分析袁根据重组单株数估算标记与 早造员
的遗传距离袁继续在连锁的标记附近寻找新的 杂杂砸 标
记以缩小目标基因的范围遥
将 早造员 定位于 砸酝员苑苑缘怨 和 砸酝员苑愿猿员 之间后袁利用
日本晴和 怨猿鄄员员 的基因组序列信息袁采用 孕则蚤皂藻则
孕则藻皂蚤藻则缘郾 园 软件在该区域内设计插入缺失标记渊 陨灶阅藻造
标记冤用于基因的精细定位遥 每个 陨灶阅藻造标记的 栽皂值
不低于 缘愿益袁孕悦砸 反应的退火温度设为 缘愿益袁其他条
件同 杂杂砸标记定位试验遥 对多态性差异较小的 陨灶阅藻造
标记渊如小于 员园遭责冤袁本试验使用全自动毛细管核酸分
析系统渊型号为 藻鄄郧耘晕耘袁 陨灶糟援 匀粤阅鄄郧栽员圆栽酝冤进行分
析袁使样品检测分辨率达 圆 耀 缘遭责渊扩增片段在 缘园园遭责
以下冤遥
利用 陨灶阅藻造标记进一步缩小 早造员 所在区域后袁本试
验进一步利用 憎憎憎援 早则葬皂藻灶藻援 燥则早 等网站上公布的 杂晕孕
数据设计开发了四引物扩增受阻突变体系 孕悦砸渊贼藻贼则葬鄄
责则蚤皂藻则 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻枣则葬糟贼燥则赠 皂怎贼葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂 孕悦砸袁
粤杂孕悦砸冤标记咱员猿暂 袁对该区域内表现为重组型的单株进
行分析袁以进一步缩小定位区域遥 孕悦砸 反应采用 圆园滋造
反应体系袁包括 缘园灶早模板 阅晕粤袁圆滋造 员园 伊 孕悦砸缓冲液袁
园郾 圆滋皂燥造 辕 蕴 内引物袁 园郾 园圆 耀 园郾 园源滋皂燥造 辕 蕴 外 引 物袁
园郾 圆皂皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕袁圆皂皂燥造 辕 蕴 酝早悦造圆 和 员哉 栽葬择 酶遥 孕悦砸
反应采用 栽燥怎糟澡凿燥憎灶程序咱员源暂 袁第一个循环的退火温度
为 远缘益袁每过一个循环温度下降 员益袁员园 个循环后降
至 缘缘益袁然后以 缘缘益为退火温度完成其余 圆苑 个循环遥
增加内引物和外引物的浓度比咱员缘暂和采用 栽燥怎糟澡凿燥憎灶
反应程序可以显著增加 孕悦砸 反应的特异性遥 所有
粤杂孕悦砸 引物在 澡贼贼责院 辕 辕 糟藻凿葬则援 早藻灶藻贼蚤糟泽援 泽燥贼燥灶援 葬糟援 怎噪 辕
责怎遭造蚤糟赃澡贼皂造 辕 责则蚤皂藻则员郾 澡贼皂造 网站在线设计咱员猿暂 袁设计引物
时尽量拉开两条特异扩增产物的大小差距袁并且避免
内引物的 猿爷端第 圆 和第 猿 个碱基和另一条模板的
杂晕孕位点互补袁以免发生非特异性扩增遥
员郾 猿摇 基因测序分析
将 早造员 定位在一较小区域后袁利用 憎憎憎援 早则葬皂藻灶藻援
燥则早上对该区域的注释袁分别对光叶水稻和普通水稻在
该区域中所有候选基因的外显子区段设计引物袁孕悦砸
扩增并对产物测序遥 所选光叶水稻材料为 运月晕栽袁毛
叶水稻材料为中 怨月袁按照 月蚤燥云造怎曾公司的 月蚤燥泽责蚤灶 孕造葬灶贼
郧藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 运蚤贼 的使用说明书提取基因组
阅晕粤袁孕悦砸 反应的试剂 孕赠则燥遭藻泽贼 阅晕粤 孕燥造赠皂藻则葬泽藻 购自
栽葬运葬砸葬公司袁反应体系为 圆缘滋造袁包括院员园园灶早 基因组
阅晕粤渊员郾 缘滋造冤袁员园 伊 孕悦砸 缓冲液 圆郾 缘滋造袁凿晕栽孕泽 圆滋造袁上
下游引物渊员园滋皂燥造 辕 蕴冤各 员滋造袁孕赠则燥遭藻泽贼 阅晕粤 孕燥造赠皂藻则葬泽藻
园郾 员缘滋造袁加 凿凿匀圆韵 补足至 圆缘滋造遥 反应程序院怨源益预变
性 缘皂蚤灶曰 怨源益变性 猿园泽袁缘圆益 耀 缘愿益退火 猿园泽袁苑圆益延
伸 怨园泽袁猿缘 个循环袁苑圆益延伸 缘皂蚤灶遥 孕悦砸产物在 员豫琼
脂糖凝胶中分离袁紫外灯下割胶袁采用 粤曾赠孕则藻责 阅晕粤
凝胶回收试剂盒纯化袁送金斯瑞生物科技有限公司测
序遥 测序结果使用 悦造怎泽贼葬造曾和 月蚤燥藻凿蚤贼进行序列比对分
析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 光叶特性的遗传
在体视显微镜下毛叶水稻叶片沿叶脉和维管束附
近有钩状小刺分布渊图 员鄄葬冤袁谷粒的颖壳上有大量的表
皮毛渊图员鄄糟冤遥 相反光叶水稻叶片表面的钩状小刺和颖
