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Effects of Heavy Ion Radiation on Oocytes and Early Development of In Vitro Fertilization Eggs in Sheep

重离子束辐照对绵羊卵母细胞及体外受精卵早期发育的影响


试验探索重离子束辐照对绵羊卵母细胞的体外成熟及体外受精卵早期胚胎发育的影响。用不同剂量的重离子束辐照绵羊卵母细胞和精液,观察卵母细胞体外成熟率及体外受精后早起胚胎的卵裂率、桑椹胚率及囊胚率。试验结果显示:与对照组相比,1.0、1.5Gy辐射可以明显提高绵羊卵母细胞的体外成熟率(p<0.01);重离子辐照绵羊精液和卵母细胞并做体外受精后,早期胚胎发育有着显著变化。当用0.5、1.0Gy剂量辐照精液时,绵羊早期胚胎的卵裂率和桑葚胚率显著升高(p<0.05),囊胚率无显著变化,1.5 Gy剂量,卵裂率显著提高(p<0.05),2.0 Gy剂量,卵裂率、桑葚胚率、囊胚发育率均极显著降低(p<0.01);当重离子束辐照卵母细胞时,0.5、1.0Gy剂量组的卵裂率、桑葚胚率和囊胚发育率显著升高(p<0.05),而2.0Gy剂量组的卵裂率和桑葚胚发育率极显著降低(p<0.01),而囊胚发育率为0。结果表明低剂量的重离子辐照绵羊精液、卵母细胞,对体外受精和早期胚胎发育具有明显的促进作用,而高剂量辐照则抑制细胞的生长发育。


全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊猿冤院园源圆猿 耀 园源圆愿允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园源鄄园猿摇 接受日期院圆园员猿鄄园怨鄄园远
基金项目院甘肃省农牧厅优质转基因肉绵羊新品种培育渊圆园员员扎曾园愿园园愿鄄园园远冤
作者简介院常卫华袁男袁主要从事临床兽医学产科研究遥 耘鄄皂葬蚤造院糟澡葬灶早憎藻蚤澡怎葬员员圆岳 员远猿援 糟燥皂曰
徐燕霞袁女袁主要从事绵羊生殖细胞及体外早期胚胎发育的研究遥 耘 原 皂葬蚤造院员愿怨园怨源愿怨愿苑猿岳 员远猿援 糟燥皂遥 同为第一作者遥
通讯作者院张勇袁男袁教授袁主要从事兽医产科学和发育生物学的研究遥 耘鄄皂葬蚤造院扎澡赠糟澡赠岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤园猿鄄园源圆猿鄄园远
重离子束辐照对绵羊卵母细胞及体外受
精卵早期发育的影响
常卫华员 摇 徐燕霞圆 摇 王摇 珂员 摇 胡俊杰员 摇 张摇 红猿袁源 摇 曹会萍圆
马呈瑞员 摇 张摇 晶员 摇 张摇 勇员
渊员 甘肃农业大学动物医学院袁甘肃 兰州摇 苑猿园园苑园曰圆 甘肃农业大学生命科学技术学院曰甘肃 兰州摇 苑猿园园苑园曰
猿中国科学院近代物理研究所 辕中国科学院重离子束辐射生物医学重点实验室袁甘肃 兰州摇 苑猿园园园园冤
摘摇 要院试验探索重离子束辐照对绵羊卵母细胞的体外成熟及体外受精卵早期胚胎发育的影响遥 用不同
剂量的重离子束辐照绵羊卵母细胞和精液袁观察卵母细胞体外成熟率及体外受精后早起胚胎的卵裂率尧
桑椹胚率及囊胚率遥 试验结果显示院与对照组相比袁员郾 园尧员郾 缘郧赠辐射可以明显提高绵羊卵母细胞的体外
成熟率渊责 约 园郾 园员冤曰重离子辐照绵羊精液和卵母细胞并做体外受精后袁早期胚胎发育有着显著变化遥 当
