全 文 :© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
此文于 1995 年 12 月 1 日收到。
本研究系河南省自然科学基金项目。
菊花花色辐射诱变研究
郭安熙 范家霖 杨保安 王柏楠 张建伟
(河南省科学院同位素研究所 郑州 450052)
陈树国
(河南农业大学 郑州 450002)
王世荣 王 然
(开封市园林处 开封 475001)
采用60Coγ辐射与组培相结合 ,研究菊花的诱变育种。结果表明 ,菊花品种间辐
射敏感性差异较大 ,辐照材料的诱变效果 :愈伤组织 > 植株 > 根芽 > 枝条。辐照愈伤
组织的适宜剂量为 018~116krad ,辐照植株、根芽和枝条为 2~3krad。绿花、白花、
黄花品种诱发花色变异的频率极低 ,粉紫色品种较易诱发花色变异 ,且变异谱宽。对
于突变嵌合体的分离 ,组培优于扦插。VM0 、VM1 、VM2 离体培养的再生植株 ,花变
异率依次为 6617 %、5613 %、3815 % ,均高于母株。已育成的 14 个菊花新品种的实
践证明 ,辐射与组培结合 ,育种效率高、周期短。本文提出了菊花无性繁殖的“辐射诱
变与组织培养复合育种技术路线”。
关键词 :菊花 辐射育种 组织培养
前 言
菊花是我国的传统名花 ,现已遍布世界各地 ,随着花卉市场的发展和人们观赏水平的提
高 ,对品种的要求也越来越高 ,因而探索快速高效育种技术势在必行。
目前国内外在菊花辐射育种上已取得大量成果 ,积累了不少经验[1 —3 ] ,但诱变育种不能
停留在原来的水平上。组培技术的应用则是花卉诱变育种的一条新途径[4 ] ,为显现体细胞突
变开辟了广阔的前景[2 ] 。在辐射与组培的结合上 ,我国学者已做大量工作[5 —7 ] ,为本研究提
供了借鉴。
辐射诱发突变具有随机性、嵌合性和单细胞突变的特点[2 ,8 ,9 ] ,突变不能完全显现。就无性
繁殖植物而言 ,大部分嵌合突变伴随着“二倍体选择”或个体衰老等生物学过程而减少或消失[8 ] 。
针对这个问题 ,作者将组培技术引入辐射育种程序 ,旨在为突变的显现创造条件 ,从而提高诱变
效率和缩短育种周期 ,同时探讨适用于菊花等无性繁殖植物的“复合育种”技术。
56 核 农 学 报 1997 ,11 (2) :65~73Acta A gricult urae N ucleatae Sinica
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材 料 与 方 法
试材与处理 从郑州市园林科研所和开封市园林系统引进 150 多个菊花 [ Dendranthem a
morif oli um ( Ramat . ) Tzvel ] 品种供试。在河南省科学院同位素所用钴源辐照 , 剂量率
011k rad/ min。辐照植株在 4~5 月份进行 ,选取主茎 30cm 左右、生长健壮的个体 ,上盆缓苗数
日后 ,连盆辐照 ,剂量为 215 和 3krad ,剂量的计算以分枝个体的主茎为准。辐照后定植田间 ,
加强养护。辐照枝条在 5~6 月份进行 ,剂量为 0、015、1、2、3krad ,选取均匀一致的嫩枝茎段 ,
辐照后扦插于自动喷雾苗床 ,23 天后移植田间。辐照根芽在 3 月份进行 ,剂量为 0、1、2、3、
4krad ,辐照后植于温室养护 ,成活后移植露地。辐照愈伤组织的剂量为 0、014、018、112、116
和 210krad。辐照后的植株、枝条和根芽 ,生长受到不同程度抑制 ,经过月余蹲苗 ,新芽陆续萌
发 ,在 8 月中旬之前 ,多次摘心 (2~3 次) ,促使多生分枝 ,同时根据枝条生长情况 ,分期分批 (1
~2 次)扦插 ,一般于 9 月中旬现蕾 ,当年开花。对花期枝间嵌合变异的分离 ,采用变异硬枝温
室冬插 ,同时取花托组培 ,进行比较。花瓣嵌合变异则取花瓣组培。辐照用的愈伤组织用叶片
(老嫩适中)诱导。VM0 、VM1 、VM2 组培用茎尖作外植体。
田间试验 采用大群体种植、抽样调查的方法 ,以相对成活率和相对株高作为损伤指标 ,
以花变异 (含花色、花型、瓣型)作为突变指标 ,以株为单位计算变异频率。VM0 系指辐照后的
材料 ,VM1 为初生枝 ,VM2 为次生枝。
组织培养 外植体的灭菌程序 :自来水冲洗 →70 %乙醇浸泡 10 秒钟 →011 %升汞溶液浸
泡 10 分钟 →无菌水冲洗 3 遍。以 MS 培养基为基础培养基 ,诱导愈伤组织和芽时 ,附加 NAA
(萘乙酸) 0101~1100mg/ L 、BA (62苄基嘌呤) 2~10mg/ L 、蔗糖 310 %、琼脂 017 %~110 % ,
p H518。诱导生根时 ,附加 NAA 011~015mg/ L 、IBA (吲哚丁酸) 011mg/ L 、蔗糖 115 %~
310 %、琼脂 016 %~018 % ,p H518。培养基高压 (019~111kg/ cm2)蒸汽灭菌 15~20 分钟。无
菌操作接种 ,将茎尖切成 015~110cm 长 ,顺插于培养基中 ,叶片沿叶脉切成 015 ×015 (cm) 的
组织块 ,花瓣横切成 110cm 的瓣段 ,花托切成小块 ,每瓶接种 3~8 块 (段) 。培养温度 25 ±
2 ℃,光照强度 2~3klx ,每日光照 12h。当丛状试管苗长至 2~3cm 时 ,剪取苗段继代培养 (2~
3 代) 。生根后移植 ,移植前开瓶置于散射光下锻炼 5~7 天 ,再移入培养料或自动喷雾苗床 ,
