全 文 ： 核 农 学 报 2004，l8(2)：155—157
Acta Agriculturae Nucleutae Sinica
文章编号 ：1000—8551(2004)02．155—03
用绵羊尿中嘌呤衍生物估测瘤胃微生物氮的研究
刘大森 单安山
(东北农业大学动物营养研究所 ．黑龙江 哈尔滨 150030)
摘 要：研究了用绵羊尿中嘌呤衍生物估测瘤 胃微生物氮。结果表明：各处理间尿液中尿囊素、
尿酸、黄嘌呤 +次黄嘌呤差异不显著 ，而硼砂组 A的嘌呤衍 生物总量显著高于其它各组(P<
0．05)。以尿囊素含量计算，各处理间微生物氮合成量差异不显著，而以嘌呤衍生物总量计算，
硼砂组 A的微生物氮合成量显著高于其它各组(P<0．05)。用嘌呤衍生物总量计算的结果高
于用尿 囊素计算的结果。
关键词：绵羊；尿 中嘌呤衍生物；瘤 胃；微生物氮
EST玎 ALTIoN oF RUⅣⅡeN M ICRoBIAL．NITRoGEN oF s眦 EP UsING UR ARY
EXCRETIoN oF PURINE DERIVATIVES
LIU Da—sen SHAN An．shan
(Animal Nutrition Institue，Northeast Agricultural University，Harbin，Heitonviang， 150030)
Abstract：Determination of nlmen microbial—nitrogen of sheep using urinary excretion of purine derivatives was
studied．Uric acid and xanthine+hypoxanthine were not affected by diets，but total purine derivatives for 1 nag borax
／kg diet Was higher than other diets(P<0．05)．Microbial—nitrogen estimated from allantoin Was not afected by
diets，but that of 1mg borax／kg diet estimated from total pudne derivatives Was higher than other diets(P<0．05)．
Microbial-nitrogen estimated from total purine derivatives was higher than that from allantoin．
Key words：sheep；urinary excretion of purine derivatives；rumen；microbial·nitrogen
在瘤 胃微生物氮合成量估算 中，需要使用标记物作为测试指标 ，已被使用的标记物分为外源标记物
和内源标记物两类 J¨。同位素属于外源标记物，目前使用的同位素包括 P、 S和 N。内源标记物属于
微生物特有的～些物质，内源标记物有二氨基庚二酸(DAPA)、氨乙基膦酸(ATP)、ATP、核酸(DNA或
RNA)、嘌呤或嘧啶等。同位素法是最为可靠的微生物氮测定方法⋯，考虑到试验成本，内源标记物法具
有优越性。上述方法都需要利用瘘管动物 ，这违背了动物福利。
根据 McAlan等 的假设 ，十二指肠的核酸主要 来 自于瘤 胃微生物 ，经过肠道消化吸收 ，而后从尿
液中排出，主要产物是尿囊素 ，还有黄嘌呤 +次黄嘌呤和尿酸。通过测定尿 中这些 嘌呤衍生物的含量 ，
估算瘤胃微生物氮的方法近年得到快速发展。本试验以绵羊为试验动物，对尿液嘌呤衍生物法估算瘤
胃微生物氮合成量进行了研究。
1 材料与方法
选择4只雄性绵羊，平均体重 41．1±3．5kg，采用4×4拉丁方设计。4个处理为对照组(基础13粮)、
硼砂组 A(1g硼砂／kg 13粮 )、硼砂组 B(2g硼砂／kg日粮 )和乙酰氧肟酸 (AHA)组 (25rag AHA／kg 13粮 )。
收稿 日期 ：2003—06-24
作者简介：刘大森(1961一)，男，博士，副教授，从事核技术应用及动物营养研究。
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l56 核 农 学 报 l8卷
