全 文 ：文章编号 :100028551 (2006) 042263206
农杆菌介导籼稻转化体系的优化
潘素君1 ,2 　戴良英1 ,2 　刘雄伦2 　张　昊2 　王国梁2 ,3
(11 湖南农业大学生物安全科技学院 ,湖南 长沙　410128 ; 21 湖南农业大学水稻基因组学实验室 ,湖南 长沙　410128 ;
31 美国俄亥俄州立大学植物生理实验室　43210)
摘 　要 :以 8 个籼稻品种作材料 ,研究了携带抗稻瘟病基因 Pi9 片段的 pCAMBIA1301 质粒的根癌农杆菌
EHA105 转化籼稻幼胚愈伤组织的影响因素。结果表明 ,NB 培养基适用于籼稻愈伤组织的诱导 ,共培养
时间以 3d 为宜。40mgΠL 的潮霉素可用于籼稻愈伤组织的筛选 ,抗性愈伤率在 6914 %～8513 %之间 ;抗
性愈伤组织经分化培养 ,幼苗分化率在 1514 %～4714 % ;鉴于多数籼稻愈伤组织分化时对潮霉素特别敏
感 ,因此分化培养基中不加潮霉素 ;但为了减少假阳性 ,生根培养基中分别用 20mgΠL 和 30mgΠL 的潮霉
素对幼苗进行筛选。
关键词 :籼稻 ;抗性愈伤 ;分化 ;潮霉素
OPTIMIZATION OF TRANSFORMATION MEDIATED BY Agrobacterium IN Indica RICE
Pan Su2jun1 ,2 　Dai Liang2ying1 ,2 　Liu Xiong2lun2 　Zhang Hao2 　Wang Guo2liang2
(11 The College of Bio2safety Science and Technology of Hunan Agricultural University , Changsha , Hunan 　410128 ;
21 Rice Genomics Lab of Hunan Agricultural University , Changsha , Hunan 　410128 ;
31 Department of Plant Pathology , Ohio State University , Columbus , Ohio 　43210)
Abstract :Factors influencing the frequency of rice transformation mediated by A . tumef acience strain EHA105 harboring
pCAMBIA1301 plasmid carrying blast2resistant Pi9 gene were investigated on 8 Indica rice cultivars. The result showed that
NB medium was suitable for calli induction of Indica rice , the best time for the co2culture of callus and Agrobacterium was 3
days. 40mg/ L hygromycin was fit for resistant selection , 6914 %～8513 % resistant calli survived. In differentiation medium ,
the frequencies of eight Indica rice varieties were between 1514 %～4714 %. Most of Indica rice calli were sensitive to
hygromycin in differention medium , hygromycin was unfit for differention. In order to reduce false positive plants , we used
20mg/ L and 30mg/ L hygromycin to select the young green plants.
Key words : Indica rice ; resistant calli ; differentiation ; hygromycin
收稿日期 :2006203228
基金项目 :国家 863 项目 (2005AA241010) ;国家自然科学资金资助项目 (30571063 ,30470990) ;湖南农业大学芙蓉学者计划资助项目
作者简介 :潘素君 (19732) ,女 ,湖南宁远人 ,博士研究生 ,主要从事分子植物病理学研究。Email :pansujn @yahoo. com. cn。戴良英和王国梁为通讯
作者。
　　水稻既是重要的粮食作物 ,也是单子叶的模式植
物[1 ] 。通过遗传转化技术获得抗病、抗虫、品质高和耐
性强的转基因水稻品种一直是人们努力的方向。
Raineri 等[2 ]和 Chan[3 ]分别通过农杆菌介导遗传转化获