经 20~30 天精心养护后植于露地。
结 果 与 分 析
(一)菊花的辐射敏感性
1. 根芽的辐射效应 :从表 1 可看出 ,品种间辐射敏感性差异较大 ,但趋势相同 ,从相对株高
看 ,均以损伤程度达 70 %左右时的变异率最高。6 个品种综合统计结果 (表 2) 表明 ,2~3krad
为适宜诱变剂量。
2. 植株的辐射效应 :表 3 表明 ,辐照植株的成活率和变异率都比较高。215 和 3krad 辐照 ,
花变异率分别达 5818 %、4811 % ,其中黄花、白花品种很少发生花色突变 ,多为花型、瓣型变
异 ,绿花品种未见任何变异。
3. 枝条的辐射效应 :试验结果 (表 4) 再次表明 ,不同品种的辐射敏感性有显著差异 ,以
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3krad 组为例 ,水红管、玉芙蓉、粉钩环、日本黄和绿朝云的相对株高 (辐照后 70 天调查) 依次
为 6417 %、5612 %、4319 %、4918 %和 4714 %。其花变异率依次相应为 35 %、1115 %、1318 %
和 210 %、0。粉紫花品种 (水红管、玉芙蓉、粉钩环) 的花变异率较高 ,黄花品种 (日本黄) 的花
色变异率很低 ,绿花品种 (绿朝云)未见变异。在本试验剂量范围内 ,花变异率与辐照剂量呈正
相关 ,以 3krad (基本是半损伤剂量)组的变异率最高。大群体的统计结果也如此 (数据略) 。
表 1 根芽的辐射效应
Table 1 The effect of irradiation on radical buds of chrysanthemum
供试品种
Varieties
剂量
Dose
(krad)
根芽数
No. of
radical
buds
成活数
No. of
Survival
成活率
Survival
rate ( %)
株 高 3
Height of plantX
(cm)
S
(cm)
C. V
( %)
相对高度
Relative height
( %)
花 变 异
Variation of flowers
株数
No. of
plants
频率
Frequency
( %)
Sp
( %)
紫荷 0 30 30 100 2312 412 1811 10010 0 0 -
Zihe 1 30 30 100 1717 217 1513 7613 3 1010 5148
2 30 30 100 716 312 4211 3218 3 1010 5148
3 30 30 100 318 211 5513 1614 2 617 4156
4 30 27 90 316 212 6111 1515 0 0 -
粉毛 0 30 30 100 1510 311 2017 10010 0 0 -
Fermao 1 30 30 100 1212 316 2915 8113 0 0 -
2 30 27 90 617 417 7011 4417 9 3313 9124
3 30 30 100 411 215 6110 2713 9 3010 8137
4 30 18 60 219 213 7913 1913 3 1617 9105
霜满天 0 30 30 100 2218 115 616 10010 0 0 -
Shuang mantian 1 30 30 100 1912 416 2410 6617 6 2010 7130
2 30 27 90 717 313 4219 2617 9 3313 9124
3 30 21 70 412 117 4015 1416 6 2816 10110
4 30 21 70 311 113 4119 1018 1 418 4178
玉芙蓉 0 30 30 100 1810 513 2914 10010 0 0 -
Yufurong 1 30 30 100 1314 315 2611 7414 3 1010 5148
2 30 21 70 419 315 7114 2712 5 2318 4147
3 30 12 40 411 110 2414 2217 4 3313 4147
4 30 9 30 213 015 2117 1218 1 1111 11111
水红管 0 30 30 100 1314 410 2919 10010 0 0 -
Shuihong guan 1 30 30 100 1017 316 3316 7919 3 1010 5148
2 30 30 100 612 211 3319 4613 9 3010 8137
3 30 15 50 218 116 5711 2019 6 4010 13109
4 30 18 60 116 017 4318 1119 5 2718 10187
粉钩环 0 30 30 100 1614 216 1519 10010 0 0 -
Fengoughuan 1 30 30 100 1115 510 4315 7011 6 2010 7130
2 30 12 40 718 716 9714 4716 0 0 -
3 30 12 40 210 114 7010 1212 0 0 -
4 30 6 20 210 - - 1212 0 0 -
3 株高为辐照后 50 天调查结果
3 The height of plants are investigated on the fiftieth day after radical buds are irradiated
