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胶水树兰的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月 913
胶水树兰的组织培养
张建霞1,2 李洪林1 付志惠1 杨波1,*
1 中国科学院武汉植物园,武汉 430074;2 中国科学院华南植物园,广州 510650
Tissue Culture of Epidendrum ciliare L.
ZHANG Jian-Xia1,2, LI Hong-Lin1, FU Zhi-Hui1, YANG Bo1,*
1Wuhan Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, China; 2South China Botanical Garden, Chinese Acad-
emy of Sciences, Guangzhou 510650, China
收稿 2006-04-21 修定  2006-08-02
资助 国家“863”计划(2002A241121)和中国科学院武汉
植物园园主任基金(05035112)。
*通讯作者(E-mail: yangbo@rose.whiob.ac.cn, Tel: 027-
62264786)。
1 植物名称 胶水树兰(Epidendrum ciliare L.)。
2 材料类别 幼 芽 。
3 培养条件 以 1/2MS 为基本培养基。(1)愈伤组
织诱导与原球茎增殖培养基:1/2MS+6-BA 1.5
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5;(2)原球茎诱导丛生
芽培养基:1/2MS+6-BA 7.0+NAA 1.0;(3)幼苗
增殖培养基:1/2MS+6-BA 3.0+NAA 0.25;(4)壮
苗及生根培养基:1/2MS+6-BA 1.0+NAA 0.5+ 活
性炭 1.0 g·L-1。以上培养基中均添加 3% 蔗糖和
0.6% 琼脂,pH 5.8~6.0。培养温度为(24±2)℃,
光照时间12 h·d-1,光强约为40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织诱导与原球茎增殖培养 从健壮、无
病虫害的母株上取1~2 cm长的健壮幼芽,自来水
冲洗1 h,去掉外围叶片。在超净台上,先用75%
酒精消毒30 s,再用0.1%升汞(加1滴吐温)消毒
8~10 min,无菌水冲洗4~5 次,切去末端稍褪色
组织,接种在培养基(1)中。10 d 左右,基部开
始膨大;20 d 后,逐渐产生淡绿色的愈伤组织。
在同样的培养基上继代培养,愈伤组织膨大并形
成类原球茎;继续继代培养,类原球茎上有绿色
芽状物突起。
4.2 丛生芽诱导培养 将类原球茎转接在培养基(2)
中,类原球茎上分化出大量的丛生芽。类原球茎
越大,分化的丛生芽越多。2 cm 长的类原球茎
分化的芽达 20 个之多。
4.3 幼苗增殖培养 将丛生芽分成小块,每小块带
3~5个芽,转接入增殖培养基(3)中。丛生芽逐渐
长大,30 d后,长大的芽旁边同时萌发出更多的
小苗,长成丛生苗,增殖倍数为 6 ~ 7 倍。
4.4 生根培养 将丛生苗单个切开,转接入培养基
(4)中,12 d 后开始生根,30 d 时幼苗生根率达
90% 以上,每苗的根数为 2~4 条,根短而粗壮。
4.5 炼苗与移栽 当试管苗长到4 cm高以上时,即
可以移栽出瓶。出瓶前,先将瓶盖打开一半,放
在室温下 1~2 d,然后全部打开,再放 1~2 d。
取出试管苗,用清水轻轻冲洗干净根上的培养
基,栽培基质用湿而不滴水的水苔。第 1 周,进
行 5 0 % 的自然光处理,叶面适当喷水,保持湿
度。1 周以后,将试管苗移到光线稍强的地方。
存活前不施肥喷药,存活后每 2 周喷 1 次百菌清
(利民化工有限责任公司生产,1 500倍)和 1次叶
面肥(HYPONEX 公司生产的花宝 2号,2 000 倍),
移栽成活率达 9 8 %。
5 意义与进展 胶水树兰为兰科树兰属附生植物,
原生于树上或岩石上。开花期长,盛花期在 9 月
份,总状花序,有芬香味,萼片和花瓣都呈黄
绿色,唇瓣白色、三裂,侧裂边缘羽化成多毛
状,花形奇异美丽,深受许多花卉爱好者和收藏
者的喜爱(Grison-Pigé等2001)。胶水树兰广泛分
布于中美洲,直至南美洲巴西,由于大量采集,
此物种已属珍稀濒危植物(Vásquez等2003)。其常
规繁殖方法主要采用分株繁殖,但繁殖系数低,
采用组织培养可快速获得大量优质种苗。本文结
果可供胶水树兰的种质资源保存和规模生产应用时
参考。胶水树兰的组织培养未见报道。
参考文献
Grison-Pigé L, Bessière JM, Turlings TCJ, Kjellberg F, Roy J,
Hossaert-McKey MM (2001). Limited intersex mimicry of
floral odour in Ficus carica. Funct Ecol, 15: 551~558
Vásquez R, Ibisch PL, Gerkmann B (2003). Diversity of Bolivian
Orchidaceae—a challenge for taxonomic, floristic and con-
servation research. Organ Divers Evolut, 3 (2): 93~102