全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊怨冤院员圆源苑 耀 员圆缘圆允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄员园鄄圆远摇 接受日期院圆园员猿鄄园猿鄄圆园
基金项目院公益性行业渊农业冤科研专项渊圆园员圆园猿园苑员冤
作者简介院蒋彧袁女袁主要从事花卉生物技术研究遥 耘皂葬蚤造院蚤葬皂躁蚤葬灶早赠怎岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园怨鄄员圆源苑鄄园远
远园 悦燥 酌辐射兰花春剑隆昌素根状茎
分化苗的 陨杂杂砸分析
蒋摇 彧摇 何俊蓉摇 刘摇 菲摇 王海娥摇 卓碧萍
渊四川省农业科学院园艺研究所袁四川 成都摇 远员园园远远冤
摘摇 要院以兰花春剑隆昌素品种为材料袁用不同剂量远园悦燥 酌射线辐照处理其根状茎袁研究辐照诱变技术对
兰花根状茎组织培养成活率及分化率的影响袁并用 陨杂杂砸分子标记技术检测春剑隆昌素组培苗辐射诱变
前后引起的 阅晕粤变异情况遥 结果表明院员园 郧赠辐射处理后的根状茎分化苗率为 怨猿郾 圆豫 袁圆园郧赠 辐射处理
后根状茎分化苗率为 缘源郾 源豫 袁而 源园郧赠和 远园郧赠剂量处理后的根状茎几乎全部死亡遥 主要变异性状是叶
色失绿变淡遥 通过对春剑隆昌素辐射后代形态变异株的 陨杂杂砸 基因检测袁发现经过 猿园 多年继代培养的
春剑隆昌素组培苗的变异率为 远豫 袁而辐射诱变后代的变异率为 员愿豫 遥 说明经过远园 悦燥 酌 辐射诱变的根
状茎所获得的变异比组织培养所获得变异高遥 可疑突变株和对照组在 员缘 个 陨杂杂砸引物扩增结果中并未
出现明显的差异袁陨杂杂砸 分子标记结果与植株表现出的形态变化之间可能并不存在一一对应关系遥
关键词院兰花曰春剑隆昌素曰根状茎曰远园悦燥 酌曰陨杂杂砸
摇 摇 春 剑 渊 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 造燥灶早蚤遭则葬糟贼藻葬贼怎皂 冤 是 兰 科
渊韵则糟澡蚤凿葬糟藻葬藻冤 兰属渊悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂冤植物袁在四川兰蕙中
独树一帜袁 尤以素心为贵遥 隆昌素 渊 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂
造燥灶早糟澡葬灶早泽怎冤属软叶素心春剑袁其叶梢弯垂袁 仙姿绰
约袁花葶直立袁着花朵 圆 耀 猿 朵袁瓣微绿袁心乳白袁花色素
雅袁香味纯正袁是以四川地名命名的川兰野五朵金花冶
之一袁曾在国内外兰展中夺魁咱员暂 遥
春剑观赏价值极高袁开发利用潜力巨大袁野名尧优尧
新尧奇尧特冶的春剑精品在市场上供不应求遥 近年来袁
诱变育种成为观赏植物育种中创造变异的主要途径之
一袁特别是将诱变育种技术与组织培养技术相结
合咱圆 原 缘暂 袁创造出不同于原品种的新品种类型已经成为
花卉育种的一个新方向遥
陨杂杂砸渊 陨灶贼藻则 杂蚤皂责造藻 杂藻择怎藻灶糟藻 砸藻责藻葬贼冤即简单重复
序列区间扩增多态性标记技术袁是 员怨源源 年 在蚤藻贼噪蚤藻憎蚤藻扎
等咱远暂发明的一种新的分子标记技术遥 该标记基于
孕悦砸反应袁无需预先知道 阅晕粤序列袁具有高多态性尧高
精确度等优点袁现已广泛应用于植物品种鉴定咱苑暂 尧遗
传作图咱愿暂 尧基因定位咱怨暂 尧遗传多样性咱员园暂 尧进化及分子生
态学研究中咱员员暂 遥 但 陨杂杂砸技术在花卉中的研究应用相
对较少袁特别是用于春剑的研究袁国内外未见报道遥
已有的研究结果表明袁应用辐射诱变技术已在月
季尧菊花尧美人蕉尧大丽花尧叶子花尧荷花植物上获得 远园
