全 文 ：北方园艺２０１４（２３）：８３～８６ ·生物技术·
第一作者简介：潘梅（１９６２－），女，广西隆安人，本科，高级园艺师，
研究方向为植物组织培养研究与开发利用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｐａｎｍｅｉ２００＠
ｓｉｎａ．ｃｏｍ．
责任作者：云勇（１９６５－），男，海南文昌人，本科，副研究员，研究方
向为热带作物种源收集与开发利用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｙｏｎｇ３８１９＠
１６３．ｃｏｍ．
基金项目：２０１３年海南省科学事业费资助项目（琼财预［２０１３］１３１
号）。
收稿日期：２０１４－０７－１６
烟叶唇柱苣苔叶片分化与植株再生研究
潘 　 梅，戚 华 莎，黄 　 赛，王 景 飞，符 瑞 侃，云 　 勇
（海南省农业科学院 园林花卉研究所，海南 海口５７１１００）
　　摘　要：以烟叶唇柱苣苔叶片为外植体，ＭＳ为基本培养基，研究了植物生长调节剂对其不
定芽诱导、增殖与不定根形成的影响，以期建立烟叶唇柱苣苔的再生繁殖体系。结果表明：采
用 ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ培养基，不定芽诱导率达到１００％，该培养基对不定芽
的增殖和生长效果好，４０ｄ的增殖系数达到７．４３；采用ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ培养基，３０ｄ生根率
１００％；组培苗在珍珠岩基质中移栽，成活率可达９４％以上。
关键词：烟叶唇柱苣苔；叶片；离体培养
中图分类号：Ｑ　９４３．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１４）２３－００８３－０４
　　海南苦苣苔科植物约有１３属２１种１变种，其中特
有属２个，特有种１０种［１］，许多种具有观赏和药用价值。
烟叶唇柱苣苔（Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ）属苦苣苔科
唇柱苣苔属多年生草本植物，是海南特有珍稀苦苣苔科
植物，分布于海南的琼中、琼海、保亭、三亚、白沙、东方，
生于海拔约４３０ｍ的山谷林中或溪边石上［２］。烟叶唇
柱苣苔叶片绿色、大而挺立，花冠淡紫色或白色，极为优
雅，花期５—１０月，四季常绿，是一种适合观赏和园艺的
野生花卉，目前尚鲜见人工栽培的报道。烟叶唇柱苣苔
在自然条件下种子不易形成，且种子细小难收集。可用
叶片进行扦插繁殖，但叶插繁殖系数小，时间长，需６０ｄ
以上才能出芽，一叶可长出１～３个芽。组织培养技术
是人工繁殖种苗最为有效的方法，可以满足烟叶唇柱苣
苔的商品性开发和技术研究的需要。有关烟叶唇柱苣
苔组织培养研究的报道仅见１篇［３］。该研究以烟叶唇
柱苣苔叶片作为外植体，研究了不定芽诱导、增殖、生根
及移栽管理的最佳培养条件，以期建立烟叶唇柱苣苔的
快速繁殖体系，为其应用研究提供技术支撑。
１　材料与方法
１．１　试验材料
供试植株烟叶唇柱苣苔采自海南省保亭县，取其幼
叶作为试验材料。
１．２　试验方法
１．２．１　培养基　以 ＭＳ为基本培养基，附加３０．０ｇ／Ｌ
的食用白糖，９．０ｇ／Ｌ的卡拉胶，灭菌前ｐＨ　６．０，配制分
装后于温度１２１℃，压力０．１４ ＭＰａ的条件下灭菌
２０ｍｉｎ。
１．２．２　培养条件　培养温度（２６±２）℃，光照强度１　５００ｌｘ，
光照时间为９ｈ／ｄ。
１．２．３　外植体表面消毒与无菌材料的获得　从植株上
剪下带叶柄的幼嫩叶片，用棉花球醮洗洁精液擦拭叶片
两面，然后用自来水清洗干净。在超净工作台上用７０％
酒精浸泡２０ｓ，无菌水冲洗１次，再用０．０２％ ＨｇＣｌ２溶液
消毒３ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗５次。将叶片切成１ｃｍ见
方的小块以叶面朝上接种于初代培养基中。接种１５ｄ
后，叶面开始膨大隆起，２５ｄ开始有小芽点萌动，４０ｄ在叶
片边缘、主叶脉基部和叶面处均分化出不定芽（图１）。
１．２．４　初代培养　以 ＭＳ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ作为基本
培养基，分别添加０．１ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ、ＫＴ和ＴＤＺ　３种细
胞分裂素进行比较试验；设置６－ＢＡ　０．１、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ
和ＮＡＡ　０．１、０．５ｍｇ／Ｌ组成６个配比组合。取无菌植
