全 文 ：文章编号 :100028551 (2008) 012041204
紫菜薹快速碱化因子基因 BcMF14 p 的
序列与表达分析
李焰焰1 ,2 　曹家树1
(11 浙江大学蔬菜研究所 ,浙江 杭州　310029 ;21 阜阳师范学院生物系 ,安徽 阜阳　236032)
摘 　要 :快速碱化因子是近年来新发现的一种植物多肽类信号分子。根据已知的普通白菜两用系中可育
株系特异表达的快速碱化因子基因 BcMF14 序列 ,在其编码框两侧设计引物 ,从紫菜薹中克隆出该类信
号分子基因 ,命名为 BcMF14 p (登陆号 : EF523517) ,全长 273 bp ,不含内含子 ,编码框包含 222 个核苷酸 ,
编码 73 个氨基酸。NCBI在线同源比对结果表明该基因属于快速碱化因子家族 ,与花椰菜、拟南芥等的
快速碱化因子核苷酸序列相似性达到 86 %以上。对该信号分子的表达进行 RT2PCR 分析 ,结果显示
BcMF14 p 只在紫菜薹花蕾、花、角果等生殖器管中表达 ,在茎、叶等营养器官中不表达 ,说明 BcMF14 p
可能参与紫菜薹生殖发育过程中的信号传导。
关键词 :紫菜薹 ; BcMF14 p ; 快速碱化因子 (RALF) ; 表达分析
MOLECULAR CHARACTERIZATION AND EXPRESSION PATTERN OF RALF2LIKE GENE
BcMF14 p FROM Brassica campestris var. purpurea
LI Yan2yan1 ,2 　CAO Jia2shu1
(11 Institute of Vegetable Science , Zhejiang University , Hangzhou , Zhejiang 　310029 ;
21Department of Biology , Fuyang Normal College , Fuyang , Anhui 　236032)
Abstract :The rapid alkalinization factor (RALF) gene is one of polypeptide signals. In this study BcMF14 p was cloned from
Brassica campestris ssp . chinensis var. purpurea based on BcMF14 from B . campestris ssp . chinensis var. communis cv.
Aijiaohuang. The sequence of this gene was 273bp ( GenBank accession number EF523517) , including a 222 bp ORF ,
colding 73 amino acids. It considered as RALF2like protein according to its high identity with B . oleracea var. botrytis
BoRAL F1 and Arabidopsis thaliana RAL F28 in nucleotide sequence ( > 86 %) . RT2PCR discovered that BcMF14 p was
expressed prominently in flower buds , flower and silique , but no expression in vegetative organs , this indicated that BcMF14 p
may be involved in the signal transduction during reproduction development of B . campestris var. purpurea.
Key words : Brassica campestris ssp . chinensis var. purpurea ; BcMF14 ;rapid alkalinization factor ;gene expression
收稿日期 :2007204229 　接受日期 :2007207226
