全 文 ：文章编号 :100028551 (2008) 042394205
水稻胚性愈伤诱导及其遗传转化的几个技术参数研究
李　毓　洪国琴　庄伟建　王乃元　戴　非　张国林　张燕云　仇秀丽
(福建农林大学作物科学学院 ,福建福州　350002)
摘 　要 :以日本晴成熟种子及幼嫩种子为材料诱导形成胚性愈伤组织 ,经农杆菌介导将水稻隐花色素基
因的 4 个 RNAi 和 2 个反义 RNA 表达载体分别转化日本晴愈伤组织 ,再经抗性筛选和分化培养诱导形
成植株 ,经分子检测筛选出阳性转基因苗。对胚性愈伤诱导率、抗性愈伤率、分化出苗率及转化率进行
统计分析。结果表明 ,成熟种子、新鲜成熟种子及幼嫩种子愈伤诱导率均大于 81 % ,平均为 86167 % ,其
中以新鲜成熟种子愈伤诱导率最高 ,达 96189 % ;抗性愈伤率成熟胚为 22121 %～40171 % ,平均为
28149 % ,幼胚为 36179 %～43121 % , 平均为 40 % ,幼胚的抗性愈伤率高于成熟胚 ;分化出苗率成熟胚为
59129 %～80143 % ,平均为 71159 % ,幼胚为 63116 %～72173 % ,平均 67195 % ,幼胚与成熟胚差异不明显 ;
转化率 ( Gus 检测阳性率) 成熟胚为 43107 %～81108 % ,平均 61159 % ,幼胚为 58133 %～76167 % ,平均
67150 % ,幼胚转化率稍高于成熟胚。
关键词 :水稻 ;胚性愈伤诱导率 ;抗性愈伤率 ;分化出苗率 ;转化率
STUDIES ON RICE EMBRYOGENIC CALLUS INDUCTION AND SEVERAL
TECHNICAL PARAMETERS FOR THEIR GENETIC TRANSFORMATION
LI Yu 　HONG Guo2qin 　ZHUANG Wei2jiang 　WANG Nai2yuan 　DAI Fei
ZHANG Guo2lin 　ZHANG Yan2yun 　QIU Xiu2li
( College of Crop Sciences , Fujian Agriculture and Forestry University , Fuzhou Fujian 350002)
Abstract :Mature and young seeds of japonic rice cultivar“Nipponbare”were used as materials to induce and produce
embryogenic callus. Four RNAi and two anti2sense RNA expression vectors of rice cryptochrome gene were transformed into
these callus tissue mediated by agrobacterium tumefaciens. Induced plants were obtained by resistance screening and
differentiation culture. Positive transgenic plants were identified through molecular detection. Statistic analysis of induced
callus rate , resistance callus rate , seedling differentiation rate and transformation rate were then carried out . The results
indicated that the callus induction rate for all matuer seeds , fresh mature seeds and young seeds was higher than 81 % ,
averaged 86167 % , with the induction rate for fresh mature seeds highest up to 96187 %. The resistance callus rate for mature
embryo was 22121 %～40171 % ,averaged 28149 % , for young embryo was 36179 %～43121 % , averaged 40 % , which
means the resistance callus rate for the young embryo was higher than that for the mature embryo. The seedling differentiation
emergence rate for mature embryo was 59129 %～80143 % ,averaged 71159 % ,for young embryo was 63116 %～72173 % ,
averaged 67195 % , showing no significant difference between the two kinds of embryos1 The transformation rate ( Gus positive
rate ) for mature embryo was 43107 %～81108 % ,averaged 61151 % ,for young embryo was 58133 %～76167 % ,averaged
67150 % ,which means the transformation rate for the young embryo was slightly higher than that for the mature embryo.