株小叶片（约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ）以叶面朝上接种进行不
定芽诱导试验，每种处理接种８袋，每袋３叶，３次重复，
定期观察记录，培养４０ｄ后统计叶片不定芽诱导率和平
均不定芽数。不定芽诱导率（％）＝诱导出芽叶片数／接
种叶片数×１００％，平均不定芽数＝不定芽总数／诱导出
芽叶片数。
１．２．５　增殖培养　在 ＭＳ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ的培养基
中分别添加０．５ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ、ＫＴ和ＴＤＺ　３种细胞分
裂素进行比较试验；设置６－ＢＡ　０．１、０．５、１．０、２．０ｍｇ／Ｌ
和ＮＡＡ　０．１、０．２、０．３、０．５ｍｇ／Ｌ各４个浓度水平的配
３８
·生物技术· 北方园艺２０１４（２３）：８３～８６
比，共１６种处理。选择初代培养获得的较均一不定芽
单个接种进行增殖试验，每袋接种３个材料，每种处理
均接种８袋，重复３次，定期观察记录，４０ｄ后统计芽增
殖系数。芽增殖系数＝不定芽总数／接种芽数。
１．２．６　生根培养　以 ＭＳ为基本培养基，添加ＩＢＡ、
ＩＡＡ和ＮＡＡ各０．５ｍｇ／Ｌ　３种生长素进行比较试验；在
ＭＳ培养基中添加不同浓度的ＮＡＡ（０．２、０．５、０．８、１．０、
１．５ｍｇ／Ｌ），以不加ＮＡＡ的培养基作为对照。增殖培养
获得的高约１．２ｃｍ的芽苗接入各种生根培养基上，比较
根系分化情况，每袋接种３个材料，每种处理均接种８
袋，重复３次，定期观察记录，３０ｄ后统计生根率、生根
数、株高。生根率（％）＝生根苗数／接种苗数×１００％，生
根数为根长大于等于０．２ｃｍ的根数。
１．２．７　组培苗的练苗与移栽　将生根培养３０ｄ的小苗
移入拱棚内练苗７ｄ，用清水洗去根部残留的培养基，栽
植于珍珠岩中，３０ｄ后统计成活率。
１．３　数据分析
试验数据采用Ｅｘｃｅｌ　２００７软件进行统计、方差分
析，新复极差法进行均数间多重比较，统计测验均为
９９％水平。
２　结果与分析
２．１　烟叶唇柱苣苔的初代培养
２．１．１　不同种类细胞分裂素对外植体芽诱导的影响　
由表１可知，６－ＢＡ和ＴＤＺ对叶片不定芽的诱导率均达
到１００％，但诱导的平均不定芽数差异极为显著，６－ＢＡ
平均每叶不定芽达到７．１７个，而ＴＤＺ仅为４．２５个；诱
导效果最差的为ＫＴ，不定芽诱导率仅为４７．６２％，平均
不定芽数为３．１０个。从生长势看，６－ＢＡ诱导的不定芽
长势好，ＫＴ诱导的不定芽也正常，但较细小，而ＴＤＺ诱
导的芽在４０ｄ以后叶片出现水渍状，有较多的玻璃化现
象。因此烟叶唇柱苣苔不定芽诱导培养的细胞分裂素
宜选用６－ＢＡ。
表１ 不同种类细胞分裂素对
烟叶唇柱苣苔不定芽诱导的影响
　　Ｔａｂｌｅ　１ Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ　ｏｎ
ｂｕｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ
细胞分裂素
Ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
不定芽诱导率
Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
平均不定芽数
Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ
ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ／（个·叶－１）
不定芽生长势
Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ
ｂｕｄ　ｇｒｏｗｔｈ
６－ＢＡ　 １００．００Ａ ７．１７Ａ 长势良好，芽较大
ＫＴ　 ４７．６２Ｂ ３．１０Ｃ 长势一般，芽细小
ＴＤＺ　 １００．００Ａ ４．２５Ｂ
长势一般，
有玻璃化现象
２．１．２　不同６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度配比对烟叶唇柱苣苔芽
诱导的影响　叶片接种于６种培养基中，２５ｄ后均有不
定芽分化，４０ｄ平均不定芽数均达到４个以上。由表２
可知，不同的６－ＢＡ和ＮＡＡ配比对烟叶唇柱苣苔不定芽
图１　不定芽诱导
Ｆｉｇ．１　Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
诱导和生长影响极大，其中以６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ／Ｌ的组合对不定芽的诱导效果最好，不定芽诱