基金项目 :国家自然科学基金项目 (30671426)和浙江省重大科技项目 (2005C12019202)资助
作者简介 :李焰焰 (19762) ,女 ,安徽阜阳人 ,博士生 ,讲师 ,研究方向为植物生殖发育及其分子调控。E2mail :liyanyan1976 @yahoo. com. cn
通讯作者 :曹家树 (19582) ,男 ,湖南芷江人 ,教授 ,博士生导师 ,主要研究方向为植物生殖发育及其分子调控。Tel :0571286971188 ; E2mail : jshcao @
zju. edu. cn
　　快速碱化因子 (rapid alkalinization factor , RALF) 是
植物多肽类激素的一种。自 1991 年多肽类激素 ———
系统素 (systemin)在植物中被发现以来[1 ] ,其研究立即
引起人们的极大兴趣。到目前为止 ,植物中发现的多
肽类激素主要有系统素、植物磺化激动素 ( PSK) 、
RALF、早期结瘤蛋白 ( ENOD40) 、CLV3、S 位点富含半
胱氨酸蛋白 (SCR) 等 6 种[2～6 ] 。其中 ,RALF 是 2001 年
在对系统素的研究中偶然发现的[3 ] 。它广泛存在于植
物中 ,在烟草、冰草、棉花、苜蓿、日本柳杉、松树、白杨、
豌豆、土豆、番茄、大豆、小麦、大麦、玉米、高粱、水稻、
杨树、松树、拟南芥、花椰菜等 20 多个物种的不同组
织、器官中都发现了编码 RALF 前体蛋白的同源基因 ,
14　核 农 学 报　2008 ,22 (1) :41～44Journal of Nuclear Agricultural Sciences
属于一个大的家族蛋白 ;同时被证明在植物多个器官
的不同发育时期都有表达 ,不同成员的表达时期和部
位各不相同 ,分别执行不同的功能[7 ] 。在同一物种中
也经常发现 RALF 的多个同源基因 ,如在杨树 ( Populus
trichocarpa ×P. deltoides ) 中有 5 个 RALF 的同源基
因[8 ] 。在模式植物拟南芥中编码 RALF 的同源基因有
39 个[9 ] ,12 个来自于 EST。但近年来发现一些非翻译
RNA[10 ] ,因此不能排除这些序列中存在假基因的可
能。研究发现 RALF 类基因有抑制拟南芥、番茄幼苗
根的生长、诱导胞间有丝分裂蛋白激酶合成等作用[3 ] 。
也有一部分 RALF 类基因与植物生殖发育有关。
Germain 等从马铃薯中克隆到 5 个 RALF 类基因 ,其中
ScRAL F1 和 ScRAL F3 主要在马铃薯的子房和大的果实
中表达 ,调节马铃薯的生殖发育过程[7 ] 。Bedinger 等
报道了一个在番茄花粉中特异表达的 RALF 类基因
( PRAL F) ,发现该蛋白可以大大降低花粉的萌发率 ,对
育性产生明显影响[11 ] 。张国裕等也报道了一个与甘
蓝显性核不育相关的 RALF 类基因 ( BoPRAL FL1) [12 ] ,
表明在快速碱化因子家族中 ,可能存在一些专一调控
植物花粉发育的 RALF 信号分子。
本实验室在对‘矮脚黄’普通白菜 ( Brassica
campestris L. ssp . chinensis Makino var. communis Tsen et
Lee cv. Aijiaohuang)小孢子发育的研究中 ,发现一个快
速碱化因子类基因 BcMF14 ( BcRAL F1) ( GeneBank
Accession NO. EF523516) ,并证实它在白菜两用系的可
育株系中特异表达 ,推测该 RALF 基因可能参与芸薹
属植物雄性生殖器官发育过程的信号传导[13 ] 。为证
明此推测 ,本研究从芸薹属的紫菜薹中克隆出该类信
号分子基因 ,对其序列特征和系统进化进行初步分析。
1 　材料与方法
111 　材料
紫菜薹 ( B campestris ssp . chinensis var. purpurea
‘Hongshan’) 品种为‘洪山’,浙江大学蔬菜研究所提
供 ,在实验田常规种植管理。克隆用载体为 p GEM2T2
easy2vector ,购于 Promega 公司 ,宿主菌为大肠杆菌 E.
