全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊苑冤院员园园园 耀 员园园缘
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员员鄄员圆鄄猿员摇 接受日期院圆园员圆鄄园缘鄄园圆
基金项目院欧盟科技合作专项经费渊园怨园源冤
作者简介院何丽华渊员怨远愿鄄冤 袁 女袁 浙江诸暨人袁 大学本科袁 副研究员袁 研究方向为昆虫分子生物学遥 栽藻造院 园缘苑员鄄愿远源园源员苑猿鄄愿员曰 耘鄄皂葬蚤造院 澡藻造澡员怨远愿岳
员远猿援 糟燥皂
通讯作者院王永强渊员怨苑园鄄冤袁男袁浙江湖州人袁博士袁研究员袁研究方向为家蚕遗传育种和蛋白质组学遥 栽藻造院 园缘苑员鄄愿远源园源圆远缘曰 耘鄄皂葬蚤造院 憎葬灶早赠择岳 扎葬葬泽援 燥则早
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园苑鄄员园园园鄄园远
棉铃虫成虫野生型与体色突变体的蛋白组成比较
何丽华员 摇 刘培刚员袁圆 摇 陈金娥员 摇 刘摇 岩员 摇 王永强员 摇 孟智启员袁圆
渊员援 浙江省农业科学院蚕桑所袁浙江 杭州摇 猿员园园圆员曰 圆援 南京农业大学动物科技学院袁江苏 南京摇 圆员园园怨缘冤
摘摇 要院为进一步了解棉铃虫体色突变体的成色和调控机理袁利用 杂阅杂 原聚丙烯酰胺凝胶电泳渊 杂阅杂鄄
孕粤郧耘冤技术尧基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱技术渊酝粤蕴阅陨鄄栽韵云鄄栽韵云 辕 酝杂冤和生物信息学技
术袁对棉铃虫显性尧隐性体色突变体与野生型成虫的蛋白质组成进行了比较分析遥 研究发现院显性体色
突变体与野生型之间差异不明显袁而隐性体色突变体和野生型之间存在一些明显差异袁选取其中比较明
显的 猿 条差异条带进行质谱分析袁发现一些与能量代谢尧细胞骨架相关的蛋白遥 结果表明袁这 圆 类蛋白
可能与棉铃虫体色突变性状的发生和调控相关遥
关键词院棉铃虫曰突变体曰野生型曰电泳
悦韵酝孕粤砸粤栽陨灾耘 粤晕粤蕴再杂陨杂 韵云 栽匀耘 孕砸韵栽耘陨晕 悦韵酝孕韵杂陨栽陨韵晕杂 月耘栽宰耘耘晕 宰陨蕴阅 栽再孕耘 粤晕阅
月韵阅再 悦韵蕴韵砸 酝哉栽粤晕栽 韵云 匀耘蕴陨悦韵灾耘砸孕粤 粤砸酝陨郧耘砸粤 粤阅哉蕴栽
匀耘 蕴蚤鄄澡怎葬员 摇 蕴陨哉 孕藻蚤鄄早葬灶早员袁圆 摇 悦匀耘晕 允蚤灶鄄藻员 摇 蕴陨哉 再葬灶员 摇 宰粤晕郧 再燥灶早鄄择蚤葬灶早员 摇 酝耘晕郧 在澡蚤鄄择蚤员袁圆
渊员郾 杂藻则蚤糟怎造贼怎则葬造 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 袁在澡藻躁蚤葬灶早 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆员曰
圆援 悦燥造造藻早藻 燥枣 粤灶蚤皂葬造 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 晕葬灶躁蚤灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶躁蚤灶早袁 允蚤葬灶早泽怎摇 圆员园园怨缘 冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽燥 早葬蚤灶 葬灶 蚤灶鄄凿藻责贼澡 怎灶凿藻则泽贼葬灶凿蚤灶早 燥枣 贼澡藻 枣蚤灶藻灶藻泽泽 葬灶凿 则藻早怎造葬贼蚤燥灶 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 遭燥凿赠 糟燥造燥则 皂怎贼葬灶贼 燥枣
匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬 匀遭灶藻则袁 贼澡藻 责则燥贼藻蚤灶 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 遭藻贼憎藻藻灶 葬凿怎造贼 燥枣 凿燥皂蚤灶葬灶贼 皂怎贼葬灶贼袁 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼 葬灶凿
憎蚤造凿 贼赠责藻 憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿 怎泽蚤灶早 贼澡藻 杂阅杂鄄孕粤郧耘 糟燥皂遭蚤灶藻凿 憎蚤贼澡 酝粤蕴阅陨鄄栽韵云鄄栽韵云 辕 酝杂 葬灶凿 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽援 栽澡藻
则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 责则燥贼藻蚤灶 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 凿燥皂蚤灶葬灶贼 皂怎贼葬灶贼 葬灶凿 憎蚤造凿 贼赠责藻 澡葬凿 造蚤贼贼造藻 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻援 匀燥憎藻增藻则袁 贼澡藻则藻
憎藻则藻 燥遭增蚤燥怎泽 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼 葬灶凿 憎蚤造凿鄄贼赠责藻援 栽澡则藻藻 泽责藻糟蚤枣蚤糟 泽贼则蚤责泽 憎藻则藻 糟澡燥泽藻灶 枣燥则 皂葬泽泽
泽责藻糟贼则燥皂藻贼则赠 葬灶凿 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽袁 葬灶凿 贼憎燥 贼赠责藻泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶泽 则藻造葬贼藻凿 贼燥 藻灶藻则早赠 皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 葬灶凿 糟赠贼燥泽噪藻造藻贼燥灶 憎藻则藻
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿援 栽澡藻泽藻 枣蚤灶凿蚤灶早泽 泽怎早早藻泽贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 贼憎燥 贼赠责藻泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶泽 皂葬赠 遭藻 葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 憎蚤贼澡 燥糟糟怎则则藻灶糟藻 葬灶凿 则藻早怎造葬贼蚤燥灶 燥枣
遭燥凿赠 糟燥造燥则 皂怎贼葬灶贼 贼则葬蚤贼泽 燥枣 匀援 葬则皂蚤早藻则葬援
运藻赠 憎燥则凿泽院匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬 匀遭灶藻则曰皂怎贼葬灶贼曰憎蚤造凿 贼赠责藻曰藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽
摇 摇 昆虫黑化是自然界中普遍存在的一种现象袁成为
揭示物种在自然界中进化与适应的经典范例遥 许多种
类的昆虫都出现过黑化突变体袁如黑化粘虫尧黑腹果蝇
突变体和桑蚕暗化型自然突变体等袁为昆虫黑化成色
和调控机理的研究提供了重要素材咱员暂 遥 黑化的发生
不仅改变了昆虫的体色袁而且还会导致昆虫行为尧生理