用 园郾 缘尧员郾 园郧赠剂量辐照精液时袁绵羊早期胚胎的卵裂率和桑葚胚率显著升高渊责 约 园郾 园缘冤袁囊胚率无显著
变化袁员郾 缘 郧赠剂量袁卵裂率显著提高渊责 约 园郾 园缘冤袁圆郾 园 郧赠剂量袁卵裂率尧桑葚胚率尧囊胚发育率均极显著降
低渊责 约 园郾 园员冤曰当重离子束辐照卵母细胞时袁园郾 缘尧员郾 园郧赠剂量组的卵裂率尧桑葚胚率和囊胚发育率显著升
高渊责 约园郾 园缘冤袁而 圆郾 园郧赠剂量组的卵裂率和桑葚胚发育率极显著降低渊责 约 园郾 园员冤袁而囊胚发育率为 园遥 结
果表明低剂量的重离子辐照绵羊精液尧卵母细胞袁对体外受精和早期胚胎发育具有明显的促进作用袁而
高剂量辐照则抑制细胞的生长发育遥
关键词院重离子辐射曰 卵母细胞曰体外受精曰早期胚胎
阅韵陨院员园援 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 园猿援 园源圆猿
摇 摇 体外受精渊蚤灶 增蚤贼则燥 枣藻则贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶袁陨灾云冤是在体外条件
下模拟动物机体生殖道内环境袁使获能精子与成熟卵
子结合袁完成受精的过程咱员暂 遥 利用体外受精技术不仅
可以揭示受精的本质和原理袁而且更有利于研究胚胎
早期的发育以及分化机理遥 如何将体外受精技术和重
离子辐照相结合来研究重离子对早期胚胎发育的影响
逐渐受到学者们重视遥 张晓铀等咱圆暂试验结果表明袁用
圆郧赠剂量的远园悦燥 原 酌射线辐照心肌细胞后袁细胞内的超
氧化物歧化酶渊杂韵阅冤含量和乳酸脱氢酶渊蕴阅匀冤活性
发生了较大的变化遥 包默阳等咱 猿暂实验证明激光可以
提高精子的超弱化学发光作用袁使精子的代谢活动增
强袁提高精子的获能效果袁从而增加了体外受精率遥 戴
桂馥等咱源暂用远园 悦燥 原 酌 射线对金鱼胚胎进行辐照后袁发
现 园郾 缘 耀 员郾 园郧赠剂量的辐射能够促进胚胎的发育袁但孵
化率却比较低遥 本试验研究了重离子辐射对绵羊卵母
细胞体外成熟及照射生殖细胞经体外受精后对早期胚
胎生长发育的影响袁从而优化绵羊胚胎体外生产条件袁
提高体外胚胎的生产质量遥 为今后重离子辐射哺乳动
物生殖细胞做转基因动物尧培育新品种打下理论基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
绵羊卵巢袁采自兰州市马忠华屠宰场曰鲜精袁采自
兰州渝中种羊场遥
员郾 圆摇 主要药品与试剂
栽悦酝员怨怨尧阅酝耘酝 和胎牛血清购自美国 郧蚤遭糟燥 公司
渊美国冤袁雌激素购自 杂蚤早皂葬 公司袁云杂匀尧蕴匀购自加拿大
猿圆源
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
的 月蚤燥灶蚤糟澡藻公司袁肝素钠尧牛血清白蛋白购自大连宝生
物公司袁其他常规试剂购自甘肃凯驰新达生物技术有
限公司和兰州远景生物技术有限公司遥
员郾 猿摇 卵母细胞的获取及体外培养
将屠宰场采集到的卵巢从保温桶中取出袁用生理
盐水渊预热冤清洗 猿 遍袁然后剪掉输卵管等多余组织遥
把卵巢放入预先准备好的加有 孕月杂渊无 悦葬圆 垣 尧酝早圆 垣 袁同
时加肝素和双抗冤培养皿中袁用刀片切开 圆 耀 愿皂皂的卵
泡袁使卵母细胞随着卵泡液的流出而流出遥 在体式显
微镜下拣出 粤 级尧 月 级 悦韵悦泽 渊卵丘卵母细胞复合
体冤 咱缘暂 袁用洗卵液渊匀 原 员怨怨冤洗 猿 次咱远暂 袁之后放入成熟