76 2 期 菊花花色辐射诱变研究
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表 2 6 个供试品种变异结果统计
Table 2 Comprehensive variation results of six varieties of chrysanthemum
剂量
Does(krad)
变异率
Rate of variation ( %)
Sp (比较标准误)
Rate of standard error ( %)
1 1117 214
2 2318 017
3 2215 318
4 1011 310
表 3 辐照植株的诱变效果
Table 3 Effect of irradiation on inducing variation of chrysanthemum plants
品种数
No. of
varieties
辐照株数
No. of
irradiated
plants
剂 量
Doses
(krad)
成活数
No. of
survival
plants
成活率
Survival
rate ( %)
花变异
Variation of flowers
株数
No. of plants
频率
Frequeney( %)
30 60 310 54 9010 26 4811
30 60 215 51 8510 30 5818
表 4 枝条辐射效应
Table 4 Experimental results of irradiation effect on chrysanthemum brimehe
品种
Varieties
剂量
Dose
(krad)
辐照枝条数
No. of
irradiated
branches
成活数
No. of
Survival
相对成活率
Relattive
survival
rate ( %)
株 高
Height of plantsX
(cm)
S
(cm)
C. V
( %)
相对高度
Relattive height
( %)
花 变 异
Variation of flowers
株数
No. of
plants
频率
Frequency
( %)
水红管 0 90 74 100 2915 418 1613 100 0 0
Shuihongguan 015 90 71 9519 2217 913 4110 7619 2 218
110 90 56 7517 2217 1019 4810 7619 2 316
210 90 42 5618 1718 616 3711 6013 6 1413
310 90 40 5411 1911 519 3019 6417 14 3510
玉芙蓉 0 90 78 100 2518 811 3114 100 0 0
Yufurong 015 90 76 9714 2511 910 3519 9713 6 719
110 90 64 8211 2411 918 4017 9314 8 1215
210 90 62 7915 2118 1017 4911 8415 2 312
310 90 52 6617 1415 519 6014 5612 6 1115
粉钩环 0 90 78 100 2414 519 2412 100 0 0
Fengouhuan 015 90 76 9714 2013 618 3315 8215 0 0
110 90 64 8211 1817 713 3910 7610 0 0
210 90 60 7619 1512 612 4018 6118 8 13. 3
310 90 58 7414 1018 415 4211 4319 8 1318
日本黄 0 90 60 100 2613 317 1411 100 0 0
Ribenhuang 015 90 56 9313 2119 615 2817 8313 0 0
110 90 58 9617 2015 515 2619 7719 0 0
210 90 50 8313 1611 513 3219 6112 0 0
310 90 48 8010 1311 517 4314 4918 1 2
绿朝云 0 90 60 100 2115 610 2719 100 0 0
Luzhaoyun 015 90 56 9313 1619 415 2616 7816 0 0
110 90 58 9617 1312 413 3216 6114 0 0
210 90 54 9010 1412 416 3214 6610 0 0
310 90 50 8313 1012 318 3713 4714 0 0
86 核 农 学 报 11 卷
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(二)组培在菊花辐射育种中的应用
1. 嵌合突变的分离 :辐照菊花诱发的突变 ,常以各种嵌合状态出现 ,用扦插方法 ,在花期将
有益变异从嵌合体上分离出来 ,并保存下去 ,比较困难 ,因此 ,我们将组培引入分离的环节。试
验结果 (表 5) 和实践表明 ,组培优于扦插 ,前者对变异的保存率可达 6617 % ,后者仅为
4014 %。对无法扦插的花瓣嵌合突变的分离 ,组培更具独特优点。即使有目标地取变异枝扦
插 ,也常须连续扦插 2~3 次 ,历时 2~3 年才能纯合 ,而用组培方法继代 (1~2 代) 培养 ,则可
很快纯化 ,育种周期一般可缩短 1~2 年。
表 5 突变嵌合体的分离