导率高达１００％，不定芽分化数量最多，平均每叶有
９．５８个，其芽苗生长势好，叶色绿而健壮。其次为６－ＢＡ
０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ组合，不定芽诱导率也高达
１００％，但不定芽分化数量较少，为７．２０个。方差分析结
果表明，６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ组合与６－ＢＡ
０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ组合其不定芽诱导率差异
不显著，与其它的配比组合差异则达到极显著水平；而
平均不定芽数与其它配比的差异则达到极显著水平，因
此，适合烟叶唇柱苣苔不定芽诱导的６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度
配比为６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ。
表２ 不同６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度配比对
烟叶唇柱苣苔芽诱导的影响
　　Ｔａｂｌｅ　２　　　　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　６－ＢＡ　ａｎｄ　ＮＡＡ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｎ
　　　　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ
调节剂
Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
不定芽诱导率
Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
平均不定芽数
Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ
ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ／（个·叶－１）
不定芽生长势
Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ
ｂｕｄ　ｇｒｏｗｔｈ
０．１　 ０．１　 １００Ａ ７．２０Ｂ 长势良好
０．１　 ０．５　 ６１．９０Ｅ ５．２２Ｃ 长势一般
０．５　 ０．１　 １００Ａ ９．５８Ａ 长势良好
０．５　 ０．５　 ７８．２６Ｄ ４．１９Ｄ 长势一般
１．０　 ０．１　 ９０．４８Ｃ ５．１０Ｃ 长势良好
１．０　 ０．５　 ９５．８３Ｂ ５．３４Ｃ 长势良好
２．２　烟叶唇柱苣苔的增殖培养
２．２．１　不同种类细胞分裂素对烟叶唇柱苣苔芽增殖的
影响　由表３可知，３种细胞分裂素对烟叶唇柱苣苔芽
的增殖均有促进作用，其中６－ＢＡ的增殖效果最好，培养
３０ｄ和４０ｄ的增殖系数分别达到４．２６和７．４１，芽生长
势最好，芽健壮；其次为ＫＴ，３０ｄ和４０ｄ的增殖系数分
别为２．７４和６．００，芽长势好，芽体壮；最差的是ＴＤＺ，
３０ｄ和４０ｄ增殖系数只有１．８５和３．１８，且芽长势差，芽
细小。方差分析表明，３种细胞分裂素的不定芽增殖系
４８
北方园艺２０１４（２３）：８３～８６ ·生物技术·
数间存在极显著差异，烟叶唇柱苣苔芽增殖培养中细胞
分裂素宜选用６－ＢＡ。
表３ 不同种类细胞分裂素对
烟叶唇柱苣苔芽增殖的影响
　　Ｔａｂｌｅ　３ Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ　ｏｎ
ｂｕｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ
细胞分裂素
Ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
３０ｄ增殖系数
３０ｄａｙｓ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
４０ｄ增殖系数
４０ｄａｙｓ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ
６－ＢＡ　 ４．２６Ａ ７．４１Ａ 长势好，芽健壮
ＫＴ　 ２．７４Ｂ ６．００Ｂ 长势好，芽壮
ＴＤＺ　 １．８５Ｃ ３．１８Ｃ 长势差，芽细小
２．２．２　不同６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度配比对烟叶唇柱苣苔芽