coli 的 DH5α菌株。
112 　方法
11211 　紫菜薹 DNA 的制备和基因的克隆 　紫菜薹叶
片 DNA 的提取参考文献 [ 14 ]。根据已知的白菜
BcRAL F 序列 , 在其编码框两侧设计引物 p1 : 5’2
CGTATGGGGGATGTCTGAAAGT23’(正向引物) 和 p2 :
5’2GTAAAATTAACCAAGGGTGGTG23’(反向引物) ,以
紫菜薹 DNA 为模板 ,进行 PCR 扩增反应。PCR 反应体
系 :DNA 模板 015μl ,10 ×PCR 缓冲溶液 5μl ,25mmolΠL
的 Mg2 + 4μl ,20μmolΠL 的引物 p1、p2 各 1μl ,10mmolΠL
的 dNTPs 1μl , 5UΠμl 的 Taq 酶 015μl ,加水到总体积
50μl。PCR 反应程序 :94 ℃2min ;94 ℃30s ,56 ℃30s ,72 ℃
2min ,35 个循环 ;72 ℃延伸 7min ,4 ℃保存。110 %琼脂
糖凝胶电泳。回收大小为 270bp 左右的 PCR 产物 ,与
p GEM2T2easy2vector 进行连接。连接方法参照 Promega
公司 p GEM2T2 easy2vector 的说明书进行。用连接好的
质粒热击法转化 E. coli DH 5α感受态细胞。经蓝白
斑筛选后 ,挑取白斑 ,提质粒 ,进行 EcoRI 酶切检测 ,切
出 270bp 片段的质粒视为含有重组目的片段 ,将含该
质粒的菌液送上海博亚生物技术有限公司测序。
11212 　基因序列及编码蛋白的特征分析 　利用
ClustawL 软件和 DNA star 对基因的核苷酸序列及编码
蛋白质的氨基酸序列进行分析。通过 http :ΠΠwww.
EMBL2Heidelberg. de 对其编码蛋白序列进行结构特征
分析 ;用 http :ΠΠwww. expasy. orgΠprosite 在线对推导的蛋
白质氨基酸序列进行生物学意义的位点分析。
11213 　基因的分子系统学分析 　在 NCBI 中 ,通过
BLAST搜索 ,找到与目的基因同源性较高的其他 RALF
基因。将这些 RAL F 基因的氨基酸序列进行同源性比
较并用 TreeView 软件构建进化树。
11214 　基因的表达分析 　分别取紫菜薹的茎、叶、花
蕾、花、角果等组织 ,花蕾按照其横径从小到大的顺序
分为五级 ( Ⅰ级 :横径 < 110mm ; Ⅱ级 :横径 1～116mm ;
Ⅲ级 :横径 116～212mm ; Ⅳ级 :横径 212～218mm ; Ⅴ
级 :横径 > 218mm ) 。参照 Invitrogen 公司的 TRIzoL 试
剂盒说明书分别提取总 RNA ,反转录成双链 cDNA。
以双链 cDNA 为模板 ,以 p1、p2 为引物做 RT2PCR , PCR
反应体系为 : 引物 p1、p2 各 2μl , Taq 酶 Buffer (10 ×)
5μl ,Mg2 + (25mmolΠL ) 4μl ,dNTPs (10mmolΠL) 1μl ,Taq 酶
2U (上海 Promega) ,加 ddH2O 至 50μl。PCR 反应条件 :
预变性 94 ℃,2min ;变性 94 ℃30s ;退火 56 ℃30s ;延伸
72 ℃1min ,30 个循环 ;72 ℃延伸 10min。以β2actin 作为
内 参 对 照 , β2actin 的 引 物 为 pActin1 : 5 ’2
TCGGAATGGGCCAGAAGGAC23 ’、 pActin2 : 5 ’2
TCCACGTCGCACTTCATGATG23’。
2 　结果与分析
211 　紫菜薹 BcMF14 p 基因的克隆
以紫菜薹 DNA 为模板 ,用引物 p1、p2 进行 PCR 扩
增反应 ,PCR 产物经电泳鉴定 ,得到一个大小为 270bp
24 核　农　学　报 22 卷
左右的特异性条带 (图 1) 。将该条带切胶回收 ,连接
到 p GEM2T2easy2vector 载体上 ,转化 E. coli DH 5α感受
态细胞 ,酶切检测 ,将阳性克隆后送出测序。
图 1 　BcMF14 p PCR 扩增结果
Fig. 1 　Amplication results of BcMF14 p
M:1 kb 核酸分子量标记 ;1 :以水为模板的阴性对照 ;
2 :以紫菜薹 DNA 为模板扩增结果。
M: 1 kb DNA marker ; 1 : CK with ddH2O as templete ;
2 : amplified product with DNA as template
序列测定表明 ,该 DNA 序列由 273 个核苷酸组成
(登陆号 : EF523517) 。DNAstar 分析表明 ,其最大开放