Table 5 The separation of mutation mosaics of chrysanthemum plants
时间
Date
month/ year
分离方法
Separation
method
取变异数
No. of
variants
used
扦插枝条数
No. of
cutting
branches
扦插成活数
No. of
survival
cuttings
成活率
Survival
rate ( %)
变异保存数
No. of
survival
variants
变异保存率
Rate of
survival
variation ( %)
11/ 1988 枝条扦插Stem cutting 29 389 43 1111 10 3415
组培
Tissue culture 6 - - - 5 8313
11/ 1989 枝条扦插Stem cutting 41 388 73 1818 19 4613
组培
Tissue culture 34 - - - 20 5818
11/ 1990 枝条扦插Stem cutting 29 679 35 512 11 3719
组培
Tissue culture 29 - - - 21 7214
2. CK、VM0 、VM1 、VM2 的组培 : (1) CK的组培。由表 6 可见 ,诱导率随品种不同而不同 ,
霜满天与 68 号比较 ,以叶片为外植体时 ,前者为 2816 % ,后者为 9515 %。以花瓣作外植体时 ,
前者为 1313 % ,后者为 7214 % ,差异甚大。
表 6 不同品种的组培效果
Table 6 Tissue culture of different varieties of chrysanthemum plants
品种
Varieties
外植体
Explants
接种数
No. of
explants
inoculated
分化、分生所需时间
Days from inoculation to
differentiation (d)
诱导成功数
No. of succesful
induction
诱导率
Induction rate ( %)
霜满天
Shuangmantian
叶片
Leafblads 63 43 18 2816
花瓣
Petals 45 47 6 1313
68 号
No. 68
叶片
Leafblads 66 35 63 9515
花瓣
Petals 58 42 42 7214
金背大红
Jinbeidahong
花瓣
Petals 57 44 18 3116
玉芙蓉
Yufurong
茎尖
Shoot tips 21 3 15 7114
大光明
Daguanming
茎尖
Shoot tips 18 5 12 6617
墨魁
Mekui
茎尖
Shoot tips 24 7 9 3715
96 2 期 菊花花色辐射诱变研究
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同一品种的不同外植体 ,组培的结果 (表 7)也不同 ,茎尖分生速度快 ,分化速度的顺序为 :
花托 > 叶片 > 花瓣。诱导率的顺序为 :叶片 > 茎尖 > 花托 > 花瓣。在茎尖培养中 ,未发现遗传
性变异。在花托培养的 517 株无性系中 ,仅发现 1 株遗传性变异 ,突变率为 01175 %。
(2) VM0 、VM1 及 VM2 的组织培养 :取辐照植株不同营养世代的顶芽和腋芽作外植体分
别培养。接种 45 天调查诱导率与苗高 (数据略) 。苗高随辐照剂量的增加而降低 ,诱导率则随
外植体无性世代的增加而提高 ,这是辐射损伤在组培中的体现。
从表 8 知 ,扦插苗的花变异率为 2215 % ,而 VM0、VM1、VM2 组培苗的花变异率依次为
6617 %、5613 %、3815 % ,均比扦插高 ,表明组培可克服“二倍体选择”,提高细胞突变的显现机率。
表 7 同一品种不同外植体的组培效果
Table 7 Tissue culture of different explants of the same vaviety of chrysanthemum plants
外植体
Explants
接种数
No. of explants
incoulated
绿芽点形成时间
No. of days from
inoculation to
green buds(d)
丛状苗形成时间
No. of days
from inoculation
to plantlet (d)
诱导成功数
No. of
successful
induction
诱导率
Induction
rate ( %)
花托
Receptacles 21 12 26 19 9015
茎尖
Shoot tips 18 21 17 9414
叶片
Leaf blads 66 35 48 63 9515
花瓣
Petals 58 42 56 42 7214
表 8 不同无性世代组培再生植株的花变异
Table 8 Variation of flowers of regenerated plants of tissue culture in different agamobiums
品种
Varieties
剂量
Doses
(krad)
处理
Treatment
调查株数
No. of plants
investigated
花 变 异
Variation of flower
株数
No. of plants
变异率
