全 文 ：核 农 学 浪 。 。 , 一 一
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氨甲喋吟 的直接
碘标记方法研容
卜
一
陆丽仪 黄永明 张京生
北京师范大学放化室 北京
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本文报道 了‘“ 。 ‘ ‘ 杭肿瘤 药物氛甲 喋吟 的制 备 方 法 , 用直 接 碘 化 法
—
、 、 进行标记 , 并甘这 几种方法进行 比较 结 果表 明 ,
法最好 , 标记率达 一 经 一 柱凝胶过 滤后得到纯产品
,
放化 纯度 为
。 所制得的标记产品适用予示玲研 究
关健词 氛甲喋吟 直接腆化 法 一澳代琉均 酸 亚胺 氛胺 , , , 一四 氛
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箭 省门勺 口
氨甲喋吟是一种抗肿瘤药物 , 有对抗叶酸的作用 , 因而能影响细胞核酸的代谢 , 抑制癌
细胞的分裂和生成 , 主治急性白血病 , 绒毛膜上皮癌等 。 为了进行示踪研究 , 需要放射性核
素标记的氨 甲喋吟作为 示踪剂 , 在核素中 选用 ’ 或 ’ ‘ 较合适 , 因其半衰期 和能量均适
争 需 口 , 二 、 , 、二 。 、 , 。 二 , 。 、 、 , 、。 , 卜 。, 。 二 。。 , 卜、。
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, 宜 , 而且氨甲喋吟分子中含有苯环 , 可采用较方便的直接碘化法标记 , 即对苯环进行亲电取
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据文献报道 〔‘ ’, 碘标记氨甲喋吟是用间接碘化法 。 本 研究采用直接碘 化法标
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记氨甲喋
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核 农 学 报 卷
试 剂 与 材 料
氨 甲喋吟 针剂
、 上海第十乒制药厂
’ 。 一浪代琉 泊酞亚胺
、
分 析纯 , 北京化
工厂 。 氯胺 一分析纯 , 天津化 一几犬利二厂
。 美国 公司 。 一
一 瑞典 公司 。 ‘钟卜 , 国原子 能科学研究院和 戈 国 “ 介
司 。 ‘“ ‘ 中国原子能科学研究院 。
方 法 与 结 果
一 碘化反应
法 涂管一一用 工 以 浴解
, 然 后侮芳 含叻 以 分装
入小玻璃试管底部 , 或分装入有两小粒聚丙烯塑料的试竹中 , 宝温下挥发溶剂至千 , 使氧化
剂在试管底部形成均匀的薄膜或包被在塑料珠上 。
碘
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磷酸缓冲溶液 〕溶液加入 述涂好的 竹 内 ,
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时而摇动试
管 , 用 协 卜 。终止反应 。
法 , 工作缓冲 液为 。 了 。 刁
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氛甲喋吟 才容液和 一 ‘“ ‘ 或 ‘ , 电 磁搅拌下加入 卜
, 主温反应 , 用 冬 。 终走反应
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温下挥发溶刘至千 , 使 注试竹底部形成均匀的薄膜 , 你管含 卜 。 然后把
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’“ ‘ 或 ’”“ 及 协 氨甲 喋 吟 溶于 。 件 「
加入上述试管中 , 宝温反应 一 ,
。
二 标记率 侧定
碘化后 的溶液点样进行纸层 析 , 号层析滤纸 , 展开刘为正丁醉 无水 乙醉
马 ‘ 。 展开后将层析纸条晾千 , 技 长分别依次剪下 , 测 鼠
其放射性 。 确定广 ‘口、 , 冷产 异价若对照 , 在此位置有 黄 色斑点 , 无机碘
川 ‘“ ‘ 做对
一
照 。 依下式求得 标记产 钻计数
兄 各部位计数
, 由此得 列 各种方法的标
记率如下 法 。 一 犷石, 共 一 百, 法 一
。
三 产品的比放射性侧定
采用 加入之总放射性活度 标记
所加入被标记物总 鼠 长计算产
, 产的比放射性 “ ’, 以 此得列吝种 方
的结呆如 下 法 一 只 件 ,
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法 一 卜 。
四 产品的分离纯化
柱凝胶过滤法一碘化反应后 的瀚夜立即转至
一 剐 柱 上
,
用 。 “ 几 洗脱
, 流速 洗脱液进行放射性测最
,
第一 个峰为产
期 氛甲喋吟 的直接碘标记方法研究
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图 卜 反应温度 ·标记率关系曲线
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图 一 反应时间一标记率关系曲线
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品峰 , 收集在第 一 管中 , 第二个峰为游
离碘峰 第 管 , 用 ‘ 吕 ’ 作对照 。
透析法 —碘化反应后 的溶液用
, 透析 , ℃ , 小 寸。
“ 盆 产品的放射化学纯度滋定
经纯化后的产品 , 用纸层析法测定 , 操
作同测定标记率 。 结果表明 , 经柱凝胶过滤
法纯化后产品的放化纯度为
, 透析法
的放射化学纯度为 。
、
六
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产品保存
标记产品在 ℃冰箱中保存 , 使 用过程
中保持稳定
。
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图 卜 碘化时所用 的
值一标记率关系曲线
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一 碘化结果
我们采用 , , 等方法
进行直接碘化 , 法标 记率最 高 , 得 到
的标记产品用于示踪研究是很理想的 。
和 法 虽经反复多次试验
’
, 但对氨 甲
哗吟的标记率都很低
。 经极谱 分 析 奉明
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的氧化力 比 略 高 , 因而可能对氨 甲喋吟的 碘化更合适
。
二 橄适株记条件的选择
氧化剂用量对标记率的影响 选择 不同重量比的氨 甲喋吟与氧化剂 进行试验 表明 ,
在 一 时标记率最高 , 和 叨在 时最好
。
反应温度对标记率的影响 从图 可 以着出 , 反应温度高于 ℃对标记率的影响不大 ,
因而碘化时在室温下进行是比较方便的
反应时间对标记率的影响 如图 所示 , 反 应时间在 以上 , 标 记率变化不大 ,
因而各方法选用的最适反应时间是 法 一 , 法 , 法 一
碘化反应时所用缓冲液 的 值对标记率的影响 法 , 法
法 , 时 , ‘标记率最高 见图
。
参 考 文 做
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〕陆丽仪等 几种蛋白质或多肤放射性碘化方法的 比较 北京师范大学学报 自然科学版 , , 一了
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〔 〕陆丽仪等 用 法碘化标记 日一内啡胧 。 北京师范大学学报 自然科学版
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增刊
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