阅读框为 222bp ,将其命名为 BcMF14 p。该基因编码
　　　　
73 个氨基酸序列 ,分子量为 8080139 Da ,等电点 71792 ,
pH 710 时的电荷为 11291 ;碱性氨基酸 ( K、R) 10 个 ;酸
性氨基酸 (D , E) 9 个 ;疏水氨基酸 (A、I、L、F、W、V) 26
个 ;极性氨基酸 (N、C、Q、S、T、Y) 19 个。ProtScale 软件
采用 Kyte 和 Doolittle 算法分析结果显示 BcMF14 p 蛋
白 N 端由一个典型的疏水区域组成 ,用 SignalP2NN 和
SignalP2HMM 算法在线分析发现 ( http :ΠΠwww. isv. cnrs2
gif . frΠterminator2) , BcMF14 p 和其他 RALF 分子一样在
N 端有信号肽结构 ,切割位点在第 28 和 29 个氨基酸
之间 (图 2) 。
在线分析 (http :ΠΠwww. expasy. orgΠprosite) BcMF14 p
蛋白的生物学意义位点 ,发现该蛋白有两个 N - 肉豆
蔻酰化位点 (在 2～7、64～69 个氨基酸之间) ,两个蛋
白激酶 C 磷酸化位点 (在 6～8、52～54 个氨基酸之
间) ,一个酪蛋白激酶 II磷酸化位点 (在 24～17 个氨基
酸之间)和一个酪氨酸激酶磷酸化位点 (在 54～61 个
氨基酸之间) 。BcMF14 p 中多种磷酸化位点的存在说
明该基因作为信号分子具有适应性 ,能通过多种方式
进行灵活调节。
图 2 　BcMF14 p 核苷酸序列及编码的氨基酸序列
Fig. 2 　Nucleotide and deduced amino acid sequences of BcMF14 p
BcMF14 p 的 ORF 为 222bp ,编码 73 个氨基酸 ,加框的为 ORF 的起始密码子和终止密码子 ,阴影是 N - 肉豆蔻酰化位点 ,
双下划线是两个蛋白激酶 C磷酸化位点 ,单下划线是酪蛋白激酶 II 磷酸化位点 ,斜体为酪氨酸激酶磷酸化位点。
The ORF of BcMF14 p gene is composed of 222 base pairs coding 73 amino acids. ATG (initiation codon) and TGA (stop codon)
are shown in frame. Shaded regions are N2myristoylation sites , double underlined are 2 Protein kinase C phosphorylation
sites , underlined sequences is casein kinase II phosphorylation site , italic is tyrosine kinase phosphorylation site.
212 　紫菜薹 BcMF14 p 的分子系统学分析
通过 BLAST 搜索 ,发现 BcMF14 p 的核苷酸序列
与“矮脚黄”白菜两用系中可育系特异表达的 RALF 基
因 BcMF14、花 椰 菜 BoRAL FL1、拟 南 芥 RAL FL8、
RAL FL9 的 cDNA 序列相似性很高 ,分别为 86 %、88 %、
86 %、85 %。由此初步确定 BcMF14 p 基因属于快速碱
化因子类基因。进一步将该基因编码的氨基酸序列在
ExPASy Proteomics Server 上 进 行 同 源 比 对 , 并 用
TreeView软件对 BcMF14 p 蛋白和十字花科芸薹属
( Brassica Campestris ) 、拟南芥属 ( Arabidopsis ) 、稻属
( Oryza ) 、杨属 ( Populus ) 、烟草属 ( Nicotiana ) 、茄属
( Solanum)等 4 科 5 属的 RALF 蛋白进行序列分析 ,构
建进化树 (图 3) 。由图 3 可知 BcMF14 p 和同为十字花
科芸薹属的 BoRAL FL1 (蛋白的登陆号为 Q4TTZ9) 聚为
一类 ,和同科的拟南芥 ArRAL FL (蛋白的登陆号为
AAM65793)距离最近 ,茄科烟草属的 NaRAL F (蛋白的
34　1 期 紫菜薹快速碱化因子基因 BcMF14 p 的序列与表达分析
登陆号编号为 AF407278) 和杨柳科的 RAL F2 (蛋白的
登陆号编号为 AAO27367)以及禾本科稻属的 OrRAL FL
(蛋白的登陆号编号为 ABA99460) 距离较近。从上面
的同源性比较可以看出 ,植物快速碱化因子基因是相
对保守的 ,因此 ,可以利用他们之间的同源性差异进行
分子系统方面的初步分析。
图 3 　BcMF14p 和其他的 RALF类蛋白的氨基酸系统树