Key words :rice ; embryogenic callus induction rate ; resistant callus rate ; seedling differentiation rate ; transformation rate
收稿日期 :2008203224 　接受日期 :2008206227
作者简介 :李毓 (19652) ,男 ,甘肃镇原县人 ,副教授 ,博士 ,主要从事植物分子遗传育种研究。Tel : 0591283768226
通讯作者 :庄伟建 (19582) ,男 ,福建惠安人 ,教授 ,博士生导师 ,主要从事植物分子遗传学研究。Tel :0591283768226
493　 核 农 学 报　2008 ,22 (4) :394～398Journal of Nuclear Agricultural Sciences
1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
　　自 1994 年 Hiei 等[1 ] 首次建立农杆菌介导粳稻转
基因体系以来 ,农杆菌介导的水稻遗传转化取得了巨
大的成功[2～7 ] ,并已成为最常用和最有效的遗传转化
方法之一。目前国内外用于水稻转基因的外植体基本
为胚性 (成熟胚和幼胚) 愈伤组织 ,对水稻组织培养与
遗传转化的一些关键问题如基本培养基、农杆菌侵染
的浓度、共培养的方法、抗性筛选等研究已有大量报
道 ,但针对愈伤诱导率、抗性愈伤率、分化率和转化率
等问题的系统研究报道相对较少。水稻中用于遗传转
化的受体绝大多数为粳稻 ,如日本晴、台粳 9 号、鄂宜
105、农垦 58S、台北 309、黑交 932、黑粳 5 号、合江 19、
中华 11、中华 15 和 C418 等[7～12 ] 。籼稻较少用作遗传
转化受体 ,见报道的主要是用明恢 63。原因是不同水
稻品种 ,其组织培养和遗传转化的技术体系有一定差
异 ,一些品种甚至不能被转化[7 ] 。本研究选用常用的
水稻品种日本晴作为研究材料 ,分别用 6 个不同的植
物表达载体对胚性愈伤组织进行转化 ,以分析统计胚
性愈伤诱导率、抗性愈伤率、分化率和转化率的差异变
化 ,为水稻的组织培养与遗传转化研究提供参考。
1 　材料与方法
111 　试验材料
转化品种为日本晴 ,用其成熟胚或幼胚诱导形成
的胚性愈伤组织作遗传转化的受体。成熟胚愈伤用干
种子 ( - 20 ℃冰箱保存半年)和刚成熟种子 (蜡熟期) 诱
导 ,幼胚愈伤用开花授粉 15 - 20d 的幼嫩种子诱导。
农杆菌 EHA105 菌株及质粒 pCAMBIA1301 由本实验室
保存。6 个植物表达载体 ( EHA105ΠpCAMBIA1301)中 ,4
个为水稻隐花色素基因 ( cryptochrome) RNAi 载体 ,分别
以 V3、V9、V16 和 V19 表示 ;另外 2 个为含有反义隐花
色素基因的载体 ,分别以 V28 和 V32 表示 ,均由本实
验室构建。
112 　培养基
以 NB 培养基为基本培养基。愈伤诱导和预培养
培养基均为 NB + 2 ,42D 2mgΠL ,pH518～519。共培养培
养基为 NB + 2 ,42D 2mgΠL + AS (乙酰丁香酮) 100μmolΠ
L ,pH516。抗性愈伤筛选培养基为 NB + 2 ,42D 2mgΠL
+ Cn (羧苄青霉素) 250mgΠL + Hyg (潮霉素) 30mgΠL～
50mgΠL , pH 518～519。分化培养基为 NB + KT (激状
素) 10mgΠL + NAA(奈乙酸) 014mgΠL ,pH 518～519。生
根培养基为 1Π2MS 无机盐 + MS 有机成分 + Hyg 30mgΠ
L ,pH 518～519。激素、抗生素均在培养基高压灭菌以
后加入。
113 　种子处理与愈伤诱导
种子消毒处理及胚性愈伤诱导的方法按文
献[7 ]。　　
114 　菌液制备
在 YEP 培养基 (115 %琼脂 ,添加卡那霉素和利福
平)上划线培养农杆菌 ,28 ℃静置培养 2d ,用添加有
100μmolΠL 乙酰丁香酮的 AAM 培养基将农杆菌从平板
上洗脱下来 ,盛于小三角瓶中 ,涡旋振荡 1min。调整
OD600在 112 左右 ,于 28 ℃下静置 1h 左右 ,即可用于侵
染。
115 　农杆菌侵染与共培养
用于转化的愈伤组织为用干种子和幼嫩种子培养
所得到的胚性愈伤。转化前的愈伤组织需要在新的培
养基上预培养 4d。于超净台上将愈伤组织放入培养
皿中 ,加入调制好的农杆菌菌液 (愈伤直径 2～3mm ,太
大时要切成小块) ,浸泡 30min ,期间摇动数次。倒去
菌液 ,将愈伤置于灭菌滤纸上 ,超净台上吹 20min 左
右 ,然后将愈伤接种于共培养培养基 (pH51 6) , 20 ℃
暗培养 3d。
116 　抗性愈伤筛选与培养