壳上的表皮毛缺失渊图 员鄄遭袁凿冤遥 粤孕怨 伊浙恢 苑怨缘源 杂交
群体的 云员 代单株均为毛叶水稻袁表明光叶对毛叶表现
为隐性遥 在 云圆 代袁光叶单株圆圆缘株袁毛叶单株远缘员株袁符
合 员颐 猿的单基因分离模式遥 在 云猿 代袁光叶单株的后代均
为光叶袁一些毛叶 云圆 单株的后代出现了分离遥
图 员摇 光叶和毛叶水稻的叶片和谷粒表型
云蚤早援 员摇 栽澡藻 责澡藻灶燥贼赠责藻 燥枣 则蚤糟藻 造藻葬增藻泽 葬灶凿 早则葬蚤灶 澡怎造造泽
葬和 糟为毛叶品种袁遭和 凿为光叶品种遥
箭头所示为叶片表面的钩状小刺遥
葬 葬灶凿 糟 葬则藻 糟燥灶增藻灶贼蚤燥灶葬造 糟怎造贼蚤增葬则泽 渊憎蚤贼澡 澡葬蚤则冤袁 遭 葬灶凿 凿 葬则藻 早造葬遭则燥怎
渊澡葬蚤则造藻泽泽冤 糟怎造贼蚤增葬则泽援 栽澡藻 葬则则燥憎 泽澡燥憎泽 贼则蚤糟澡燥皂藻
蚤灶 贼澡藻 怎责责藻则 泽蚤凿藻 燥枣 造藻葬增藻泽
园怨园员
摇 远 期 水稻光叶性状基因 早造员 的精细定位与候选基因分析
圆郾 圆摇 光叶基因的精细定位
圆郾 圆郾 员摇 杂杂砸 标记 摇 根据 郧砸粤酝耘晕耘渊憎憎憎援 早则葬皂藻灶藻援
燥则早冤上的信息袁 早造员 基因与第 缘 染色体 砸云蕴孕 标记
砸郧缘缘远 和 杂杂砸 标记 砸酝员猿 相连锁遥 利用生物信息学
手段袁推测 早造员 的物理位置可能在第 缘 染色体的 源园园噪遭
到 员员郾 远酝遭之间遥 为此袁在该区域选择 远怨 个 杂杂砸标记
对光叶和毛叶基因池及亲本 阅晕粤 进行分析袁共获得 怨
个与目标基因连锁的 杂杂砸多态性标记渊表 员冤袁并把 早造员
定位在 砸酝员苑苑缘怨 渊园郾 缘源酝遭冤和 砸酝员苑愿猿员 渊员郾 远缘酝遭冤之
间渊图 圆鄄葬冤遥
表 员摇 水稻第 缘 染色体上与光叶基因 早造员 连锁的 杂杂砸标记
栽葬遭造藻 员摇 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 造蚤灶噪藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 早造葬遭则燥怎泽 造藻葬枣 葬灶凿 澡怎造造 早藻灶藻 早造员 燥灶 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 缘 燥枣 则蚤糟藻
杂杂砸标记
杂杂砸 皂葬则噪藻则
基因组位置
早藻灶燥皂蚤糟 责燥泽蚤贼蚤燥灶
渊酝遭冤
上游渊云冤和下游渊砸冤引物序列
枣燥则憎葬则凿渊云冤 葬灶凿 则藻增藻则泽藻 渊砸冤 责则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻 渊缘爷鄄猿爷冤
孕悦砸片段
葬皂责造蚤糟燥灶
泽蚤扎藻 渊遭责冤
砸酝员猿 员员郾 缘愿 云院 栽悦悦粤粤悦粤栽郧郧悦粤粤郧粤郧粤郧粤郧 员源员
砸院 郧郧栽郧郧悦粤栽栽悦郧粤栽栽悦悦粤郧
砸酝员园愿怨 缘郾 猿远 云院 悦粤郧粤粤郧郧粤栽栽粤栽悦栽悦郧粤栽粤悦悦 圆猿怨
砸院 粤粤栽粤郧郧郧悦栽栽郧粤粤粤栽粤粤粤栽栽郧
砸酝员苑怨怨园 源郾 远猿 云院 栽悦栽悦悦粤悦粤悦粤粤栽粤悦粤粤郧栽悦粤悦郧 圆怨怨
砸院 郧粤郧粤郧栽栽郧郧粤郧粤郧粤粤粤郧郧粤粤郧郧
砸酝员苑怨远圆 猿郾 愿员 云院 悦粤郧悦粤粤粤栽悦栽悦栽粤栽悦粤悦栽郧悦粤粤悦悦 圆怨缘
砸院 郧悦栽粤郧粤栽郧粤悦悦粤悦悦栽郧悦栽郧栽粤悦郧
砸酝员苑怨缘源 猿郾 缘怨 云院 粤栽栽栽悦粤郧栽粤悦粤粤郧郧悦粤悦悦悦粤栽郧悦 员怨愿
砸院 郧栽粤郧粤悦郧粤郧郧郧粤郧栽粤悦悦粤粤悦栽栽郧悦
砸酝员苑怨缘园 猿郾 源怨 云院 郧郧粤粤粤栽郧栽郧悦粤栽粤郧郧栽粤郧栽栽悦粤郧郧 猿园圆
砸院 郧粤郧栽栽郧郧郧粤粤悦栽郧悦栽粤悦粤粤粤悦郧
砸酝员苑怨园猿 圆郾 愿远 云院 悦悦栽悦悦栽悦粤郧郧郧悦悦粤粤粤悦粤栽栽郧悦 圆缘怨
砸院 栽栽郧粤郧栽郧郧悦栽悦栽郧郧粤悦悦栽栽悦栽栽悦粤郧悦
砸酝员苑愿猿员 员郾 远缘 云院 栽悦郧粤粤郧栽粤郧粤郧悦粤郧悦郧粤悦粤栽郧郧 圆源怨
砸院 悦郧栽郧栽栽悦粤栽悦粤栽悦粤栽悦粤栽悦悦栽郧栽悦悦
砸酝员苑苑缘怨 园郾 缘源 云院 悦栽栽郧粤栽悦粤郧栽栽粤粤粤郧粤郧悦悦粤郧栽悦栽郧悦 圆圆源
砸院 栽栽悦粤粤郧郧悦粤郧粤悦粤粤悦粤粤悦粤栽郧郧
圆郾 圆郾 圆摇 陨灶阅藻造标记摇 为获得新的分子标记袁根据日本
晴和 怨猿鄄员员 在 园郾 缘源酝遭 和 员郾 远缘酝遭 之间基因组序列的