(图中英文名称为属名 ,基因名)
Fig. 3 　A phylogenetic tree based on the RALF amino
acids ( Enghish names in the figure : genus , gene)
图 4 　BcMF14 p 的表达分析
Fig. 4 　RT2PCR analysis of the expression
pattern of BcMF14 p
Fb1～Fb5、F、Si、Sc、L 分别代表紫菜薹的 1～5 级花蕾、
花、角果、茎、叶 ;β2actin 为内参对照
Fb1～Fb5 , F , Si , Sc , L indicate stage 1～5 of flower bud ,
open flower , germinal silique , scape and leave of
Brassica campestris var. purpurea respectively ;
β2actin is internal control
213 　紫菜薹 BcMF14 p 的表达
以紫菜薹的茎、叶、花蕾、花、角果等组织的双链
cDNA 为模板 ,以 p1、p2 为引物做 RT2PCR ,以β2actin 作
为内参对照 ,电泳结果如图 4。BcMF14 p 只在紫菜薹
的花蕾、花、角果等生殖器官中表达。BcMF14 p 基因
的表达强度随着花蕾的发育逐渐增加 :前 3 级的花蕾
中表达很弱 ,在第 4 级花蕾中表达最强 ,并在第 5 级花
蕾中保持较高水平 ,在开放的花中表达量有所降低 ,嫩
角果中降到很低的水平 ,在茎、叶等营养器官中检测不
到表达信号。BcMF14 p 在紫菜薹生殖器官发育过程
中的表达模式表明该信号分子可能参与花的发育过
程 ,尤其是在花蕾发育晚期到开花期的信号传导中表
达活跃。
3 　讨论
多肽信号分子是重要的胞间信号感应分子 ,在动
物、植物、细菌、真菌中广泛存在 ,调节生命体的发育过
程。有关植物多肽成分信号分子的研究起步较晚 ,其
中 RALF 在 2001 年才被报道。本研究首次从紫菜薹
中克隆出 RALF 类信号分子基因 BcMF14 p ,把该类基
因的研究扩展到一个新的物种。
通过对 BcMF14 p 基因的序列特征分析发现
BcMF14 p 蛋白包含多个磷酸化位点。许多研究表明蛋
白磷酸化是重要的转录后修饰方式 ,且与信号传导密
切相关 ,其中 ,蛋白激酶 C 是比较活跃的 ,广泛参与生
物细胞的生长、增殖、分化等各个过程 ,并受酪氨酸激
酶的调控[15 ] 。N - 肉豆蔻酰化位点和酪蛋白激酶 II 磷
酸化位点在信号传导、蛋白定位和胞间通讯中起到重
要作用[16 ,17 ] 。这些位点的存在有利于 BcMF14 p 蛋白
执行信号传导过程中的功能。
研究发现快速碱化因子属于一个大的家族 ,在
RALF 家族中 ,可能存在一些专一调控植物花粉发育的
信号分子。从 BcMF14 p 在紫菜薹生殖器官和营养器
官中的表达模式来看 , BcMF14 p 蛋白属于此类信号分
子 ,很可能参与了紫菜薹花蕾发育晚期到开花期的信
号传导过程。
参考文献 :
[ 1 ] 　Ryan C A , Pearce G. Systemin :a polypeptide signal for plant defensive
genes. Annu Rev Cell Dev Biol , 1998 , 14 : 1～17
[ 2 ] 　Yang H , Matsubayashi Y, Hanai H , et al . Molecular cloning and
characterization of OsPSK, a gene encoding a precurso . Plant Mol Biol ,
2000 , 44 (5) : 635～647
[ 3 ] 　Pearce G, Moura D S , Stratmann J , et al . RALF , a 52kDa ubiquitous
polypeptide in plants , arrests root growth and development . Proc Natl
Acad Sci USA , 2001 , 98 (22) : 12843～12847
[ 4 ] 　Martin D C , Jurkevitch E , Poiret M , Yves d’Aubenton2Carafa ,
Petrovics G, Kondorosi E , Kondorosi A. enod40 , a Gene Expressed
During Nodule Organogenesis , Codes for a Non2Translatable RNA
Involved in Plant Growth. EMBO J , 1994 , 13 : 5099～5112
