分析了不同剂量氮离子(N+)和高压静电场(HVEF)处理金色链霉菌的存活率和突变率关系,进而确定了最佳处理参数:N+能量10kev·cm-1,注入剂量1.82×1015 N+ions·cm-2、2.86×1015 N+ions·cm-2,电场剂量(时间、场强)20s×0.5kv·cm-2、60s×2kv·cm-2。用上述优选的HVEF和N+剂量对金色链霉菌进行复合处理,发现在部分复合处理条件下,菌株正变率比使用等剂量N+单因子处理的正变率要高。通过对出发菌株SL2、N+注入选育的高产菌株M226以及N+和HVEF复合处理获得的高产菌株D1114的3种保护酶POD、SOD、CAT的活性进行检测,发现D1114菌株3种酶的活性均最高,其次是M226,说明这3种酶在诱变处理中扮演着重要角色,并且HVEF和低能N+复合处理的效果较N+单一诱变效果要好。
全 文 :核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊源冤院园苑园圆 耀 园苑园苑
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园怨鄄员猿摇 接受日期院圆园员源鄄园圆鄄员圆
基金项目院国家自然科学基金项目渊缘员圆远苑园员猿冤
作者简介院石磊袁女袁环境生物物理研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 员圆园员猿愿怨源员岳 择择援 糟燥皂
通讯作者院白爱枝袁女袁讲师袁主要从事环境生物物理和微生物育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院院遭葬蚤葬蚤扎澡蚤岳 蚤皂怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤园源鄄园苑园圆鄄园远
高压静电场和氮离子复合处理对链霉菌的影响
石摇 磊员袁圆 摇 白爱枝员袁猿 摇 鲍秀珍员袁圆 摇 梁运章员袁猿
渊员 内蒙古自治区离子束生物工程重点实验室袁 内蒙古 呼和浩特摇 园员园园圆员袁圆 内蒙古医科大学计算机信息
学院物理教研室袁内蒙古 呼和浩特摇 园员园园缘园曰 猿 内蒙古大学物理科学与技术学院袁 内蒙古 呼和浩特摇 园员园园圆员冤
摘摇 要院分析了不同剂量氮离子渊晕 垣 冤和高压静电场渊匀灾耘云冤处理金色链霉菌的存活率和突变率关系袁进
而确定了最佳处理参数院晕 垣能量 员园噪藻增窑糟皂 原员袁注入剂量 员郾 愿圆 伊 员园员缘 晕 垣 蚤燥灶泽窑糟皂 原圆尧圆郾 愿远 伊 员园员缘 晕 垣 蚤燥灶泽
窑糟皂 原圆袁电场剂量渊时间尧场强冤圆园泽 伊 园郾 缘噪增窑糟皂 原圆尧远园泽 伊 圆噪增窑糟皂 原圆遥 用上述优选的 匀灾耘云 和 晕 垣剂量
对金色链霉菌进行复合处理袁发现在部分复合处理条件下袁菌株正变率比使用等剂量 晕 垣单因子处理的
正变率要高遥 通过对出发菌株 杂蕴圆尧晕 垣注入选育的高产菌株 酝圆圆远 以及 晕 垣和 匀灾耘云复合处理获得的高
产菌株 阅员员员源 的 猿 种保护酶 孕韵阅尧杂韵阅尧悦粤栽的活性进行检测袁发现 阅员员员源 菌株 猿 种酶的活性均最高袁其
次是 酝圆圆远袁说明这 猿 种酶在诱变处理中扮演着重要角色袁并且 匀灾耘云和低能 晕 垣复合处理的效果较 晕 垣
单一诱变效果要好遥
关键词院高压静电场曰氮离子曰链霉菌曰复合处理