多态性袁在相关基因位点设计 员圆 个 陨灶阅藻造 标记袁发现 缘
个标记在 粤孕怨 和浙恢 苑怨缘源 之间存在多态性渊表 圆冤遥
其中在 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆源员园 位点的标记 陨灶阅怨 多态性差
异仅为 源 个碱基袁须用毛细管核酸分析系统加以鉴定遥
利用这 缘 个 陨灶阅藻造 标记对 杂杂砸 重组型单株进行分析袁
结果有 员 个单株在标记 陨灶阅怨渊苑苑园郾 缘噪遭冤处重组袁猿 个单
株在标记 陨灶阅缘渊怨怨缘噪遭冤处重组袁在标记 陨灶阅源渊愿缘远噪遭冤
处已没有任何重组单株袁从而将 早造员 的范围缩小至第 缘
染色体的 苑苑园郾 缘 耀 怨怨缘噪遭之间渊图 圆鄄遭冤遥
表 圆摇 水稻第 缘 染色体上与光叶基因 早造员 连锁的 陨灶阅藻造标记
栽葬遭造藻 圆摇 陨灶阅藻造 皂葬则噪藻则泽 造蚤灶噪藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 早造葬遭则燥怎泽 造藻葬枣 葬灶凿 澡怎造造 早藻灶藻 早造员 燥灶 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 缘 燥枣 则蚤糟藻
陨灶阅藻造标记
陨灶阅藻造 皂葬则噪藻则
所在基因
责燥泽蚤贼蚤燥灶藻凿 造燥糟怎泽
基因组位置
早藻灶燥皂蚤糟
责燥泽蚤贼蚤燥灶 渊噪遭冤
上游渊云冤与下游渊砸冤引物序列
枣燥则憎葬则凿 渊云冤 葬灶凿 则藻增藻则泽藻 渊砸冤 责则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻 渊缘爷鄄猿爷冤
孕悦砸片段
葬皂责造蚤糟燥灶 泽蚤扎藻 渊遭责冤
陨灶阅圆 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆圆源园 远怨员 栽悦悦郧栽粤悦栽悦悦悦栽悦悦粤郧栽栽栽悦粤 猿远圆
栽郧郧悦栽悦悦栽栽悦悦粤栽栽栽悦栽悦粤栽栽
陨灶阅源 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆缘猿园 愿缘远 悦栽悦粤粤栽郧粤悦粤栽悦悦栽粤郧悦郧粤悦粤粤 源圆苑
悦悦粤粤粤栽悦粤粤悦栽郧悦悦栽粤栽粤粤粤悦粤悦栽
陨灶阅缘 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆愿圆园 怨怨缘 栽栽悦悦悦粤粤郧粤栽悦郧郧悦粤悦栽悦悦 猿苑园
栽郧悦郧栽悦栽悦粤栽悦粤郧悦粤粤悦悦悦
陨灶阅怨 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆源员园 苑苑园郾 缘 栽郧郧悦栽悦悦粤郧栽栽栽粤郧郧栽郧栽粤栽栽郧 员远苑
栽粤郧粤栽粤粤粤粤郧粤粤悦悦悦粤粤粤郧郧粤 粤栽郧
陨灶阅远 蕴韵悦赃韵泽园缘早园猿圆园园 员圆苑缘 栽栽郧栽栽粤郧郧粤粤郧悦粤粤悦栽悦栽郧郧郧 员缘员
栽郧郧悦郧悦粤粤栽粤粤粤栽郧郧郧粤栽粤
员怨园员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
圆郾 圆郾 猿摇 栽藻贼则葬鄄责则蚤皂藻则 粤砸酝杂 孕悦砸 标记摇 在水稻第 缘 染
色体的 苑苑园郾 缘噪遭 到 怨怨缘噪遭 区段袁根据日本晴和 怨猿鄄员员
之间的 杂晕孕共设计了 苑 个 粤杂孕悦砸 标记遥 经鉴定发现
有 猿 个标记在双亲间存在多态性渊表 猿冤遥 对 陨灶阅藻造 标
记显示为重组型的 源 个单株的分析表明袁其中有 圆 个
单株在标记 粤杂远渊怨苑苑郾 员噪遭冤处仍为杂合状态袁而在标记
粤杂源渊怨员怨郾 远噪遭冤处表现为纯合突变型遥 据此 早造员 基因
被定位在 苑苑园郾 缘噪遭到 怨苑苑郾 员噪遭间的约 圆园远郾 远噪遭 区段内
渊图 圆鄄糟冤遥
图 圆摇 水稻光叶基因 早造员 的精细定位
云蚤早援 圆摇 云蚤灶藻 皂葬责责蚤灶早 燥枣 则蚤糟藻 早造葬遭则燥怎泽 造藻葬枣 葬灶凿 澡怎造造 早藻灶藻 早造员
每个标记名称下方的第一个数字表示该标记在第 缘 染色体上的物理位置遥 葬院用 杂杂砸标记将 早造员 定位在第 缘 染色体上曰遭袁糟院分别利用
陨灶阅藻造标记和 粤杂 原 孕悦砸标记缩小 早造员 定位区间袁标记物理距离下方的数字为检测出的重组单株数目曰 凿院 蕴蚤等咱员园暂对 早造员 的定位结果曰
藻院 在 郧砸粤酝耘晕耘中 陨阅猿猿 和 粤杂远 之间注释的基因遥