[ 5 ] 　Clark S E , Running M P , Meyerowitz E M. CLAVATA1 , a regulator of
meristem and flower development in Arabidopsis . Development , 1993 ,
119 : 397～418
[ 6 ] 　Christel R S , Nasrallah M E , Nasrallah J B. The Male Determinant of
Self2Incompatibility in Brassica . Science , 1999 , 5445 : 1697～1700
[ 7 ] 　Germain H , Chevalier E , Caron S , Matton D. P. Characterization of five
RALF2like genes from Solanum chacoense provides support for a
developmental role in plants. Planta , 2005 , 220 , 447～454
(下转第 31 页)
44 Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2008 ,22 (1) :41～44
花粉辐照是较为有效的使亲和花粉不具有供精能
力的方法 ,其中首要考虑的问题是选择一个合适的剂
量 ,过高的剂量可能会导致蛋白质等亲和性识别物质
被破坏。在 Vantuyl 的试验中 ,认为 1000Gy 和 2500Gy
是麝香百合适宜的辐照剂量[4 ] 。从本试验结果来看 ,
对于亚洲百合‘cordelia’,上述两种剂量也是适宜的。
虽然‘cordelia’与毛百合杂交亲合 ,但毕竟是百合栽培
品种与野生种之间的远缘杂交 ,‘cordelia’柱头和花柱
上的蛋白会对异种材料毛百合花粉的萌发有一定拒绝
反应 ,但是‘cordelia’辐照花粉的“蒙导”和“先锋”作用 ,
会消耗掉一定量的拒绝蛋白[9 ] ,从而促进了毛百合花
粉在异种柱头上的萌发和伸长 ,导致结果率和形成种
子的数量大大增加。
切割花柱授粉曾被认为是克服百合远缘杂交受精
前障碍的最佳方法之一[10 ,11 ] ,因为它能减少异种花粉
在柱头和花柱中的不亲合障碍。但本研究结果表明 :
切割花柱反而比常规柱头授粉明显减少结果率和种子
形成量。可能‘cordelia’和毛百合亲合性较高 ,切割后
的花柱缺少了具有良好缓冲能力的柱头及柱头分泌物
来促使花粉萌发[12 ] ,因而导致结果率低 ;同时 ,由于柱
头切短后 ,造成花粉管未完全伸长 (即未成熟) 即达到
胚囊[10 ] ,无法提供成熟精子用于受精 ,造成种子形成
率低。
参考文献 :
[ 1 ] 　Van Tuyl J M , Van Holsteijn H C M. Lily breeding research in the
Netherlands. Acta Hortic ,1996 ,414 :35～45
[ 2 ] 　Asano Y, Myodo H. Studied on crosses between distantly related species
of lilies I. For the intrastylar pollination technique. J Japan Soc Hor Sci ,
1977 ,46 (1) :59～65
[ 3 ] 　Hopper J E , Ascher P D , Peloquin S J . Inactivation of self2
incompatibility following temperature pretreatment of styles in lilium
longiflorum . Euphytica , 1967 ,16 :215～220
[ 4 ] 　Van Tuyl J M , Clara Marcucci M , Visser T. Pollen and pollination
experiments . VII. The effect of pollen treatment and application method
on incompatibility and incongruity in lilium . Euphytica , 1982 ,31 :613
～619
[ 5 ] 　Van Tuyl J M , Van de Sande K, Van Dien R , et al . Overcoming
interspecific crossing barriers in lilium by ovary and embryo culture.