将共培养后的愈伤组织置于小三角瓶中 ,用无菌
水清洗 2 次 ,再加入无菌水浸泡 10min ,使愈伤内部的
菌体游离出来。倾去无菌水 ,加入含 250mgΠL Cn 的无
菌水浸泡 15min ,倒干洗液后反复用无菌水清洗 (5～8
次) ,至洗液清亮如纯净水为止。将洗干净的愈伤组织
置于经高压灭菌的滤纸上 ,超净台上吹 20min 左右 ,最
后将愈伤接种于制备好的筛选培养基上 ,每皿接 20 块
愈伤 ,于 27 ℃暗培养。2 周后继代 1 次。继续培养至
大约 45d 左右 ,在褐化的愈伤周围会长出鲜黄色的抗
性愈伤。当新长出的抗性愈伤直径达 2mm 左右时 ,将
其转移至新的筛选培养基上继续培养约 10d ,即可进
入分化培养。抗性筛选最初潮霉素浓度为 30mgΠL ,最
后一次筛选时加大至 50mgΠL。
117 　分化培养及分化苗的移栽
来自同一克隆的抗性愈伤接种于同一培养瓶中 ,
立即于 25 ℃,2000lx 光照下分化培养。当分化苗长至
2～3cm 高时即可转入生根培养基生根培养 ,并在分化
苗长出大量根系时及时盆栽或大田培养。
118 　分化苗 Gus 检测
Gus 染 色 液 配 制 : 012molΠL Na2 HPO4 ( pH710 )
6125ml , 012 molΠL NaH2 PO4 ( pH710) , 6125ml , X2Gluc
25mg (Merk 公司产品 ) , Triton X2100 125μl , Methanol
125μl ,加蒸馏水定容至 25 ml ,混合均匀 ,分装于离心
管 ,220 ℃保存备用。
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检测方法 :取绿色幼嫩叶片 (开花前) ,剪成小块 (1
mm×115mm) ,转入 200μl PCR 管中 ,加入 20μl Gus 染
色液 ,37 ℃过夜培养。阳性转基因苗叶片切口部位呈
深蓝色 ,而假阳性或对照叶片呈均一的浅绿色。染色
后 ,可用 70 %的酒精脱色处理 1～2 次。
119 　统计方法
成熟种子或幼嫩种子接种培养 30 天后统计愈伤
诱导率 : (长出愈伤的种子数Π接种的种子总数 ) ×
100 % (污染的种子不计在内) 。
抗性愈伤率统计 : (抗性愈伤数Π抗性筛选开始时
的愈伤总数) ×100 % (污染的愈伤不计在内) 。
分化率统计 : (出苗瓶数Π分化总瓶数) ×100 % (污
染瓶不计在内) 。
转化率统计 : ( Gus 检测阳性的瓶数Π总出苗瓶数)
×100 %。
2 　结果与讨论
211 　不同种子材料的胚性愈伤诱导率
用成熟种子或幼嫩种子诱导产生的愈伤组织 (图
1 ,不同材料诱导产生的愈伤组织形态相同) 均起源于
种子胚。胚乳在愈伤形成过程中作为养分被逐渐吸
收。但去除胚乳并不影响愈伤组织的形成。将幼嫩种
子或干种子胚切下接种于培养基上 ,同样可以诱导形
成愈伤 ,说明胚乳并非形成愈伤组织所必需。愈伤诱
导 30d 后 ,统计愈伤诱导率 (表 1) 。
图 1 　胚性愈伤 (来自干种子)
Fig. 1 　Embryogenic callus (from dy seeds)
从表 1 可以看出 ,刚成熟种子诱导愈伤率最高 ,可
达 96188 % ,其次是幼嫩种子切胚培养的愈伤率 ,为
85199 %。直接用干种子和整粒幼嫩种子诱导愈伤时 ,
愈伤率分别为 81151 %和 82131 % ,相对较低。4 种材
料的平均愈伤率为 86167 %。可见利用幼嫩种子诱导
形成愈伤并无明显优势 ,用干种子也可以达到较好的
效果 ,而用刚刚成熟的种子诱导愈伤的效果最好。
表 1 　日本晴不同种子材料的胚性愈伤诱导率统计
Table 1 　Embryogenetic callus induction rate induced
from different Nipponbare seed material
材料
materials
总胚 (粒)数
No. of total
embryo (grain)
产生愈伤
的胚数
No. of
produced callus
愈伤率
callus rate
干种子 dry seeds 714 582 81151
新鲜成熟种子 fresh
mature seeds
160 155 96188
幼嫩种子 young seeds 503 414 82131
幼 嫩 种 子 切 胚
embryo cut from young
seeds
157 135 85199
　　注 :除最后一行用纯粹的胚诱导外 ,其余均用带胚乳的种子培养
Notes : All the materials used for callus induction were whole seeds with
endosperm except for the materials listed in the last line.