预试期 10 d，试验期 5 d。每天8：00、15：00时喂两次，每次先饲喂精料0．3kg，羊草自由采食，自由饮水。
试验期开始后，给每只羊带上集尿袋(自制)。每天分 6次收集尿样，连续收集 5d。每天按收集尿
液总量 的 5％取样 ，装入塑料瓶内，并在瓶内加入尿量 5％的浓硫酸，使尿样的最终 pH值低于 3，避免细
菌破坏尿中嘌呤衍生物。在瓶上注明 日期和动物编号，在 一20cI=保存 ，以备分析嘌呤衍生物。
按张永根 报 道的方法测定 嘌呤衍生物含量 。按 Chen等 提 出的公式 Y=0．84X+(0．15 。
e ，式 中 l，为绵羊尿中嘌呤衍生物排出量 (mmol／d)；X为小肠对嘌呤吸收量 (mmol／d)；0．84是尿 中
嘌呤衍生物排出物 占小肠对嘌呤吸收的比例；括号内部分表示尿中内源嘌呤衍生物的排出量 ，内源嘌呤
排 出量依指数方程 0．15 e 而变化 ；0．15指当吸收嘌呤数量为零时，尿中排出内源嘌呤衍生物的
数量 ；一0．25表示 由吸收嘌呤替代 内源嘌呤损失量的速度常数 ； 为代谢体重 )，用尿中嘌呤衍生物
总量计算微生物氮合成量。
按 Rys等 提出的公式 N =(，v 一NA )X 4 X 100／18，式中 ，v 为微生物 氮合成量 ，Ⅳ 为 24 h尿中
排出的尿囊素；Na 为禁食 24 h尿液中的尿囊素，N =W。‘ ／d(kg／mg)，用尿中尿囊素计算微生物氮合
成量。用 SAS6．12的 ANOVA过程进行数据的统计分析一
2 结果与分析
饲喂硼砂或乙酰氧肟酸对绵羊瘤胃微生物氮合成的影响见表 l。由表可见 ，各试验组的尿囊素、尿
酸及黄嘌呤 +次黄嘌呤差异不显著 ，硼砂组 A的总嘌呤衍生物显著高于其它各组。以嘌呤衍生物总量
计算结果表明，硼砂组 A的微生物氮 日合成量显著高于其它各组(P<0．05)，而以尿囊素估测的结果是
试验各组间微生物氮 日合成量差异不显著。用尿囊素估测的微生物氮合成量高于用总嘌呤衍生物估测
的微生物氮合成量。
表 l 不同处理对绵羊瘤 胃微生物氮产量的影响
Table 1 Effect of diferent treatment on microbial N yield in sheep
3 讨论
Rys等 于 1975年提出了将尿囊素作为瘤胃微生物氮的标记物。以尿液嘌呤衍生物含量计算瘤胃
微生物氮方法近来才得到发展 。虽然关于尿液是否为尿囊素的唯一排出途径仍有争议 ，但其作
为主要渠道得到了证明 j。并且有研究表明内源尿囊素不受饲养水平影响 。进入瘤 胃的内源尿囊
素完全被瘤胃微生物降解 。Fujihara等 “认为，以嘌呤衍生物总量计算微生物氮合成量比单独用尿囊
素计算的结果更准确。但 Puchala和 Kulasek 12 J的实验结果并不支持这种观点 ，没必要测定嘌呤衍生物
总量 ，用尿中尿囊 素含量计算微生物氮合成量足以。P6rez等 的研究结果表明，不同处理问尿囊素或
总嘌呤衍生物差异极显著，说明以尿中排出的尿囊素量估算微生物氮是有根据的，会使方法简单化。本
研究结果支持 Fuihara的观点 ，即应该用尿中嘌呤衍生物总量估算瘤胃微生物氮合成量。
同位素法较尿液嘌呤衍生物法估测的瘤 胃微生物氮合成量更直接。如 S法测定瘤 胃微生物氮合
成量时，首向瘤胃内灌注 Na2 SO ，然后由瘤胃瘘管、真胃或十二指肠采集食糜，分离微生物。通过测定
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Acta agricdturae Nucleatae Sinica 157
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食糜内 s与非氨态氮比例、食糜微生物部分 s与非氮态氮比例及食糜氮在消化道内的流通量，即可计
算出微生物氮产量 ，是一种直接测定方法。而尿液嘌呤衍生物法，是通过测定尿液中嘌呤衍生物含
量，利用经验公式计算微生物氮产量，是一种间接方法。由此可见，尿液嘌呤衍生物法对微生物氮估测
结果依赖于经验公式。P6rez 研究表明，嘌呤衍生物法较 N法估测的微生物氮合成量低。由于利用
嘌呤衍生物估测微生物氮合成不需要瘘管动物，收集尿液即可测定，使其在生产中大规模估测微生物氮
合成量成为可能，特别适用于比较研究u 。
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