特征和生活史等发生改变遥 黑化个体的幼虫和成虫生
命力通常比正常型强袁生长发育和交配行为也表现出
显著差异咱圆暂 遥
作为棉花重要害虫之一的棉铃虫 渊匀藻造蚤糟燥增藻则责葬
葬则皂蚤早藻则葬 匀遭灶藻则冤也存在着不同类型的体色黑化突变
体遥 棉铃虫体色黑化突变体的类型很多袁但关于棉铃
园园园员
摇 苑 期 棉铃虫成虫野生型与体色突变体的蛋白组成比较
虫体色黑化突变的稳定品系的报道却很少遥 王沫咱猿 耀 缘暂
等发现一棉铃虫蛾蛹黑型突变体且性状稳定遗传袁并
对其进行了相关的遗传学尧生理学和生物学等分析遥
本实验室通过远园悦燥 酌射线照射野生型棉铃虫获得一体
色突变体袁其后又在野生型棉铃虫常规饲养过程中发
现一自然突变的体色突变体袁分别对其进行了遗传规
律分析袁证明 圆 突变体分别为显性尧隐性黑化突变
体咱远袁苑暂 遥
前人经过大量的研究袁对昆虫黑化的成色和调控
机理有了初步了解袁但昆虫黑化形成的原因与类别多
种多样袁而且黑化的遗传调控和分子基础也不尽相同袁
因此还需通过更多的技术手段进行分析探讨咱愿暂 遥 棉
铃虫作为一种危害广泛的农作物害虫袁体色变化的多
样性为防治工作增加了困难袁因此袁深入了解棉铃虫体
色机理袁建立合理的防治方法显得十分迫切遥
本研究在完成对上述棉铃虫显性尧隐性体色突变
体遗传分析的基础上袁通过 杂阅杂鄄孕粤郧耘 技术尧酝粤蕴阅陨鄄
栽韵云鄄栽韵云 辕 酝杂技术和生物信息学分析技术等方法袁对
棉铃虫体色突变体的成色和调控机理作了初步探讨袁
同时结合突变体的免疫生理特征研究结果袁期待为棉
铃虫遗传防治研究提供有价值的参考遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
员郾 员郾 员摇 试验用棉铃虫摇 棉铃虫显性尧隐性体色突变体
及野生型品种保存于浙江省农业科学院蚕桑所昆虫分
子实验室遥 试验用野生型棉铃虫在浙江省萧山棉田中
捕获袁并在本实验室经人工多代饲养曰显性体色突变体
是在羽化前 员 耀 圆凿 的野生型棉铃虫经远园悦燥 酌 射线照射
渊辐照剂量为 猿缘郧赠袁剂量率为 圆缘郧赠 辕 皂蚤灶冤袁羽化后与正
常雄蛹交配获得的后代中发现的袁经多代饲育性状稳
定遗传曰隐性体色突变体于 圆园园苑 年 愿 月在人工饲养的
野生型成虫中发现并选出袁经多代繁育该突变性状稳
定遗传遥 猿 个材料于 圆园员园 年春季在相同条件下饲养袁
养至成虫第 圆 天后收集成虫个体渊雄性冤于离心管中
并迅速液氮冷冻袁然后于 原苑园益 冰箱保存备用遥
员郾 员郾 圆摇 试剂和仪器摇 十二烷基硫酸钠渊杂阅杂冤尧丙烯酰
胺渊 孕燥造赠葬糟则赠造葬皂蚤凿藻 冤尧 晕袁 晕忆 原 亚甲基双丙稀酰胺
渊酝月粤冤尧二硫苏糖醇渊阅栽栽冤尧甘氨酸渊郧造赠糟蚤灶藻冤尧三羟甲
基氨基甲烷渊栽则蚤泽冤等试剂购自 郧耘公司袁考马斯亮蓝 砸
原圆缘园 渊 悦月月鄄砸圆缘园冤尧过硫酸铵渊粤孕冤尧四甲基乙二胺
渊栽耘酝耘阅冤尧甲醇和冰乙酸等试剂均为分析纯袁购自华
东医药集团袁低分子量标准蛋白渊员源郾 源 耀 怨苑郾 源噪阅冤购自
上海生工生物工程有限公司遥
员郾 圆摇 样本提取和预处理
蛋白质提取参照文献咱怨暂并加以改进袁利用液氮
将棉铃虫 猿 个不同的雄性成虫样本渊各 员 头冤研碎袁各
称取 园郾 员圆早 样品按照 员颐 员园 的比例加入蛋白质抽提液
渊远圆郾 缘皂皂燥造 辕 蕴 栽则蚤泽鄄匀悦员 责匀 远郾 愿袁园郾 缘豫 杂阅杂袁员园豫甘油袁
缘豫巯基乙醇冤于 圆皂造 离心管中袁漩涡震荡 猿园泽袁源益放
置 员澡袁充分溶解蛋白质遥 然后在 源益尧员远源园园则 辕 皂蚤灶 条件
下离心 猿园皂蚤灶袁取上清后相同条件下再次离心 猿园皂蚤灶袁
取上清后分装袁 原 苑园益 保存备用遥 利用 月则葬凿枣燥则凿 法精