212 　不同表达载体转化的抗性愈伤诱导率
本研究 4 个 RNAi 载体 (V3、V9、V16 和 V19) 均以
干种子的成熟胚愈伤组织作为转化受体 , 2 个反义
RNA 载体 (V28 和 V32)以幼嫩种子 (整粒培养) 的幼胚
愈伤组织作为转化受体。经 45d 抗性筛选后 ,两种受
体的抗性愈伤一般长至 2～3mm 大小 ,未形成抗性愈
伤的愈伤组织或者褐化、干瘪死亡 ,或者愈伤颜色变化
不大 ,保持暗黄色 (图 2 ,来自干种子产生的愈伤) 。不
同材料的愈伤组织在抗性筛选过程中均出现类似的形
态变化。在同一块愈伤组织中 ,从不同部位长出的抗
性愈伤被视为起源于不同细胞的克隆 ,继代时作为不
同克隆处理 ,但在愈伤率统计时只作为一个抗性愈伤
计算。
图 2 　源于胚性愈伤的抗性愈伤 (V19)
Fig. 2 　Hygromycin resistance callus derived
from embryogenic callus (V19)
统计结果 (表 2) 显示 , 成熟胚抗性愈伤率为
22121 %～40171 % ,平均 28149 % ;幼胚为 36179 %～
43121 % ,平均 40 %。幼胚的抗性愈伤率高于成熟胚。
同时可以看出 ,不同载体的抗性愈伤率存在一定差异。
载体不同则插入的外源基因片段也不同 ,因此 ,插入的
外源基因片段与抗性愈伤率有一定关系。
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表 2 　6 个植物表达载体遗传转化的抗性愈伤率
Table 2 　Resistance callus rate for 6 genetic2
transformed plant expression vectors
愈伤来源
origin of
callus
植物表达
载体
plant expression
vectors
筛选开始时
的愈伤数
No. of
before callus
screening
抗性愈伤数
No. of
resistance
callus
抗性愈伤率
resistance
callus rate
( %)
日本晴成熟胚 3 V3 334 94 28114
mature embryo of
Nipponbare
V9 339 138 40171
V16 419 96 22191
V19 396 84 22121
日本晴幼胚33 V28 287 124 43121
young embryo of
Nipponbare V32 318 117 36179
　　注 : 3 成熟胚源于干种子 ;33 幼胚源于未成熟的幼嫩种子
Note : 3 Mature embryo derived from dry seeds ; 33 Young embryo derived
from green young seeds
213 　不同表达载体转化的分化率与转化率
抗性愈伤组织转入分化培养基后 ,一周内个别愈
伤即开始变绿 ,少部分愈伤两周后即有幼芽出现 (图 32
A) 。培养 1 个月时 ,虽然出苗的速度和苗生长的快慢
很不一致 ,但大部分苗均可转入生根培养 (图 32B) 。 分化培养大约 20d 时出苗达到高峰期 ,到 30d 时约80 %的抗性愈伤已分化出苗 ,随后逐渐减少。个别瓶培养 60d 后还会分化出苗来。分别于分化培养 30d (熟胚的 RNAi 载体进行) 和 60d 对分化出的苗作统计 ,移栽后对每一种载体的同一克隆的苗分别编号 ,取样进行 Gus 检测 (图 32C) 。分化率和转化率统计结果见表3。 根据表 3 结果 ,抗性愈伤组织分化培养 30d 后 ,成熟胚愈伤组织有 47179 %～65155 %的培养瓶分化出苗 ,分化率平均为 59183 %。培养 60d 以后 ,分化率上升为 59129 %～80143 % ,平均为 71159 % ,分化率增加11176 %。可见 ,分化培养 30d 时绝大部分苗已分化长出 ,而未分化的愈伤组织仍有一成以上可能随后分化出苗。幼胚 60d 的分化率为 63116 %～72173 % ,平均为 67195 % , 略低于成熟胚的分化率。表 3 还显示 ,Gus 阳性率 ,成熟胚为 43107 %～81180 % ,不同载体间转化率差别较大 ,平均为 61151 % ;幼胚为 58133 %～76167 % ,平均为 67150 % ,略高于成熟胚 ,且不同载体之间也有较大的差异。用不同载体转化相同质量的愈伤组织 ,得到的分化率与转化率不同 ,说明插入的外源基因片段不同对分化率和转化率有一定的影响。
图 3 　抗性愈伤分化生根培养与分化苗 Gus 检测图
Fig. 3 　Culture of resistant callus differentiation , root development and Gus check of differentiation seedlings