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 园源援 园苑园圆
摇 摇 在微生物诱变领域中袁单一诱变因子的诱变往往
诱变效率低而回复突变率高袁且反复诱变常常产生诱
变饱和效应袁使产量难以提高甚至下降袁相比之下袁离
子束生物技术是具有我国自主知识产权的遗传改良新
方法袁其诱变效应显著袁具有损伤小尧突变率高尧突变谱
广尧正变率高尧可重复性好的特点咱员暂 袁可打破传统诱变
方法负突变率高和抗性饱和的瓶颈遥 静电技术作为一
门交叉学科袁已被广泛应用于农业尧医学等领域咱圆 原 猿暂 袁
但关于静电场处理对微生物影响的研究极少遥 我们在
利用低能离子诱变育种的研究中发现袁离子束诱变获
得的高产菌株的稳定性较差袁为了更好的发挥离子束
育种技术的优势袁针对这一问题开展了高压电场尧离子
束组合诱变饲用金霉素生产菌的试验遥
员摇 材料和方法
员郾 员摇 菌种
金色链霉菌渊杂贼则藻责贼燥皂赠糟藻泽 葬怎则藻燥枣葬糟蚤藻灶泽冤院杂蕴圆袁实验
室保存遥
员郾 圆摇 菌悬液的制备
成熟新鲜斜面用适量无菌水将孢子洗脱于含玻璃
珠的三角瓶内袁圆猿园则窑皂蚤灶 原员摇床振荡 圆缘皂蚤灶袁经 怨 层灭
菌纱布过滤两次袁再在振荡器上振荡混匀袁制成浓度为
员园远 耀 员园苑 个窑皂蕴 原员单孢悬液遥
员郾 猿摇 离子注入条件
采用 晕 垣 袁能量 员园噪藻增袁剂量为 园渊对照冤要圆员园 伊 圆郾 远
伊 员园员 猿 蚤燥灶泽 窑 皂蕴 原圆袁脉冲剂量为 圆郾 远 伊 员园员猿 蚤燥灶泽 窑
渊糟皂圆窑泽冤 原员袁注入靶室的真空度为 员园 原猿孕葬遥
员郾 源摇 存活率统计
晕 垣处理后的平皿中加入 员皂蕴 无菌水袁用涂棒将
菌膜洗下袁吸取适量菌悬液袁适当稀释后涂布于分离培
养基上培养袁同时设未经 晕 垣处理的为对照袁于培养箱
猿圆益培养 猿 耀 源凿后进行菌落计数袁统计存活率遥
员郾 缘摇 高压静电场处理剂量
在电场生物效应中袁电场强度和处理时间是影响
实验结果的两个重要因素袁所以电场强度和处理时间
的选择至关重要遥 在利用高压静电场灭菌的实验中袁
多使用高场强与较长时间相结合的处理办法达到灭菌
圆园苑
摇 源 期 高压静电场和氮离子复合处理对链霉菌的影响
的效果咱源 原 缘暂 遥 因为本试验的主要目的是为了研究高压
静电场对离子束处理的金色链霉菌的协同作用袁并不
是为了达到灭菌的效果袁所以在试验中采用低场强与
短时间结合进行试验渊见表 员冤遥
表 员摇 不同的时间和场强组合
栽葬遭造藻 员摇 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼蚤皂藻 葬灶凿 蚤灶贼藻灶泽蚤贼赠 燥枣 匀灾耘云
剂量 阅燥泽藻 粤组 月组
场强 陨灶贼藻则泽蚤贼赠 燥枣 匀灾耘云 辕
渊噪增窑糟皂 原员 冤 园郾 缘 员 员郾 缘 圆 圆 源 远 愿
时间 栽蚤皂藻 辕 泽 员园 圆园 猿园 源园 远园 员愿园 猿园园 源圆园 缘源园
员郾 远摇 高压静电场处理方法
调整高压静电场的两极板间距袁将待处理的加入
金色链霉菌孢子悬液的平皿放于下极板中央渊避免边
缘效应冤袁进行静电场处理遥
员郾 苑摇 三种同工酶活性的测定
悦粤栽酶活测定依据南京依贝公司的试剂盒及其
说明进行曰孕韵阅 酶活测定参照李合生等咱远暂的方法测
定袁杂韵阅酶活测定参照 月藻葬怎糟澡葬皂责等咱苑暂的方法进行遥
员郾 愿摇 金霉素效价测定方法
化学测定法院 金霉素在酸性溶液中经加热后能脱
去一分子水袁生成黄色的脱水金霉素袁其色度与含量成