多种突变体咱员圆暂 袁成为观赏园艺植物的种质资源创新和
品种选育新方法和途径之一遥 用远园悦燥 酌辐射进行兰花
育种已有报道咱员猿暂 袁但在春剑上尚未见报道遥 本研究在
已建立的春剑隆昌素组织培养体系的基础上袁以其根
状茎为原材料进行远园悦燥酌辐射诱变袁将辐射育种技术与
组织培养技术相结合袁探讨诱变后代与组培苗在形态
上尧遗传物质 阅晕粤 上的差异袁为春剑品种的改良和选
育奠定前期基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
本试验材料为春剑隆昌素袁由四川省农科院园艺
研究所经过茎尖克隆技术培育所得遥
员郾 圆摇 试剂
试剂院陨杂杂砸 员园园 条通用引物序列由上海生工合成曰
员园 伊 栽葬择 月怎枣枣藻则 渊不含 酝早圆 垣 冤尧 栽葬择 阅晕粤 聚合酶尧
凿晕栽孕泽尧酝早圆 垣 尧栽则葬灶泽圆运孕造怎泽 阅晕粤 酝葬则噪藻则均购于 栽则葬灶泽郧藻灶
公司遥
苑源圆员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
培养基院隆昌素根状茎增殖培养基渊粤冤院酝杂 垣 远 原
月粤 员郾 园皂早窑蕴 原员 垣 晕粤粤 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 粤悦 园郾 猿豫 曰分化培
养基渊月冤院酝杂 垣 栽阅在 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 晕粤粤 园郾 圆皂早窑蕴 原员 垣
粤悦 园郾 猿豫 遥 上述培养基 责匀值为 远郾 园 左右遥
员郾 猿摇 方法
员郾 猿郾 员摇 春剑隆昌素根状茎辐射诱变处理摇 在超净工
作台上袁将组培的根状茎放在经过灭菌的培养皿中袁用
灭菌的小刀切成 圆糟皂 左右的小段袁接种到 粤 培养基
上遥 每瓶接种 缘园 个根状茎袁对其进行培养遥 一周后袁
在四川省农科院生物技术与核技术研究所用远园悦燥 酌对
其进行不同剂量的 酌射线处理遥
辐射吸收剂量院 园郧赠 渊 悦运冤尧 员园郧赠尧 圆园郧赠尧 源园郧赠尧
远园郧赠袁剂量率为 员郧赠窑皂蚤灶 原员袁照射部位保持基本一致遥
经过不同剂量远园悦燥 酌诱变处理的根状茎组织培养
员 个月后袁将其转接到 月 培养基上进行培养遥 远 个月
后统计株高 员糟皂以上的分化植株袁计算分化苗率遥
培养条件院湿度 远缘豫 耀愿缘豫 袁温度 圆圆 耀 圆缘益袁每天
光照 愿澡袁光照强度为 员园园园造曾遥 辐射后的根状茎与对照
培养条件相同遥
员郾 猿郾 圆摇 总 阅晕粤 的提取及电泳检测 摇 运用 阅藻造造葬责燥则贼葬
等咱员源暂的 悦栽粤月 法提取基因组 阅晕粤袁员豫琼脂糖凝胶电
泳检测 阅晕粤质量袁栽燥贼葬造葬遭软件检测 阅晕粤含量袁稀释到
缘园 灶早窑滋蕴 原员备用遥
员郾 猿郾 猿摇 陨杂杂砸 引物的筛选及植株基因组 陨杂杂砸 分子标
记摇 以 悦运的 阅晕粤为模板袁对 员园园 条 陨杂杂砸通用引物进
行筛选袁选择适合春剑隆昌素基因组 陨杂杂砸 扩增的引
物遥 反应体系参照刘菲等咱员缘暂所构建的国兰 陨杂杂砸鄄孕悦砸
反应体系 圆缘滋蕴院员园 伊 遭怎枣枣藻则 圆郾 缘滋蕴尧凿晕栽孕泽 园郾 圆皂皂燥造窑
蕴 原员 园郾 缘滋蕴尧引物 员郾 园滋皂燥造窑蕴 原员 园郾 缘滋蕴尧酝早圆 垣 圆郾 缘皂皂燥造窑
蕴 原员 园郾 缘滋蕴尧栽葬择 酶 员哉 园郾 猿滋蕴遥 陨杂杂砸鄄孕悦砸 的反应程序
为院怨源益预变性 缘 皂蚤灶曰怨源益变性 员 皂蚤灶袁源源 耀 缘远益退火
员 皂蚤灶袁苑圆益延伸 员 皂蚤灶袁源园 个循环曰苑圆益延伸 员园 皂蚤灶遥
反应结束后袁取 员园滋蕴产物在 员郾 愿豫琼脂糖凝胶上电泳