得了水稻转基因细胞和植株。Hiei 等[4 ] 利用此法转化
粳稻获得转基因植株 ;Dong 等[5 ] 在爪哇稻上获得转基
因植株。Rashid 等[6 ] 、翟文学等[7 ] 在籼稻上也取得了
成功。农杆菌介导法在粳稻转化中已成为一个有效的
体系[8 ] ,转化率一般在 30 %左右 ,高的可达 6416 % ,甚
至 80 %以上[9 ,10 ] 。而占整个水稻品种 80 %的籼稻 ,其
转化率多数不超过 10 % ,有人认为这主要与籼稻愈伤
组织形成、继代和再生植株比较困难有关[3 ] 。本研究
将抗稻瘟病基因 Pi9 导入几个籼稻品种中 ,以获得抗
稻瘟病的转基因植株 ,并建立一套稳定的籼稻转化体
系。
362　核 农 学 报　2006 ,20 (4) :263～268Journal of Nuclear Agricultural Sciences
1 　材料与方法
111 　植物材料
供试材料包括两系 R :R996 ;三系 B :丰源 B ;常规
优质稻 :湘晚籼 11 号 ,湘晚籼 13 号 ;常规早稻 1701 ;三
系 R :25H003 ,25H075 ,527 的成熟种子。
112 　农杆菌菌株及质粒
根 癌 农 杆 菌 菌 株 为 EHA105 , 双 元 载 体
pCAMBIA1301。双元载体 pCAMBIA1301 的 T2DNA 区
含有潮霉素抗性 (Hyg - )基因。
113 　培养基
本研究采用以下培养基进行遗传转化 (表 1) 。
表 1 　水稻转化所用培养基
Table 1 　Media used in rice transformation procedure
培养基 media 组成成分 component
农杆菌培养基
agrobacterium medium
LB 培养基 ; 50mgΠL Kanamycin ( Kan) ; 50mgΠL Rifampicin (Rif)
愈伤诱导培养基
callus induction medium
NB 基本培养基 ; 300mgΠL Casein enzymatic hydrolysate ; 500mgΠL Proline ; 30gΠL Sucrose ; 3gΠL Phytagel ; 2 mgΠL
2 ,4 - D ; pH 518
愈伤继代培养基
callus culture medium
L3 基本培养基 ; 500mgΠL Glutamine ; 500mgΠL Proline ; 30gΠL Maltose ; 3gΠL Phytagel ; 2 mgΠL 2 ,4 - D ; pH 518
共培养培养基
co2culture medium N6 基本培养基 ; 10gΠL Glucose ; 30gΠL Sucrose ; 2gΠL Phytagel ; 2mgΠL 2 ,42D ; pH 512
筛选培养基
selection medium
L3 基本培养基 ; 500mgΠL Proline ; 500mgΠL Glutamine ; 30gΠL Maltose ; 3gΠL Phytagel ; 2mgΠL 2 ,4 - D ; 250mgΠL
Cefatoxin ; 40mgΠL Hygromycin ; pH 518
分化培养基
differentiation medium
DL 基本培养基 ; 30gΠL Maltose ; 3gΠL Phytagel ; 2 mgΠL Kin ; 1. 0mgΠL 6 - BA ; 015mgΠL NAA ; 015mgΠL IAA ;
3gΠL Phytagel ; pH 518
生根培养基
1Π2MS medium 1Π2MS基本培养基 ; 30gΠL Sucrose ; 3gΠL Phytagel ; 20～30mgΠL Hygromycin ; pH 518～519
114 　水稻愈伤组织的诱导
成熟种子去壳后 ,用 70 %的乙醇消毒 1～3min ,再用
0. 1 %的升汞消毒 15 min ,然后用无菌水洗 4～5 次 ,接种
在 NB 培养基上 ,25 ℃黑暗条件诱导愈伤组织 ,8～10d 后
选取愈伤组织继代培养 , 15d 左右进行共培养。
115 　农杆菌对水稻愈伤组织的转化
挑取 - 70 ℃保存的农杆菌转化子在LB 培养基 (见
表 1)上划线 ,28 ℃暗培养 3d ,用无菌牙签挑取单菌落
于 5 ml 加有相同抗生素的液体 LB 培养基中 ,28 ℃、
225rpm振荡培养 16～24h。从中取 1ml 菌液加入到
50ml LB (含 Kan、Rif)液体培养基中 ,28 ℃、225rpm 振荡
培养 ,0D600 = 018 时用于共培养。4000rpm 离心 ,收集
菌体 ,并将菌体重悬于加有 100μmolΠL 乙酰丁香酮
AAM 液体培养基。挑选颜色新鲜、淡黄色、致密、生长
旺盛的颗粒状胚性愈伤组织 ,愈伤组织和农杆菌菌液