正比袁故利用比色法来测定其效价遥 发酵液经草酸酸
化过滤后袁吸 员 皂蕴 滤液于 怨 皂蕴 蒸馏水中袁分别吸取 员
皂蕴 稀释滤液于 圆 只 缘园 皂蕴 装有 缘 皂蕴 圆 皂燥造窑蕴 原员盐酸
的容量瓶中袁一只用作 悦运袁另一只于沸水煮沸 缘 皂蚤灶袁
冷却后加水定容至刻度袁摇匀后于 苑圆圆晕 型分光光度
计尧波长 源源园 灶皂尧光程 员 糟皂 测定遥
员郾 怨摇 正负突变的筛选指标院
电场或离子束处理后挑选单菌落接斜面培养渊猿圆
耀猿远益袁猿凿 耀 缘凿冤袁镜检初筛袁然后上种子瓶渊猿员益袁圆猿园则
窑皂蚤灶 原员袁猿园皂蕴种子培养基 辕 圆缘园皂蕴 三角瓶袁员愿 耀 圆源澡冤
培养袁再上发酵瓶 渊吸取 源皂蕴 种子液袁猿员益袁圆猿园则窑
皂蚤灶 原员袁猿园皂蕴 发酵培养基 辕 圆缘园皂蕴 三角瓶袁员圆园澡冤培养袁
测定金霉素效价袁确定效价提高 员园豫以上的菌株作为
正突变株遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 晕 垣处理对金色链霉菌的影响
圆郾 员郾 员摇 氮离子处理对金色链霉菌存活率的影响
摇 如图 员 所示袁晕 垣处理后菌株的存活率具有随注入剂
量的增大呈野振荡型冶变化趋势袁在 苑园 伊 圆郾 远 伊 员园员猿 蚤燥灶泽
窑糟皂 原圆的剂量下袁菌株的存活率达最大袁员缘园 伊 圆郾 远 伊
员园员猿 蚤燥灶泽窑糟皂 原圆的剂量下袁菌株存活率次之遥
图 员摇 氮离子注入对金色链霉菌存活率的影响
云蚤早援 员摇 杂怎则增蚤增蚤灶早 糟怎则增藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶 葬枣贼藻则 晕 垣 蚤燥灶泽 遭藻葬皂 蚤皂责造葬灶贼蚤灶早
圆郾 员郾 圆摇 晕 垣处理金色链霉菌的诱变率摇 将经 晕 垣诱变
处理的金色链霉菌涂板培养后袁每个诱变剂量任意挑
取 猿园 个单菌落接种斜面袁摇瓶发酵测定其生物效价遥
效价提高 员园豫以上为正突变株袁降低 员园豫以上为负突
变株遥 分别统计不同剂量 晕 垣注入对金色链霉菌的正
突变率和负突变率的影响袁其结果如表 圆遥 从表中可
见院剂量由 猿园 伊 圆郾 远 伊 员园员猿 蚤燥灶泽窑糟皂 原圆到 员员园 伊 圆郾 远 伊
员园员猿 蚤燥灶泽窑糟皂 原圆递增的过程中袁正变率随着存活率的
改变而改变袁在存活率的峰值处渊剂量 苑园 伊 圆郾 远 伊 员园员猿
蚤燥灶泽窑糟皂 原圆冤正变率达到最高 圆圆郾 园豫 袁可见 晕 垣注入对
金色链霉菌的诱变效果比较明显遥
表 圆摇 晕 垣注入金色链霉菌的诱变效果
栽葬遭造藻 圆摇 酝怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶 遭赠 晕 垣
剂量 阅燥泽藻渊 伊 圆郾 远 伊 员园员猿
蚤燥灶泽窑糟皂 原圆 冤 园 猿园 缘园 苑园 怨园 员员园
存活率
杂怎则增蚤增葬造 则葬贼藻 员园园 源远郾 苑 圆苑郾 愿 缘缘郾 远 员缘 圆圆郾 圆
正突变率 辕 豫
孕燥泽贼蚤增藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 园 员源郾 圆 员员郾 员 圆圆郾 园 苑郾 源 员远郾 苑
负突变率 辕 豫
晕藻早燥贼蚤则藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 园 怨郾 缘 圆园郾 苑 圆圆郾 圆 缘缘 员苑郾 源