确测定各样品的蛋白质浓度咱员园暂 遥
员郾 猿摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘分析
采用 栽则蚤泽 原 甘氨酸电极缓冲液系统袁以 阅再悦在 原
圆源月 型垂直板电泳槽进行电泳遥 分离胶浓度为
员圆郾 缘豫 袁浓缩胶浓度为 缘豫 袁每泳道上样量 员缘滋造袁样本
蛋白的绝对量为 猿园滋早遥 样品尽量加在中间孔中袁未加
样孔中加入等体积 员 伊 杂阅杂鄄孕粤郧耘 上样缓冲液袁在样品
旁边泳道中加入等体积的低分子量标准蛋白遥 先恒流
员园皂粤袁运行 园郾 缘澡袁再于 圆园皂粤 运行至溴酚蓝前沿到达
分离胶底部约 员糟皂 时停止电泳遥 轻轻撬开玻璃板取
下凝胶袁利用考马斯亮蓝进行染色遥
员郾 源摇 差异蛋白质条带质谱鉴定
利用 匝怎葬灶贼蚤贼赠 燥灶藻 源郾 远圆 软件分析各样本的 杂阅杂鄄
孕粤郧耘图谱袁然后将差异蛋白质条带切出进行质谱分
析遥 按照 杂澡藻增糟澡藻灶噪燥 的方法咱员员暂将切下的 猿 条差异蛋
白条带应用胰蛋白酶分别进行蛋白酶解袁包括脱色尧干
胶尧酶解尧肽段提取尧浓缩等过程袁浓缩后的样品用串联
飞行时间质谱仪进行串联质谱分析 渊 酝粤蕴阅陨鄄栽韵云鄄
栽韵云 辕 酝杂冤袁此过程委托上海博苑生物科技有限公司完
成遥 仪器型号院粤月陨 源愿园园 酝粤蕴阅陨鄄栽韵云 辕 栽韵云 串联质谱
仪渊粤责责造蚤藻凿 月蚤燥泽赠泽贼藻皂泽袁 哉杂粤 冤遥
员郾 缘摇 蛋白质数据库搜寻分析
将一级和二级质谱数据整合并使用 郧孕杂 猿郾 远
耘曾责造燥则藻则 栽酝 泽燥枣贼憎葬则藻渊粤责责造蚤藻凿 月蚤燥泽赠泽贼藻皂泽冤和 酝葬泽糟燥贼圆郾 员
渊酝葬贼则蚤曾 杂糟蚤藻灶糟藻冤 对质谱数据进行分析和蛋白鉴定袁搜
索参数如下院数据库为 晕悦月陨灶则曰酶为胰蛋白酶曰允许最
大漏切位点为 员曰固定修饰为 悦葬则遭葬皂蚤凿燥皂藻贼澡赠造 渊悦冤曰可
变修饰为 韵曾蚤凿葬贼蚤燥灶 渊酝冤曰 酝杂 贼燥造藻则葬灶糟藻为 园郾 员缘阅葬曰酝杂 辕
酝杂 贼燥造藻则葬灶糟藻 为 园郾 圆缘阅葬遥 孕则燥贼藻蚤灶 泽糟燥则藻 悦援 陨援 豫大于 怨缘
为鉴定成功遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 棉铃虫显性尧隐性突变体及野生型成虫的表型比
员园园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
较
与棉铃虫野生型雄性成虫相比袁经远园 悦燥 酌 射线照
射处理而获得的显性突变体雄性成虫的体色呈现深褐
色袁而在常规饲养过程中自然突变获得的隐性突变体
雄性成虫的体色则呈现为黑色袁两者在体色上均与野
生型成虫在表型上有着显著的差异渊图 员 冤遥
图 员摇 显性尧隐性体色突变体和野生型雄性棉铃虫成虫比较
云蚤早援 圆摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 责澡藻灶燥贼赠责藻 燥枣 憎蚤造凿 贼赠责藻 葬灶凿 凿燥皂蚤灶葬灶贼袁 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼 蚤灶 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬
圆郾 圆摇 棉铃虫显性尧隐性突变体及野生型成虫的电泳图
谱
分别对棉铃虫显性尧隐性突变体和野生型雄性成
虫的蛋白质进行 杂阅杂鄄孕粤郧耘分析袁染色及图像扫描后袁
获得清晰尧规则的蛋白质电泳图谱渊图 圆冤遥
图 圆摇 棉铃虫显性尧隐性突变体和野生
型雄性成虫蛋白质 杂阅杂鄄孕粤郧耘图谱