按一定的比例混合 ,浸染 20～30min ,愈伤组织适当凉
干后 ,放入加有 100μmolΠL 乙酰丁香酮共培养培养基
上 ,26 ℃暗培养 2～3d。
116 　转化子的筛选和植株再生
共培养的愈伤组织用无菌水漂洗 10 次以上 , 再
用含 250mgΠL 头孢霉素和 200mgΠL 氨苄青霉素的无菌
水在 25 ℃、150rmp 条件下振荡 1～2 h。洗净、晾干 ,放
入 40mgΠL 潮霉素筛选压的筛选培养基上 ,26 ℃暗培养
15～20d 左右 ,进行第 2 轮筛选。新长出的抗性愈伤转
入到分化培养基上 ,26 ℃光照培养。
117 　转化苗的生根与移栽
将分化得到的幼苗移入生根培养基中培养 ,待根
系生长良好 ,小苗长至 8～10cm 时 ,将根部培养基清洗
干净 ,炼苗并移栽。为使移栽后的苗保持在 85 %的湿
度条件下 ,采用塑料膜覆盖 ,2d 后适当进行通风 ,4d 后
揭去膜 ,进行常规管理。
118 　PCR 鉴定
PCR 反应扩增反应条件为 : 94 ℃3min ,94 ℃50s ,
55 ℃50s ,72 ℃60s ,最后 72 ℃延伸 10min ,37 个循环。
分别以非转化水稻 DNA 和 pCAMBIA1301 质粒 DNA 作
为阴性和阳性对照。扩增产物用 (琼脂糖) = 112 %的
凝胶 电 泳 检 测。引 物 序 列 为 : 正 向 引 物 : 5 ’2
TACTTCTACACAGCCATC23 ’; 反 向 引 物 : 3 ’2
TATGTCCTGCGGGTAAAT25’。
2 　结果与分析
211 　不同培养基对籼稻愈伤组织诱导的影响
将 8 个籼稻品种的成熟种子分别接种于 NB、N6 、
462 核　农　学　报 20 卷
MS、CC 和 L3 [11 ] 培养基上 ,8d 后观察愈伤组织的生长
情况并统计愈伤组织诱导率。结果表明 ,5 种基本培
养基对籼稻愈伤组织的诱导存在明显差异 (表 2) 。NB
和 N6 培养基用于诱导籼稻幼胚愈伤组织效果较好 ,愈
伤大而嫩黄 ;MS 和 CC 培养基则较差 ,愈伤弱小、褐
化 ;L3 培养基的诱导情况最差 ,愈伤组织生长缓慢 ,愈
伤弱小 ,出愈率低。这 5 种培养基诱导籼稻的平均出
愈率分别为 :8218 %、7518 %、6916 %、5917 %和 5710 %。
因此 ,NB 培养基最适于诱导籼稻胚性愈伤组织。
表 2 　不同培养基对籼稻愈伤组织诱导的影响
Table 2 　Effects of different basic media on the frequency
of callus induction in indica rice
品种
variety
培养基
medium
诱导率
frequency of callus
induction ( %)
品种
variety
培养基
medium
诱导率
frequency of callus
induction ( %)
NB 85. 9 湘晚籼 NB 75. 3
N6 80. 7 11 号 N6 69. 5
25H003 MS 76. 3 Xiangwanxian MS 65. 4
CC 56. 4 11 CC 51. 7
L3 52. 3 L3 50. 4
NB 82. 3 湘晚籼 NB 76. 7
N6 75. 0 13 号 N6 72. 1
25H075 MS 76. 6 Xiangwanxian MS 55. 7
CC 66. 7 13 CC 53. 6
L3 60. 5 L3 51. 4
NB 87. 9 NB 80. 8
N6 76. 4 丰源 B N6 76. 3
R996 MS 67. 9 FengyuanB MS 73. 8
CC 63. 6 CC 67. 2
L3 62. 9 L3 63. 8
NB 88. 6 NB 85. 2
N6 80. 6 N6 75. 6
527 MS 73. 8 1701 MS 67. 0
CC 57. 5 CC 60. 6
L3 55. 4 L3 58. 9
212 　共培养时间对转化的影响
愈伤组织与农杆菌共培养时间的长短直接影响到
外源基因的导入。以继代 10d 的湘晚籼 11 号的胚性
愈伤组织为转化受体 ,与农杆菌 EHA105 共培养 1～
4d。结果显示 ,共培养时间 3d 的转化效果最好 ,获得
的抗性愈伤率最高 (表 3) 。不同品种愈伤组织在形态
上存在差异 ,有些品种的愈伤致密、坚硬 ,有些品种的
愈伤松散。致密、坚硬的愈伤与农杆菌共培养时 ,农杆
菌生长较慢 ,而松散的愈伤农杆菌共培养时 ,农杆菌生
长较快。因此 ,在愈伤与农杆菌浸染 30min 晾干时 ,致
密、坚硬的愈伤湿度要比松散的愈伤大一些为宜 ,从而
保证愈伤组织与农杆菌共培养 3d 不致于过度生长。
表 3 　共培养时间对抗性愈伤率的影响
Table 3 　Effect of time for co2culture with EHA105 on