相对最高效价
栽澡藻 澡蚤早澡藻泽贼 则藻造葬贼蚤增藻
责葬贼藻则 辕 渊怎早窑皂蕴 原员 冤
员园园 员员员郾 苑 员园苑郾 圆 员圆缘郾 园 员员猿郾 苑 员圆员郾 园
圆郾 员郾 猿摇 晕 垣处理对金色链霉菌菌落形态的影响 摇 晕 垣
处理后袁金色链霉菌经培养出现了 缘 种菌落形态袁差别
较大遥 依据其菌落形态尧菌落大小尧孢子颜色和孢子丰
满程度等特征作为区分标准袁将每类菌株各挑选 猿园 耀
猿园苑
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
摇 摇 摇 摇 表 猿摇 氮离子注入金色链霉菌的菌落形态变化
栽葬遭造藻 猿摇 栽澡藻 泽澡葬责藻 燥枣 杂援 葬怎则藻燥枣葬糟蚤藻灶泽 遭赠 晕 垣 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶
分类
悦造葬泽泽蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
菌落形态
悦燥造燥灶蚤葬造 皂燥则责澡燥造燥早赠
菌落表面
杂怎则枣葬糟藻 枣藻葬贼怎则藻
燥枣 糟燥造燥灶赠
菌落直径
悦燥造燥灶赠
凿蚤葬皂藻贼藻则 辕 皂皂
孢子颜色
悦燥造燥则 燥枣 泽责燥则藻
数量
匝怎葬灶蚤贼赠
高效价比
栽澡藻 则葬贼蚤燥 燥枣
澡蚤早澡 责燥贼藻灶糟赠 辕 豫
玉型 草帽形 光滑袁较饱满 圆郾 缘 耀 猿郾 缘 鼠灰色 一般 愿园
域型 圆形袁有的中央凹陷袁有的
产生同心圆袁表面有白点
较粗糙平坦 猿郾 园 耀 源郾 园 中心浅
灰色
较多 源园
芋型 草帽形袁表面有裂纹袁有的中央凹陷 粗糙袁 饱满 圆郾 园 耀 缘郾 园 鼠灰色 多 苑缘
郁型 圆形山峰状 光滑袁饱满 圆郾 园 耀 猿郾 园 浅灰色 少 猿园
吁型 光秃 光秃 圆郾 园 浅黄 少 园
源园 株进行摇瓶初筛袁测定效价并对试验数据进行分析
统计渊表 猿冤遥 通过发酵试验发现袁突变株的菌落形态
与金霉素发酵效价之间存在一定的对应关系袁玉型和
芋型的菌株的效价普遍较高袁而且数目也较多曰不产孢
子的吁型菌株效价最低袁所以在育种试验中以玉型和
芋型为主要类型作为初筛的指标遥
圆郾 圆摇 高压静电场处理对金色链霉菌存活率的影响
金色链霉菌孢子悬液经不同剂量的高压电场处理
后袁菌悬液适当稀释后涂平板袁置恒温培养箱培养袁统
计单菌落数计算存活率如图 圆尧图 猿 所示袁统计分析如
表 源尧表 缘 所示遥
图 圆摇 剂量 粤对金色链霉菌的存活率影响
云蚤早援 圆摇 杂怎则增蚤增葬造 则葬贼藻 蚤灶 粤
从图 圆 可以看出袁在剂量 粤 的组合下袁不同的电
场强度对金色链霉菌孢子的萌发既有促进作用又有抑
制作用袁这与朱丽霞等咱愿暂用高压静电场处理桔青霉菌
以及白爱枝等咱怨暂用高压静电场处理大肠杆菌的结果
相同遥 其中在 园郾 缘噪增窑糟皂 原员 伊 圆园泽处袁孢子的存活率最
高袁比对照提高了 圆源豫 曰在 员郾 缘噪增窑糟皂 原员 伊 源园泽 处袁孢
子的存活率是 缘园豫 袁为半致死状态曰在 圆噪增窑糟皂 原员 伊
远园泽剂量处袁孢子的存活率最低袁只有对照的 圆怨豫 遥 而
且在相同时间内袁随着电场强度的增加袁金色链霉菌孢
子的存活率逐渐降低遥
从图 猿 可以看出袁在剂量 月 组合中袁选择的处理
时间比 粤组的长袁电场强度也比 粤 组的高袁在 月 组合
下高压静电场并没有对孢子表现出激活作用袁只表现