Acta Hortic ,1990 ,266 :317～322
[ 6 ] 　Hayashi M , Kanoh K, Serizawa Y, et al . Ovary slice culture of lilium
forumosanum Wallace. Japan.J Breed ,1986 ,36 :304～308
[ 7 ] 　Kanoh K, Hayashi M , Serizawa Y, et al . Production of interspecific
hybrids between Lilium longiflorum and L . ×elegance by ovary slice
culture. Japan J Breed , 1988 ,38 :278～282
[ 8 ] 　Asano Y Studies on crosses between distantly related species of lilies Ⅴ.
Characteristics of Newly Obtained through embryo culture. J Japan Soc
Hort Sci , 1980 ,49 (2) :241～250
[ 9 ] 　孟金陵. 植物生殖遗传学. 北京 :科学出版社 ,1995 ,330～332
[10 ] 　Van Tuyl J M , V Van Dien M P , Van Creij M GM , etal . Application of
in vitro pollination ,ovary culture ,ovule culture and embryo rescue for
overcoming incongruity barriers in interspecific lilium crosses. Acta
Hortic ,1991 :115～126
[ 11 ] 　Van Tuyl J M , Van Dijken A , Chi H S , et al . Breakthroughs in
interspecific hybridization of lily. Acta Hortic ,2000 ,508 :83～88
[12 ] 　刘　春 ,穆　鼎 ,明　军 ,等. 百合种间杂交受精前障碍的研究.
园艺学报 ,2006 ,33 (3) :653～656
(上接第 44 页)
[ 8 ] 　Haruta M , Constabel C P. Rapid alkalinization factors in poplar cell
cultures. Peptide isolation , cDNA cloning , and differential expression in
leaves and methyl jasmonate2treated cells. Plant Physiol , 2003 , 131 ,
814～823
[ 9 ] 　Olsen A N , Mundy J , Skriver K. Peptomics , identification of novel
cationic Arabidopsis peptides with conserved sequence motifs. In Silico
Biology , 2002 , 2 (4) : 177～180
[10 ] 　MacIntosh G C , Wilkerson C , Green P J . Identification and analysis of
Arabidopsis expressed sequence tags characteristic of non2coding RNAs.
Plant Physiol , 2001 , 127 (3) : 765～776
[11 ] 　Bedinger P , Parsons R , Clark M , Covey P , Arthur2Asmah R. PEX
proteins , pollen specific LRX (Leucine2Rich Repeat Extensin Chimera)
proteins. Proceedings of the 7th International Congress on Plant
Molecular Biology. Barcelona Spain , 2003 , S20～S69
[12 ] 　张国裕 , 康俊根 , 张延国 ,等. 青花菜快速碱化因子 RALF 的克隆
与序列分析. 园艺学报 , 2006 , 33 : 561～565
[13 ] 　李焰焰 , 曹家树 , 黄 　鹂. 植物多肽信号分子 RALF 的研究进
展. 生物学杂志 , 2006 , 23 : 1～4
[14 ] 　曹家树 ,曹寿椿 ,易清明. 白菜及相邻类群基因组 DNA 的 RAPD
分析. 园艺学报 ,1995 ,22 : 47～52
[15 ] 　Park J , Hill M M , Hess D , Brazil D P , Hofsteenge J , Hemmings B A.
Identification of tyrosine phosphorylation sites on 32phosphoinositide2
dependent protein kinase21 and their role in regulating kinase activity. J
Biol Chem ,2001 , 276 : 7459～37471
[16 ] 　Lin R , Hiscott J . A role for casein kinase II phosphorylation in the
regulation of IRF21 transcriptional activity. Mol Cell Biochem , 1999 ,
191 : 169～180
[17 ] 　Boisson B , Giglione C , Meinnel T. Unexpected protein families
including cell defense components feature in the N2myristoylome of a
higher eukaryote. J Biol Chem ,2003 , 278 : 4341～43429
13Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2008 ,22 (1) :28～31