全 文 ：文章编号 :100028551 (2008) 022152204
枣幼胚子叶再生植株的研究
王国平1 ,2 　李晓梅2 　马会勤1
(11 中国农业大学农学与生物技术学院 ,北京　100094 ;21 山西农业科学院果树研究所 ,山西 太谷　030815)
摘 　要 :本试验研究了影响金丝小枣幼胚子叶再生植株的相关因素 ,获得了金丝小枣幼胚子叶的再生植
株。正交试验结果表明 :金丝小枣幼胚子叶在附加 TDZ 016mgΠL、IAA 015mgΠL、NAA 013mgΠL 的 1Π2MS 培
养基中 ,暗培养 20d ,愈伤组织诱导率和再生频率均最高 ,分别达到 100 % 和 41186 %。再生获得的不定
芽在 MS 培养基上 ,添加 62BA 110mgΠL 和 IBA 011mgΠL ,增殖效果最好 ;在 1Π2MS + IBA110mgΠL 培养基上 ,
生根率达到 100 %。
关键词 :枣 ;幼胚子叶 ;不定芽再生
PLANT REGENERATION FROM COTYLEDON OF IMMATURE EMBRYO OF JUJUBE
WANG Guo2ping1 ,2 　LI Xiao2mei2 　MA Hui2qin1
(11 College of Agriculture and Biotechnology , China Agricultural University , Beijing 　100094 ;
21 Pomology Institute , Shanxi Academy of Agricultural Science , Taigu , Shanxi 　030815)
Abstract :The effects of TDZ , IAA , NAA and medium on bud initiation of cotyledon of immature embryo from jujube cultivar
Jinsixiaozao were evaluated by L9 (34 ) orthogonal design. The result showed that TDZ was the most important factor for bud
initiation followed by medium , IAA , and NAA. The optimum combination medium was on 1Π2MS medium containing TDZ
(016mgΠL) ,IAA (015mgΠL) and NAA013 (mgΠL) by variance analysis , on which cultured in dark 20d , callus inducing rate
was 100 % and adventitious bud inducing rate was 41186 %. The optimum media for adventitious bud propagation and for root
inducing are on MS medium adding 62BA 110mgΠL , IBA 011mgΠL and on 1Π2MS medium supplemented with IBA 110mgΠL
respectively.
Key words :jujube ;cotyledon of immature embryo ;adventitious bud regeneration
收稿日期 :2007206214 　接受日期 :2007208227
作者简介 :王国平 (19712)男 ,山西汾西人 ,硕士 ,助理研究员 ,主要从事果树生物技术研究。Tel :13935415863 ; E2mail :gsswgp @163. com　　枣树是我国特有果树 ,耐寒耐旱 ,特别适合干旱山地生长。由于生理方面原因 ,常规的杂交育种无法在枣树育种中应用[1 ] 。现有的枣品种主要是从自然遗传变异中选出的[2 ] ,而且裂果和保鲜一直困扰着枣产业的发展。随着生物技术在作物育种中的成功应用 ,利用基因工程对枣树进行遗传改良 ,很有必要[3 ] 。本试验以优良品种金丝小枣的幼胚子叶为试验材料 ,建立了不定芽再生系统 ,为建立枣树的遗传转化体系及无性系变异的筛选奠定基础。1 　材料和方法111 　幼胚子叶接种培养 供试品种金丝小枣选自山西省果树所国家枣种质资源圃。在盛花期后 50d ,将采回的幼果去掉果柄 ,用洗洁精洗一遍 ,冲洗干净后在超净工作台上放入 95 %的酒精中蘸一下 ,再于酒精灯上灼烧。当表面没有液滴时 ,放入垫有过滤纸的培养皿中。用解剖刀将枣剖开 ,取出种仁 ,剥去种皮 ,将子叶从幼胚上切下 ,每片子叶平均横切为两块 ,表面向上 ,平铺于含不同生长调节物质 (表 1)的培养基 (附加 310 %蔗糖 ,016 % 琼脂 ,pH值 518) 上进行培养。每处理接种 3 瓶 , 每瓶接种 11块子叶。重复试验 2 次。接种后 60d , 调查其再生率。子叶再生率 ( %) = (再生芽总数Π接种子叶数 ) ×100 %。