液中袁按照试验设计方案进行体外成熟培养遥 培养条
件为院猿愿郾 缘益尧缘豫的 悦韵圆 浓度尧饱和湿度袁培养 圆圆澡遥
员郾 源摇 精液的采集
利用假阴道方法采集公羊精液咱苑暂 袁迅速送到实验
室做活力检测及稀释处理遥 按照精子密度与活力五级
评分标准袁经检测袁本实验所采集的精液密度为中等袁
活力为四级遥
图 员摇 卵母细胞复合体
云蚤早援 员摇 悦韵悦泽院
图 圆摇 第一极体院渊员园 伊圆园冤
云蚤早援 圆摇 孕月 燥枣 云蚤则泽贼 渊员园 伊圆园冤
员郾 缘摇 卵母细胞体外成熟效果的观察
卵母细胞体外成熟的一个重要指标就是卵丘颗粒
细胞的扩散程度袁本试验参考 匀怎灶贼藻则 等咱愿暂的实验方法
将卵母细胞体外成熟后卵丘颗粒细胞的扩展程度分为
猿 级渊图 员冤院员 级院野卵丘颗粒细胞完全扩展冶袁卵丘细
胞团向外扩展至少有 猿 倍裸卵直径大小曰圆 级院野卵丘
颗粒细胞中等扩展冶袁细胞团向外扩展约 圆 倍于裸卵
直径曰猿 级院野卵丘颗粒细胞轻度扩展冶袁卵丘细胞仍紧
紧地围绕在透明带周围遥 第一极体渊图 圆冤也是卵母细
胞体外成熟的一个重要指标院将 悦韵悦泽置于 匀 原 员怨怨 中
吹打 猿皂蚤灶袁再将其放在 园郾 圆缘豫的透明质酸酶中进行吹
打 缘皂蚤灶袁去除卵丘细胞遥 然后在体式显微镜下观察卵
母细胞第一极体排出情况遥
员郾 远摇 体外受精
试验采用 怨远 孔板进行体外受精及培养袁每孔加受
精液 愿园滋蕴袁在培养箱预平衡 圆澡遥 将成熟的卵母细胞
在 月韵液中洗涤 猿 遍渊受精液与获能液相同冤袁放入受
精液中袁然后将 怨远 孔板放回培养箱袁待用遥 将获能处
理的精液放入受精液中袁作用时间 员苑澡遥
员郾 苑摇 早期胚胎的培养
将体外受精 员苑澡 的卵母细胞放入 园郾 圆缘豫的透明
质酸酶中进行吹打 缘皂蚤灶袁以去除卵丘细胞及周围的精
子咱员园暂 袁再用发育液洗涤 猿 遍袁之后放入发育液袁圆源澡 观
察卵裂情况遥 远园澡 后加入颗粒细胞袁并使其在培养基
中的浓度达 员园缘 个窑皂蕴 原员遥
员郾 愿摇 试验设计
试验 员院探索重离子束辐射对绵羊卵母细胞体外
成熟的影响遥 重离子束辐射实验在中国科学院兰州近
代物理研究所的重离子研究装置渊匀藻葬增赠 陨燥灶 砸藻泽藻葬则糟澡
云葬糟蚤造蚤贼赠 蚤灶 蕴葬灶扎澡燥怎袁 匀陨砸云蕴冤 辐照终端进行袁 束流
为圆悦远 垣离子束袁能量为 怨园酝藻灾窑怎 原员袁 蕴耘栽 为 圆愿 噪藻灾窑
滋皂 原员袁吸收剂量率约 园郾 缘郧赠窑皂蚤灶 原员袁将收集到的卵母
细胞分六组袁吸收剂量分别为 园郾 员尧园郾 圆尧园郾 缘尧员郾 园尧员郾 缘尧
圆郾 园郧赠遥 用空气电离室监测剂量袁剂量数据获取由计
算机控制袁所有样品均在室温下进行照射遥 样品照射
完后用保温桶迅速带回实验室并转移至 怨远 孔板中培
养遥 另设未照射对照组遥
试验 圆院探索重离子束辐射精液对早期胚胎发育
的影响遥 将采集到的精液分七组袁吸收剂量率约 园郾 缘
郧赠窑皂蚤灶 原员袁吸收剂量分别是 园尧园郾 员尧园郾 圆尧园郾 缘尧员郾 园尧员郾 缘尧
圆郾 园郧赠袁用 员郾 缘皂蕴离心管分装遥 辐射装置与实验 员 相
同袁所有样品照射都在室温下进行遥 照射完以后用用
冰盒迅速带回实验室并进行处理做体外受精遥
试验 猿院探索重离子束辐射绵羊卵母细胞对早期
源圆源
摇 猿 期 重离子束辐照对绵羊卵母细胞及体外受精卵早期发育的影响
受精卵发育的影响遥 绵羊卵母细胞体外培养 员愿澡袁分
六组进行照射袁吸收剂量率和吸收剂量及试验过程同