the frequency of hygromycin2resistant calli
共培养天数
days for
co2culture 总愈伤数total calli 抗性愈伤数No. of hyg2resistantcalli 抗性愈伤率frequency of hyg2resistant calli ( %)
1 58 16 27. 6
2 69 54 78. 3
3 65 56 86. 2
4 55 34 61. 8
213 　潮霉素对愈伤筛选、分化和植株再生的影响
筛选培养基采用 20、30、40、50mgΠL 的潮霉素进行
筛选 (表 4) 。结果表明 ,40mgΠL 的筛选压适于籼稻的
　　　
表 4 　40mgΠL 的潮霉素筛选后不同品种愈伤组织的抗性愈伤率
Table 4 　The hyg2resistant rate of calli in different cultivar
after 40mgΠL hygromycin selection
品种
varieties
供试愈伤数
No. of tested calli
抗性愈伤数
No. of hyg2resistant
calli
抗性愈伤率
rate of hyg2resistant
calli ( %)
丰源 B 276 201 72. 8
湘晚籼 11 号 205 165 80. 5
湘晚籼 13 号 252 215 85. 3
25H003 285 235 82. 5
25H075 269 220 81. 8
527 283 228 80. 6
R996 265 184 69. 4
1701 215 160 74. 4
筛选。这 8 个籼稻品种经 40mgΠL 的潮霉素筛选后 ,其
抗性愈伤率在 6914 %～8513 %之间。筛选率受每轮筛
选时间的影响较大。选择培养基上进行第 1 轮筛选 ,
10d 后多数材料出现褐化现象 ,少量材料长出新愈伤。
筛选时间达到 25～30d 时 ,受体材料绝大部分愈伤组
织褐化死亡 ,少部分褐化愈伤组织的边缘出现新的生
长迅速的乳白色 HygB 抗性愈伤 ,有些新生的愈伤则
呈褐化死亡状。但第 1 轮筛选时间在 15d 左右时 ,将
所有的愈伤组织转入新的筛选培养基中 ,结果发现 ,大
部分的愈伤组织都可长出新的愈伤 ,抗性愈伤率高。
籼稻抗性愈伤组织转入分化培养基 ,绿苗分化频率低 ,
潮霉素对有些籼稻绿苗分化的影响很大 ,因此 ,分化时
不加潮霉素。
为了减少假阳性 ,在生根培养基中加入浓度为 20
和 30mgΠL 潮霉素分别对每个品种的 20 株幼苗进行筛
选。结果表明 ,丰源 B、湘晚籼 11 号、1701、R996 和 527
可用 30mgΠL 潮霉素筛选 ,湘晚籼 13 号和 25H003 则宜
用 20mgΠL 潮霉素筛选 ,而 25H075 的幼苗对潮霉素非
常敏感 ,用 20mgΠL 的潮霉素筛选只有 40 %的幼苗存
活 ,因此可考虑用更低浓度的潮霉素进行筛选 (表 5) 。
562　4 期 农杆菌介导籼稻转化体系的优化
表 5 　潮霉素在生根培养基中对 20 株幼苗的筛选
Table 5 　Hygromycin selection of 20 treated plantlets in 1Π2MS
品种
varieties
20mgΠL 潮霉素筛选所得幼苗数
No. of plantlet treated with 20mgΠL
hygromycin
幼苗筛选率
selection rate of plantlet
( %)
30mgΠL 潮霉素筛选所得幼苗数
No. of plantlet treated with 30mgΠL
hygromycin
幼苗筛选率
selection rate of plantlet
( %)
丰源 B Fengyuan B 17 85 14 70
湘晚籼 11 号 Xiangwanxian 11 16 80 12 60
湘晚籼 13 号 Xiangwanxian 13 15 75 11 55
25H003 12 60 8 40
25H075 8 40 3 15
527 18 90 15 75
R996 19 95 15 75
1701 17 85 14 70
214 　抗性愈伤组织的分化与植株再生
8 个品种的抗性愈伤组织转入分化培养基培养
20d 后 ,有的愈伤逐渐褐化 ,有些愈伤慢慢长出绿点 ,
有些绿点可分化出绿芽 ,有些绿点生长缓慢或停止 ,后
逐渐褪绿 ,只有分化出芽点的愈伤组织才能长成绿苗。
本研究分化绿点率达 5518 %～ 7616 % , 绿苗率为
1514 %～4714 %。丰源 B 绿点率高 ,为 7613 % ,绿苗分
化率却相对较低 ,只有 2019 %(表 6) 。
表 6 　8 个籼稻品种的分化率
Table 6 　Differentiation efficiencies of 8 Indica varieties
品种
varieties
抗性愈伤
resistant calli