渊 含 员豫核酸染料冤袁栽月耘渊员 伊 冤缓冲液袁以 栽则葬灶泽圆运 孕造怎泽
阅晕粤为 酝葬则噪藻则袁员圆园灾 电泳 怨园 皂蚤灶 用紫外凝胶成像系
统观测并拍照遥
运用筛选出的条带清晰尧稳定性高的 圆园 条引物对
组培苗渊宰员 原缘园冤以及辐射诱变后代渊云员 原 缘园冤的各 缘园
个植株样本进行 陨杂杂砸 分子标记遥 通过对扩增结果的
条带进行统计袁以特异性条带作为突变的标准袁计算突
变率遥 圆园 条引物序列见表 员遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 春剑隆昌素根状茎处理远园悦燥 酌辐射剂量的确定
辐射诱变对春剑隆昌素根状茎的影响通过分化苗
率进行统计袁结果如表 圆遥 未经远园悦燥 酌处理的根状茎的
分化苗率为 员园园豫 袁每瓶平均分化出 圆郾 缘 苗曰员园郧赠辐射
处理后的春剑隆昌素根状茎分化苗率下降为 怨猿郾 圆豫 袁
每瓶平均分化 圆郾 猿 苗袁与对照组相比无明显差异曰
圆园郧赠辐射处理后春剑隆昌素根状茎分化苗率下降到
缘源郾 源豫 袁平均每瓶分化出 员 苗曰 源园郧赠 辐射处理后春剑
隆昌素根状茎一共仅分化出 源 苗袁而 远园郧赠剂量处理后
的春剑根状茎全部死亡遥
表 员摇 选用引物名称及序列
栽葬遭藻造 员摇 孕则蚤皂藻则泽 葬灶凿 泽藻择怎藻灶糟藻泽
引物名称 孕则蚤皂藻则泽 序列渊缘忆 原 猿忆冤孕则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻 引物名称 孕则蚤皂藻则泽 序列渊缘忆 原 猿忆冤孕则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻
哉月悦愿园愿 粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧悦 哉月悦愿源源 悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽砸悦
哉月悦愿园怨 粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧郧 哉月悦愿缘园 郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽再悦
哉月悦愿员圆 郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤粤 哉月悦愿缘源 栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦砸郧
哉月悦愿员缘 悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽郧 哉月悦愿缘缘 粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦再栽
哉月悦愿圆苑 粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦郧 哉月悦愿缘远 粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦再粤
哉月悦愿猿缘 粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧再悦 哉月悦愿远源 粤栽郧粤栽郧粤栽郧粤栽郧粤栽郧粤栽郧
哉月悦愿猿远 粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧再粤 哉月悦愿愿园 郧郧粤郧粤郧郧粤郧粤郧郧粤郧粤
