全 文 ：核 农 学 报!"#$%!"&"$## $$’%% )$’.#
!"#$%&’"()#*’+&$,-$.*#’/#$&’0*.+%*+1
收稿日期!"#$(*#’*$&!接受日期!"#$%*#.*$"
基金项目!国家自然科学基金项目"(#%’$#$’!(#’’$"’H# !现代农业产业技术体系建设专项经费项目"I,W?*$$*I*$&#
作者简介!陈胜勇!男!农艺师!主要从事作物栽培与生理研究% /*0123$;U95LX995*$A$H(8;J0
通讯作者!李彩凤!女!教授!主要从事农作物生理研究% /*0123$ 32;12f95L$AH.4$H(8;J0
文章编号!$###*&..$""#$%#$#*$’%%*#’
氮素诱导的甜菜 -’%" 的克隆及序列分析
陈胜勇$!"!李彩凤$!侯!静(!马凤鸣$!李观康"
何霭如"!余小丽"!汪!云"
" $东北农业大学农学院! 黑龙江 哈尔滨!$.##(#*"广东省湛江市农业科学研究院!
广东 湛江!."%#A%*(中国农业大学农学与生物技术学院!北京!$##$A(#
摘!要!本文探索了在氮素诱导下!甜菜 -’%" 序列变化情况及氮素对 -’%" 的调控表达情况’ 根据已知甜
菜谷氨酰胺合成酶基因" -’%"!登录号为 ,j#"H(.(#设计特异引物!利用 WF*VIW方法克隆甜菜质体型
谷氨酰胺合成酶的 ;-E,"G?" ;-E,#片段和甜菜质体型谷氨酰胺合成酶基因组 -E,"G?" -E,#序列!
并进行生物信息学分析’ 获得甜菜 G?" ;-E,片段序列!并首次得到甜菜 G?" -E,序列!并将 G?"
-E,登录到了 EI+C网站的G95+15N"登录号为 /a..&$("#’ 生物信息学分析结果表明!G?" -E,长度
为 H $%%相似性达 AAQA"R!可编码 %($ 个氨基酸残基&其氨基酸序列与其它植物的质体型谷氨酰胺合成酶
"G?"#有很高的同源性!与菠菜 G?" 的同源性最高!属于混合型蛋白!具有 G35*PM5[保守功能域!E端为
<9[1*GX1PY :J0125!I端为 ;1[13M[2;:J0125’ 采用半定量 VIW分析该基因在氮素处理下的诱导表达情
况!结果表明!ES(
@EbE]%
K @E_&#b"# 和 ES(
@EbE]%
K @E_.#b.# 的处理对 G?" 基因表达的促进
效果最好!ES(
@EbE]%
K @E_#b$## 对 G? 基因诱导作用最差’ 研究甜菜 G? 基因的结构功能及表达
调控对甜菜实现高同化氨及增产增糖有重要意义’
关键词!甜菜&质体型谷氨酰胺合成酶"-’%"#&基因克隆&序列分析&表达谱
-SC$$#Q$$&HAT682PP58$##*&..$Q"#$%Q$#8$’%%
!!甜菜"8+/& >#’-&$.1B8#是我国北方特有的糖料作
物!在我国北方农业生产中占有重要地位% 甜菜产业
与北方地区农业生产的发展!农民收入的提高!地方糖
料工业的兴旺等息息相关% 目前黑龙江省乃至全国甜
菜单产不高(总产不稳!特别是甜菜含糖率呈下降趋
势!已成为限制我国甜菜糖业发展的障碍性因子!氮素
供应不合理是造成这一显现主要原因之一 &$ @(’ % 因
此!研究甜菜的氮代谢关键酶谷氨酰胺合成酶"G?#的
氮素调控机制及基因结构对于氮素调节基因的布局和
合理利用具有重要的理论意义% 氮素作为作物生产中
的限制因子!对植物产量有着决定性的影响% 为了提
高作物对氮素的利用率!应该从植物自身出发!研究植
物利用氮素的生理生化特性!并有效地调节这些过程!
才能提高氮素利用率并防止环境污染 &%’ % 研究表明!