251　 核 农 学 报　2008 ,22 (2) :152～155Journal of Nuclear Agricultural Sciences
1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
表 1 　L9 ( 34 )试验设计表
Table 1 　The design of the orthogonal test L9 (34 )
水平
levels
因素 factors
A
TDZ(mgΠL) BIAA(mgΠL) CNAA(mgΠL) D培养基 medium
1 012 015 010 1Π4MS
2 014 110 011 1Π2MS
3 016 115 013 MS
112 　不定芽增殖培养
将 111 中得到的不定芽苗经壮苗后接种到以 MS
为基本培养基 ,62BA (015 ,110 和 115mgΠL) 与 IBA (011 ,
013 和 015mgΠL) 各 3 个水平完全组合 ,共 9 个处理中。
每处理 3 瓶 ,每瓶接种 5 个不定芽苗 ,重复 3 次。接种
30d 统计处理的芽苗总数 ,计算增殖系数和生长系数。
增殖系数 = (接种 30d 的芽苗数Π接种的芽苗数) ×
100 %。
113 　不定芽生根培养
由 112 得到的芽苗 ,先在基本培养基MS 上进行壮
苗 ,15d 后以 1Π2MS 为基本培养基 ,选取苗高、长势较
为一致的不定芽苗进行试验 ,探讨对生根率及根长的
影响。试验共设 10 个处理 , IAA 和 IBA 各 5 个 (012、
014、016、018 和 110mgΠL) ,每处理 3 瓶 ,每瓶 5 个外植
体。
114 　培养条件
除子叶接种后先进行 20d 的暗培养 , 再移至光下
培养外 ,其他培养均为光下培养。培养温度为 25 ℃±
2 ℃, 每日光照 14hΠd , 光照强度为 2000lx。
2 　结果和分析
211 　幼胚子叶不定芽再生过程的形态学观察
金丝小枣幼胚子叶块接种在不同植物生长调节物
质配比的培养基上。7d 左右开始膨大 ,10d 左右边缘
的刀切口处产生愈伤组织 ,子叶的颜色由绿色变为浅
黄色或浅绿色 (图 12A) 。暗培养 20d 后子叶 2Π3 布满
愈伤组织。在光照下培养 7d ,愈伤组织变成为浅黄色
或黄绿色 ,并且愈伤组织布满了整个子叶 (图 12B) 。
接种 40d 后 ,个别子叶愈伤组织上出现黄绿色芽点 ,已
明显不同于愈伤组织 , 继续培养后形成不定芽 (图 12
C) 。形成的愈伤组织随培养时间延长 ,子叶再生频率和
再生不定芽数量开始增加。到 60d 时再生频率不再增
加 ,以后仅是不定芽增殖和伸长形成不定梢 (图 12D) 。
212 　正交试验结果的分析
从表 2 试验结果可以看出 ,不同因素不同水平对
图 1 　枣幼胚子叶再生植株
Fig. 1 　Plant regeneration from cotyledon of
immature embryo of jujube
A :金丝小枣子叶块接种 10d 时产生的愈伤组织 ;B :金丝小枣子叶块
接种 40d 后子叶全部愈伤化 ; C :金丝小枣幼胚子叶在培养基 1Π2MS
附加 TDZ 016mgΠL、IAA015mgΠL 和 NAA013mgΠL 上形成的绿色芽点 ;
D :金丝小枣幼胚子叶在培养基 1Π2MS附加 TDZ 016mgΠL、IAA 015mgΠL
和 NAA013mgΠL 上形成的不定梢。
A :callus of immature cotyledons after inoculation 10d ;B :callus of immature
cotyledons after inoculation 40d ;C :adventitious buds induced on medium 1Π
2MS with TDZ 016mgΠL , IAA015mgΠL and NAA013mgΠL ; D : shoots
formation on medium1Π2MSwith TDZ 016mgΠL , IAA015mgΠL and
NAA013mgΠL1