哉月悦愿源园 郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤再栽 哉月悦愿愿缘 月匀月郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤
哉月悦愿源员 郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤再悦 哉月悦愿愿愿 月阅月悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤
哉月悦愿源猿 悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽砸粤 哉月悦愿怨园 灾匀灾郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽
愿源圆员
摇 怨 期 远园悦燥 酌辐射兰花春剑隆昌素根状茎分化苗的 陨杂杂砸分析
表 圆摇 不同远园悦燥 酌辐射计量对春剑隆昌素
根状茎分化苗率影响
栽葬遭藻造 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 远园悦燥 酌 则葬赠泽
剂量
阅燥泽藻 辕 郧赠
接种瓶数
粤皂燥怎灶贼泽
分化情况
栽澡藻 灶怎皂遭藻则 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
辕苗
平均分化
苗数
栽澡藻 葬增藻则葬早藻
凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
泽藻藻凿造蚤灶早泽
分化率
栽澡藻 则葬贼藻 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
辕 豫
园 源园 怨愿 圆郾 源缘 员园园
员园 员园远 圆源圆 圆郾 圆愿 怨猿郾 圆
圆园 员园园 员员圆 员郾 员圆 缘源郾 源
源园 员园员 源 园郾 园源 猿郾 缘园
远园 员园圆 园 园 园
注院悦运为未经处理的组培苗袁圆园园赠是经过远园悦燥酌处理的突变株遥
晕燥贼藻院 悦燥灶贼则凿 糟澡藻糟噪 蚤泽 怎灶贼则藻葬贼藻凿援 栽澡藻 皂怎贼葬灶贼泽 憎藻则藻 贼则藻葬贼藻凿 遭赠 远园悦燥酌 圆园郧赠援
图 员摇 辐射诱变突变株
云蚤早援 员摇 酝怎贼葬早藻灶蚤糟 责则燥早藻灶蚤藻泽 遭赠 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶
注院酝院阅晕粤标准分子量曰左为引物 哉月悦愿园苑 的扩增产物曰中间为引物 哉月悦愿园怨 的扩增产物曰右为引物 哉月悦愿圆苑 的扩增产物
晕燥贼藻院酝院栽则葬灶泽圆运 孕造怎泽 阅晕粤 酝葬则噪藻则曰蕴藻枣贼院贼澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 责则蚤皂藻则 哉月悦愿园苑曰酝蚤凿凿造藻院 贼澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣
责则蚤皂藻则 哉月悦愿园怨曰砸蚤早澡贼院 贼澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 责则蚤皂藻则 哉月悦愿圆苑
图 圆摇 春剑隆昌素组培苗部分 陨杂杂砸扩增产物
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 陨杂杂砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻泽怎造贼泽 燥枣 泽藻藻凿造蚤灶早泽 蚤灶 增蚤贼则燥
摇 摇 由上可知袁经过不同剂量远园 悦燥 酌 处理的春剑隆昌
