全 文 ：文章编号 :100028551 (2007) 042369203
尜尜枣茎段组培繁殖研究
霍书新1 　张小红1 　杜国强2
(11 河北北方学院园艺系 ,河北 ,张家口　075131 ;21 河北农业大学园艺学院 ,河北 ,保定　071001)
摘 　要 :以 MS 为基本培养基 ,幼嫩茎段为外植体 ,进行尜尜枣组培繁殖研究 ,筛选出适宜的培养基 ,结果
表明 ,增殖培养以 MS + BA 510 mgΠL + IBA 012 mgΠL 为好 ,增殖系数为 617340 ;生根培养以 1Π2MS + IBA
110 mgΠL 较好 ,平均根长为 2161cm ,平均生根条数为 5112 条。
关键词 :尜尜枣 ;组培 ;繁殖 ;茎段
PROPAGATION OF GAGAZAO( Zizyphus jujuba) WITH STAL K SEGMENT BY TISSUE CULTURE
HUO Shu2xin1 　ZHANG Xiao2hong1 　DU Guo2qiang2
(11 Department of Horticulture , Hebei North University , Zhangjiakou , Hebei 　075131 ;
21 College of Horticulture , Hebei Agricultural University , Baoding , Hebei 　071001)
Abstract :To select an optimum culture medium , the Gagazao stalk segments were cultured in MS media. Results showed that
the proliferating index was 61734 at a medium of MS + BA510 mgΠL + IBA012 mgΠL ,which was a better culture medium
formula for proliferating culture. And for rooting culture , the culture medium formula of 1Π2MS + IBA110 mgΠL was the best ,
which with an average root length of 2161cm and an average root number of 51121
Key words : Gagazao ( Zizyphus jujuba) ; tissue culture ; propagation ; stalk segment
收稿日期 :2006209201
作者简介 :霍书新 (19632) ,男 ,河北行唐人 ,副教授 ,从事果树栽培和生物技术研究。E2mail : guoshuhuahui @1631com
　　尜尜枣 ( Zizyphus jujuba Mill . cv. Gagazao ) 是张家
口地区优良的鲜食枣品种 ,其外形细长 ,赭红光亮 ,皮
薄肉腻 ,浓甜无渣 ,深受消费者喜爱。该品种目前在国
内栽培规模小 ,极具市场发展潜力。但目前尜尜枣育
苗仍沿用传统的分蘖繁殖法 ,繁殖率低 ,育苗速度慢 ,
且浪费材料 ,使尜尜枣的推广受到极大的限制。另外 ,
传统的无性繁殖措施无法去除幼苗体内的病毒 ,使一
些病毒病 (如枣疯病)代代相传 ,危害日益严重 ,这些都
是尜尜枣种植中亟需解决的问题。
现代生物技术的发展为枣树良种的快速繁殖提供
了一条出路 ,利用组织培养技术可以在短期内迅速建
立无性繁殖体系 ,不受季节的限制、周年育苗 ,规模大、
推广快 ,同时该技术可以有效地脱除存在于植株内的
病原体及其他病毒 ,从而使品种复壮[1～4 ] 。枣树组培
繁殖可以茎尖、茎段、叶片、花药、胚等为外植
体[1 ,5～12 ] ,而茎段为枣树组培繁殖的重要手段 ,迄今已
在多个枣品种上获得成功[1 ,5 ,7 ] ,尜尜枣幼嫩茎段组培
繁殖研究 ,对尜尜枣种植发展有深远的意义。
1 　材料与方法
供试材料为 4 年生尜尜枣 ,采自河北省宣化县河
子西乡尜尜枣根孽苗。6 月以尜尜枣幼嫩枣头为外植
体 ,流水冲洗 2h ,在超净工作台上用 75 %乙醇浸 30s ,
