全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 3期, 2010年 3月 253
收稿 2009-12-23 修定 　2010-01-11
资助 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 0992003B-31)。
* 通讯作者(E-mail: hnzhen68@yahoo.com.cn; Tel: 0773-
2 9 0 6 0 8 7 )。
桂林唇柱苣苔的组织培养和快速繁殖
付传明, 黄宁珍 *, 唐凤鸾, 石云平, 赵志国
广西壮族自治区 /中国科学院广西植物研究所, 广西桂林 541006
Tissue Cultere and Rapid Propagation of Chirita guilinensis W. T. Wang
FU Chuan-Ming, HUANG Ning-Zhen*, TANG Feng-Luan, SHI Yun-Ping, ZHAO Zhi-Guo
Guangxi Institute of Botany, Guangxi Zhuangzu Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences, Guilin, Guangxi 541006,
China
1 植物名称 桂林唇柱苣苔(Chirita guilinensis W.
T. Wang)。
2 材料类别 幼嫩叶片。
3 培养条件 (1)诱导培养基: MS+6-BA 0.2 mg·L-1
(单位下同)+IBA 0.1+3%蔗糖; (2)增殖培养基: MS+
6-BA 0.1+NAA 0.1+3%蔗糖; (3)生根培养基: 1/2MS+
0.5%活性炭+2%蔗糖或MS+2%蔗糖。以上培养基
均加 0.6%琼脂, pH 5.8。培养温度为(25±3) ℃, 光照
时间为 12~14 h·d-1, 光照强度为 30~40 μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的消毒和接种 取桂林唇柱苣苔幼叶, 先用
自来水冲洗干净, 用甲基托布津溶液浸泡 5~6 min,
用软毛笔刷洗干净后, 移至超净工作台内进行无菌
操作, 先放入 75%酒精中浸泡 15 s后, 转入 0.1%
HgCl2溶液中消毒 3~5 min, 无菌水冲洗 5遍。用
解剖刀将叶片切成 1.0 cm×l.0 cm的小块, 叶面朝
上置于诱导培养基中培养。
4.2 丛生芽的诱导与增殖 接种一段时间后, 叶片外
植体加大、增厚, 接种 3~4周后, 有的外植体已有
不定芽生成, 主要发生在叶片外植体边缘, 继续培
养形成丛生芽(图 1)。当叶片上丛生小芽长到 0.5~
l.0 cm时, 切成带 2~3个芽的小块转接到增殖培养
基上进行扩增, 培养 20 d左右时形成新的丛芽, 如
此反复的分切丛生芽进行增殖培养后可以获得大量
的丛生芽(图 2)。
4.3 生根培养 当芽长到 2~3 cm, 有一对以上叶片
时, 切下移入生根培养基诱导生根, 余下的小芽继
续生长。桂林唇柱苣苔试管苗容易生根, 培养 30
d后在 1/2MS+0.5%活性炭 +2%蔗糖或MS+2%蔗
糖培养基上的生根率都为 100% (图 3)。
4.4 炼苗及移栽 生根培养30~40 d后, 于室内打开
图 1 桂林唇柱苣苔的初代诱导
图 2 桂林唇柱苣苔的增殖培养
图 3 桂林唇柱苣苔的生根培养
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture
植物生理学通讯 第 46卷 第 3期, 2010年 3月254
瓶盖炼苗 3 d, 将生根试管苗从培养瓶中轻轻取出,
用自来水洗净根部残留的培养基, 用火土(带杂草的
表层土经煅烧后的土, 南方俗称火土)和腐殖土按1:
1混匀作为移栽基质, 移栽后浇透水, 在遮阳网遮荫
75%自然光的大棚内保持温度为 18~25 ℃和相对
湿度 80%以上, 移栽成活率达 80% (图 4)。桂林
唇柱苣苔试管苗相对比较脆弱, 根系较细, 因此在
炼苗及移栽过程中要尽量小心, 以避免损伤试管苗
和弄断根系。
5 意义与进展 桂林唇柱苣苔为苦苣苔科唇柱苣苔
属的多年生小草, 在广西(桂林、桂平)及广东西部
图 4 桂林唇柱苣苔组培苗的移栽
(云浮)均有分布, 生于石灰山林下或山洞洞口及洞
中光线较好的地方或裸露的岩石上。桂林唇柱苣
苔花色艳丽、生长适应性强, 根状茎在民间用于治
疗咳嗽、跌打损伤等症, 具有较高的观赏和药用价
值(李振宇和王印政 2004; 文和群等 1998)。温放
等(2006)引种栽培的 20余种极具观赏价值和开发
潜力巨大的苦苣苔科植物中也有桂林唇柱苣苔。
本文结果对其开发利用和种质资源保存可能有一定
的参考价值。唇柱苣苔属中一些种的组织培养已
有报道(汤正辉等 2004; 温放等 2008), 但桂林唇柱
苣苔的组织培养和快速繁殖的报道未见。
参考文献
李振宇, 王印政(2004). 中国苦苣苔科植物. 郑州: 河南科技出版
社, 232
汤正辉, 陈维伦, 石雷, 邢全(2004). 刺齿唇柱苣苔的离体快速繁
殖. 植物生理学通讯, 40 (2): 211
温放, 李湛东, 张启翔(2006). 南方喀斯特地区苦苣苔科观赏植
物在北京的引种栽培. 北方园艺, (5): 136~137
温放, 张启翔, 任翔翔(2008). 黄花牛耳朵的离体培养和快速繁
殖. 植物生理学通讯, 44 (2): 301~302
文和群, 钟树华, 韦毅刚(1998). 广西苦苣苔科观赏植物资源. 广
西植物, 18 (3): 209~212