素根状茎的分化苗率差异显著袁分化苗率随着远园 悦燥 酌
剂量的增加明显下降袁并且苗的质量也和远园 悦燥 酌 的剂
量成反比遥 实验中当辐射剂量达到 圆园郧赠 时袁分化苗
率为 缘源郾 源豫 曰员园郧赠 剂量处理与对照组差别不大袁
源园郧赠尧远园郧赠剂量处理袁春剑隆昌素根状茎都处于休眠
或者死亡状态袁剂量已经超过半致死剂量袁严重影响了
根状茎分化苗率遥 所以本实验选择 圆园郧赠 为远园 悦燥 酌 辐
射的最适剂量遥
圆郾 圆摇 辐射诱变后代突变株的筛选
对经过辐射处理的春剑隆昌素根状茎分化苗进行
观察袁发现其中有一株春剑隆昌素渊圆园郧赠处理剂量冤的
植株叶片的颜色与 悦运逐渐明显不同袁见图 员遥
怨源圆员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
悦运为未经处理的组培苗袁圆园郧赠 是经过远园悦燥酌处理
的突变株袁对照组春剑隆昌素的根状茎和叶片均呈墨
绿色袁植株叶片有一定程度的卷曲曰而 圆园郧赠 辐射处理
所得植株的根状茎以及植株叶片颜色呈浅绿色袁叶片
并未出现弯曲现象遥 为了确定是否是由于辐射导致的
变异袁我们特别将此株放在自然光下进行培养袁圆 个月
后其叶片颜色仍旧呈浅绿色袁且其周边根状茎再生的
圆 株幼苗叶片也呈浅绿色袁由此我们初步推测此株叶
片颜色偏浅并非由于光照原因所致袁更可能是由于辐
射导致的突变株遥
注院酝院阅晕粤标准分子量曰左为引物 哉月悦愿员缘 的扩增产物曰中间为引物 哉月悦愿猿缘 的扩增产物曰右为引物 哉月悦愿怨园 的扩增产物遥
晕燥贼藻院酝院栽则葬灶泽圆运 孕造怎泽 阅晕粤 酝葬则噪藻则曰蕴藻枣贼院贼澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 责则蚤皂藻则 哉月悦愿园苑曰酝蚤凿凿造藻院 贼澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援
责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 责则蚤皂藻则 哉月悦愿园怨曰砸蚤早澡贼院 贼澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 责则蚤皂藻则 哉月悦愿圆苑
图 猿摇 春剑隆昌素远园悦燥 酌辐射诱变后代部分 陨杂杂砸扩增产物
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 陨杂杂砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻泽怎造贼泽 燥枣 皂怎贼葬早藻灶蚤糟 责则燥早藻灶蚤藻泽 遭赠 远园悦燥 酌 则葬赠泽 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶
注院酝院阅晕粤标准分子量遥
晕燥贼藻院酝院栽则葬灶泽圆运 孕造怎泽 阅晕粤 酝葬则噪藻则援
图 源摇 变异植株的 陨杂杂砸鄄孕悦砸检测结果
云蚤早 源摇 栽澡藻 陨杂杂砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻泽怎造贼泽 燥枣 贼澡藻 造藻葬枣 泽澡葬责藻 皂怎贼葬灶贼泽 遭赠 远园悦燥 酌 则葬赠泽
圆郾 猿摇 春剑隆昌素组培苗 陨杂杂砸分子标记
圆郾 猿郾 员摇 未经辐照处理的春剑隆昌素组织培养再生植
株的 陨杂杂砸分子鉴定摇 对春剑隆昌素组培苗的宰员 原缘园
植株样本分别进行 圆园 个 陨杂杂砸 分子标记分析袁部分扩
增结果如图 圆 所示遥
由上图可知袁左图为引物 哉月悦愿园苑 对 宰员员 原 圆园 植
株的扩增产物袁可以看出植株 宰员圆 在大约 苑园园遭责 处袁