栽澡藻 枣蚤则泽贼 灶怎皂遭藻则 遭藻造燥憎 藻葬糟澡 皂葬则噪藻则 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 蚤贼泽 责澡赠泽蚤糟葬造 责燥泽蚤贼蚤燥灶 蚤灶 悦澡则援 缘 援 孕葬灶藻造 葬院 酝葬责责蚤灶早 燥枣 贼澡藻 早造员 早藻灶藻 燥灶 悦澡则援 缘 怎泽蚤灶早 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽曰
孕葬灶藻造 遭 葬灶凿 糟院 阅藻造蚤皂蚤贼蚤灶早 贼澡藻 早造员 早藻灶藻 怎泽蚤灶早 陨灶阅藻造 葬灶凿 粤杂孕悦砸 皂葬则噪藻则泽 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁 贼澡藻 灶怎皂遭藻则泽 遭藻造燥憎 贼澡藻 责澡赠泽蚤糟葬造 责燥泽蚤贼蚤燥灶泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 贼澡藻
灶怎皂遭藻则 燥枣 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造泽曰 孕葬灶藻造 凿院 酝葬责责蚤灶早 则藻泽怎造贼泽 燥枣 早造员 则藻责燥则贼藻凿 蚤灶 蕴蚤袁 藻贼 葬造咱员园暂 曰 孕葬灶藻造 藻院 粤灶灶燥贼葬贼藻凿 造燥糟蚤 蚤灶 贼澡藻 则藻早蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶
陨阅猿猿 葬灶凿 粤杂远 蚤灶 贼澡藻 郧砸粤酝耘晕耘 凿葬贼葬遭葬泽藻援
圆郾 猿摇 候选基因分析
在完成上述定位后袁最近 蕴蚤等咱员园暂将 早造员定位于第 缘
染色体 圆个 陨灶阅藻造 标记 陨阅猿猿 和 陨阅源源 之间袁物理距离为
怨苑员 耀员园圆远噪遭之间的区域渊图 圆鄄凿冤遥 综合该报道与本试
验结果袁早造员应该位于 怨苑员噪遭到 怨苑苑郾 员噪遭间遥 根据 憎憎憎援
早则葬皂藻灶藻援 燥则早网站袁该区域有 源 个注释的基因袁分别为
蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑源园尧蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘园尧蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源和
蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑远园曰其中 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘园 序列包含在
蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源以内渊图 圆鄄藻冤遥
对 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑源园尧蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源 和 蕴韵悦赃
韵泽园缘早园圆苑远园 的外显子序列设计多对引物加以扩增袁并
进行测序遥 结果发现袁在这 猿 个基因的外显子区域序
列高度保守袁中 怨月尧日本晴渊毛叶冤和 运月晕栽渊光叶冤之
间仅在 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源 第 圆 个外显子处有一 粤 辕 栽的
杂晕孕袁光叶水稻序列在该处由 粤 突变为 栽袁其他序列完
全相同遥
猿摇 讨论
研究水稻的光叶特性不但具有一定的生产意义袁
圆怨园员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员员袁圆缘渊远冤院员园愿愿 耀 员园怨猿
同时对研究植物细胞分化尧毛状体发育和形态建成也
有重要的利用价值遥 本研究将 早造员 定位在约 愿噪遭 的区
段袁找到了光叶和毛叶水稻在该区段外显子区域的唯
一一个 杂晕孕袁从而大大推进了光叶基因遗传控制的研
究袁对最终克隆光叶基因和开展光叶水稻育种具有重
要意义遥
表 猿摇 水稻第 缘 染色体上与光叶基因 早造员 连锁的 粤杂孕悦砸标记