枣幼胚子叶不定芽再生的影响很大。从 T 值可以看
出 ,TDZ、IAA、NAA、培养基 4 个因素的各水平最佳组合
为 :TDZ 016mgΠL ,IAA 115mgΠL ,NAA 011mgΠL 添加于1Π2
MS 培养基中。本试验中 ,编号 7 的幼胚子叶不定芽诱
导率最高 ,在 1Π2MS 基本培养基上添加 TDZ 016mgΠL、
IAA 015mgΠL、NAA 013mgΠL , 不 定 芽 诱 导 率 可 达
41186 %。而 1 号、2 号的诱导率均为零 ,表现出对诱导
金丝小枣子叶不定芽的极不适应。
观察极差值可以看出 ,极差值越大的因素 ,对试验
结果的影响越显著。TDZ 因素为试验主导因子 ,即基
本培养基中 TDZ 的存在对幼胚子叶不定芽的诱导发
挥着极其显著的作用。各因素对幼胚子叶不定芽诱导
的主次关系为 :TDZ > 培养基 > IAA > NAA。
表 3 方差分析所用数据在表 2 基础上进行了百分
数的反正弦转换 ,从表 3 可以看出 ,测试的 4 个因素均
差异极显著。
213 　不定芽的增殖试验
由幼胚子叶诱导的不定芽 ,经过一次壮苗培养 ,再
选择生长一致的芽苗进行增殖。增殖培养基中植物生
长调节物质配比不同 ,芽苗的发育状况也明显不同。
351　2 期 枣幼胚子叶再生植株的研究
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
表 2 　金丝小枣幼胚子叶不定芽诱导的 L9 ( 34 )正交设计结果
Table 2 　The result of the orthogonal test L9 (34 ) for adventitious bud induction
frequency of cotyledon from immature embryo of Jinsixiaozao
测试序号
test No1 测试因素 factors 不定芽诱导率 bud induction frequency( %)A B C D Ⅰ Ⅱ Tt x t
1 1 1 1 1 0 0 0 0
2 1 2 2 2 0 0 0 0
3 1 3 3 3 13112 14132 27144 13172
4 2 1 2 3 25174 25100 50174 25137
5 2 2 3 1 17100 16172 33172 16186
6 2 3 1 2 29101 30100 59101 29151
7 3 1 3 2 42100 41172 83172 41186
8 3 2 1 3 22197 23116 46113 23107
9 3 3 2 1 23189 25123 49112 24156
T1 27144 134146 105112 82186 T Ⅰ173173 T Ⅱ176115 T349188
T2 137198 79186 99184 143182
T3 143146 135160 14419 124132
X1 4157 22141 17152 13181
X2 23191 13131 16164 23197
X3 29183 22160 24115 20172
R 25126 9129 7151 10116
注 :表中Ⅰ、Ⅱ代表 2 次重复 ;Tt 代表每个处理 2 次重复之和 ; T Ⅰ、T Ⅱ、分别代表 1 次、2 次处理的总和 ; T 代表 2 次处理的总和 ; x 代表 2 次重复的平
均数 ; T1 、T2 、T3 分别代表在 1、2、3 水平上 ,每个试验因子的总和 ; x1 、x2 、x3 分别代表 1、2、3 水平上 ,每个试验因子的平均数 ; R 代表极差值。测
试因素 A、B 、C、D 见表 1 ,下表同。
Note : Ⅰ, Ⅱindicate two repeats ; Tt indicates sum of every treat ; T Ⅰ , T Ⅱindicates total sum of every repeat ; T indicates total sum of two repeats ; x indicates average
of two repeats ; T1 , T2 , T3 indicate total sum of every factor on three levels ; X1 , X2 , X3 indicate average of every factor or three levels ; R indicates rangs value.
Factors A , B , C are the same as figure 1 , the same as following figures.