增殖的影响　从表４可以看出，１６种培养基对烟叶唇柱
苣苔的芽增殖效果不同，６－ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ与ＮＡＡ
０．１ｍｇ／Ｌ两者配合时，增殖效果最好，培养３０ｄ和４０ｄ
的增殖系数均最高，分别达到４．０５和７．４３。低浓度和
较高浓度的６－ＢＡ对烟叶唇柱苣苔芽的增殖生长不利，
６－ＢＡ　０．１ｍｇ／Ｌ时，其与ＮＡＡ　０．３ｍｇ／Ｌ的组合芽分化
最多，培养３０ｄ和４０ｄ的增殖系数分别为３．２１和６．２８。
６－ＢＡ浓度在１．０～２．０ｍｇ／Ｌ时，３０ｄ芽的增殖系数为
１．７８～３．１４，４０ｄ的增殖系数为２．４８～４．９８。对各配比
处理的增殖系数进行方差分析的结果表明，６－ＢＡ
０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ的组合与其它组合处理间
的差异达到极显著性水平，而且芽苗长势好，健壮（图
２），因此，烟叶唇柱苣苔芽增殖培养的最优组合为 ＭＳ＋
６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ。
表４ 不同６－ＢＡ和ＮＡＡ组合对
烟叶唇柱苣苔芽增殖的影响
　　Ｔａｂｌｅ　４　　　　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　６－ＢＡ　ａｎｄ　ＮＡＡ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｎ
　　　　ｂｕｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ
调节剂
Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
３０ｄ增殖系数
３０ｄａｙｓ
ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
４０ｄ增殖系数
４０ｄａｙｓ
ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ
０．１　 ０．１　 ２．５４ＥＦ　 ４．４４Ｅ 长势较好，芽较壮
０．１　 ０．２　 ３．１１Ｂ ４．３８Ｅ 长势较差，芽小
０．１　 ０．３　 ３．２１Ｂ ６．２８Ｂ 长势好，芽健壮
０．１　 ０．５　 ２．５４ＥＦ　 ５．３０ＣＤ 长势较好，芽较壮
０．５　 ０．１　 ４．０５Ａ ７．４３Ａ 长势好，芽健壮
０．５　 ０．２　 ３．００ＢＣ　 ６．２１Ｂ 长势好，芽健壮
０．５　 ０．３　 ２．６８ＤＥＦ　 ５．５１ＢＣ 长势较好，芽较壮
０．５　 ０．５　 ２．６８ＤＥＦ　 ４．７９ＣＤＥ 长势较好，芽较小
１．０　 ０．１　 ３．１４Ｂ ４．５２ＤＥ 长势较好，芽较壮
１．０　 ０．２　 ２．９７ＢＣＤ　 ４．３３Ｅ 长势较差，芽小
１．０　 ０．３　 ２．７０ＣＤＥ　 ４．９８ＣＤ 长势较好，芽较壮
１．０　 ０．５　 ２．４１ＥＦＧ　 ４．０８Ｅ 长势较好，芽较壮
２．０　 ０．１　 １．７８Ｉ ２．４８Ｆ 长势差，芽细
２．０　 ０．２　 ２．０８Ｈ ２．９２Ｆ 长势差，芽细
２．０　 ０．３　 ２．２１ＧＨ　 ３．１３ＥＦ 长势差，芽细
２．０　 ０．５　 ２．３６ＦＧＨ　 ３．０９Ｆ 长势差，芽细
图２　不定芽增殖
Ｆｉｇ．２　Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
２．３　烟叶唇柱苣苔的生根培养
２．３．１　不同种类生长素对烟叶唇柱苣苔小苗生根的
影响　培养１２ｄ后小苗基部均开始生根，３０ｄ植株高
２．０ｃｍ左右。由表５可知，３种生长素对烟叶唇柱苣苔
小苗根系的分化有明显的促进作用，ＮＡＡ的效果最好，
生根率达到１００％，根粗，平均生根数１９．９５条，植株健
壮；其次是ＩＢＡ，生根率９４．７４％，诱导的根细长，平均生
根数９．６７条，植株较弱，叶微黄；ＩＡＡ的诱根效果最差，
生根率偏低，只有８０．９５％，根细，平均根数９．９４条，植株
矮小。经方差分析，ＮＡＡ的生根率和平均根数均极显
著高于ＩＢＡ和ＩＡＡ，株高与ＩＢＡ差异极不显著，而与
ＩＡＡ差异极显著，因此，烟叶唇柱苣苔组培苗的生根培
养生长素宜选用ＮＡＡ。
表５ 不同种类生长素对
烟叶唇柱苣苔根系分化的影响
　　Ｔａｂｌｅ　５ Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ａｕｘｉｎ　ｏｎ
ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｏｔ
生长素种类
Ａｕｘｉｎ
ｔｙｐｅ
生根率
Ｔｈｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ
ｒａｔｅ／％
根数
Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ
ｏｆ　ｒｏｏｔ／条
株高
Ｐｌａｎｔ　ｈｅｉｇｈｔ
／ｃｍ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ
ＩＢＡ　 ９４．７４Ｂ ９．６７Ｂ ２．１３Ａ 较弱、根细长、叶较黄
ＩＡＡ　 ８０．９５Ｃ ９．９４Ｂ １．９３Ｂ 较弱、根细长、叶绿
ＮＡＡ　 １００Ａ １９．９５Ａ ２．１４Ａ 健壮、根粗、叶深绿
２．３．２　不同ＮＡＡ浓度对烟叶唇柱苣苔小苗生根的影响
　从表６可以看出，ＮＡＡ对小苗根系分化的效果明显，诱
导的生根率、生根数和株高均高于不加生长素的对照
（ＣＫ）；较低浓度的ＮＡＡ有利于根系的生长，ＮＡＡ　０．２、
０．５、０．８ｍｇ／Ｌ的 生根率均达到１００％，其株高差异不显
著，而诱导的生根数则差异极显著，其中ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ
诱导的发根数目最多，平均根数达到２０．７８，且植株健壮叶
色深绿。高浓度的ＮＡＡ诱根效果较差，ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ
和１．５ｍｇ／Ｌ的生根率偏低，平均根数较少，植株也较矮
小，且茎基部有愈伤组织。因此，烟叶唇柱苣苔组培苗
的生根培养最适培养基为ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ。
５８
·生物技术· 北方园艺２０１４（２３）：８３～８６
表６　不同浓度ＮＡＡ对根系分化的影响
　　Ｔａｂｌｅ　６ Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ
ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｏｔ
ＮＡＡ浓度
ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
生根率
Ｔｈｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ
ｒａｔｅ／％
根数
Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ
ｏｆ　ｒｏｏｔ／条
株高
Ｐｌａｎｔ
ｈｅｉｇｈｔ／ｃｍ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ
０（ＣＫ） ６０．５３Ｄ ５．９４Ｅ １．４３Ｃ 细弱矮小、叶淡绿
０．２　 １００Ａ １４．３２Ｄ ２．１８Ａ 苗壮、枯叶较多
０．５　 １００Ａ ２０．７８Ａ ２．１５Ａ 健壮、叶深绿
０．８　 １００Ａ １６．６１Ｃ ２．１０Ａ 较壮、叶深绿
１．０　 ９０．４８Ｂ １７．３９Ｃ １．９８Ｂ 苗弱、叶绿、茎基部有少量愈伤
１．５　 ８８．１Ｃ １８．９４Ｂ ２．１４Ａ 较壮、叶绿、茎基部愈伤较多
２．４　烟叶唇柱苣苔组培苗的练苗和移栽
无根苗在生根培养基中培养３０ｄ后，根系发达，有
６～８片叶，将其移入拱棚内练苗７ｄ即可移栽。组培苗
从培养袋中取出后，用清水洗净根上的培养基，小心栽
植于珍珠岩基质中，浇透定根水后用透明塑料薄膜覆盖
保湿，遮阳网遮荫，注意通风降温。植后１５ｄ可揭去薄
膜，３０ｄ成活率可达９４％以上。
３　结论与讨论
植物生长调节剂在植物的组培快繁中起着重要的
作用，不同种类的植物生长调节剂对外植体生长和分化
的作用不同，同一种生长物质使用的浓度不同，起的作
用也有变化［４］，而不同种类间的浓度配比对外植体的形
态发生和生长有极大的促进作用。
在烟叶唇柱苣苔的叶片离体培养中，细胞分裂素和
生长素的配比对叶片不定芽的诱导和增殖以及生长状
况影响很大。该研究中６－ＢＡ对烟叶唇柱苣苔叶片不定
芽的诱导和增殖的效果最好，极显著优于ＫＴ和ＴＤＺ；
６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ与ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ配合时，烟叶唇柱苣
苔的叶片不定芽的诱导率最高，每叶分化的不定芽数最
多，该组合对单芽的继代增殖也表现出最佳效果，芽增
殖系数最高，达到７．４３，而且芽生长状况好，极显著优于
其它配比组合。该试验结果与汤正辉［３］选用的细胞分
裂素和生长素种类一致，但浓度配比略有偏差，汤正辉
认为６－ＢＡ　０．１ｍｇ／Ｌ与ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ为最佳组合。