试验 员遥 另设未照射对照组遥
员郾 怨摇 数据分析
所有试验均重复 猿 次袁用 杂孕杂杂 员远郾 园 统计软件对
试验数据进行方差分析袁并做多重比较遥
表 员摇 重离子辐射对卵母细胞体外成熟的影响
栽葬遭造藻 员摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 澡藻葬增赠 蚤燥灶 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶 贼澡藻 陨灾酝 燥枣 泽澡藻藻责 燥燥糟赠贼藻泽
辐射剂量
砸葬凿蚤葬贼蚤燥灶 凿燥泽藻 辕 郧赠 园 园郾 员 园郾 圆 园郾 缘 员郾 园 员郾 缘 圆郾 园
卵母细胞总数
栽燥贼葬造 燥枣 燥燥糟赠贼藻泽
圆远 猿园 圆缘 圆愿 猿员 猿园 猿圆
第一极体的释放数
晕怎皂遭藻则 燥枣 孕月
员圆 员源 员圆 员猿 员怨 员苑 员园
成熟率
酝葬贼怎则葬贼藻 则葬贼藻 辕 豫
源远郾 圆 依 园郾 缘员怨远 源远郾 苑 依 园郾 远怨圆愿 源愿郾 园 依 园郾 缘员怨远 源远郾 源 依 园郾 圆猿园怨 远员郾 猿 依 园郾 远怨圆愿葬 缘远郾 苑 依 园郾 圆愿愿苑葬 猿员郾 猿 依 园郾 怨猿圆愿遭
摇 摇 注院葬遭代表差异显著情况袁其中 葬院 责 约 园郾 园员增泽园郧赠曰 遭院 责 约 园郾 园员 增泽园郧赠 袁员郾 园 郧赠遥
摇 摇 晕燥贼藻院葬遭 则藻责则藻泽藻灶贼 泽蚤早蚤灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻袁 葬院 责 约 园郾 园员 增泽 园 郧赠曰 遭院 责 约 园郾 园员 增泽 园 郧赠袁 员 郧赠援
表 圆摇 重离子辐射绵羊精子细胞对早期胚胎发育的影响
栽葬遭造藻 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 藻葬则造赠 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬枣贼藻则 泽澡藻藻责 杂责藻则皂泽 遭赠 澡藻葬增赠 蚤燥灶 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶
剂量
阅燥泽藻 辕 郧赠
卵母细胞数
晕怎皂遭藻则 燥枣 燥燥糟赠贼藻
卵裂数
晕怎皂遭藻则 燥枣
糟造藻葬增葬早藻
卵裂率
悦造藻葬增葬早藻 则葬贼藻 辕

桑葚胚数
晕怎皂遭藻则 燥枣
皂燥则怎造葬
桑葚胚率
酝燥则怎造葬 则葬贼藻
囊胚数
晕怎皂遭藻则 燥枣
遭造葬泽贼怎造葬
囊胚率
月造葬泽贼怎造葬 则葬贼藻
园 员远怨 缘员 猿园郾 员 垣 园郾 猿缘园苑遭月 圆缘 员源郾 愿 垣 园郾 猿源远源遭 员怨 员员郾 圆 垣 园郾 远远源圆葬粤
园郾 员 员员圆 猿愿 猿猿郾 怨 垣 园郾 缘园愿员遭 员远 员源郾 猿 垣 员郾 园猿怨圆遭 员源 员圆郾 缘 垣 园郾 缘员怨远葬粤
园郾 圆 怨圆 猿园 猿圆郾 远 垣 员郾 圆苑园员遭 员源 员缘郾 圆 垣 园郾 远猿缘员遭 员圆 员猿郾 园 垣 园郾 远员苑怨葬粤
园郾 缘 愿员 猿猿 源园郾 苑 垣 园郾 苑圆员怨葬粤 员苑 圆员郾 园 垣 园郾 缘愿员圆葬粤 员员 员猿郾 远 垣 园郾 源远员怨葬粤
员郾 园 员圆源 缘圆 源员郾 怨 垣 园郾 怨圆猿愿葬粤 圆远 圆员郾 园 垣 园郾 源远员怨葬粤 员远 员圆郾 怨 垣 园郾 源远员怨葬粤