栽葬遭造藻 猿摇 粤杂孕悦砸 皂葬则噪藻则泽 造蚤灶噪藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 早造葬遭则燥怎泽 造藻葬枣 葬灶凿 澡怎造造 早藻灶藻 早造员 燥灶 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 缘 燥枣 则蚤糟藻
粤杂孕悦砸标记
皂葬则噪藻则
基因组位置
早藻灶燥皂蚤糟 责燥泽蚤贼蚤燥灶
渊噪遭冤
杂晕孕
外引物对渊韵云院 上游曰 韵砸院下游冤和内引物对
燥怎贼藻则 责则蚤皂藻则 责葬蚤则泽 渊韵云院 枣燥则憎葬则凿曰 韵砸院 则藻增藻则泽藻冤
葬灶凿 蚤灶灶藻则 责则蚤皂藻则 责葬蚤则泽 渊缘爷鄄猿爷冤鄢
孕悦砸片段
葬皂责造蚤糟燥灶 泽蚤扎藻 渊遭责冤
粤杂源 怨员怨郾 远 栽 辕 悦 韵云院 粤郧栽栽悦粤郧粤粤粤栽栽粤栽郧栽栽栽郧郧栽栽悦栽栽悦栽郧栽悦 外院源怨缘
韵砸院 粤粤粤栽栽悦粤悦粤栽栽郧栽郧粤郧粤粤悦悦粤栽栽粤粤粤悦粤粤 悦院 圆缘苑
栽院 粤粤郧栽悦粤悦悦粤悦栽郧粤粤粤粤粤粤栽粤郧郧悦悦栽粤粤 栽院 圆怨苑
悦院 郧郧悦粤郧粤粤粤郧粤悦栽粤郧郧悦悦栽栽郧栽粤栽栽郧
粤杂远 怨苑苑郾 员 栽 辕 郧 韵云院 栽栽栽栽栽栽郧粤栽悦栽栽粤栽栽悦悦悦栽郧栽栽粤悦粤悦悦郧 外院缘怨员
韵砸院 粤粤栽栽粤郧栽郧栽栽粤粤粤悦粤栽悦悦郧粤栽郧栽郧郧悦粤 郧院 猿源园
栽院 郧郧悦粤郧悦栽粤粤郧郧栽郧郧栽郧栽栽栽郧郧粤栽粤 栽院 猿园远
郧院 悦栽粤栽郧郧悦栽粤悦悦悦栽悦悦栽郧悦 粤郧郧栽栽粤悦
粤杂苑 怨愿怨郾 园 悦 辕 郧 韵云院粤郧悦粤粤郧粤郧粤粤栽悦郧栽栽粤粤郧粤栽栽悦粤悦粤 外院猿愿猿
韵砸院栽粤栽粤栽粤粤栽悦郧悦粤郧悦悦栽栽悦栽栽栽郧栽栽悦 悦院 员怨源
悦院 郧栽郧栽悦粤粤粤栽栽悦郧粤粤栽郧栽粤栽栽栽郧郧悦粤粤郧 郧院 圆源源
郧院 粤悦栽悦栽栽郧粤粤栽栽粤粤粤栽栽粤郧栽郧粤栽栽悦悦粤悦悦
注院鄢内引物对包含 圆 个对应 杂晕孕的特异性引物袁如 栽 辕 悦 对应的内引物分别记为 栽和 悦遥
晕燥贼藻院陨灶贼藻则灶葬造 责则蚤皂藻则泽 糟燥灶贼葬蚤灶 贼憎燥 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早 杂晕孕鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则泽袁 枣燥则 藻曾葬皂责造藻袁 栽 辕 悦 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早 责则蚤皂藻则泽 憎藻则藻 凿藻灶燥贼藻凿 葬泽 栽 葬灶凿 悦援
摇 摇 在基因精细定位和图位克隆研究中袁采用合适的
技术开发多态性标记十分重要遥 本试验中袁除采用常
规的 杂杂砸标记外袁还针对性地开发了 陨灶阅藻造 标记袁采用
毛细管电泳技术等加以检测袁检出小至两个碱基的差
异袁从而提高了精细定位的能力遥 杂晕孕 是最丰富的分
子标记袁本试验成功采用四引物 粤砸酝杂 孕悦砸 技术检测
杂晕孕位点袁获得了新的 粤杂孕悦砸标记袁进一步缩小了 早造员
基因的区段袁提高了定位的精度遥
在基因定位试验中袁采用两个或多个遗传群体有
利于将目标性状定位到更小的区域遥 在本试验中袁除
粤孕怨 伊浙恢 苑怨缘源 这一遗传群体外袁还使用了浙 苑猿猿 伊
运月晕栽的重组自交系袁但由于未能提供更好的定位信
息袁在本文中没有加以具体分析遥 蕴蚤 等咱员园暂利用 怨猿鄄员员
光叶突变体与 园圆源圆愿渊毛叶冤的杂交群体将 早造员 定位在
第 缘 染色体的 怨苑员 耀 员园圆缘噪遭 间袁而本试验则将其定位
在 苑苑园郾 缘 耀 怨苑苑郾 员噪遭间袁综合这两项研究袁早造员 被定位在
了小于 愿噪遭的区段遥 这两项独立的试验不但结果相互
印证袁而且大大提高了定位的精度袁间接地证明了不同
遗传群体在基因精细定位中的价值遥
在 早造员 被定位的约 愿噪遭区段内袁郧砸粤酝耘晕耘只注释
了 源 个基因袁而且 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘园 基因无内含子袁其
外显子全长与 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源 的一个外显子重叠
渊图 员鄄藻冤袁因此对 猿 个基因的外显子区段进行了测序遥
结果发现该区段不同品种间序列十分保守袁即使在籼