云蚤早援 圆摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘 藻造藻糟贼则燥责澡燥则早则葬皂藻泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶
燥枣 憎蚤造凿 贼赠责藻 葬灶凿 凿燥皂蚤灶葬灶贼袁 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼
蚤灶 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬
粤院显性突变体曰月院野生型曰
悦院隐性突变体
粤院 凿燥皂蚤灶葬灶贼 皂怎贼葬灶贼曰 月院 憎蚤造凿 贼赠责藻曰
悦院 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼
由图 圆 可以看出袁显性突变体和野生型的 杂阅杂鄄
孕粤郧耘图谱谱型相似袁两者之间没有明显的差异条带袁
但隐性突变体与野生型谱型差异明显袁两者之间存在
差异显著的条带遥
图 猿摇 匝怎葬灶贼蚤贼赠 燥灶藻 源郾 远圆 软件分析棉铃虫显性尧
隐性突变体和野生型雄性成虫蛋白质电泳条带
云蚤早援 猿摇 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶 孕粤郧耘 造葬灶藻泽 燥枣 憎蚤造凿
贼赠责藻 葬灶凿 凿燥皂蚤灶葬灶贼袁 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼 蚤灶 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬
葬则皂蚤早藻则葬憎蚤贼澡 遭赠 匝怎葬灶贼蚤贼赠 燥灶藻 源郾 远圆
粤院显性突变体曰月院野生型曰
悦院隐性突变体
粤院 凿燥皂蚤灶葬灶贼 皂怎贼葬灶贼曰 月院 憎蚤造凿 贼赠责藻曰
悦院 则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼
利用 匝怎葬灶贼蚤贼赠 燥灶藻 源郾 远圆 软件对图谱做进一步定量
分析袁结果见图 猿遥 通过灰度分析可以发现院与野生型
相比袁隐性突变体与野生型多个条带存在显著差异袁隐
性突变体有一些条带表达量下调袁也存在一些表达量
圆园园员
摇 苑 期 棉铃虫成虫野生型与体色突变体的蛋白组成比较
上调的蛋白条带袁而显性突变体与野生型存在明显差
异的条带较少袁这些差异条带可能与体色突变的调控
相关遥
圆郾 猿摇 差异蛋白质谱及生物信息学分析
利用 匝怎葬灶贼蚤贼赠 燥灶藻 源郾 远圆 软件对各样本的 杂阅杂鄄
孕粤郧耘图谱进行比较分析袁选取其中 猿 条差异明显尧界
限清晰的差异条带渊图 圆 所示袁条带 圆 和条带 猿 在隐性
突变体内上调表达袁而条带 员 在隐性突变体内表达量
下降袁猿 条条带的分子量及其含量比见表 员冤进行质谱
分析袁获得对应的肽质量指纹渊孕酝云冤图谱袁图谱结果
的评估图见图 源遥 对获得的差异蛋白样品的肽质量指
纹图谱进行在线搜索比对和蛋白质功能分析袁获得蛋
白的相关信息袁结果见表 圆遥 条带 员 在隐性突变体内
表达量下降袁通过质谱分析袁结合蛋白得分袁结果显示
条带 员 含有 员源 个蛋白袁包括 匀 垣转运 粤栽孕合成酶 茁亚
基异构体 陨尧腺苷酸转移酶尧粤栽孕 合成酶 茁 链尧粤栽孕
圆粤员尧琢 原微管尧琢 原微管 原 员尧琢 原微管 原 员 月 链和钙转
运 粤栽孕合成酶肌质 辕内质网型 愿 个已知蛋白和另外 远
个假定或未命名蛋白遥 在 晕悦月陨灶则尧杂憎蚤泽泽鄄孕则燥贼 和 郧藻灶藻
韵灶贼燥造燥早赠等数据库中对已知蛋白进行功能查询分析袁
可发现这些蛋白在机体的能量代谢和细胞骨架构成方
面发挥着重要作用遥
表 员摇 匝怎葬灶贼蚤贼赠 燥灶藻 分析鉴定条带分子量及其含量比