愈伤绿点
green point of calli
愈伤绿点率
frequency of green point ( %)
绿苗数
No. of plantlet
绿苗分化率
frequency of differentiation ( %)
丰源 B Fengyuan B 139 106 76. 3 29 20. 9
湘晚籼 11 号 Xiangwanxian 11 128 98 76. 6 41 32. 0
湘晚籼 13 号 Xiangwanxian 13 135 87 64. 4 39 28. 9
25H003 147 107 72. 8 35 23. 8
25H075 143 89 62. 2 22 15. 4
527 96 117 70. 5 46 47. 4
R996 109 115 60. 8 37 33. 9
1701 125 82 65. 6 45 36. 0
215 　不同激素配比对愈伤组织分化率的影响
适宜的激素配比可促进愈伤组织的分化 ,对于提
高愈伤组织的转化率起着非常重要的作用。本试验以
R996 为研究对象 ,采用几种不同的激素配比来分析对
籼稻愈伤组织分化率的影响。结果表明 ,在分化过程
中 ,以 62BA 2mgΠL + KT 2mgΠL + NAA 015 mgΠL + IAA
015 mgΠL 的激素配比 ,对抗性愈伤组织的分化率最高
(表 7) 。
表 7 　不同激素配比对 R996 愈伤组织的影响
Table 7 　Effect of different hormone combinations on callus differentiation rate of Indica rice cultivar R996
激素配比
combination of hormones
抗性愈伤数
No. of hyg2resistant calli 绿苗数No. of planlet 绿苗频率rate of planlet ( %)
6 - BA 2mgΠL + KT 2mgΠL + NAA 015mgΠL + IAA 015 mgΠL 70 34 4816
6 - BA 2mgΠL + KT 2mgΠL + NAA 1mgΠL + IAA 1 mgΠL 75 26 3417
6 - BA 2mgΠL + KT 2mgΠL + NAA 012mgΠL + IAA 012 mgΠL 72 24 3313
6 - BA 2mgΠL + KT 1mgΠL + NAA 015mgΠL + IAA 015 mgΠL 69 28 4016
6 - BA 2mgΠL + KT 015mgΠL + NAA 015mgΠL + IAA 015 mgΠL 76 29 3812
216 　转基因植株的 PCR 检测
对稻瘟病抗性植株做 PCR 检测 , 均能扩增出
837bp 的 Pi9 基因的特异带 ,而非转化植株未扩增出目
的片段 ,证明 Pi9 基因已整合到水稻基因组中 (图 1) 。
217 　优化的转化体系
经转化参数的优化组合 ,形成高效的农杆菌转化
程序如下 :水稻愈伤组织诱导 →预培养 10～15d →农
杆菌 (菌液 OD 值 018 左右) 感染 30min →共培养 3d
(26 ℃暗培养) →潮霉素 40～50mgΠL 筛选 →分化成苗
→潮霉素 20～30mgΠL 的 1Π2MS 生根培养基生根 →20d
后移入无潮霉素的 1Π2MS 生根培养基中培养 →移栽幼
苗 (图 2) 。
662 核　农　学　报 20 卷
图 1 　1701 转化再生植株的 PCR 检测结果
Fig. 1 　The PCR result of 1701 transformed regenerating green plants
1 标记物 ;2 质粒 ;3 阴性对照 ;4～15 为转化苗
1 marker ; 2 plasmid ; 3 negative contrast ; 4 transformed green plants
图 2 　农杆菌介导的籼稻基因的转化过程
Fig. 2 　Gene transformation of Indica rice mediated by A. tumefacience
A :从幼胚诱导出愈伤 ;B :愈伤预培养 ;C :愈伤在选择培养基上进行抗性筛选 ;
D :抗性愈伤组织在分化培养基上长出绿点和小苗 ; E :小苗在生根培养基上培养 ;F : 移栽幼苗
A :calli from young embryo ; B :calli subculture ; C : resistant calli on selection medium ; D : differentiation green point
and young seedling from resistant calli ; E :young seedling in 1Π2MS medium ; F : transgenic rice plant .