表 3 　金丝小枣幼胚子叶不定芽诱导的方差分析
Table 3 　Statistical analysis of different factors used in
optimization study for adventitious bud
induction frequency of cotyledon from
immature embryo of Jinsixiaozao
变异来源
sources of variance
SS df MS F F0105 F0101
A 2093159 2 1046179 389010833 4146 8165
B 338123 2 169111 62814733
C 201189 2 100194 37511233
D 313170 2 156183 58218133
区组 block 0133 1 0133 1121 5132
e 2115 8 0130
总变异
Sum of variance
2949184 17
　　表 4 结果表明 ,在 IBA 3 个浓度水平下 ,随 IBA 浓
度的升高 ,增殖系数逐渐降低 ,说明在进行芽苗增殖
时 , IBA 浓度水平降低对增殖有利。同时 ,在 62BA 3 个
浓度水平下 ,芽苗增殖系数同样存在差异。随 62BA 浓
度由 015mgΠL 升到 110mgΠL ,增殖系数由小变大 ,而当
62BA 浓度由 110mgΠL 升到 115mgΠL 时 ,增殖系数却由
高变低。说明 62BA 浓度不能太高 ,也不能太低 ,在
110mgΠL 左右较合适。获得最高芽苗增殖的激素配比 为 2 号处理 ,即 62BA 110mgΠL 和 IBA 011mgΠL。从表中还可以看出 , 62BA 浓度由 015mgΠL 升至 115mgΠL 时 ,生长系数逐渐降低 ,说明低浓度 62BA 对幼胚子叶芽苗的生长有利。因此 ,在芽苗增殖试验中 ,添加低浓度的62BA 及 IBA 适于芽苗的生长。表 4 　植物生长调节物质配比对金丝小枣幼胚子叶诱导不定芽增殖的影响Table 4 　Effect of plant growth regulator to proliferationof adventitious buds from cotyledon of immature embryo处理treatment 增殖系数proliferation coefficient 生长系数growth coefficientIBA011mgΠL + BA 015mgΠL 2149 ±0115Dd 3161 ±0110AaIBA011mgΠL + BA 110mgΠL 3178 ±0111Aa 3112 ±0117BbIBA011mgΠL + BA 115mgΠL 3145 ±0114ABa 2151 ±0114DdIBA013mgΠL + BA 015mgΠL 1192 ±0118Ee 3158 ±0112AaIBA013mgΠL + BA 110mgΠL 3105 ±0117Bb 2146 ±0131EeIBA013mgΠL + BA 115mgΠL 2160 ±0110Cc 2142 ±0109EeIBA015mgΠL + BA 015mgΠL 1176 ±0114Ff 3151 ±0112ABbIBA015mgΠL + BA 110mgΠL 2153 ±0111Cc 2185 ±0113CcIBA015mgΠL + BA 115mgΠL 1171 ±0117Ff 2154 ±0112Dd214 　生根试验将经过壮苗的金丝小枣芽苗转移到含有不同浓度生长素 ( IAA、IBA)的 1Π2 MS培养基上 ,从表 5 中可以看
451 核　农　学　报 22 卷
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
出 ,IBA 促进生根的作用比 IAA 强 ,最高生根诱导率可
达 100 %。试验观察表明 , IBA 诱导出的根粗壮 ,有一定
的长度 ,颜色为白色 ,表面光滑 ,数量较多 ,而且根部有
愈伤组织。接种后 4 周 ,主根上有毛根出现 , IAA 诱导
生根时缓慢 ,生根数量少于 IBA 诱导的数量 ,根表面粗
糙 ,浅黄色 ,较脆 ,移栽时极易断裂 ,移苗成活率低。
表 5 　生长素对不定芽苗生根的影响
Table 5 　Effect of auxin to the rooting of
shoots from adventitious buds
处理号
number
生长素种类
auxin
浓度
concentration (mgΠL) 生根率rooting frequency( %)
1 IAA 012 67132
2 IAA 014 76141
3 IAA 016 86105
4 IAA 018 83173
5 IAA 110 85169
6 IBA 012 80103
7 IBA 014 87156
8 IBA 016 95108
9 IBA 018 97130