后放入 011 %升汞 (HgCl2 )溶液中 ,加入 2 滴吐温 80 ,浸
10min ,倾去升汞液 ,用无菌水冲洗 5～6 次 ,切成 115cm
长的单芽茎段接种到启动培养基上。培养室光强为
2000lx ,光照 12hΠd ,温度 25 ℃～28 ℃。
启动培养 :以 MS 为基本培养基 ,添加浓度不同的
植物生长调节剂 ,以 BA(6 - 苄基氨基嘌呤)和 NAA(奈
乙酸)的不同浓度设 6 个处理 ,将灭菌后的尜尜枣幼嫩
茎段接种到培养基上 ,促使萌发生长 ,每处理调查 30
个茎段。
增殖培养 :以 MS 为基本培养基 ,添加浓度不同的
963　核 农 学 报　2007 ,21 (4) :369～371Journal of Nuclear Agricultural Sciences
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植物生长调节剂进行增殖培养 ,每瓶接种尜尜枣的茎
段培养产生的芽 3 个 ,以 BA 浓度为试验因素 ,共设 5
个处理 (分别为 0、015、110、210 和 510mgΠL) ,添加 IBA
(吲哚丁酸) 012mgΠL ,琼脂 410gΠL ,每处理 5 瓶 ,每处理
调查 15 个芽 ,调查芽的平均长度、增殖系数 ,并对调查
结果进行方差分析 (增殖系数经反正弦转换) 。
生根培养 :用 1Π2MS 培养基 ,每瓶接种尜尜枣的增
殖培养产生的芽 5 个 ,以 1Π2MS 为基本培养基 ,加白砂
糖 20gΠL ,琼脂 410gΠL , 以不同浓度的 IAA 和 IBA 设 5
个处理 (分别为 IAA 110 和 115mgΠL ; IBA 110 和 115mgΠ
L ; IAA 015 mgΠL + IBA 015 mgΠL) ,每处理 3 瓶 ,每处理
调查 15 个芽 ,调查平均根长、平均生根条数 ,并对调查
结果进行方差分析。
2 　结果与分析
211 　生长调节剂浓度对启动培养的影响
以MS 为基本培养基 ,以 BA 和 NAA 的不同浓度
设 6 个处理 ,将灭菌后的尜尜枣幼嫩茎段接种到培养
基上 ,促使萌发生长 ,结果 (见表 1) 表明 ,NAA 浓度达
110 mgΠL 时 (处理 C 和 F) ,茎段上不发枣吊和枣头 ;其
余处理茎段发枣吊 ,其中处理 E 发出的枣吊数最多 ,
达 312 个Π茎段 ,且生长良好 ;茎段发枣头数较少 ,带顶
芽的茎段可萌发枣头。这表明启动培养以生长季带顶
芽的茎段为外植体 ,以添加 BA210mgΠL + NAA015mgΠL
的培养基为好。
表 1 　BA 和 NAA 浓度对茎段启动培养影响
Table 1 　Effects of concentration of BA and
NAA on initial culture of stalk segment
处理 激素种类和浓度(mgΠL) 接种茎段数(个) 发枣吊数(个) 发枣头数(个)
A BA110 + NAA012 30 51 2
B BA110 + NAA015 30 48 1
C BA110 + NAA110 30 0 0
D BA210 + NAA012 30 87 1
E BA210 + NAA015 30 96 3
F BA210 + NAA110 30 0 0
212 　BA 浓度对增殖培养的影响
生长调节剂浓度对增殖培养有影响 ,影响丛生芽
的发生数量和丛生芽的伸长。将茎段启动培养获得的
丛生芽进行增殖培养 ,结果见表 2。
从表 2 可知 ,芽生长以 MS + IBA012 mgΠL 和 MS +
BA015 mgΠL + IBA012 mgΠL 较好 ,平均芽伸长分别为
117134 和 113533cm ;从增殖系数来看 ,以 MS + BA510
mgΠL + IBA012 mgΠL 为好 ,增殖系数为 617340 ,显著高
于其他处理。
表 2 　BA 浓度对增殖培养的影响
Table 2 　Effects of concentration of BA
on proliferation culture
激素种类和浓度 (mgΠL) 芽平均伸长 (cm) 增值系数
BA010 + IBA012 117134 ±013365 a 119320 c