栽葬遭造藻 员摇 酝燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 葬灶凿 糟燥灶贼藻灶贼 则葬贼蚤燥 燥枣 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 责则燥贼藻蚤灶 遭葬灶凿泽
条带
遭葬灶凿
分子量
酝憎渊噪阅冤
粤凿躁援 灾燥造 渊陨灶贼鄢皂皂圆冤 豫 粤凿躁援 灾燥造
显性突变体
凿燥皂蚤灶葬灶贼 皂怎贼葬灶贼
野生型
憎蚤造凿 贼赠责藻
隐性突变体
则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼
显性突变体
凿燥皂蚤灶葬灶贼 皂怎贼葬灶贼
野生型
憎蚤造凿 贼赠责藻
隐性突变体
则藻糟藻泽泽蚤增藻 皂怎贼葬灶贼
员 圆怨郾 怨愿 猿苑圆远苑郾 怨缘 猿园园猿圆郾 园缘 员怨源苑远郾 苑远 源圆郾 怨缘 猿源郾 远员 圆圆郾 源源
圆 圆猿郾 源源 员源园员远郾 源猿 员圆怨猿缘郾 愿员 圆怨猿圆怨郾 员缘 圆源郾 怨园 圆圆郾 怨愿 缘圆郾 员圆
猿 圆员郾 远圆 缘源苑源郾 怨员 缘员圆远郾 园远 员愿园愿怨郾 缘园 员怨郾 园愿 员苑郾 愿苑 远猿郾 园缘
图 源摇 差异蛋白条带肽质指纹图谱结果的评估图
云蚤早援 源摇 栽澡藻 葬责责则葬蚤泽葬造 枣燥则 贼澡藻 则藻泽怎造贼 燥枣 责藻责贼蚤凿藻 皂葬泽泽 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼蚤灶早 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 责则燥贼藻蚤灶 遭葬灶凿
摇 摇 粤栽孕合成酶广泛存在于线粒体内膜尧叶绿体类囊
体尧原核藻尧异养菌和光合菌质膜袁参与氧化磷酸化和
光合磷酸化袁是生物体能量代谢的关键酶咱员圆暂 遥 匀 垣转
运 粤栽孕合成酶 茁亚基异构体 陨尧腺苷酸转移酶尧粤栽孕合
成酶 茁 链尧粤栽孕 圆粤员 和肌质 辕内质网型钙转运 粤栽孕 合
成酶属于不同类型的 粤栽孕合成酶袁在生物机体中参与
不同的功能遥 其中袁匀 垣转运 粤栽孕 合成酶 茁 亚基异构
体 陨和肌质 辕内质网型钙转运 粤栽孕 合成酶在进行离子
运输的过程中进行了 粤栽孕 水解反应袁释放能量袁完成
离子转运咱员猿暂 遥 腺苷酸转移酶渊粤阅孕 辕 粤栽孕 贼则葬灶泽造燥糟葬泽藻冤
是真核细胞的转运蛋白家族成员袁其主要功能是催化
细胞质中 粤阅孕和线粒体内 粤栽孕间进行跨膜交换袁是保
持细胞内能量平衡的关键成分咱员源暂 遥 粤栽孕 合酶 茁 亚基
通过野阅耘蕴杂耘渊耘阅冤阅冶模体与 酌亚基相结合袁通过质子
运动产生动力催化合成或分解 粤栽孕咱员缘暂 遥 粤栽孕圆粤员 会产
生一种 杂耘砸悦粤 悦葬圆 垣 原 粤栽孕葬泽藻泽袁可水解 粤栽孕 并调控
悦葬圆 垣由胞质流向肌肉浆质网内并刺激肌肉的收缩咱员远暂 遥
微管蛋白是细胞骨架的组成部分之一袁微管蛋白
由 圆 个 琢 原微管和 茁 原微管蛋白亚基组成咱员苑暂 袁条带 员
中鉴定出 猿 个 琢 原微管蛋白亚基渊 葬造责澡葬鄄贼怎遭怎造蚤灶袁葬造责澡葬
员 原 贼怎遭怎造蚤灶袁贼怎遭怎造蚤灶 葬造责澡葬 原 员月 糟澡葬蚤灶冤遥 微管蛋白是真
核细胞所独有的并普遍存在的结构袁多存在于细胞质
中袁在保持细胞形态尧运动和胞内物质运输等方面发挥
重要功能咱员愿暂 遥
条带 圆 和条带 猿 在隐性突变体内上调表达遥 通过
质谱分析袁结合蛋白得分袁条带 圆 和条带 猿 分别鉴定出
圆源和 圆猿 个蛋白袁包括肌动蛋白渊葬糟贼蚤灶袁 葬糟贼蚤灶 原 缘袁 葬糟贼蚤灶
缘悦袁 遭藻贼葬鄄葬糟贼蚤灶袁 遭藻贼葬鄄葬糟贼蚤灶 原 员 冤尧 胞 质 肌 动 蛋 白