10 IBA 110 100100
3 　结论与讨论
枣的再生研究主要集中在枣树的茎段[4～6 ] 和叶
片[7～10 ] ,而关于枣幼胚子叶不定芽的诱导 ,只有李登科
等在枣品种六月鲜的试验中报道过[11 ] 。在本研究的 4
个试验因素中 ,TDZ 是影响金丝小枣幼胚子叶不定芽
再生最关键的因素 ,在不定芽诱导方面有明显的效果 ,
这与其他关于 TDZ在不定芽诱导中的报道一致[12～15 ] 。
Kim等认为 , TDZ 同比效果是 62BA 的 50～100 倍[16 ] 。
在幼胚子叶不定芽诱导中 , TDZ 016mgΠL 使不定芽诱
导率达到 42 %。但同时也发现 ,诱导的不定芽多呈芽
丛状 ,玻璃化现象严重 ,不定芽成苗较为困难 ,这与于
冬梅等在草莓不定芽再生过程中发现的现象一致[17 ] 。
进一步研究并克服其产生的玻璃化作用 ,同时研究其
作用机理 ,将会使 TDZ 在植株再生中得到更加广泛的
作用。本试验基本培养基以 1Π2MS 效果最好 ,进一步
说明了枣的不定芽再生 ,要求适当降低培养基中无机
盐的浓度[18 ] ,但是与刘翠云等的结果不一致[19 ] ,这可
能与所用材料的基因型不同有关。不定芽的增殖和生
长同样受生长调节物质的影响。本试验中 ,低浓度的
生长素和细胞分裂素有效地促进了不定芽继代后的增
殖和生长 ,这与陈宗礼等在研究狗头枣叶片不定芽增
殖中的结论一致[10 ] 。生根试验中 ,同样浓度的 IBA 促
进继代苗生根的效果明显好于 IAA ,这可能与高温灭
菌后 IAA 活性下降有关。
合适的试验设计和统计分析可以省时省力 ,并提
高试验的精确度[20 ] 。通过采用正交试验设计 ,本试验
获得了诱导金丝小枣幼胚子叶不定芽的培养基组合 ,
即在 1Π2MS 培养基上 ,添加 TDZ 016mgΠL、IAA 115mgΠ
L、NAA 011mgΠL ,但其对诱导金丝小枣幼胚子叶不定
芽的效果还需进一步试验证实。本试验中的最佳培养
基为 :在附加 TDZ 016mgΠL、IAA 015mgΠL、NAA 013mgΠ
L 的 1Π2MS 培养基中 ,暗培养 20d ,愈伤组织诱导率达
到 100 % ,不定芽再生率达 41186 %。在 MS + 62BA
110mgΠL + IBA 011mgΠL 培养基上 ,金丝小枣不定芽苗
增殖和生长效果最好 ,增殖系数达 3178 ,生长系数达
3112。关于进一步扩大 62BA 和 IBA 的比例对不定芽
增殖系数和生长系数的效果还需进一步试验。在培养
基 1Π2MS + IBA 110mgΠL 上 ,生根率达 100 % ,从而建立
了金丝小枣幼胚子叶再生体系 ,为以后的细胞培养、原
生质体培养、细胞融合培养和遗传转化技术在金丝小
枣育种中的应用奠定了基础。
参考文献 :
[ 1 ] 　祁业凤 ,刘孟军. 枣的胚败育及幼胚培养研究. 园艺学报 , 2004 ,
31 (1) :78～80
[ 2 ] 　祁业凤 ,刘孟军. 枣胚培养影响因素研究. 果树学报 ,2004 ,21
(1) : 25～28
[ 3 ] 　张法勇 ,刘向东 ,高秀丽. 木本植物组织培养器官发生植株再生
研究进展. 河北林果研究 , 2005 ,20 (3) :234～238
[ 4 ] 　伍成厚 ,何业华 ,谢碧霞 ,胡芳名. 梨枣组织培养的研究. 经济林
研究 ,2004 ,22 (2) :17～19
[ 5 ] 　伍成厚 ,何业华 ,谢碧霞 ,胡芳名. 枣茎段组织培养的研究. 果树
学报 ,2004 ,21 (6) :609～611
[ 6 ] 　王国平 ,李晓梅 ,陈秋芳. 枣不定芽再生体系的研究. 中国农学通
报 ,2006 ,22 (4) :281～283
[ 7 ] 　尹美强 , 王玉国 ,温银元 , 赵 　娟. 梨枣叶片和茎段再生体系的
建立. 西北植物学报 ,2005 , 25 (10) :1954～1959
[ 8 ] 　GU X F ,ZHANGJ R. Efficient adventitious shoot regeneration system for
Zhanhua winter jujube using leaf explants. Plant Cell Rep , 2005 ,23 :775
～779
[ 9 ] 　李　云 ,王　宇 ,田砚亭 ,王树芝. 赞皇大枣叶片再生植株的初步
研究. 核农学报 ,2003 ,17 (3) :187～190
[10 ] 　陈宗礼 ,延志莲 ,齐 　龙. 枣叶片离体培养再生植株. 植物生理
学通讯 ,1996 ,32 (1) :27～28
[11 ] 　李登科 ,杜学梅 ,王永康 ,隋串玲 ,贺晋瑜. 六月鲜枣愈伤组织诱
导及胚状体发生. 果树学报 ,2004 ,21 (5) :414～418
[12 ] 　Bates S , Preece J E , Navarrete N E , Sambeek Van J W , Gaffney G R.