员郾 缘 员园远 源源 源员郾 缘 垣 园郾 缘源愿苑葬粤 员怨 员苑郾 怨 垣 员郾 园怨苑园遭 愿 苑郾 缘 垣 园郾 缘源愿苑遭
圆郾 园 员园愿 圆猿 圆员郾 猿 垣 园郾 缘员怨远糟悦 员园 怨郾 猿 垣 园郾 缘源愿苑糟月 圆 员郾 愿缘 垣 园郾 缘猿源员糟月
摇 摇 注院同一列不同小写字母之间表示在 园郾 园缘 水平上差异显著袁不同大写字母之间表示在 园郾 园员 水平上差异及显著遥 下同遥
晕燥贼藻院阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造袁葬灶凿 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟葬责蚤贼葬造 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园员 造藻增藻造 遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 泽葬皂藻
糟燥造怎皂灶援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早援
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 重离子束辐射对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
不同剂量的重离子束照射卵母细胞后对其体外成
熟的影响见表 员遥 从表 员 中可以看出袁员郾 园 和 员郾 缘郧赠辐
照组与对照组相比袁成熟率极显著增加渊 责 约 园郾 园员冤袁
园郾 员尧园郾 圆 尧园郾 缘 郧赠和对照组相比差异不显著袁圆郾 园郧赠 和
对照组相比袁成熟率极显著降低渊责 约园郾 园员冤遥
结果表明院员郾 园 和 员郾 缘郧赠 的剂量照射卵母细胞可
以促进其体外成熟袁而 员郾 园郧赠 的辐射剂量效果最好遥
圆郾 园郧赠高剂量下明显的抑制卵母细胞的体外成熟袁这
可能与高剂量重离子束对细胞 阅晕粤 的双链有一定破
坏作用有关咱员员暂 袁使卵母细胞发生死亡袁从而导致体外
成熟率下降遥
圆郾 圆摇 重离子束辐射精液对早期胚胎发育的影响
不同剂量重离子束辐照绵羊精液并做体外受精
后袁早期胚胎的卵裂率尧桑葚胚率和囊胚率不同遥 从表
圆 可以看出袁园郾 缘尧员郾 园郧赠 剂量组与对照组尧圆郾 园郧赠 剂量
组相比其卵裂率极显著升高渊 责 约 园郾 园员冤袁而与 园郾 员尧
园郾 圆郧赠剂量组相比卵裂率显著升高渊 责 约 园郾 园缘冤曰园郾 缘尧
员郾 园郧赠剂量组与对照组尧园郾 员尧园郾 圆尧员郾 缘郧赠 剂量组相比袁
桑葚胚率显著升高渊 责 约 园郾 园缘冤袁而与 圆郾 园郧赠 剂量组相
比极显著升高渊 责 约 园郾 园员冤曰员郾 缘郧赠 剂量组与对照组尧
缘圆源
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
园郾 员尧园郾 圆尧园郾 缘尧员郾 园郧赠 剂量组相比袁囊胚率显著下降渊 责
约 园郾 园缘冤袁而 圆郾 园郧赠 剂量组与对照组相比其囊胚率极
显著下降渊责 约园郾 园员冤遥
结果表明袁园郾 缘尧员郾 园郧赠 剂量辐照精液袁绵羊早期胚
胎的卵裂率尧桑葚胚率显著升高袁囊胚率无显著变化袁
员郾 缘郧赠剂量辐照精液袁卵裂率显著提高袁桑葚胚率和囊
胚率显著降低袁圆郾 园郧赠剂量辐照精液袁其卵裂率尧桑葚胚