粳品种间也只发现一个碱基差异遥 对这种高度保守的
特性是否与进化较迟有关尚需要更多的研究加以分
析遥 本试验毛叶品种和光叶品种在 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源
的一个外显子中发现了 粤 辕 栽 差异袁与 蕴蚤 等咱员园暂在光叶
突变体与其亲本 怨猿鄄员员 之间发现的差异一致袁因此袁本
文的结果支持 蕴蚤 等咱员园暂有关 蕴韵悦赃韵泽园缘早园圆苑缘源 为控制
光叶性状基因的假设遥
在拟南芥上迄今已经定位并克隆多个与毛状体发
育相关的调控基因袁但在单子叶植物中尚未克隆相关
基因袁对其毛状体发育的研究也鲜有报导遥 本试验通
过对水稻光叶性状基因 早造员 的定位研究袁获得了一个
极有可能是控制光叶性状的基因袁研究结果将对植物
尤其是单子叶植物毛状体发育调控的研究具有一定的
指导和参考价值遥
致谢院浙江大学 怨愿缘 农业生物与环境科技创新平
台的李源龙老师为本试验提供全自动毛细管核酸分析
仪的技术支持袁并且为该技术的使用提供宝贵指导袁谨
致谢意遥
参考文献院
咱 员 暂摇 赵成章袁杨长登袁吴连斌袁戚秀芳袁黄发松袁胡培松袁罗摇 矩援 光
身稻的培养特性研究咱允暂 援 作物学报袁 员怨怨怨袁 圆缘渊员冤院 愿圆 原 愿缘
咱 圆 暂摇 曾亚文袁 申时全袁 李自超袁 张洪亮袁 文国松援 云南地方稻种不同
分类方法的比较研究咱 允暂 援 西南农业大学学报袁 圆园园圆袁 圆源渊缘冤院
猿愿缘 原 猿愿愿袁 猿怨圆
渊下转第 员员怨园 页冤
猿怨园员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员员袁圆缘渊远冤院员员愿源 耀 员员怨园
咱 愿 暂 摇 运蚤皂 阅 匀袁 允燥 悦袁再燥燥噪 匀 杂袁 藻贼 葬造援 耘灶澡葬灶糟藻皂藻灶贼 燥枣 责则藻泽藻则增葬贼蚤燥灶
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 酝藻躁怎袁 葬灶凿 蚤灶贼藻则皂藻凿蚤葬贼藻 皂葬贼藻则蚤葬造 枣燥则 运燥则藻葬灶 造藻早怎皂藻鄄
遭葬泽藻凿 枣藻则皂藻灶贼藻凿 泽燥赠 泽葬怎糟藻袁 运葬灶躁葬灶早袁 遭赠 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶咱 允暂 援 砸葬凿蚤葬贼蚤燥灶
孕澡赠泽蚤糟泽 葬灶凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁圆园园圆袁远源院猿员苑 原 猿圆圆
咱 怨 暂 摇 郧月 辕 栽 缘园园怨郾 缘源鄄圆园园猿郾 酱腌菜卫生标准的分析方法咱杂暂
咱员园暂 摇 悦怎泽澡皂葬灶 阅 宰袁悦澡藻怎灶早 匀 杂援 杂责藻糟贼则燥皂藻贼则蚤糟 葬泽泽葬赠 葬灶凿 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣
葬灶早蚤燥贼藻灶泽蚤灶 糟燥灶增藻则贼蚤灶早 藻灶扎赠皂藻 燥枣 则葬遭遭蚤贼 造怎灶早 咱 允 暂 援 月蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造
孕澡葬则皂葬糟燥造燥早赠袁员怨苑员袁圆园院员远猿苑 原 员远源苑
咱员员暂 摇 月造燥蚤泽 酝 杂援 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 凿藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 遭赠 贼澡藻 怎泽藻 燥枣 葬 泽贼葬遭造藻 枣则藻藻
则葬凿蚤糟葬造咱允暂 援 晕葬贼怎则藻袁员怨缘愿袁员愿员院员员怨怨 原 员圆园园
咱员圆暂摇 月藻灶扎蚤藻 陨 云 云袁杂贼则葬蚤灶 允 允援 栽澡藻 枣藻则则蚤糟 则藻凿怎糟蚤灶早 葬遭蚤造蚤贼赠 燥枣 责造葬泽皂葬 葬泽 葬
皂藻葬泽怎则藻 燥枣 野粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 孕燥憎藻则冶院 栽澡藻 云砸粤孕 葬泽泽葬赠援 粤灶葬造赠贼蚤糟葬造咱允暂 援
月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁员怨怨远袁圆猿怨院苑园 原 苑远