渊糟赠贼燥皂燥责造葬泽皂蚤糟 葬糟贼蚤灶袁 糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 葬糟贼蚤灶 悦赠陨陨 冤尧细胞骨
架肌动蛋白渊葬糟贼蚤灶袁糟赠贼燥泽噪藻造藻贼葬造 猿粤冤和骨骼肌肌动蛋白
猿园园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
摇 摇 摇 摇 摇 表 圆摇 质谱分析结果
栽葬遭造藻 圆摇 砸藻泽怎造贼泽 燥枣 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则怎皂 葬灶葬造赠泽蚤泽
条带编号
遭葬灶凿 晕燥援
蛋白名称
责则燥贼藻蚤灶 灶葬皂藻
登录号
晕悦月陨 郧陨
分子量 辕等电点
酝则渊噪阅冤 辕 责陨
得分
泽糟燥则藻鄢
肽片段匹配率
泽藻择怎藻灶糟藻 糟燥增藻则葬早藻 渊豫 冤
员 匀 垣 贼则葬灶泽责燥则贼蚤灶早 粤栽孕 泽赠灶贼澡葬泽藻 遭藻贼葬 泽怎遭怎灶蚤贼 蚤泽燥枣燥则皂 员 员员源园缘圆园苑圆 缘源郾 怨缘 辕 缘郾 圆远 源猿员 员苑
员 粤阅孕 辕 粤栽孕 贼则葬灶泽造燥糟葬泽藻 员缘员猿愿源愿愿缘 猿圆郾 苑怨 辕 怨郾 愿缘 员愿园 员怨
员 粤栽孕 泽赠灶贼澡葬泽藻 遭藻贼葬 糟澡葬蚤灶 圆远远愿远员怨园怨远 缘苑郾 员圆 辕 缘郾 缘猿 怨愿 愿
员 粤贼责圆葬员 责则燥贼藻蚤灶 缘缘圆源怨怨远苑 员员园郾 园怨 辕 缘郾 员员 怨缘 猿
员 葬造责澡葬鄄贼怎遭怎造蚤灶 猿圆园员缘 源怨郾 苑远 辕 源郾 怨缘 怨猿 远
员 葬造责澡葬 员鄄贼怎遭怎造蚤灶 源园愿园远园愿圆 源怨郾 愿怨 辕 缘郾 园员 苑源 远
员 贼怎遭怎造蚤灶 葬造责澡葬 原 员月 糟澡葬蚤灶 苑苑缘猿怨苑缘圆 缘园郾 员园 辕 源郾 怨愿 苑员 远
员 悦葬造糟蚤怎皂鄄贼则葬灶泽责燥则贼蚤灶早 粤栽孕葬泽藻 泽葬则糟燥责造葬泽皂蚤糟 辕 藻灶凿燥责造葬泽皂蚤糟则藻贼蚤糟怎造怎皂 贼赠责藻 员苑园缘愿圆苑园源 员员苑郾 远员 辕 缘郾 圆猿 远员 圆
圆 葬糟贼蚤灶 员缘远远源园缘源愿 源员郾 苑远 辕 缘郾 猿园 缘园圆 圆猿
圆 葬糟贼蚤灶 员员猿圆员缘 源员郾 苑远 辕 缘郾 猿园 源怨源 员怨
圆 遭藻贼葬鄄葬糟贼蚤灶 远愿员缘怨苑源缘 员猿郾 园怨 辕 缘郾 远苑 源怨员 苑缘
圆 葬糟贼蚤灶袁糟赠贼燥泽噪藻造藻贼葬造猿粤 源苑缘缘员园猿怨 源员郾 愿园 辕 缘郾 源远 源愿猿 员怨
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注院鉴定结果中假定或未命名蛋白未在表中列出遥
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动蛋白袁且搜索结果中共有 圆园 个未命名或假定蛋白遥
肌动蛋白是一类在真核生物中普遍存在的高度保守蛋
白质袁主要存在于机体的细胞质中袁是细胞骨架微丝的
主要组成成分袁具有 员 个 粤栽孕结合位点和 圆 个与肌动
蛋白结合位点咱员怨暂 遥 有研究发现袁包括肌动蛋白在内的
细胞骨架成分在促进黑化色素转移和沉降中发挥着重
要作用咱圆园暂 遥
猿摇 讨论
昆虫的体色是其体壁中色素的反映袁常会因一些
因素的影响而发生变化遥 人们对昆虫体色分化的研
究袁早期主要集中在寄主和环境因素上袁而随着分子生
物学技术的发展袁其研究也越来越深入遥 本研究利用
电泳技术尧质谱技术和生物信息学等方法对实验室保
存的棉铃虫显性尧隐性突变体和野生型雄性成虫的蛋
白质组成进行了差异比较袁发现一些可能与棉铃虫体
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色突变的成色和调控机理相关的蛋白遥