Thidiazuron stimulates shoot organogenesis and somatic embryogenesis in
white ash ( Fraxinus americana L. ) . Plant Cell , Tissue and Organ
Culture ,1992 ,31 :21～29
(下转第 147 页)
551Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2008 ,22 (2) :152～155
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
功能基因组学研究、新基因预测、及玉米与其他生物的
比较基因组学研究等提供了理论基础 ,具有较强的实
践指导意义。
参考文献 :
[ 1 ] 　Qingpo Liu , Ying Feng , Xin’ai Zhao , Hui Dong , Qingzhong Xue
Synonymous Codon Usage Bias in Oryza sativa. Plant Science , 2004 ,
167 : 101～105
[ 2 ] 　田清震 ,谢传晓 ,李新海 ,李明顺 ,张世煌. 玉米基因组学研究进
展. 玉米科学 ,2006 , 14 (3) :1～5 ,9
[ 3 ] 　刘庆坡 ,谭 　军 ,薛庆中. 籼稻品种 93211 同义密码子的使用偏
性. 遗传学报 ,2003 30 (4) :335～340
[ 4 ] 　Sharp P M , Li W H. An evolutionary perspective on synonymous codon
usage in unicellular organisms. J Mol Evol ,1986 ,24 :28～38
[ 5 ] 　范三红 ,郭蔼光 ,单丽伟 ,胡小平. 拟南芥基因密码子偏爱性分
析. 生物化学与生物物理进展 ,2003 ,30 (2) : 221～225
[ 6 ] 　胡桂兵 ,张上隆 ,徐昌杰 ,林顺权. 柑橘密码子用法分析. 果树学
报 ,2006. 23 (3) :479～485
[ 7 ] 　Carlini D B ,Chen Y,Stephan W. The relationship between third - codon
position nucleotide content ,codon bias ,mRNA secondary structure and
gene expression in the drosophild alcohol dehydrogenase genes Adh and
Adhr. Genetics ,2001 ,159 (2) :623～633
[ 8 ] 　Stenstrom C M ,Jin H N ,Major L L ,et a1. Codon bias at the 3’- side of
the initiation codon is correlated with translation initiation efficiency in
Escherichia coli . Gene ,2001 ,263 (1 - 2) :273～284
[ 9 ] 　Karlin S , Campbell A M ,Mrazek J . Comparative DNA analysis across
diverse genomes. Annu Rev Genetics ,1998 ,32 :185～225
[10 ] 　石秀凡 ,黄京飞 ,柳树群 ,等. 人类基因同义密码子偏好的特征以
及与基因 GC 含量的关系. 生物化学与生物物理进展 ,2002 ,29
(3) :4l1～414
[11 ] 　Duret L ,Mouchiroud D. Expression pattern and ,surprisingly ,gene length
shape codon usage in Caenorhabditis ,Drosophila and Arabidopsis. Proc
Natl Acad Sci USA ,1999 ,96 (8) :4482～4487
[12 ] 　Moriyama E N , Powell J R. Gene length and codon usage bias in
Drosophila melanogaster ,Saccharomyces cerevisiae and Escherichia coli .