咱员猿暂摇 晕藻灶藻 杂 孕袁灾葬噪蚤造 哉 运袁杂则藻藻灶蚤增葬泽葬灶 粤援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 早葬皂皂葬 陨则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶
则藻凿 早则葬皂 渊 悦葬躁葬灶怎泽糟葬躁葬灶冤 责则燥贼藻蚤灶 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 云燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻袁
员怨苑缘袁源园院愿员缘 原 愿员怨
咱员源暂 摇 匀葬泽泽葬灶 酝 陨援 耘造藻糟贼则燥责澡燥则藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶泽 枣则燥皂 糟澡蚤糟噪藻灶 葬枣贼藻则
蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 葬灶凿 凿怎则蚤灶早 糟燥造凿 泽贼燥则葬早藻咱 允暂 援 云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁员怨怨园袁猿缘院
圆远猿 原 圆苑远
咱员缘暂摇 刘春泉袁朱佳廷袁赵永富袁张卫东袁金宇东袁季摇 萍袁严晓明援 冷冻
虾仁辐照保鲜研究咱允暂 援核农学报袁圆园园源袁员愿渊猿冤院圆员远 原 圆圆园
咱员远暂摇 悦澡燥蚤 允 陨袁运蚤皂 匀鄄允袁运蚤皂 允鄄匀袁藻贼 葬造援 悦澡葬灶早藻泽 蚤灶 糟燥造燥怎则 葬灶凿 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼
葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 匀蚤扎蚤噪蚤葬 枣怎泽蚤枣燥则皂蚤泽 糟燥燥噪蚤灶早 凿则蚤责泽 遭赠 早葬皂皂葬 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶
咱允暂 援 云燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁圆园员园袁源猿院员园苑源 原 员园苑愿
咱员苑暂摇 蕴藻藻 允 宰袁运蚤皂 允 运袁杂则蚤灶蚤增葬泽葬灶 孕袁藻贼 葬造援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 早葬皂皂葬 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶
皂蚤糟则燥遭蚤葬造 葬灶葬造赠泽蚤泽袁 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 泽怎早葬则 糟燥灶贼藻灶贼 葬灶凿 糟燥造燥则 燥枣
则藻葬凿赠鄄贼燥鄄怎泽藻 贼葬皂葬则蚤灶凿 躁怎蚤糟藻 凿怎则蚤灶早 泽贼燥则葬早藻 咱 允暂 援 云燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿
栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁圆园园怨袁源圆院员园员 原 员园缘
咱员愿暂摇 杂燥灶早 栽 匀袁运蚤皂 阅 匀袁孕葬则噪 月 允袁藻贼 葬造援 悦澡葬灶早藻泽 蚤灶 皂蚤糟则燥遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿
早藻灶藻则葬造 择怎葬造蚤贼赠 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 早葬皂皂葬 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 运葬灶躁葬灶早 葬灶凿
杂澡燥赠怎咱允暂 援 运燥则藻葬灶 允燥怎则灶葬造 燥枣 云燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁圆园园员袁
猿猿院猿猿愿 原 猿源源
咱员怨暂摇 朱佳廷袁谢宗传袁邢小黑袁赵永富袁 李正魁袁 张卫东袁 吴摇 雷袁 金
摇 捷袁 何摇 旭袁 田金余援高剂量辐照对银杏果仁营养成分的影响
咱允暂 援核农学报袁圆园园圆袁员远渊缘冤院圆苑圆 原 圆苑缘