谷氨酰胺合成酶"G?#在高等植物氮代谢中起着重要
的作用!是氮代谢的关键酶之一!也与植物抗土壤氮素
瘠薄(抗强光照和抗除草剂草胺磷等抗非生物逆境特
性直接相关 &. @H’ *根据亚细胞定位!植物体内的 G? 分
为存在于细胞质的胞液型谷氨酰胺合成酶"G?$#和存
在于叶绿体的质体型谷氨酰胺合成酶"G?"#两种 &’’ %
G?" 负责再同化光呼吸释放的氨"E]( #!该同化作用
为光呼吸的限速步骤 && @A’ % G? 负责在 ,FV供能及金
属离子存在的条件下催化 E]% K和谷氨酸生成谷氨
酰胺!完成从无机氮转化成有机氮的第一步反应!谷氨
酸合酶"GSG,F#催化谷氨酰胺和 ,@酮戊二酸生成
两分子的谷氨酸!最终完成氨的同化 &$# @$"’ % m9309X
等 &$(’研究发现!过量硝酸盐能促进 G? 活性!过量
E]K% 抑制甜菜 G? 活性% 王学奎等
&$%’研究光对小麦
谷氨酰胺合成酶调控时研究表明!光诱导 G? 的重新
合成!短期调节主要在翻译水平上起作用!受环己亚胺
%%’$
!$# 期 氮素诱导的甜菜 -’%" 的克隆及序列分析
的抑制!长期调节则在转录水平上发挥作用!受放线菌
素 -的影响% 目前关于甜菜 G? 的研究主要集中在
G? 活性方面 &$!$. @$A’ !在影响 G? 基因表达方面的研究
较少% 经检索发现!甜菜 G?" 基因基因已在 EI+C登
录!但 -’%" 在氮素诱导下的结构变化研究未见报道%
本研究拟利用 WF*VIW技术!克隆 -’%" 并通过生物信
息学分析 L35" 结构及其编码蛋白的基本特性*并通过
半定量 VIW分析其在氮素诱导下的表达特征!为今后
研究甜菜 G? 基因在氮素循环的作用提供理论基础%
!"材料和方法
!#!"试验材料
试验于 "##’ 年 . 月 @"##& 年 H 月在东北农业大
学国家重点生理实验室进行% E?*"’.感受态细胞
-].,购自北京 FC,EG/E公司!YZ-3& @F载体(B,
B&F聚合酶(-E,片段回收纯化试剂盒均购自大连
F1k1W1公司!?7Y9X?;X2Y[%反转录酶(FWClJ3试剂均购
自美国 25\2[XJL95 公司!-E1P9#购自立陶宛 Z+C公
司% 供试甜菜品种是二倍体品种甜研 ’ 号!种子由黑
龙江大学甜菜研究所提供% 将甜菜种子在 ".^培养
箱中催芽 "%U!后挑选已出芽的种子播种在培养钵中!
育苗管理中只浇水不施肥!待甜菜幼苗在营养钵中生
长到二叶一心时把幼苗拔出!洗净根系!再移栽到装有
营养液的泡沫杯!最后放在光照约 $ &## 3=!温度约
".^的培养箱培养% 营养液配方以 ]J1L315: 营养液
配方 &$"’ 为基础!并加以改进!营养液成分如下$I1
"ES( # ")%]"S" %Q#"00J3)B
@$ #! ZL"?S%)’]"S
"$QAA00J3)B@$#!kES( "HQ#(00J3)B
@$ #!"E]% # " ?S%
"$Q’.00J3)B@$ #!k]"VS% "$Q#(00J3)B
@$ #!/-F,*D9
"#Q$.00J3)B@$ #!](+S( " $Q# ‘$#
@( 00J3)B@$ #!
Z5I3")%]"S"$Q# ‘$#
@(00J3)B@$#!m5?S%)’]"S"$Q#
‘$# @( 00J3)B@$ #!I7?S%).]"S" $Q# ‘$#
@% 00J3)
B@$#!"E]%# HZJS’S"%)%]"S".Q# ‘$#
@H00J3)B@$ #%
营养液培养 ’: 后!将幼苗置于含不同氮源的营养液中
进行培养!其中 ES(
@以 I1"ES( # " 和 kES( 为氮源!