Variation rate ( %)
金背大红
Jinbeidahong 215 枝条扦插Stem cutting 40 9 2215
215 VM0 组培Tissue
culture on VM0
48 32 6617
215 VM1 组培Tissue culture
on VM1
48 27 5613
215 VM2 组培Tissue culture
on VM2
52 20 3815
注 :花变异包括花色、花型和瓣型 Note : The variation of flowers include colour ,flowers shape and petal pattern
(3)辐照愈伤组织 :试验结果 (表 9 与表 10) 表明 ,014krad 已对愈伤组织的分化产生明显
的抑制 ,抑制程度与辐照剂量呈正相关 ,2krad 呈现严重抑制。从外部形态看 ,116krad 以上剂
量辐照 ,10 天后逐渐褐化 ,仅有个别褐化愈伤组织出现少数绿色芽点 ,且品种间差异甚大。田
间调查表明 ,在 014~116krad 范围内 ,花变异率随剂量的增大而提高 ,116krad 组的花变异率
高达 6316 % ,明显高于辐照枝条、植株和根芽的诱变率。
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表 9 辐照愈伤组织对分化的影响
Table 9 Influence of irradiated callus on differentiation
剂量
Dose (krad)
辐照愈伤组织数
No. of callus irradiated
68 号
No. 68
霜满天
Shuangmantian
愈伤组织分化数
No. of differentiated callus
68 号
No. 68
霜满天
Shuangmantian
诱导率相对值
Relative induction rate ( %)
68 号
No. 68
霜满天
Shuangmantian
0 66 63 63 18 100 100
014 63 - 46 - 7615 -
018 56 60 36 12 6713 6919
112 65 54 35 4 5613 2519
116 60 54 15 4 2612 2519
210 - 51 - 3 - 2016
表 10 辐照愈伤组织再生植株的花变异
Table 10 Variant rate of renegeration plants f rom callus irradiated
剂量
Doses
(krad)
调查株数
No. of plants
investigated
变异类型
Type of variation
变异株数
No. of variants
变异率
Variation rate
( %)
0 84 扭曲平瓣Distorted even petal 1 112
014 51 晚花、宽勺瓣Wide2spoon2shaped petal 6 1118
018 52 色金黄、平瓣外翻Golden colour ,rolled2outwards even petal 8 1514
112 54 花色深、蕾变、外曲平瓣Deepening in flower colour ,distorted outward petal 18 3313
116 66 花色深、晚花、平瓣外翻、宽勺瓣Deepning in flower colour ,rolled2outwards
petal ,and wide2spoon2shaped petal 42 6316
图 1 辐射诱变与组织培养复合育种技术示意图
Fig. 1 Combining breeding technique of irradiation mutation with tissue culture
17 2 期 菊花花色辐射诱变研究
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(三)辐照与组培复合育种技术
在试验和育种实践的基础上 ,总结提出了“菊花辐射诱变与组织培养复合育种技术路线”,
确定了基本程序 (图 1) ,包括选材、辐照处理、突变观察、嵌合突变的分离以及新品种鉴定与生
产等几个部分 ,使辐照与组培密切结合。须说明的是 ,辐照整株、枝条、根芽成活后 ,除取早代
组织离体培养之外 ,仅对其进行多次摘心 ,迫使多生分枝 ,待花期嵌合突变显现 ,用组培分离即
可 ,勿须盲目大量扦插。经验证 ,该技术育种效率高、周期短 ,作者曾在 3 年内分两批鉴定了
14 个菊花新品种[10 ] ,并在无锡全国第四届菊花博览会、开封市菊花花会和郑州市菊展中分别
获优、良新品种奖。
讨 论
1. 菊花辐射诱变与组培相结合的育种技术 ,优于单项育种技术 : (1)对嵌合突变的分离 ,组
培优于扦插。在已育成的 14 个菊花品种中[10 ] ,经组培分离 1 次成功的占 13 个 (另 1 个为花
托愈伤组织诱导的自发变异) ,连同稳定性观察、扩繁和鉴定在内 ,育成时间为 2~3 年。其中
5 个品种是在组培与扦插两种分离方法的比较中育成的 ,尽管两者都达到了育种目标 ,但扦插
分离的育成时间为 4~5 年 ; (2)组培可克服“二倍体选择”,提高细胞突变的显现机率。由于辐
射诱发突变具有单细胞事件的特点 ,所以突变细胞在分裂增殖时 ,在细胞群中会发生彼此之间
的竞争 ,通常突变细胞被大量淘汰 ,这一过程称之谓“二倍体选择”[8 ] ,本文 VM0 、VM1 、VM2