咱圆园暂摇 运蚤皂 匀 允袁悦澡燥蚤 允 陨袁运蚤皂 阅 允袁藻贼 葬造援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 蚤燥灶蚤扎蚤灶早 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶 贼澡藻
责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 藻贼澡葬灶燥造 藻曾贼则葬糟贼 枣则燥皂 澡蚤扎蚤噪蚤葬 枣怎泽蚤枣燥则皂蚤泽
糟燥燥噪蚤灶早 凿则蚤责泽咱允暂 援 粤责责造蚤藻凿 砸葬凿蚤葬贼蚤燥灶 葬灶凿 陨泽燥贼燥责藻泽袁 圆园园怨袁 远苑院 员缘园怨
原 员缘员圆
咱圆员暂摇 允燥 悦袁杂燥灶 允 匀袁蕴藻藻 匀 允袁藻贼 葬造援 陨则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 枣燥则 糟燥造燥则 则藻皂燥增葬造
葬灶凿 责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 早则藻藻灶 贼藻葬 造藻葬增藻泽 藻曾贼则葬糟贼咱允暂 援 砸葬凿蚤葬贼蚤燥灶 孕澡赠泽蚤糟泽 葬灶凿
悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁圆园园猿袁远远院员苑怨 原 员愿源
咱圆圆暂摇 粤澡灶 匀 允袁运蚤皂 允 匀袁允燥 悦袁藻贼 葬造援 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 责澡赠贼蚤糟 葬糟蚤凿
葬灶凿 燥贼澡藻则 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼泽 枣燥则 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠咱 允暂 援 云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁
圆园园源袁愿愿院员苑猿 原 员苑愿
渊责任编辑摇 高美须摇 裴摇 颖冤
蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱蕱
渊上接第 员园怨猿 页冤
咱 猿 暂 摇 郭龙彪袁 罗利军袁 钟代彬袁 余新桥袁 梅捍卫袁 王一平袁 应存山援
美国光壳稻品种农艺性状评价及其改良和利用咱 允暂 援 浙江农业
科学袁 员怨怨怨袁 缘院 圆园员 原 圆园远
咱 源 暂 摇 普 摇 莉袁 索金凤袁 薛勇彪援 植物表皮毛发育的分子遗传控制
咱允暂 援 遗传学报袁 圆园园猿袁 猿园渊员员冤院 员园苑愿 原 员园愿源
咱 缘 暂摇 胡培松袁唐绍清袁罗摇 炬袁黄发松援 美国光身稻品种的利用与超
高产品种的选育咱允暂 援 作物学报袁 员怨怨怨袁 圆缘渊员冤院 猿圆 原 猿愿
咱 远 暂摇 张建新袁 黄建鸿袁 饶鸣钿袁 唐晓东袁 程天杰袁 洪伟雄援 水稻籼光
交和籼籼交杂种优势的初步研究咱允暂 援 亚热带农业研究袁圆园园远袁圆
渊猿冤院 员远员 原 员远源
咱 苑 暂 摇 栽葬噪藻凿葬 运援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 葬 早造葬遭则燥怎泽灶藻泽泽 早藻灶藻袁 早造员袁 燥灶 葬早则燥灶燥皂蚤糟 贼则葬蚤贼泽
咱允暂 援 砸蚤糟藻 郧藻灶藻贼蚤糟泽 晕藻憎泽造藻贼贼藻则袁 员怨愿缘袁 圆院 苑源
咱 愿 暂 摇 李金军袁 林正魁袁 陈鸿藻袁 徐美玲援 水稻品种 砸蚤糟燥 晕燥援 员 光叶特
性的遗传咱允暂 援 浙江农业学报袁 员怨怨猿袁 缘渊源冤院 圆猿猿 原 圆猿源
咱 怨 暂 摇 再怎 在 匀袁 酝糟悦燥怎糟澡 杂 砸袁 栽葬灶噪泽造藻赠 杂 阅袁 运蚤灶燥泽澡蚤贼葬 栽袁 杂葬贼燥 杂援
粤泽泽燥糟蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 砸云蕴孕 皂葬则噪藻则泽 蚤灶 则蚤糟藻 渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬
蕴援 冤 咱允暂 援 郧藻灶燥皂藻袁 员怨怨缘袁 猿愿渊猿冤院 缘远远 原 缘苑源
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