Nucleic Acids Res ,1998 ,26 (13) :3188～3193
[13 ] 　Moriyama E N , Powell J R. Codon usage bias and tRNA abundance in
Drosophila.J Mot Evol ,1997 ,45 (5) :514～523
[14 ] 　Gupta S K, Bhattacharya T K, Bhattacharya T K. Studies on the
relationships between the synonymous codon usage and protein secondary
structural units. Biochemical and Biophysical Research
Communications ,2000 ,269 : 692～696
[15 ] 　刘次全 ,谢 君 ,柳树群 ,梁宠荣 ,黄京飞 ,石秀凡. 人类基因中同
义密码子的偏好与密码子 - 反密码子间的结合强度密切相关
吗 ?科学通报 ,2000 , 45 (23) :2520～2525
[16 ] 　Akira Kawabe , Naohiko T Miyashita. Patterns of codon usage bias in
three dicot and four monocot plant species. Genes Genetic Systems ,
2003 ,78 (5) :343～352
[17 ] 　时成波 , 吕安国. 改造稀有密码子提高 SEA 蛋白表达量. 生物工
程学报 ,2002 ,18 (4) :477～480
[18 ] 　张相民 ,辛　伟 ,王世峰 ,李仁清 ,陆柔剑 ,王文玲 ,吕亦晨 ,阮 　
力. 按痘苗病毒优势密码子改造 HIV21 gag 基因提高表达水平的
研究. 病毒学报 ,2005 ,21 (3) :210～216
[19 ] 　刘礼兵 ,刘 　云 ,何华庆 ,李永辉 , 徐琪寿. qa - 3 稀有密码子和
mRNA 结构改造及其在大肠杆菌中的高效表达. 生物工程学报 ,
2006 ,22 (2) :198～203
[20 ] 　刘会超 , 李永春 , 巨关生 , 孙振元 , 柴德勇. 香石竹 ACC 氧化酶
基因克隆及其反义表达载体构建. 核农学报 ,2005 ,19 (6) :461～
464
[21 ] 　牟　禹 ,何　晶 ,付凤玲 ,李晚忱. 用酿酒酵母海藻糖合成酶基因
(TPS1)转化玉米获得转基因植株. 核农学报 ,2007 ,21 (5) :430～
435
[22 ] 　秦永华 ,张上隆. 影响根癌农杆菌介导的丰香草莓遗传转化因素
分析. 核农学报 ,2007 ,21 (5) :461～465
(上接第 155 页)
[13 ] 　Lane W D ,Iketani H ,Hayash T. Shoot regeneration from cultured leaves
of Japanese pear Pyrus pyrifolia. Plant Cell , Tissue and Organ Culture ,
1998 ,54 (1) :9～14
[14 ] 　王　鸿 ,马锋旺 ,王发林 ,赵秀梅 ,管清美. 山杏下胚轴再生不定
芽影响因素的研究. 果树学报 ,2005 ,22 (4) :399～401
[15 ] 　Mante S , Scorza R , Cordts J M. Plant regeneration from cotyledons of
prunus persica ,prunus domestica , Prunus cerasus. Plant Cell , Tissue
and Organ Culture ,1989 , 19 (1) :1～11
[ 16 ] 　Kim M S , Schumann C M , Klopfenstein N B. . Effects of thidiazuron and
benzyladenine on axillary shoot proliferation of three green ash ( Fraxinus
pennsylvanica Marsh. ) clones. Plant Cell , Tissue and Organ Culture ,
1997 ,48 (1) :45～52
[17 ] 　于冬梅 ,胡文娱 ,王关林. 基因型和培养因子对诱导草莓叶片再
生芽的影响. 沈阳农业大学学报 ,1998 ,29 (2) :138～143
[18 ] 　李师翁 ,范小峰 ,佟子林. 三个枣品种的植株再生研究. 兰州大学
学报 ,2001 ,37 (1) :126～128
[19 ] 　刘翠云 ,李 　艳 ,马洪明. 黑山俊枣植株再生研究. 西北植物学
报 ,1997 ,17 (3) :362～367
[20 ] 　Nas M N , Eskridge K M , Read P E. Experimentaldesigns suitable for
testing many factors with limitednumber of explants in tissue culture.
Plant Cell , Tissue and Organ Culture ,2005 ,81 :213～220
741Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2008 ,22 (2) :141～147
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net