有研究发现袁色素细胞色素颗粒的运输沿微管运
送咱圆员暂 袁同时动态肌动蛋白丝也可以为持续不断黑色素
等蛋白的运转提供轨道咱圆圆暂 袁而运转的动力正是来源于
能量代谢蛋白渊粤栽孕 合成酶等冤促进 粤栽孕 的水解反应
而释放的能量咱圆猿暂 遥 因此袁可推测上述发现的 匀 垣转运
粤栽孕合成酶 茁亚基异构体 陨尧腺苷酸转移酶尧粤栽孕 合成
酶 茁 链尧粤栽孕 圆粤员 等能量代谢蛋白和肌动蛋白尧微管
蛋白等细胞骨架组分 圆 类蛋白可能在隐性突变体的成
色和调控过程中发挥了重要作用袁参与了细胞色素的
移动和沉降遥 研究中并没有发现色素蛋白在不同个体
间存在显著差异袁可推测色素蛋白的生成含量在体色
突变体的形成中不占主要因素曰而能量代谢蛋白和细
胞骨架组分蛋白的含量改变袁推测由此引起的细胞色
素向表皮的转移和沉淀是导致突变体颜色加深的主要
因素袁最终导致突变发生遥
分析鉴定蛋白数据结合图谱观察袁可以发现鉴定
蛋白在 杂阅杂鄄孕粤郧耘 上的位置与实际分子量有一定差
异袁造成这种结果的原因有许多院一可能是蛋白质在磷
酸化尧糖基化和泛素化等翻译后修饰过程中结合了不
同的基团袁改变了原有的分子量曰二可能是样本制备过
程中袁不同处理影响导致蛋白质立体结构改变曰三可能
是电荷异常尧结构异常和带有较大辅基的蛋白质不适
合 杂阅杂鄄孕粤郧耘电泳遥 这些原因造成了蛋白质在 杂阅杂鄄
孕粤郧耘电泳时袁其分子量大小没有完全与电泳距离保
持相对应关系袁进而导致分子量差异的出现咱圆源袁圆缘暂 遥
本研究利用 杂阅杂鄄孕粤郧耘 技术尧酝粤蕴阅陨鄄栽韵云鄄栽韵云 辕
酝杂技术及生物信息学等方法对棉铃虫显性尧隐性突变
体和野生型雄性成虫的蛋白质组成差异进行了比较袁
获得了一定的结果遥 但本研究中显性突变体和野生型
的蛋白质图谱差异不大袁为探究原因袁笔者以后将利用
其他相关试验技术对其做进一步探讨比较遥 同时袁笔
者还将从雌性成虫尧棉铃虫其他时期以及双向电泳等
其他技术对显性尧隐性突变体和野生型进行差异比较
研究袁进一步探讨棉铃虫显性尧隐性突变体的发生尧成
色和遗传机理等袁也为棉铃虫等作物害虫的生物防治
提供依据遥
参考文献院
咱 员 暂摇 江幸福袁 罗礼智援 昆虫黑化现象咱允暂 援昆虫学报袁 圆园园苑袁 缘园渊员员冤院
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体色遗传规律及黑化相关酶研究 咱 阅暂援 武汉院华中农业大学袁
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咱 缘 暂摇 陈利珍援 棉铃虫 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬渊匀怎遭藻灶则冤 蛾蛹黑型突变体
生物学及生理学特性研究 咱阅暂援武汉院华中农业大学袁圆园园缘
咱 远 暂 摇 何丽华袁牛宝龙袁齐晓朋袁翁宏飚袁沈卫锋袁刘 岩袁王守先袁孟智
启援 棉铃虫成虫体色突变体的发现及其遗传分析 咱 允暂 援 核农学
报袁 圆园园苑袁 圆员渊源冤院 猿怨苑 原 源园园
咱 苑 暂摇 何丽华袁牛宝龙袁刘 岩袁沈卫锋袁翁宏飚袁陈金娥袁孟智启援一种棉
铃虫成虫体色突变体的遗传分析 咱 允暂 援 核农学报袁 圆园员园袁 圆源
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变应原蛋白的质谱鉴定与分析 咱 允暂 援 昆虫学报袁 圆园园缘袁 源愿渊圆冤院
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渊责任编辑摇 邱爱枝冤
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