率尧囊胚率都极显著降低袁明显抑制了早期胚胎的发育遥
圆郾 猿摇 重离子束辐射绵羊卵母细胞对早期受精卵发育
的影响
不同剂量的重离子束照射绵羊卵母细胞对早期胚
胎的发育的影响结果见表 猿遥 由表 猿 可以看出袁 园郾 缘尧
员郾 园郧赠剂量组与对照组相比袁卵裂率尧桑葚胚率尧囊胚
发育率均显著升高渊责 约 园郾 园缘冤袁与 圆郾 园郧赠 剂量组相比袁
发育率极显著升高渊责 约园郾 园员冤曰园郾 员尧园郾 圆郧赠 剂量组与对
照组相比袁桑葚胚发育率无显著差异曰员郾 缘尧圆郾 园郧赠 剂量
组之间差异显著袁与对照组相比袁囊胚发育率均显著降
低渊责 约园郾 园缘冤曰对于囊胚发育率来说袁园郾 员尧园郾 圆郧赠 剂量
组较对照组无显著差异袁 圆郾 园郧赠 剂量组的囊胚发育率
为 园遥
从结果中可以看出袁园郾 缘尧员郾 园郧赠 剂量组的卵裂率尧
桑葚胚率尧囊胚发育率显著升高袁而 圆郾 园郧赠 剂量组的
卵裂率尧桑葚胚率尧囊胚发育率极显著降低袁其中囊胚
发育率为 园袁与辐照精液的效果一致遥
表 猿摇 重离子辐射绵羊卵母细胞后早期胚胎的发育情况
栽葬遭造藻 猿摇 悦葬泽藻 燥枣 藻葬则造赠 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬枣贼藻则 泽澡藻藻责 燥燥糟赠贼藻泽 遭赠 澡藻葬增赠 蚤燥灶 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶
剂量
阅燥泽藻 辕 郧赠
卵母细胞数
晕怎皂遭藻则 燥枣
燥燥糟赠贼藻
卵裂数
晕怎皂遭藻则 燥枣
糟造藻葬增葬早藻
卵裂率
悦造藻葬增葬早藻 则葬贼藻 辕

桑葚胚数
晕怎皂遭藻则 燥枣 皂燥则怎造葬
桑葚胚率
酝燥则怎造葬 则葬贼藻 辕

囊胚数
晕怎皂遭藻则 燥枣
遭造葬泽贼怎造葬
囊胚率
月造葬泽贼怎造葬 则葬贼藻 辕

园 苑苑 圆员 圆苑郾 猿 垣 员郾 缘园员员遭 怨 员员郾 苑 垣 园郾 苑缘园远遭 苑 怨郾 员 垣 园郾 苑缘猿源遭
园郾 员 怨圆 圆远 圆愿郾 猿 垣 园郾 远园远源遭 员员 员员郾 怨远 垣 员郾 圆源苑员遭 愿 愿郾 苑 垣 园郾 远圆远源遭
园郾 圆 苑远 圆圆 圆愿郾 怨 垣 园郾 苑苑怨远遭 员园 员猿郾 圆 垣 园郾 苑苑怨远遭 愿 员园郾 缘 垣 员郾 缘猿圆怨葬
园郾 缘 愿缘 圆怨 猿源郾 员 垣 员郾 猿缘远怨葬粤 员远 员愿郾 愿 垣 园郾 远怨圆愿葬粤 员员 员圆郾 怨 垣 园郾 远远源圆葬粤
员郾 园 怨愿 猿缘 猿缘郾 苑 垣 园郾 缘苑苑源葬粤 员怨 员怨郾 源 垣 员郾 员愿猿苑葬粤 员猿 员猿郾 猿 垣 园郾 远园远源葬粤
员郾 缘 愿怨 圆猿 圆缘郾 愿 垣 园郾 远缘缘源遭 苑 苑郾 怨 垣 园郾 远远员猿糟月 猿 猿郾 猿苑 垣 员郾 圆怨远圆遭月
圆郾 园 怨猿 员源 员缘郾 员 垣 园郾 远员圆猿糟月 圆 圆郾 员缘 垣 园郾 远圆园苑凿月 园 园 垣 园郾 园园园园糟月
猿摇 讨论
猿郾 员摇 重离子束辐射对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
重离子束辐射是一种致密的电离辐射袁 与传统的
载射线尧酌 射线相比具有传能线密度 渊 造蚤灶藻葬则 藻灶藻则早赠
贼则葬灶泽枣藻则冤 高尧能量沉积密集尧局部剂量大等优点咱员员暂 遥
随着人类向外层空间的拓展和放射治疗的应用袁重离
子的生物效应研究日益受到重视袁然而其对哺乳动物