扩增出了一条特异性条带曰中间为引物 哉月悦愿园怨 对
宰圆员 原猿园 的扩增产物袁其中植株 宰圆缘 在大约 员圆园园遭责
处袁扩增出一条特异性条带曰右边为引物 哉月悦愿圆苑 对植
株宰源员 原源源 的扩增结果袁其中植株 宰源源 在大约 远园园遭责
处袁扩增出了一条特异性条带遥 春剑隆昌素组培苗的
宰员 原缘园 样本植株共扩增出 缘缘园猿 条谱带袁其中有 猿 条
特异性带袁有 猿 株植株发生变异袁分别为 宰员圆尧宰圆缘尧
宰源源袁隆昌素组培苗的变异率为 远豫 遥
圆郾 猿郾 圆摇 春剑隆昌素根状茎辐射诱变后组培苗的 陨杂杂砸
分子鉴定摇 应用前期筛选到的 圆园 个 陨杂杂砸 引物袁对经
过 圆园郧赠 远园悦燥 酌辐照诱变后的 缘园 个春剑隆昌素根状茎
组培苗 云员 原 缘园 进行扩增袁袁部分扩增结果如图 猿 所示遥
由上图可知袁左边为引物 哉月悦愿员缘 对 云圆员 原 猿园 的
园缘圆员
摇 怨 期 远园悦燥 酌辐射兰花春剑隆昌素根状茎分化苗的 陨杂杂砸分析
扩增产物袁其中 云圆圆 在 员园园园遭责尧苑园园遭责处各扩增出一条
特异性条带曰中间为引物 哉月悦愿猿缘 对 云猿员 原 源园 的扩增
产物袁其中 云猿怨 在约 愿缘园遭责扩增出一条特异性条带曰右
边为引物 哉月悦愿怨园 对 云猿员 原 源园 的扩增产物袁其中 云猿缘
在 员圆园园遭责处扩增出一条特异性条带遥 春剑隆昌素辐
射诱变后代的 缘园 个植株样本袁共扩增出 缘缘员员 条谱带袁
其中有 员员 条特异性条带袁共有 怨 株植物发生变异袁分
别为袁云圆尧云员苑尧云圆员尧云圆圆尧云圆猿尧云猿缘尧云猿怨尧云源员尧云源源袁辐射
诱变的变异率为 员愿豫 遥
圆郾 猿郾 猿摇 春剑隆昌素形态变异株的 陨杂杂砸分子鉴定摇 在
经过 圆园郧再远园悦燥 酌辐射诱变的春剑隆昌素后代中袁发现
了一叶片颜色较浅的可疑突变株袁将该植株在超净工
作台上袁用灭过菌的剪刀剪取适量叶片袁提取 阅晕粤袁利
用已经优化的体系袁随机选择 圆园 条引物中的 员缘 条进
行 陨杂杂砸分子标记鉴定袁结果如图 源 所示遥
由上图可知此可疑突变株和对照组在 员缘 个 陨杂杂砸
引物扩增结果中并未出现明显的差异遥 陨杂杂砸 分子标
记与植株表现出的形态变化之间并不存在一一对应关
系袁说明此可疑突变植株有可能是由诱变剂的伤害作
用造成袁而不是基因组 阅晕粤发生变异遥
猿摇 讨论
利用远园悦燥 酌对春剑隆昌素根状茎进行辐照诱变处
理是可行的遥远园悦燥 酌对春剑隆昌素根状茎的生长尧再生
苗均产生一定的伤害作用袁且和辐射剂量成正相关遥
未经辐射的根状茎分化率为 员园园豫 袁员园郧赠 辐射处理后
的根状茎分化率为 怨猿郾 圆豫 袁圆园郧赠辐射处理后根状茎分
化率为 缘源郾 源豫 袁而 源园郧赠和 远园郧赠剂量处理后的根状茎
几乎全部死亡遥 再生植株的 陨杂杂砸检测表明袁这些畸变
未必是植株 阅晕粤分子变异造成的袁主要是因为诱变剂
的延续伤害造成的遥
春剑根状茎组织培养再生苗和经过远园悦燥 酌辐照诱
变后代相比袁扩增出的特异性条带有一定的相似性袁比
如 宰 株系和 云 株系都在引物 哉月悦愿圆苑 的扩增结果中
发现了特异性条带袁但是所扩增出的特异性条带的片
段大小却存在明显差异遥 总体上说经过远园悦燥 酌辐照诱
变的春剑根状茎所获得的变异比组织培养所获得变异
要高的多遥
组织培养过程中发生的变异袁是以一种循序渐进
的方式产生袁因此比较缓和袁对外植体的伤害较小曰而
辐射诱变是以一种急剧的方式对外植体产生作用袁最
佳剂量的确定是以半致死量为标准袁所以辐射诱变对
外植体的伤害作用大袁使大量外植体产生白化尧褐化现
象袁最后导致一半外植体死亡袁即使存活下来的再生苗
也比较弱袁需要多次继代培养才能恢复袁因此可以将辐