生长素能促进生根，而使用不同种类的生长素，不
但影响生根的数量，而且影响根的质量［５］。该研究中，
生长素ＮＡＡ、ＩＢＡ和ＩＡＡ对烟叶唇柱苣苔的生根均有
促进作用，而以ＮＡＡ的促根效果最好，ＮＡＡ诱导的根
多而粗，ＩＢＡ和ＩＡＡ诱导的根少而细长；较低浓度的
ＮＡＡ（０．２～０．８ｍｇ／Ｌ）的诱根效果优于高浓度的ＮＡＡ
（１．０～１．５ｍｇ／Ｌ），ＮＡＡ的最佳浓度为０．５ｍｇ／Ｌ，诱导
的根系多，平均每株多达２０．７８条，生根率达到１００％，
且植株健壮，叶色浓绿。汤正辉［３］认为采用不添加生长
素的１／２ＭＳ＋活性炭５．０ｇ／Ｌ的培养基对生根最好。
该研究对烟叶唇柱苣苔叶片离体培养中的芽诱导、
芽增殖以及生根的最佳植物生长调节剂的种类和浓度
配比进行了筛选，已建立组培快繁体系，可以为其开发
应用提供技术上的支撑。
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［５］　王玉英，高新一．植物组织培养技术手册［Ｍ］．北京：金盾出版社，
２００６：３７，９８．
Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｐｌａｎｔ　ｆｒｏｍｉｎ　ｖｉｔｒｏ　Ｌｅａｆ　Ｔｉｓｓｕｅｓ　ｏｆ
Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ
ＰＡＮ　Ｍｅｉ，ＱＩ　Ｈｕａ－ｓｈａ，ＨＵＡＮＧ　Ｓａｉ，ＷＡＮＧ　Ｊｉｎｇ－ｆｅｉ，ＦＵ　Ｒｕｉ－ｋａｎ，ＹＵＮ　Ｙｏｎｇ
（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｇａｒｄｅｎ　Ｆｌｏｗｅｒ，Ｈａｉｎａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｉｋｏｕ，Ｈａｉｎａｎ　５７１１００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　ａｓ　ｅｘｐｌａｎｔｓ，ＭＳ　ａｓ　ｂａｓｉｃ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ
ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｏｎ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｏｔ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ　Ｍｅｒｒ．Ｏ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ／Ｌ　ｍｅｄｉｕｍ，ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｒｅａｃｈｅｄ　１００％；ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｎ　ｓｈｏｏｔ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗａｓ
ｇｏｏｄ，４０ｄａｙｓ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅａｃｈｅｄ　７．４３；ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ　ｍｅｄｉｕｍ，３０ｄａｙｓ　ｒｏｏｔａｇｅ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１００％；ｔｈｅ
ｒｏｏｔｅｄ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｗｅｒｅ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｅａｒｌｉｔｅ　ｍａｔｉｘ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｏｖｅｒ　９４％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｉｒｉｔａ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｃｈａ；ｌｅａｆ；ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｃｕｌｔｕｒｅ
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