E]%
K以"E]%
K# " ?S% 为氮源% 为保持营养液总氮量相
同!E浓度均为 ’00J3)B@$!分别设 ES(
@EbE]%
K @E
为 $##b#(&#b"#(.#b.#("#b&# 和 #b$## 五种处理!每个
处理 ( 个重复!并用 %R的硝酸 @磷酸混合液"$b"##调
节 Y]值至 ’Q# 左右&$#’ % 取处理后 %&U 的甜菜幼叶作
试验材料!样品采集后立即置于液氮中速冻!并于
@&#^冰箱中保存用于总 WE,的提取!取样在条件一
致的光照培养箱"光照约 $ &## 3=!温度 ".^#中进行%
!#$"试验方法
$Q"Q$!总 WE,的提取及 ;-E,的合成!总 WE,的
提取参考FWClJ3试剂说明书进行% 甜菜品种甜研 ’ 号
于温室中培养至 % )H 片幼苗期时取样!取样前对幼苗
浇灌 (#00J3)B@$的 kES( 溶液进行 %U 的诱导% 将样
品置于液氮中研磨!用 FWClJ3试剂提取 WE,% WE,的
消化参考 -E1P9C的说明书进行% "$#用分光光度法
定量测定 "H#50和 "2处的吸光值!计算 ,"H# T,"&#
的值以估计总 WE,的纯度!,"H# T,"&#的值为 $Q&. )
"Q# 时!表明无杂质的污染% 通过 ,"H# 的值计算总
WE,的量% ""#在 $R琼脂糖凝胶上分离总 WE,!有
两条清晰的带!且大相对分子质量""&? XWE,#的亮度
近似为小相对分子质量"$&? XWE,#的亮度的 " 倍!说
明总 WE,完整% 第一链 ;-E,的合成的具体操作步
骤参考 ?7Y9X?;X2Y[%反转录酶的使用说明书进行% 引
物采用 S32LJ":F# $&!反转录酶为 ?7Y9X?;X2Y[%%
$Q"Q"!G?" ;-E,获取!引物设计参照 G95+15N 上
]Jf0155 和 F2P;U59X提交的甜菜 -’%" 基因序列"登录
号为 ,j#"H(.(#!合成一对 G?$ 基因扩增的特异引物
&由生工生物工程"上海#股份有限公司合成’% 引物
序列如下$G"D$$.n@,FGGIFI,,,F,IFFGI,IIF,,
I,@(n!G"W$"AH$.n@FF,I,I,FFG,G,G,G,GFIF
FFG,@(n% 在 .# "B反应体系中!取 " "B第一链
;-E,作模板!利用 B,*F1o 酶进行 VIW"A%^变性 (
025*A%^ (# P!H#^ (# P! ’"^ $ 025 为一个反应循
环!重复 (# 次*’"^延伸 $# 025#扩增 G?";-E,!回
收特异扩增条带后进行连接(转化(测序%
$Q"Q(!总 -E,的提取!参考 -JM39和 -JM39的 IF,+
小量法进行甜菜幼苗叶片总 -E,的提取 &$(’ %
$Q"Q%!G?" -E,的分离!根据 G?" ;-E,的序列和
分段克隆策略!合成 " 对 G?" -E,扩增的特异引物!
其中一对引物"G"D$ 和 G"W’($#扩增 G?" -E,的 .n
端序列!另一对引物 "G"DH$. 和 G"W$"AH#扩增 G?"
-E,的 (n端序列% 引物编号及其序列如下$G"D$$.n
@,FGGIFI,,,F,IFFGI,IIF,,I,@(n!G"W’($$
.n@FFF,FFII,GI,F,I,GGI,,G@(n!G"DH$.$ .n
@FGFIGG,GIIF,FIIFGGFI@(n!G"W$"AH$ .n@
FF,I,I,FFG,G,G,G,GFIFFFG,@(n% 用 B,*F1o
酶扩增 G?" -E,的 .n端序列和 G?" -E,的 (n端序
列!同上回收(连接(转化和测序% 结合 .n((n端序列
信息得到 G?" -E,全长%
$Q"Q.!序列的生物信息学分析!利用 EI+C+31P[
"U[Y$TTeee85;<28530852U8LJ\T+B,?F#将克隆得到
.%’$
核!农!学!报 "& 卷
的 G?" -E,序列进行序列对比!分析 G?" -E,序列
的内含子情况% 利用 EI+C+31P[将 G?" ;-E,编码的
氨基酸序列进行序列对比!用 I37P[13d" U[Y$TTeee8