出了对孢子萌发的抑制作用遥 用 怨皂蚤灶 处理的孢子存
活率要比 猿皂蚤灶尧缘皂蚤灶尧苑皂蚤灶的存活率偏高的现象袁但整
体上仍显示出了高压静电场对金色链霉菌孢子的抑制
作用遥
图 猿摇 剂量 月对金色链霉菌存活率的影响
云蚤早援 猿摇 杂怎则增蚤增葬造 则葬贼藻 蚤灶 月
分析 粤尧月两种剂量组合对金色链霉菌的影响袁剂量 粤
的作用较剂量 月 的作用相对较强袁因此选择剂量 粤作
为下一步与 晕 垣组合诱变的参数遥
圆郾 猿摇 高压静电场和 晕 垣复合处理对金色链霉菌的影
响
圆郾 猿郾 员摇 复合处理后突变率变化摇 将经高压静电场和
晕 垣复合处理的金色链霉菌通过摇瓶发酵进行突变率
的统计袁结果如表 远院从中可以看出高压静电场对 晕 垣
注入的金色链霉菌菌株正变率有较大影响遥 在单独使
用静电场时袁孢子存活率最高的 园郾 缘噪增窑糟皂 原员 伊 圆园泽剂
量处袁金色链霉菌的正变率并没有达到最高袁而存活率
最低的 圆郾 园噪增窑糟皂 原员 伊 远园泽 剂量与 员员园 伊 圆郾 远 伊 员园员猿晕 垣
蚤燥灶泽窑 糟皂 原圆 晕 垣 复合处理后菌株的正变率最高为
猿猿郾 猿豫 袁且比使用相同剂量的 晕 垣单独注入的正变率
要高约 员 倍遥 说明复合处理后袁正变率与孢子的存活
率可能没有必然关系袁此外低剂量的高压静电场可能
源园苑
摇 源 期 高压静电场和氮离子复合处理对链霉菌的影响
摇 摇 摇 摇 表 远摇 静电场对 晕 垣注入的金色链霉菌诱变率的影响
栽葬遭造藻 远摇 栽澡藻 皂怎贼葬早藻灶贼蚤糟 则葬贼藻 燥枣 杂援 葬怎则藻燥枣葬糟蚤藻灶泽 遭赠 晕 垣 葬灶凿 匀灾耘云 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶
离子束 陨燥灶 遭藻葬皂 苑园 伊 圆郾 远 伊 员园员猿晕 垣 蚤燥灶泽窑糟皂 原圆 员员园 伊 圆郾 远 伊 员园员猿晕 垣 蚤燥灶泽窑糟皂 原圆
场强 陨灶 贼藻灶泽蚤贼赠 燥枣 匀灾耘孕 辕 渊噪增窑糟皂 原员 冤 园 园郾 缘 圆 园 园郾 缘 圆
时间 栽蚤皂藻 辕 泽 园 圆园 远园 园 圆园 远园
正变率 孕燥泽蚤贼蚤增藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 辕 豫 圆园 员愿郾 缘 圆源 员远郾 苑 圆缘 猿猿郾 猿
负变率 晕藻早葬贼蚤增藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 辕 豫 源园 员缘 猿怨 猿猿郾 猿 圆园 缘园
相对最高效价 糟噪渊员园园冤
栽澡藻 澡蚤早澡藻泽贼 则葬造葬贼蚤增藻 责燥贼藻灶糟赠 糟噪渊员园园冤 辕 渊怎窑皂蕴 原员 冤 员圆源郾 苑 员圆源郾 愿 员源怨 员员苑郾 圆 员园源郾 缘 员圆园郾 源
注院葬院 注入后菌落形态曰 遭院静电场 垣 晕 垣注入的菌落形态遥
晕燥贼藻院 葬院 栽澡藻 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬灶早藻 燥枣 糟燥造燥灶蚤藻泽 葬枣贼藻则 贼则藻葬贼藻凿 遭赠 晕 垣 曰 遭院栽澡藻 皂燥则责则燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬灶早藻 燥枣 糟燥造燥则糟蚤藻泽 葬枣贼藻则 贼则藻葬贼藻凿 遭赠 匀灾耘云 葬灶凿 晕 垣 援