早期胚胎的发育影响研究很少遥 报道称袁低剂量的重
离子辐射可以促进早期胚胎的卵裂遥 随着胚胎工程相
关技术的迅猛发展袁如何提高卵母细胞的质量愈来愈
重要遥 本文研究了重离子辐射对绵羊卵母细胞体外成
熟的影响遥 结果显示 员郾 园尧员郾 缘郧赠辐射剂量与对照组相
比袁体外成熟率极显著升高 渊 责 约 园郾 园员 冤袁园郾 员尧园郾 圆尧
园郾 缘郧赠和对照组差异不显著袁圆郾 园郧赠 与对照组相比袁体
外成熟率极显著降低渊责 约 园郾 园员冤遥 说明 员郾 园 和 员郾 缘郧赠
的辐照剂量可以提高绵羊卵母细胞体外成熟率袁陈仕
生咱员圆暂研究指出当低剂量电离辐射人脐静脉内皮细胞
渊匀哉灾耘 原 员圆冤时袁匀哉灾耘 原 员圆 分泌一定量的血管内皮
生长因子渊灾耘郧云冤和碱性成纤维生长因子渊遭云郧云冤袁该
因子均可以促进细胞的生长和分裂遥 我们推断 员郾 园 和
员郾 缘郧赠的辐照剂量能够促进卵丘颗粒细胞促生长因子
的释放袁从而提高了卵母细胞的体外成熟率袁具体机理
还有待进一步探索遥 而 圆郾 园郧赠 高剂量抑制卵母细胞
的体外成熟袁与高剂量重离子束造成了卵母细胞 阅晕粤
的双链断裂咱员猿暂有关袁对细胞造成重大伤害袁导致细胞
的裂解与死亡遥
猿郾 圆摇 重离子辐射绵羊精子细胞对早期胚胎发育的影

精子必须在母畜生殖道发生一定生理变化获能之
后袁才具备受精的能力遥 在体外受精过程中袁应最大限
度地模拟动物机体内环境袁提高体外受精效果袁增加体
外受精胚的质量遥 李金泉咱员源暂报道袁用一定剂量的激光
辐照精子袁可以促进精子细胞内 粤栽孕 的合成袁使精子
细胞代谢活动增强袁有助于精子穿透卵黄膜袁进入卵子
远圆源
摇 猿 期 重离子束辐照对绵羊卵母细胞及体外受精卵早期发育的影响
内部袁形成雄性原核袁提高体外受精效果遥 李晟阳
等咱员缘暂报道袁绵羊精子有超弱发光现象遥 通过离子照射
绵羊精液后袁能提高精子的超弱化学发光现象袁进而使
精子的代谢活动加强遥 该实验通过重离子束辐照绵羊
新鲜精液袁并通过体外受精后观察早期胚的发育遥
园郾 缘尧员郾 园郧赠剂量辐照绵羊新鲜精液后袁与对照组相比袁
早期胚的卵裂率尧桑葚胚率均显著升高袁而囊胚发育率
无明显差异曰员郾 缘郧赠剂量辐照精液袁早期合子的卵裂率
显著升高袁桑葚胚率和囊胚发育率均显著降低曰圆郾 园郧赠
剂量辐照精液袁早期配的卵裂率尧桑葚胚率以及囊胚发
育率均极显著降低遥 从试验结果中得出袁低剂量的重
离子束辐照精液后袁精子代谢活动增强咱员远暂 袁提高了精
子体外受精能力袁有助于早期胚胎的发育遥 而高剂量
的重离子束辐照绵羊精液后袁精子细胞受到损伤尧活力
降低袁减弱了体外受精的能力及早期胚的发育遥
猿郾 猿摇 重离子辐射绵羊卵母细胞对早期胚胎发育的影

卵母细胞的体外成熟是体外受精尧早期胚胎的发
育及胚胎移植最基础的环节遥 用不同剂量的离子束辐
照卵母细胞袁通过体外受精后袁观察早期胚的发育情
况遥 由实验结果可以看出袁不同剂量重离子束照射卵
母细胞袁体外受精后早期胚的发育差异显著遥 园郾 缘尧
员郾 园郧赠剂量组与对照组相比袁卵裂率尧桑葚胚率和囊胚
发育率均显著升高袁与 圆郾 园郧赠 剂量组相比袁发育率极
显著升高曰园郾 员尧园郾 圆郧赠剂量组与对照组相比袁桑葚胚发
育率无显著差异曰员郾 缘尧圆郾 园郧赠剂量组之间差异显著袁与
对照组相比袁囊胚发育率均显著降低曰对于囊胚发育率
来说袁园郾 员尧园郾 圆郧赠 剂量组较对照组无显著差异袁圆郾 园郧赠