9<281;87NTFJJ3PT;37P[13e"T#程序对与此氨基酸序列得
分较高的高等植物氨基酸序列进行进化树分析!用
/=V,?M的 VXJ[V1X10" U[Y$TTeee89=Y1PM8;UT;L2*<25T
Y2#工具预测其蛋白质的等电点及相对分子质量!用
FJYVX9:" U[Y$TT<2Je9<8Y1P[97X8fXT25[XJ*7N8U[03#分析
蛋白质的疏水性和跨膜区!用 ]EE" U[Y$TT5YP1*Y<238
2<;Y8fXT;L2*<25 TP9;YX9:pU558Y3#网络服务器预测蛋
白质的二级结构%
$Q"QH!半定量 VIW反应!根据 G95+15N 网络数据
库 &"#’提供的甜菜 G?" 基因 -’%" "1;;9PP2J5 570<9X$
,j#"H(.(#和甜菜看家基因三磷酸甘油醛脱氢酶
G,V-] "1;;9PP2J5 570<9X$ /D%#&"(%#的 ;-E,序列
设计特异引物% 引物由 YX209XYX9029X. 软件设计!然
后在 EI+C网站上进行 +31P[以保证引物的专一性%
引物设计 &$#’ 如下$G?" 上游引物为 G?" @D.n@
,FGGIFI,,,F,IFFGI,IIF,,I,@(n!下游引物
为 G?" @W .n@FF,I, I,FFG ,G,G, G,GFI
FFFG,@(n* G,V-] 上 游 引 物 为 G,V-]*D.n@
I,I,FFFIFI,FFFIFFI,II,F@(n!下游引物为
G,V-]*W.n@FIG,,,,IFGI,GIF,FGF,FF,@
(n!引物均由生工生物工程"上海#股份有限公司合成%
同时用 ::]"S和总 WE,样品代替 ;-E,模板作阴性
对照% 半定量 VIW反应采用 .#"B反应体系% 于一
VIW管中加入反转录产物 ;-E,模板 $ )""B! $# ‘
+7f9X."B!ZLI3" " ".0Z# ("B! :EFV" $#0Z# 02=
$"B!G?" @D和 G?" @W或 G,V-]*D和 G,V-]*W各
$"B!+2JW91:MB,*F1o 酶 "+2JD37=# #Q."B!加 WE1P9
DX99::]"S至 .#"B% VIW反应条件参考 +2JW91:M
B,*F1o 酶说明书% VIW完成后!取 VIW产物 ""B!
-E,01XN9X""B!用 #Q&R琼脂糖凝胶电泳检查!在影
像分析系统 ?jEG/E/"G959IJ0Y15M! a?,#上摄像!
用系统自带的 ?jEG/E/FSSB? 凝胶分析软件对电泳
条带进行平均光密度分析!根据光密度值来判断 G?"
基因的表达情况 &$#’ % 最后利用 G,V-]基因的 VIW
产物的亮度对各个样品模板的加入量进行调整!从而
达到半定量的效果%
$"结果与分析
$#!"*7$ 8RET的 >@V扩增"克隆及序列分析
由图 $ 可知!以设计的 G"D$ 和 G"W$"AH 引物对
该 ;-E,进行特异 VIW扩增!获得的 -E,片段长度
约为$ ".A 有$ "AH子% 通过与 ]Jf0155 和 F2P;U59X提交的甜菜 -’%" 基
因序列",j#"H(.(#相比较!开放阅读框"SWD#中核苷
酸序列相似性为 AAQA"R!存在 $ 个核苷酸的差异!即
,j#"H(.( 序列的 $#& 位的 I变为 F!由此 G?" ;-E,
序列推导出氨基酸残基数为 %($ 个!与 ,j#"H(.( 序
列推导出的氨基酸序列完全一致%
注$Z$-B"### Z1XN9X*$ @.$G?" ;-E,基因的 VIW结果%
EJ[9$Z$-B"### Z1XN9X*$ @.$W9P73[JfG?" ;-E,8
图 !"*7$8RET基因 >@V电泳图
4356!"M()82+,.9,+)/3/+)/-(2,0*7$ 8RET’N >@V
$#$"*7$ RET的序列与分析
由图 " 可知!扩增得到的 G?" -E,全长约为
H $%#显子和 $" 个内含子!最大内含子长度为 $ .’H的长度为 &A与常见植物基因的内含子边界一致% 该基因序列已登
录在 G95+15N"登录号为 /a..&$("# &"$’ %
$#F"*7$ 氨基酸序列分析