图 源摇 晕 垣处理后与复合处理后菌落形态的比较
云蚤早援 源摇 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽澡葬责藻 燥枣 杂援 葬怎则藻燥枣葬糟蚤藻灶泽 遭赠 晕 垣 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶 葬灶凿 遭赠 晕 垣 葬灶凿 匀灾耘云 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶
并不能对金色链霉菌的孢子形成损伤袁只是促进了菌
株中某些物质的改变使新陈代谢作用加快袁从而提高
了菌株的存活率袁而高剂量的高压静电场可能会对金
色链霉菌形成分子水平的损伤袁再叠加氮离子使菌株
的突变率进一步提高遥 从负变率也可以看出高剂量的
电场与 晕 垣叠加后的负变率明显高于低剂量的电场与
晕 垣的叠加袁进一步说明高剂量的高压静电场可能对金
色链霉菌的孢子造成分子水平的损伤遥
圆郾 猿郾 圆摇 复合处理前后菌落形态的变化摇 菌落的形态
对金色链霉菌的效价有一定的影响袁通过菌落形态的
确定袁可以对菌株的初筛提供初步的依据遥
由图 源 知袁金色链霉菌孢子在低能 晕 垣处理后菌落
形态发生了变化袁有玉要吁型五种菌落形态袁但是经高
压静电场复合处理后袁菌落形态趋于单一型渊图 源冤袁菌
落形态主要表现为院草帽形袁鼠灰色袁表面粗糙袁呈龟裂
状袁单菌落与对照相比较饱满袁直径为 圆郾 缘 耀 猿郾 缘皂皂遥
这个形态正是高产菌的表现形式袁从菌落形态上说明
复合处理的作用较明显遥
圆郾 猿郾 猿摇 复合处理前后菌株保护酶分析摇 超氧化物歧
化酶渊杂韵阅冤尧过氧化氢酶渊悦粤栽冤和过氧化物酶渊孕韵阅冤
是大多数生物所共有的保护酶遥 本试验对出发菌
杂蕴圆尧晕 垣注入高产菌 酝圆圆远 和高压静电场与 晕 垣复合处
理的高产菌 阅员员员源 三株菌株进行 杂韵阅尧孕韵阅尧悦粤栽 的
酶活性测定分析遥 由表 苑 可以知院与对照相比袁晕 垣注
入得到的高产菌株 酝圆圆远 的 杂韵阅尧悦粤栽 和 孕韵阅 酶活性
均不同程度的提高袁其中 孕韵阅 的活性提高最多袁是对
照的 圆郾 缘 倍袁杂韵阅尧悦粤栽 的活性分别提高了 员郾 猿 和 员郾 员
倍曰而高压静电场复合 晕 垣得到的菌株 阅员员员源 的三种
酶活性则进一步的提高遥 其中 孕韵阅 的活性比对照提
高了 远郾 愿 倍袁杂韵阅尧悦粤栽 的活性比对照提高了 圆郾 缘 和
员郾 苑 倍曰此外酶活性与金霉素的效价高低成一定的正
比关系遥
摇 摇 杂韵阅为自由基清除剂袁它广泛存在于生物体的各
种组织中袁能清除具有细胞毒性的自由基 韵圆 渊超氧阴
离子自由基冤袁悦粤栽尧孕韵阅 是清除胞内具有细胞毒性的
匀圆韵圆渊过氧化氢冤的酶袁 但它们的作用机制不同袁悦粤栽
直接催化 匀圆韵圆分解袁 而 孕韵阅 是通过催化 匀圆韵圆分解其
它底物以消耗 匀圆韵圆遥 杂蚤凿藻憎葬赠 等咱员园暂最早通过实验得
缘园苑
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
摇 摇 摇 摇 表 苑摇 高产菌同工酶测定
栽葬遭造藻 苑摇 栽澡藻 蚤泽燥藻灶扎赠皂藻 燥枣 贼澡藻 澡蚤早澡鄄责则燥凿怎糟蚤灶早 杂援 葬怎则藻燥枣葬糟蚤藻灶泽
菌号
杂贼则葬蚤灶 糟燥凿藻 辕 渊怎窑皂蕴 原员 冤 杂蕴圆 酝圆圆远 阅员员员源
孕韵阅 圆员郾 缘 缘猿郾 愿 员猿猿
悦粤栽 圆源郾 缘苑 圆苑郾 源圆 源猿郾 园猿