剂量组的囊胚发育率为 园遥 可见袁园郾 缘尧员郾 园郧赠剂量的重
离子束可以促进颗粒细胞促生长因子的释放袁提高绵
羊卵母细胞体外成熟质量袁促进早期胚的发育遥
圆郾 园郧赠剂量的重离子束造成细胞损害袁使胚胎发育受
到抑制遥 这与下面的观点是一致的院低剂量重离子束
可以加速细胞新陈代谢袁增强细胞因子的分泌活
动咱圆袁员苑暂 曰而高剂量重离子束使细胞核内的 阅晕粤双链断
裂尧造成染色体损伤咱源袁员愿暂 袁从而抑制细胞的分裂和生
长袁甚至使其死亡遥
源摇 结论
重离子束辐射绵羊生殖细胞并做体外受精后袁卵
母细胞的体外成熟率和早期胚胎发育有着显著变化遥
园郾 缘尧员郾 园郧赠的剂量辐照对卵母细胞体外成熟具有促进
作用袁同时绵羊早期胚胎的卵裂率尧桑葚胚率显著升
高袁囊胚率无显著变化袁员郾 缘郧赠 剂量辐照袁卵裂率明显
提高袁桑葚胚率和囊胚率显著降低袁圆郾 园郧赠 剂量袁卵裂
率尧桑葚胚率尧囊胚发育率均极显著降低袁其中 圆郾 园郧赠
剂量辐射卵母细胞时其囊胚发育率为 园遥 因此袁在培
养条件不变的情况下袁可以适当选择低剂量的离子束
处理生殖细胞袁提高体外受精胚的发育率袁为后续工作
提供一条新思路遥
参考文献院
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咱 圆 暂摇 张晓铀袁汪恭质袁丁柏袁岳茗袁谭映军援 援模拟失重和辐射对体外培
养心肌细胞代谢的影响 咱 允暂 援 航天医学与医学工程袁员怨怨愿袁员员
渊源冤院圆缘愿 原 圆远员
咱 猿 暂摇 包默阳袁李金泉援 激光辐照对绵羊精子代谢和体外获能的影响
咱允暂 援激光生物学报袁员怨怨猿袁圆渊员冤院 圆员圆 原 圆员远
咱 源 暂摇 戴桂馥袁吴健袁张凤秋袁徐文举袁霍建磊袁霍裕平援 远园 悦燥酌 辐射对金
鱼胚胎发育的影响咱允暂 援核农学报袁圆园园缘袁员怨渊缘冤院猿愿远 原 猿愿怨
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云杂匀 辕 蕴匀及丙酮酸钠对绵羊卵母细胞体外成熟的影响咱 允暂 援核农
学报袁圆园员员袁圆缘渊圆冤院怨猿员 原 怨猿远
咱 苑 暂摇 王伟忠袁王秀清袁杨莉萍援绵羊的采精及人工授精技术咱 允暂 援 江西
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咱员员暂摇 袁雄袁叶常青袁周平坤援重离子辐射的 阅晕粤链断裂效应咱 允暂 援航天
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咱员圆暂摇 陈仕生援电离辐射对人脐静脉内皮细胞影响的研究咱阅暂援 汕头院
汕头大学袁 圆园园缘
咱员猿暂摇 郭传玲袁王菊芳袁魏巍袁荆西刚袁金晓东袁李文建援 高 蕴耘栽 重离子
照射人肿瘤细胞的 阅晕粤 双链断裂及修复研究咱 允暂 援 核技术援
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咱员源暂摇 李金泉援激光辐照对家兔精子体外受精的影响咱 允暂 援 中国激光袁
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咱员缘暂摇 李晟阳袁罗光彬袁张晓华援 云杂匀尧蕴匀 对猪卵母细胞核成熟及体外
成熟时间对去核效率的影响咱允暂 援黑龙江畜牧兽医袁圆园园远袁渊员员冤院
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