3 　结论与讨论
311 　品种间的遗传转化差异
根癌农杆菌在籼稻中的遗传转化率因不同的品种
而存在差异 ,这反应了不同基因型对农杆菌浸染的敏
感性不一样。愈伤诱导率高、继代生长好的不一定抗
性愈伤率高。抗性愈伤率高 ,分化率也不一定高。湘
晚籼 11 号和 25H003 在预培养时 ,大部分愈伤死亡 ,但
存活愈伤组织经共培养、筛选后 ,抗性愈伤率都高 ,而
且湘晚籼 11 号绿苗分化率最高。丰源 B 的抗性愈伤
率不高 ,但绿苗率却较高。在本试验中的 8 个品种中 ,
其绿苗率分别为 : 527 是 4714 % ,R996 是 3319 % ,湘晚 籼 11 号为 3210 % ,湘晚籼 13 号是 2819 % ,25H003 是2318 % ,丰源 B 是 2019 % ,1701 是 3610 % ,25H075 是1514 %。312 　预分化对籼稻转化的影响预分化阶段在粳稻的转化中是必不可少的。通过预分化 ,抗性愈伤逐渐变成坚硬、乳白色的胚性愈伤组织 ,转入分化培养基后 ,胚性愈伤能很快变绿并分化出绿苗。但在籼稻的转化体系中 ,笔者认为可以不经过预分化而直接进入分化培养。因为 ,籼稻的抗性愈伤放入预分化培养基中培养时 ,愈伤组织大多褐化、衰老 ,只有极少数的愈伤组织变成乳白色的胚性愈伤。但是 ,将坚硬、嫩黄的抗性愈伤直接在分化培养基中分化时 ,大多数愈伤都可分化出绿点 ,绿苗转化率也很
762　4 期 农杆菌介导籼稻转化体系的优化
高。
313 　潮霉素在转化中的作用
潮霉素作为抗性筛选标记对抗性愈伤组织的筛选
有着重要的作用 ,但是 ,对愈伤组织的生长 ,尤其对分
化的影响很大。本研究发现 ,愈伤组织在筛选时可用
40～50mgΠL 的潮霉素筛选 ,但大多数籼稻愈伤组织在
分化培养基中对潮霉素特别敏感 ,只要添加了 10mgΠL
的潮霉素 ,抗性愈伤就会褐化 ,没有绿点出现 ,无法获
得转基因苗。因此 ,抗性愈伤组织宜在无潮霉素的分
化培养基上分化 ,以利于绿芽的分化 ,待绿芽分化成绿
苗后 ,转入有潮霉素的生根培养基中 ,绿苗在有潮霉素
的生根培养基中生长时 ,部分假阳性植株死亡 ,但存活
绿苗根系生长易受到潮霉素的影响而根须不发达 ,绿
苗生长缓慢。为了保证绿苗移栽成活 ,可将在生根培
养基中筛选 20d 后的绿苗移到不含潮霉素的生根培养
基中生长 ,以保证转基因苗正常生长。
参考文献 :
[ 1 ] 　Shimamoto K, Kyozuka J . Rice as a model for comparative genomics of
plants. Annu Rev Plant Physiology Plant Mol Bio 2002 , 53 : 399～419
[ 2 ] 　Raineri D M , Bettino P , Gordon M P , et al . Agrobacterium2mediated
transformation of rice ( Oryza sativa L. ) . Bio technology , 1990 , 8 : 33
～38
[ 3 ] 　Chan M T , Chang H H , Ho S L et al . Agrobacterium2mediated
production of transgenic rice plants expressing a chemeric α2amylase
promoter/β2glucuronidase gene. Plant Mol Biol ,1993 ,22 :491～506
[ 4 ] 　Hiei Y, Ohta S , Kumashiro T , et al . Efficient transformation of rice
mediated by Agrobacterium and sequence analysis of the boundaries of the
T2DNA. PIant J ,l994 , 6 (2) : 27l～282