组培植株变异率的依次递降趋势证明了这一点。此外 ,三者的变异率均高于母株 ,进一步表明
组培可克服“二倍体选择”,有利于细胞突变的显现 ; (3)辐照愈伤组织的突变率较高 ,且发现有
同质突变体。这可能与不定芽的单细胞起源有关[9 ] ; (4) 复合处理引入了愈伤组织诱导的体
细胞自发变异 ,亦称体细胞无性系变异 (Somaclonal variation) [14 ] ,丰富了选择基础。裘文达等
利用菊花花瓣组培获得新类型[6 ] 。本文在菊花花托组培 (CK)中发现 1 株花色变异体 (系体细
胞无性系变异) ,遗传性稳定 ,经鉴定命名为霞光 (亲本为花百合) [10 ] ,曾获全国第四届菊花博
览会优秀新品种奖。
2. 基于特定试验目的 ,VM0 、VM1 、VM2 组培采用茎尖作外植体 ,意在排除体细胞无性系
变异的干扰 ,因为茎尖培养不易诱导自发变异[12 ] ,CK组培试验也证明了这一点。但也有学者
认为 ,茎尖基部也能诱导出愈伤组织 ,也会产生不定芽[14 ] 。因此 ,若非特定试验 ,用其它组织
作外植体 ,会更有利于育种。
3. 本文提出的“复合育种技术路线”,尚未涉及单细胞培养 ,有待进一步研究。
参 考 文 献
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6 裘文达等. 利用菊花花瓣组织培养获得新类型. 浙江农业大学学报 ,1983 , (3) :243~246
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27 核 农 学 报 11 卷
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10 杨保安等. 辐射与组培复合育成“霞光”等 14 个菊花新品种. 河南科学 ,1996 , (1) :57~60
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12 Collins G B. 植物细胞和组织培养. 生物科学动态 ,生物工艺学专集 ,1984 , (增刊) :51
13 桂耀林等编著. 植物组织培养. 北京 ,科学出版社 ,1985 ,31 ,87
14 李浚明. 体细胞无性系及其变异. 遗传 ,1983 ,5 (1) :41~44
STUDY ON THE TECHNIQUE OF IND UCING MUTATION
BREEDING IN CHRYSANTHEMUM
Guo Anxi Fan Jialin Yang Baoan Wang Bainan Zhang Jianwei
( Isotope Instit ute , Academy of Science of Henan Province , Zhengz hou 450002)
Chen Shuguo
( Horticult ural Depart ment , Henan A gricult ural U niversity 450052)
Wan Shirong Wang Ran
( Kaif eng Horticult ural A gency 475001)
ABSTRACT
Technique of mutation breeding in chrysanthemum was studied by means of 60Co2γ irradia2
tion and tissue culture. The results showed that radiosensitivity varies greatly with different vari2
eties of chrysanthemum;the suitable doses are 2~3 krad for radical buds ,cutting boughs and the
whole plants ,and 018~110 krad for callus from cultures in vit ro. Tissue culture has an advan2
tage over cuttage in isolation of mutant mosaics. Mutation rates of flowers of regenerated plants
from in vit ro culture of VM0 , VM1 , VM2 are 6617 %, 5613 %, and 3815 % respectively , all of
which are higher than that from irradiated plants. Practice of breeding 14 new chrysanthemum
varieties proved that by combination technique of irradiation with tissue culture , a higher breed2
ing effeciency and shorter period of breeding was achieved.
Key words :Chrysanthemum ,radiation ,breeding ,tissue culture
37 Acta A gricult urae N ucleatae Sinica1997 ,11 (2) :65~73