A : 抗性愈伤分化苗 (V3) ;B : 转化植株 (V19) ;C : Gus 检测图 (V28)
A : Seedlings from resistance callus (V3) ; B :Transformants (V19) ;C : Gus detection (V28)
表 3 　成熟胚和幼胚的遗传转化分化率与转化率( Gus 阳性率)
Table 3 　Genetic transformation differentiation rate and transformation rate ( Gus positive rate)
植物表达载体 plant expression vector V3 V9 V16 V19 V2833 V3233
分化培养总瓶数 total bottle number for differentiation culture 90 113 86 46 99 95
30d 后出苗的瓶数 (分化率) bottles of seedling emergence after 30d culture 59 54 56 28 — —
60d 后出苗的瓶数 bottles of seedling emergence after 60d culture 65 67 64 37 72 60
30d 培养的分化率 differentiation rate after 30d culture ( %) 65155 47179 65111 60187 — —
60d 培养的分化率 differentiation rate after 60d culture ( %) 72122 59129 74142 80143 72173 63116
30d 后增加的分化率 increased differentiation rate after 30d culture ( %) 6167 11150 9131 19156 — —
Gus 阳性瓶数 3 Gus positive bottle number 3 28 40 40 30 42 46
Gus 阳性率 3 Gus positive rate ( %) 43107 59170 62150 81108 58133 76167
　　注 : 3 指对 60 天后出苗的植株检测结果 ;“—”为未作检测。33 V28、V32 转化受体为幼胚 ,其余载体转化受体均为成熟胚。
Notes : 3 Results collected after 60d culture.“—”indicates the detection was not carried out . 3 3 The transformation recipient for V28 and V32 were callus
induced from young embryos , for the rest vectors the transformation recipient were callus induced from mature embryos.
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3 　小结与讨论
311 　胚性愈伤组织诱导中材料的选择
诱导胚性愈伤的材料可以是成熟胚或幼胚 ,可以
将胚从种子上切下培养 ,也可以带胚乳培养。但不同
方法操作的难易有较大的区别。本研究认为切胚培养
费时费力 ,易污染 ,且与整粒种子培养的愈伤诱导率无
显著差异。用幼嫩种子诱导愈伤也容易污染 (可能是
内生菌所致) 。用干种子和用幼嫩种子整粒培养的愈
伤诱导率几乎没有差别。而用刚刚成熟的新种子整粒
培养愈伤诱导率最高 (96188 %) ,也不易污染。新鲜成
熟种子、干种子和幼嫩种子 (带胚乳培养) 的愈伤诱导
率均在 80 %以上 ,足以满足转化的需要 ,可作为优先
选择的培养材料。
312 　分化培养过程的简化
一般文献认为 ,分化培养开始前须有一个预分化
培养过程 (暗中培养一周) ,分化培养还需要继续添加
潮霉素进行筛选。本试验将这两步全部省去 ,均得到
较高的分化率 (70 %) 和转化率 (64 %) 。因此 ,本研究
认为 ,分化培养前的预分化培养并不是必须的 ,分化培
养阶段继续添加潮霉素进行抗性筛选也非必要。
313 　试验规模设计
按本研究成熟胚的数据 ,平均愈伤率为 81151 % ,
抗性愈伤率、分化率和转化率 ( Gus 阳性 ) 分别为
28149 %、71159 %和 61159 %来计算 ,如欲获得一个载
体的 5 株 Gus 阳性植株 ,则最少需要 5Π(81151 % ×
28149 % ×71159 % ×61159 %) ≈49 个愈伤。按一粒种
子诱导的愈伤平均可以继代 4 个愈伤计算 ,则需要 49Π