[ 5 ] 　Dong J J , Teng W M , Buchholz W G, et al . Agrobacterium2mediated
transformation of Javanica rice. Molecular Breeding , 1996 , 2 : 267～
276
[ 6 ] 　Rashid H , Yokoi S , Hinata K, et al . Transgenic plant production
mediated by Agrobacterium in Indica rice. Plant Cell Rep , 1996 , 15 :
727～730
[ 7 ] 　翟文学 ,李晓兵 ,田文忠 ,等. 由农杆菌介导将白叶枯病抗性基固
Xa21 转入我国的 5 个水稻品种. 中国科学 (C 辑) ,2000 ,30 (2) :
200～206
[ 8 ] 　Lin H S , Hua Z H , Li N , et a1. Transformation of glg C2TM gene into
rice mediated by Agrobacterium . Chinese J Rice Sci , 2002 , 16 (2) : 129
～133
[ 9 ] 　Liu Q Q , Zhang J L , Wang Z Y, et a1. A highly efficient transformation
system mediated by Agrobacterium tumefaciens in rice. Acta Phytophysiol
Sin , 1998 , 24 : 259～271
[10 ] 　黄红梅 ,杨永智 ,张治国 ,等. 影响根癌农杆菌介导的高效水稻遗
传转化的相关因素分析. 西北农林科技大学学报 (自然科学版) ,
2004 ,32 (9) : 4～8
[11 ] 　Lin Y J , Zhang Q F. Optimisin the tissue culture conditions for high
efficiency transformation of indica rice. Plant Cell Rep , 2005 , 23 (8) :
540～547
食品与医疗卫生用品辐照标准和质量控制
国际培训班暨学术研讨会在南京成功举办
　　由中国原子能农学会和中国同位素与辐射行业协会辐射加工专业委员会共同主办、江苏省原子能农学会和
江苏省农业科学院原子能农业利用研究所承办的“食品与医疗卫生用品辐照标准和质量控制国际培训班暨学术
研讨会”于 2006 年 7 月 2～4 日在南京召开。中国原子能农学会、中国同位素与辐射行业协会辐射加工专业委员
会、江苏省科学技术协会、江苏省农业科学院的领导、国际原子能机构 ( IAEA) 专家及全国各地近百位辐射加工行
业的专家和学者出席了会议。
培训班安排国际原子能机构 ( IAEA) 专家 Mr. Yves M. HENON 就辐射安全问题、食品辐照设施出口到欧盟国
家的贸易现状、国际辐射加工产业的近况以及 ISO - 11137 医疗卫生消毒产品辐射灭菌的国际标准等问题进行了
详细讲解和分析。大会特邀国内专家针对辐照农产品质量安全现状、辐射防护概念的拓展与环境放射防护、农副
产品辐射加工质量检测技术标准研究进展、检疫辐照处理进展、医疗保健产品辐射灭菌的最新国际标准等方面内
容进行了专题报告。与会专家对我国辐射加工行业近况进行了研讨 ,提出下一步工作的重点及亟待解决的问题。
这次研讨会的召开对我国辐射加工行业与国际接轨并健康发展具有重要意义。大会建议国家有关主管部门按照
中华人民共和国国务院令 (第 449 号)《放射性同位素与射线装置安全和防护条例》进行科学管理、规范收费行为 ,
促进我国核技术应用健康有序发展。大会期间 ,代表们参观了南京辐照中心。
(中国原子能农学会秘书处)
862 Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2006 ,20 (4) :263～268