用 I37P[13d程序将甜菜 G?" 氨基酸序列与已知
的部分植物 G?" 氨基酸进行聚类分析!结果如图 ( 所
示% 甜菜 G?" 氨基酸残基序列与菠菜 " 04.%&*.&
"’+$&*+& # G?" 亲 缘 关 系 最 近! 冰 叶 日 中 花
"G+1+63$5&%/;+6#6*$51/&’.%#6#次之!且与其它的高
等植物如芸苔 "8$&11.*& %&4#1#(拟南芥 ",$&3.="41.1
/;&’.&%&#(芦 苇 "2;$&-6./+1
/$&’.1#( 水 稻 "H$5:&
1&/.>& #( 小 麦 " B$./.*#6 &+1/.>#6#( 大 麦 " I"$=+#6
>#’-&$+#(玉米"J+& 6&51#(甜瓜"<#*#6.16+’"#(大豆
"K’5*.%+6&7#(苜蓿 "G+=.*&-"1&/.>&#(百脉根 " A"/#1
C&4"%.*#1#(绣线菊 " 04.$&+& %.44"%.*& #(豌豆 "2.1#6
H%’$
!$# 期 氮素诱导的甜菜 -’%" 的克隆及序列分析
注$Z$-B$.### Z1XN9X*$ @($G"DH$. 和 G"W’($ 引物对扩增
的 VIW结果*% @H$G"DH$. 和 G"W$"AH 引物对扩增的 VIW
结果*’ @&$G"D$ 和 G"W$"AH 引物对扩增的 VIW结果*A @
!! $#$G"D$ 和 G"W’($ 引物对扩增的 VIW结果%
EJ[9$Z$-B$.### Z1XN9X*$ @($W9P73[JfG?"-E,G"DH$. 15: G"W’($* % @H$W9P73[JfG?"-E, G"DH$. 15: G"W$"AH* ’ @&$W9P73[JfG?"-E, G"D$ 15: G"W$"AH*A @$#$W9P73[JfG?"-E,!! 15: G"W’($8
图 $"*7$RET基因 >@V电泳图
4356$"M()82+,.9,+)/3/+)/-(2,0*7$RET’N >@V
P1[2\70#(烟草 ").*"/.&%& &/+%#&/&#和胡萝卜 "L&#*#1
*&$"/&#等的 G?" 氨基酸残基序列具有较高的同源性%
注$箭头表示甜菜 G?" 在系统发生树中的位置%
EJ[9$FU91XXJe25:2;1[9: [U9YJP2[2J5 JfG?" fXJ0P7L1X<99[25 YUM3JL95;M[X998
图 F"甜菜中 *7$ 与 E@SJ中部分 *7$ 的进化树分析
4356F">9N(,5)1)238+)(&23,1/93./’)2<))1*7$ ,0/-5&+’))2&1;.&+2,0*7$ 31E@SJ
通过网上资源 ]EE"]29X1X;U2;13E97X13E9[eJXN
09[UJ:# " U[Y$TT5YP1*Y<2382<;Y8fXT;L2*<25 TP9;YX9:p
U558Y3#分析!G?" 各个氨基酸残基对应的二级结构及
多肽预测的二级结构!其主要二级结构个数及比例如
下$,螺 旋 " ,3YU1 U932=# " ]U # $#% 个! 比 例 为
"%Q$(R!-折叠"/=[95:9: P[X15:# "/9#HA 个!比例为
$HQ#$R!无规卷曲"W15:J0;J23#"I;# ".& 个!比例为
.AQ&HR!属于混合型蛋白!其 E端与 I端各含一个段
-折叠%
$#K"不同氮素处理下甜菜叶片 *7$:VET的变化
从图 % @,和图 % @+可以看出!甜菜 -’%" 在转录
水平上的表达受氮素诱导!不同 ES(
@EbE]%
K @E处
理 %&U 后!甜菜 G?"0WE,相对表达量有显著或极显
著差异% 在 ES(
@EbE]%
K @E为 .#b.# 的 G?"0WE,
相对表达量最高!并与其他氮处理的达到显著差异!其
中与 "#b&# 及 #b$## 的达到极显著差异% 在 ES(
@Eb
E]%
K @E为 #b$## 的 G?"0WE,相对表达量最低!但
与 "#b&# 没有达到显著差异% G?"0WE,相对表达量
自高到低的顺序为 .#b.# q&#b"# q$##b# q"#b&# q#