4≈12 粒种子。考虑到污染等因素的影响 ,愈伤诱导
需要的种子数应多于 12 粒 ,即获得一个阳性转基因
苗 ,需要的种子 (或胚)数量应多于 3 个。
参考文献 :
[ 1 ] 　Hiei Y, Ohta S , Komari T , et al . Efficient transformation of rice
mediated by Agrobacterium and sequence analysis of the boundaries of
the T2DNA. P lnt J , 1994 , 6 : 271～282
[ 2 ] 　曹孟良. 农杆菌介导的水稻高效遗传转化体系的建立. 湖南农业
大学学报 (自然科学版) ,1999 , (5) :5～12
[ 3 ] 　Jiang J D , Linscombe S D , Wang J L , et al . High efficiency
transformation of US rice lines from mature seedderived calli and
segregation of glufosinate resistance under field condition. Crop Sci ,
2000 , 40 : 1729～1741
[ 4 ] 　Upadhyyaya N M , Surin B , Ramm K, et al . Agrobacterium mediated
transformation of Austalian rice cultivars Jarrah and Amaroo using
modified promoters and selectable markers. Aust J Plant Physiol , 2000 ,
27 : 201～210
[ 5 ] 　黄健秋 ,卫志明 ,安海龙 , 徐淑平 ,章 冰. 根癌土壤杆菌介导的水
稻高效转化和转基因植株的高频再生. 植物学报 ,2000 , (11) :
1172～1178
[ 6 ] 　Ignacimuthu S , Arockiasamy S. Agrobacterium2mediated transformation
of an elite indica rice for insect resistance. Current Science , 2006 ,90
(6) :25
[ 7 ] 　林拥军 ,陈　浩 ,曹应龙 , 吴昌银 ,文 　静 ,李亚芳 ,华红霞. 农杆
菌介导的牡丹江 8 号高效转基因体系的建立. 作物学报 ,2002 ,
(3) :294～300
[ 8 ] 　蒋家焕 ,刘　峰 ,许 　明 , 黄志伟 ,谢丽雪 , 郑 　金. 高赖氨酸蛋
白基因遗传转化水稻的研究. 福建农林大学学报 (自然科学版) ,
2006 , (6) :615～618
[ 9 ] 　王玉珍 ,罗景兰 ,徐　进 ,刘香玲. 农杆菌介导的水稻遗传转化与
植株再生. 华北农学报 ,2005 , (2) :8～11
[10 ] 　刘志学 ,张 　旭 ,徐亚南 ,何艺园 ,马向前 ,沈大棱 ,唐克轩. 用
LBA4404ΠpCAMBIA 系列转化水稻的最佳条件. 复旦学报 (自然
科学版) ,1999 , (4) :439～443
[11 ] 　金松恒 ,翁晓燕 ,王妮妍 ,李雪芹 ,毛伟华 ,蒋德安. Rubisco 活化
酶基因反义表达载体的构建与水稻的遗传转化. 遗传 ,2004 ,
(6) :881～886
[12 ] 　王亚琴 ,梁承邺. 硝酸银在水稻农杆菌转化中的作用. 湖南大学
学报 (自然科学版) ,2004 , (2) :28～31 + 51
[13 ] 　朱海生 ,潘东明 ,林义章 ,张志忠 ,温庆放. 根癌农杆菌介导草莓
遗传转化研究. 核农学报 ,2008 , (1) :36～40
[14 ] 　秦永华 ,张上隆. 影响根癌农杆菌介导的丰香草莓遗传转化因素
分析. 核农学报 ,2007 , (5) :461～465
更正 :
本刊 2008 ,22 (3) :286 ,李玉平等人撰写的论文“不同培养条件对大花金挖耳愈伤组织生长及黄酮产量的影
响”中 ,通讯作者 :“张 　兴 (19822) ,男 ,陕西周至人 ,教授 ,主要从事生物农药研究。E2mail : Zx @126. com”应为
“张 　兴 (19522) ,男 ,陕西周至人 ,教授 ,主要从事生物农药研究。E2mail :Zx @126. com”。特此更正。
893 Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2008 ,22 (4) :394～398
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net