杂韵阅 员圆郾 怨 员苑郾 苑 猿员郾 苑源
到静电场可以提高种子 孕韵阅 和 悦粤栽 等其它酶的活
性袁宋道军等咱员员暂通过 晕 垣离子注入不同耐辐射微生物
的研究发现 杂韵阅尧悦粤栽 和 孕韵阅 活性随剂量的变化而
变化袁燕晓阳等咱员圆暂和刘志高等咱员猿暂的研究均显示一定
剂量的低能离子注入能够增强清除自由基的酶的合成
能力袁本试验进一步验证了上述试验结果袁说明高压静
电场和 晕 垣离子复合处理引起金色链霉菌体内产生大
量的自由基袁从而引起生物体内清除自由基的抗氧化
物酶 悦粤栽尧杂韵阅尧孕韵阅的活性提高遥 而酶活性的提高也
可能源于高压静电场与 晕 垣注入对微生物生命活动中
保护酶合成从转录到翻译等各个不同水平上产生影
响袁使它们的固有酶结构和活性中心的空间构象发生
变化袁 从而导致酶活改变曰曹永军等咱员源暂的研究表明高
压电场能促进大豆种子萌发袁显著提高种子的 琢 原淀
粉酶尧过氧化氢酶活性和可溶性蛋白含量袁酶活性的提
高促进了种子内贮藏物质的转化尧分级和蛋白质的合
成曰宋颖琦的研究显示咱员缘暂 院适宜的高压静电场可以提
高蔬菜种子的活力指数袁提高蔬菜种子萌发过程中
孕韵阅尧悦粤栽活性袁促进种子内原有贮藏物质的分解袁提
高可溶性蛋白质和总糖的含量袁促进干物质的合成曰高
压静电场与 晕 垣处理后也可能如电场处理植物种子那
样加速链霉菌内贮存物质的分解和转化袁为旺盛的生
理活动奠定了物质基础和能量来源袁使得菌株的代谢
水平提高曰所有的可能需要进一步相关试验验证遥 据
上述对保护酶的测试分析袁可以得出高压静电场复合
晕 垣对金色链霉菌的作用效果较单独用 晕 垣的诱变效果
要好袁且进一步说明高压静电场可能对微生物有诱变
作用遥
猿摇 结论
通过本试验初步验证了高压静电场与 晕 垣复合诱
变的积极效果袁单一用 晕 垣诱变微生物的效果远不及
晕 垣与高压电场复合诱变的诱变率尧正变率高袁这与 晕 垣
注入结合其它诱变方法能够取得较好的诱变效果的试
验结果一致咱员圆 原 员源暂 遥 但二者复合作用的规律性尧作用机
理以及最佳剂量尧最佳照射时间等问题袁有待进一步研
究探讨遥
参考文献院
咱 员 暂摇 云藻灶早 匀 再袁 再怎 在 蕴袁 悦澡怎 孕 运援 陨燥灶 蚤皂责造葬灶贼葬贼蚤燥灶 燥枣 燥则早葬灶蚤泽皂泽咱 允暂 援
酝葬贼藻则蚤葬造泽 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早院砸院砸藻责燥则贼泽袁圆园园远袁缘源渊猿 原 源冤院源怨
原 员圆园
咱 圆 暂摇 悦澡蚤怎 云 再袁 悦澡藻灶 再 砸袁 栽怎 杂 蕴援 耘造藻糟贼则燥泽贼葬贼蚤糟 蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶 燥枣
责澡赠贼燥糟澡则燥皂燥遭蚤造蚤灶 泽赠灶贼澡葬泽藻 葬灶凿 枣藻则则藻凿燥曾蚤灶 枣燥则 遭蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 燥枣
责澡赠贼燥糟澡则燥皂藻 糟澡则燥皂燥责澡燥则藻 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 月蚤燥造燥早蚤糟葬造袁 悦澡藻皂蚤泽贼则赠援 袁
圆园员园袁 圆愿缘渊苑冤院缘园缘远 原 缘园远缘
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