b$##!表明硝态氮比例较高的混合态氮及硝态氮较铵
态 氮 比 例 较 高 的 混 合 态 氮 及 铵 态 氮 更 能 促 进
G?"0WE,的表达%
F"讨论
本研究利用 WF*VIW和分段 VIW策略!从糖用甜
’%’$
核!农!学!报 "& 卷
注$泳道 Z为 -B" ### Z1XN9X!自上而下为 " ###@EbE]%
K
@E为 #b$##("#b&#($##b#(.#b.#(&#b"# 的 G?";-E,*H(’(&(A($# 分别为 #b$##("#b&#($##b#(.#b.#(&#b"# 的 G,V-];-E,%
EJ[9$B159Z2P-B" ### Z1XN9Xe2[U " ####!.#b.#!&#b"# fJXES(
@E$E]%
K @EX9PY9;[2\93M* 15: H!’!&!A!$# 2PG,V-];-E,e2[U #$$##!"#$&#!$##$#!.#$.#!&#$"#
!!!! X9PY9;[2\93M8
图 K"处理 KW9后不同氮素下 *7$:VET定量 >@V表现
4356K"V)(&23Q))O.+)//3,1()Q)(,0*7$:VET-1;)+;300)+)12132+,5)1.+,.,+23,1&02)+KW 9,-+/
菜叶片中分别克隆获得 G?" ;-E,和 G?" -E,序列!
与 ]Jf0155 和 F2P;U59X提交的甜菜 -’%" 基因序列
",j#"H(.(#相比!发现甜菜品种甜研 ’ 号 G?" ;-E,
SWD序列中存在 $ 个核苷酸的差异!这可能是由于品
种不同所致!而非 VIW扩增时核苷酸的错误掺入所引
起% 因为这一核苷酸的变化为同义突变!即编码的氨
基酸未发生改变!从而减少了基因变异本身对植物的
影响!这可能是同一物种不同品种适应不同生态环境
和生理条件的遗传基础略有不同的具体体现%
研究还对所得到的 G?" ;-E,序列推导出的氨基
酸残基序列进行了结构(功能保守区预测和聚类分析%
甜菜 G?" 与菠菜 G?"(冰叶日中花 G?" 聚在一起!同
属于叶绿体型 G? 家族!同源性在 &AR以上!与豌豆(
烟草(水稻(小麦等植物的叶绿体型 G? 同源性叶很
高!G? 具有 G35*PM5[家族的结构功能域!这说明 G?"
在植物界里都是比较保守的!预示着 G?" 在植物的生
长发育中起着重要作用%
本研究中!适当比例的 ES(
@E$E]%
K @E能增加
G?" 基因的表达谱!当 ES(
@E比例较高时!对 G?" 基
因表达的促进效果更为明显% 此结果与陈胜勇等 &""’ (
管闪青等"(’ (mU1J等 &"%’氮素对甜瓜(水稻 G? 基因表
达的研究结果比较相近% 研究发现!以ES(
@E为外部
氮源时!处理初期即可以明显促进 G?" 基因的表达!
随着氮浓度的增大而增加% 这可能和 ES(
@可以通过
茎维管系统直接运输有关!ES(
@除了能促进根 EW活
性外!还能很快地促进叶 EW活性!从而提高叶 E]%
K
的水平!促进 G?" 基因的表达% 单一的氮素类型!特
别是单一的铵态氮对 G? 基因的诱导较差!可能是由
于植物对 E]%
K吸收较差或 E]%
K不能直接参与氮代
谢途径!而需要 ES(
@的辅助或转化% 这就能为在混
合态氮营养中!硝态氮比例高的条件下更能促进 G?
基因的表达作解释 &".’ %
K"结论
首次克隆到氮素诱导的甜菜 -’%" 和 G?" 基因组
-E,!并将 G?" -E,登录到了 EI+C网站的 G95+15N
"登录号为 /a..&$("#% G?" -E,长度为 H$%%有 $( 个外显子和 $" 个内含子*氮素诱导的 G?" ;-E,
序列长度为 $ "AH基酸序列与其它植物的质体型谷氨酰胺合成酶"G?"#
有很高的同源性!属于混合型蛋白!具有 G35*PM5[保守
功能域% ES(
@EbE]%
K @E_&#b"# 和 ES(
@EbE]%
K
@E_.#b.# 的处理最能促进 G?" 基因的表达!ES(
@
EbE]%
K @E_#b$## 对 G? 基因诱导作用最差%
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