BA015 + IBA012 113533 ±012755 ab 215340 c
BA110 + IBA012 018668 ±013224 cd 119320 c
BA210 + IBA012 111734 ±013030 bc 418660 b
BA510 + IBA012 015534 ±011070 d 617340 a
　　注 :邓肯氏新复极差测验 ,表中同列数值后标记不同字母表示差异
达 0105 显著水平。
213 　生根培养
生长素的种类和浓度是尜尜枣组培苗生根的关键
因素。由表 3 可见 ,1Π2MS 添加 110 mgΠL 和 115mgΠL
IAA 有利于组培苗根系加长生长 ,而 1Π2MS 添加 110
mgΠL 和 115mgΠL IBA 有利于组培苗根条数增加 ,综合
考虑根长、根条数 ,尜尜枣组培苗生根以 1Π2MS +
IBA110 mgΠL 较好。
表 3 　生长调节剂种类和浓度对生根培养的影响
Table 3 　Effects of kinds and concentration of
hormone on rooting culture
激素种类和浓度 (mgΠL) 平均根长 (cm) 平均生根条数 (条)
IAA 110 　3175 ±015619 a 2144 ±016693 b
IAA 115 3164 ±114541 ab 1172 ±110450 b
IBA 110 2161 ±012684 bc 5112 ±112377 a
IBA 115 1188 ±013414 c 5128 ±118089 a
IAA015 + IBA015 2184 ±016010 abc 3132 ±110918 b
　　注 :邓肯氏新复极差测验 ,表中同列数值后标记不同字母表示差异
达 0105 显著水平。
3 　讨论
枣树以茎尖、茎段为外植体组培开展最早 ,迄今已
在金丝小枣、灰枣、赞皇大枣、冬枣、骏枣等十几个品种
上获得成功[1 ,6 ,7 ] 。本研究结果表明 ,以生长季尜尜枣
枣头茎段为外植体进行启动培养 ,接种在 MS + BA
210mgΠL + NAA 015mgΠL 培养基上 ,萌发枣吊较多 ,带
顶芽的茎段可萌发枣头 ,生长良好 ,能培养出苗。这与
伍成厚在鸡蛋枣上的试验结果相同[10 ] 。这是由于枣
吊是枣树的结果枝 ,不能形成发育枝培养成苗。枣树
的枣头即一般果树所谓的发育枝 ,才是形成树体骨架
和结果单位枝的主要枝条 ,也是组培繁殖培养成苗的
主要枝条。
073 核　农　学　报 21 卷
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BA 是一种细胞分裂素 ,其作用是 : (1) 诱导芽的分
化 ; (2)促进细胞分裂和扩大 ; (3)抑制根的分化。组织
内细胞分裂素与生长素的比例决定着发育的方向 ,细
胞分裂素Π生长素比值高时 ,有利于诱导愈伤组织和芽
的分化 ;细胞分裂素Π生长素比值低 ,或除去细胞分裂
素时 ,有利于芽的生长。在组培中不同基因型甚至同
一基因型的不同生态型的培养效果间存在差别 ,这种
差别主要由基因型间内源激素水平的差异所致 ,其次
是基因型间营养水平的差别。除了遗传的主导因素
外 ,还有部分生态条件 (包括微生态条件) 因素的影
响[11 ,13 ] 。本试验证实 ,BA 浓度对增殖培养有影响 ,影
响丛生芽的发生数量和丛生芽的伸长。MS + IBA 012
mgΠL 和 MS + BA 015 mgΠL + IBA 012 mgΠL 培养基利于
芽生长 ;MS + BA 510 mgΠL + IBA 012 mgΠL 培养基上的
增殖系数显著高于其他处理。
生长素的种类和浓度影响组培苗根系的诱导和生
长。IBA 对不定根的诱导明显优于 NAA 和 IAA[5 ,9 ,12 ] ,
IBA 诱导生根 ,枝条基部愈伤组织产生少 ,根较粗壮 ,
数量多 ,也有一定长度 ; IAA 诱导生根 ,根细长 ,数量明
显比 IBA 诱导的少[10 ] 。综合考虑本试验结果 ,尜尜枣
组培苗生根以 1Π2MS + IBA110 mgΠL 较好。
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