射育种与组织培养技术相结合袁以期获得更多的突变
材料袁为新品种的选育奠定材料基础遥
参考文献院
咱 员 暂摇 魏亚鉥援 野克隆冶名兰要要要浅谈春剑名品隆昌素的茎尖培养技术
兼答读者问咱允暂 援中国花卉盆景袁员怨怨愿渊远冤院员
咱 圆 暂摇 徐晓薇袁林绍生袁姚丽娟援 蝴蝶兰 远园悦燥 原 酌 辐射诱变育种初报
咱允暂袁广西热带农业袁圆园园愿渊圆冤院员 原 圆
咱 猿 暂摇 张永柏袁廖福琴袁钟淮钦援蝴蝶兰花粉辐射诱变育种初报咱 允暂袁福
建农业学报袁圆园园怨 圆源渊猿冤院圆猿苑 原 圆源园
咱 源 暂摇 彭绿春袁黄丽萍袁余朝秀援四种兰花辐射育种研究初报咱 允暂袁云南
农业大学学报袁圆园园苑 圆圆渊猿冤院猿猿圆 原 猿猿缘
咱 缘 暂摇 陈华袁林兵袁潘宏援国兰辐射诱变效应研究初报咱 允暂 援福建农业科
技袁圆园园缘渊源冤院圆源 原 圆缘
咱 远 暂摇 在蚤藻枣噪蚤藻憎蚤糟扎 耘袁 砸葬枣葬造泽噪蚤 粤袁 蕴葬遭怎凿葬 阅援 郧藻灶燥皂藻 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼蚤灶早 遭赠
泽蚤皂责造藻 杂藻择怎藻灶糟藻 则藻责藻葬贼 渊 杂杂砸冤 葬灶糟澡燥则藻凿 责燥造赠皂藻则葬泽藻 糟澡葬蚤灶 则藻葬糟贼蚤燥灶
葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 咱允暂 援 郧灶燥皂蚤糟泽援 员怨怨源袁 圆园院员苑远 原 员愿猿
咱 苑 暂摇 月造葬蚤则皂 宰袁 孕葬灶葬怎凿 韵袁 酝糟糟燥怎糟澡 杂援 陨杂杂砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 枣燥则 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣
皂蚤糟则燥 泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂燥贼蚤枣 枣则藻择怎藻灶糟赠 葬灶凿 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼蚤灶早 蚤灶 则蚤糟藻 咱 允 暂 援
栽澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽 袁 员怨怨怨袁 怨愿院苑愿园 原 苑怨圆
咱 愿 暂摇 运燥躁皂葬 栽袁 晕葬早葬燥噪葬 栽袁 晕燥凿葬 运援 郧藻灶藻贼蚤糟 造蚤灶噪葬早藻 皂葬责 燥枣 陨杂杂砸 葬灶凿
砸粤 孕阅 皂葬则噪藻则泽 蚤灶 耘蚤灶噪燥则灶 憎澡藻葬贼 蚤灶 则藻造葬贼蚤燥灶 贼 燥 贼澡葬贼 燥枣 砸云蕴孕
皂葬则噪藻则泽咱允暂 援 栽澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 员怨怨愿袁 怨远院 猿苑 原 源缘
咱 怨 暂摇 砸葬贼灶葬责葬则噪澡藻皂 月袁 杂葬灶贼则葬 阅袁栽怎造造怎 粤袁 酝怎藻澡造遭葬怎藻则 云援 陨灶澡藻则蚤贼葬灶糟藻 燥枣
蚤灶贼藻则鄄 泽蚤皂责造藻鄄 泽藻择怎藻灶糟藻鄄 则藻责藻葬贼 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂泽 葬灶凿 造蚤灶噪葬早藻 憎蚤贼澡 葬
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粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 员怨怨愿袁 怨远院 猿源愿 原 猿缘猿
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